食品中还原糖的测定

1、食品中还原糖的测定（碱性铜盐法[直接滴定法、高锰酸钾滴定法]、铁氰化钾法、碘量法、比色及酶法）掌握直接滴定法1）原理：试样经处理除去蛋白质后在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，由于酒石酸铜具有氧化性，加热条件下可以将还原糖氧化成醛酸，而本身还原成氧化亚铜沉淀，使溶液呈蓝色，由于所用指示剂为氧化还原指示剂，当还原糖将二价铜全部还原后，过量的还原糖则可以把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变成无色，即为滴定终点。

2）样品预处理（看实验册！！）3）步骤：①样品预处理：取样→提取液（50ml水）→250ml锥形瓶→乙酸锌溶液、亚铁氰化钾溶液各5ml→定容、摇匀，静置30min→过滤（弃去初滤液）→滤液备用；②碱性酒石酸铜溶液的标定：碱性酒石酸铜甲乙液各5ml，水10ml于150ml锥形瓶（玻珠3粒）→从滴定管放入9ml葡萄糖标准溶液→加热（2min内沸腾）→准确沸腾30min→用葡萄糖标准溶液以1滴/秒的速度进行滴定→蓝色刚好褪去时记录葡萄糖标准溶液的消耗量（ml）；③样品溶液预测：碱性酒石酸铜甲乙液各5ml，水10ml于150ml锥形瓶（玻珠3粒）→加热（2min 内沸腾）→以先快后慢的速度从滴定管中滴加试样溶液，保持溶液沸腾状态，待颜色变浅，以1滴/2秒的速度滴定，直至溶液蓝色刚好消失为终点，记录样液消耗量（应与标定碱性酒石酸铜溶液时说消耗的葡萄糖标准溶液体积接近，若太高则要适当稀释才进行正式滴定，过低则可以直接加10ml的样液而不加10ml水，在用还原糖标准溶液滴定至终点，记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液的体积之差，那么一会正式滴定则加这差值）④试样溶液测定：碱性酒石酸铜甲乙液各5ml，水10ml于150ml锥形瓶（玻珠3粒）→从滴定管滴加比预测体积少1ml的试样溶液至锥形瓶→加热（2min内沸腾）→趁沸继续以1滴/2秒的速度滴定→直至溶液蓝色刚好消失为终点，记录样液消耗量（平行三次）4）主要试剂及作用①乙酸锌-亚铁亚铁氰化钾溶液：作为澄清剂，主要是利用乙酸锌和亚铁亚铁氰化钾反应生成的氰亚铁酸锌沉淀带走或吸附干扰物质（主要是蛋白质），这种澄清剂除蛋白质能力强，但脱色能力弱，适合于色泽较浅、蛋白质含量较高的样液澄清，如乳制品、豆制品。

食品中还原糖的测定测定食品中还原糖：探索简便而可靠的方法。

还原糖的测定是一种评估食品中糖含量的方法，是食品中糖分含量分析的重要方法之一。

以下是关于还原糖的测定的详细介绍：一、原理还原糖是指以葡萄糖、蔗糖、果糖为主要组成成分的糖类化合物，其可以产生黄色暗褐色的褐醛酚酸—硝酸还原试剂，即硝酸铁还原剂。

在酸性水溶液中，硝酸铁还原剂释放出的氧原子簇会与还原糖发生物化反应，并生成一些褐色的氧化物，正因为这个原因，硝酸铁还原糖又称为“褐醛酚酸—硝酸法”。

二、试验条件和操作步骤1.试剂硝酸铁还原剂（1）制备硝酸铁试剂：将适量硝酸铁粉末溶于等容的醋酸溶液中，即可得到硝酸铁试剂。

（2）蒸馏剂：用蒸馏水调节测定液的稀释比例。

2.样品处理（1）4倍稀释：将100毫升食品样品加入400毫升蒸馏水中，按A1/B1(A1表示样品，B1表示蒸馏水)的比例稀释。

（2）添加试剂：将上述4倍稀释的液体加入100毫升硝酸铁试剂中混合；（3）反应和空白对照：调节稀释液量200毫升，将A2/B2比例稀释后，用剩余空白对照硝酸铁试剂做同样处理；（4）温度和反应时间：反应时，温度控制在30～35℃，反应时间控制在5～10分钟内。

三、测定结果分析（1）观察反应和空白对照：反应时间结束后，用460浓度的碘酒检查反应液的颜色，若比空白对照深，表示反应发生；（2）判定定量：使用正常的视觉色谱法定量判定，尽量不要进行精密定量；（3）反应有逆反应现象：在比较反应液比色前，应先检查有无影响反应发生的原因，如样品中存在大量糖醛类或有机酸类等杂质物质；（4）计算结果：将反应液与空白对照，使用A1/B1比例稀释，使用A2/B2比例稀释，则添加硝酸铁试剂的反应液中，还原糖的量可根据以下公式进行计算：还原糖的量（g/L）=反应后量（g/L）-空白对照量（g/L）四、注意事项1.硝酸铁还原剂易被氧化，为保证试验结果的准确性，试剂应及时使用；2.每次实验均应有空白对照；3.实验温度和反应时间应严格控制，否则会影响试验结果；4.原始样品中的其他物质有可能产生干扰，必要时应向样品中添加一定的抑制剂；5.实验过程中，应全程使用橡皮囊实施空白比色，以保持稳定的环境。

食品中还原糖的测定--直接滴定法一、实验目的与要求1．学习直接滴定法测定还原糖的原理，并掌握其测定的方法。

2. 掌握蜂蜜中还原糖的测定的操作技能。

3. 学会控制反应条件，掌握提高还原糖测定精密度的方法。

二、原理将等量的碱性酒石酸铜甲液、乙液混合时，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀立即与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。

此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还原糖还原为一价的氧化亚铜沉淀，氧化亚铜与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈浅黄色而指示滴定终点。

根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原糖含量。

三、试剂、仪器与样品试剂：除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。

1．碱性酒石酸铜甲液：称取7.5 g硫酸铜（CuSO4·5H2O），及0.025 g次甲基蓝，溶于水中并稀释至500ml。

2．碱性酒石酸铜乙液：称取25 g酒石酸钾钠与37.5 g氢氧化钠，溶于水中，再加入2g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至500ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。

3.盐酸溶液（1+1）：量取50mL盐酸加水稀释至100mL.4.氢氧化钠溶液（40g/L）：称取4g氢氧化钠，加水溶解并稀释至100mL。

5．转化糖标准溶液：准确称取1.0526g蔗糖，用100ml水溶解，置具塞三角瓶中，加5ml盐酸（1+1），在68℃-70℃水浴中加热15min,放置至室温，转移到1000ml容量瓶中并定容至1000ml,每毫升标准相当于1.0毫克转化糖。

6．澄清剂：中性醋酸铅：粗称醋酸铅20g，加新煮沸放冷的蒸馏水溶解，再滴加醋酸使溶液澄清，再加水至200ml。

往醋酸铅溶液里加入两滴酚酞指示剂，再用氢氧化钠溶液调至微红。

注意：醋酸铅试液有毒，禁止用手！7．指示剂：次甲基蓝8．样品：蜂蜜。

9．仪器：酸式滴定管，容量瓶，电炉，坩埚钳，150mL锥形瓶，匹配的胶塞等四、操作方法1．样品处理：称取35-40g样品，加50mL水稀释并洗入250mL容量瓶中，摇匀后慢慢加入少量中性醋酸铅溶液，加水至刻度，摇匀，静止30min.用干燥滤纸过滤，弃初滤液，滤液备用。

还原糖的测定方法还原糖是指能够还原铜离子的糖类物质，通常用来测定葡萄糖、果糖、麦芽糖等在食品和生物样品中的含量。

测定还原糖的方法有很多种，其中包括费林试剂法、硫酸铜比色法、硼酸硫酸铜比色法等。

本文将介绍硫酸铜比色法和硼酸硫酸铜比色法两种测定还原糖的方法。

硫酸铜比色法测定还原糖的方法如下：1. 准备样品，将待测样品溶解于适量的水中，得到一定浓度的溶液。

2. 配制硫酸铜溶液，取一定容量的硫酸铜溶液，通常浓度为0.1mol/L。

3. 反应，将样品溶液与硫酸铜溶液混合，加热至沸腾，使得还原糖与硫酸铜发生反应，生成红色的氧化铜沉淀。

4. 沉淀析出，待反应结束后，将溶液冷却，沉淀析出。

5. 比色，用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度，根据标准曲线计算出还原糖的含量。

硼酸硫酸铜比色法测定还原糖的方法如下：1. 准备样品，将待测样品溶解于适量的水中，得到一定浓度的溶液。

2. 配制硼酸硫酸铜试剂，将一定量的硼酸溶液与硫酸铜溶液混合制备硼酸硫酸铜试剂。

3. 反应，将样品溶液与硼酸硫酸铜试剂混合，加热至沸腾，使得还原糖与硫酸铜发生反应，生成蓝色的氧化铜沉淀。

4. 沉淀析出，待反应结束后，将溶液冷却，沉淀析出。

5. 比色，用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度，根据标准曲线计算出还原糖的含量。

以上两种方法均是通过还原糖与硫酸铜发生反应生成沉淀，再通过比色法测定沉淀的吸光度来计算还原糖的含量。

在具体操作时，需要注意样品的处理、试剂的配制、反应条件的控制以及仪器的使用等细节，以确保测定结果的准确性和可靠性。

总结，硫酸铜比色法和硼酸硫酸铜比色法是常用的测定还原糖的方法，通过与硫酸铜发生反应生成沉淀，再通过比色法测定沉淀的吸光度来计算还原糖的含量。

在实际操作中，需要严格按照方法步骤进行操作，以获得准确可靠的测定结果。

实验三食品中还原糖的测定方法（菲林试剂法）一、原理样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液，以次甲基蓝作指示剂，根据样品液消耗体积，计算还原糖量。

二、试剂1、碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基蓝。

溶于水中并稀释至1000ml。

2、碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml,储存于橡胶塞玻璃瓶中。

3、乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL。

4、10.6%亚铁氰化钾溶液。

5、盐酸。

6、葡萄糖标准溶液：精密称取1.000g经过98~100℃干燥至恒量的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并以水稀释至1000mL。

此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖。

三、操作方法1、样品处理：1）乳类、乳制品及含蛋白质的冷食类：称取约2.5~5g固体样品（吸取25~50ml液体样品），置于250ml容量瓶中，加50ml水，摇匀后慢慢加入5mL乙酸锌溶液及5mL10.6%亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀。

静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。

2）酒精性饮料：吸取100ml样品，置于蒸发皿中，用1M氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积的1/4后，移入250ml容量瓶中，加水50ml水，混匀后慢慢加入5mL乙酸锌溶液及5mL10.6%亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀。

静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。

3）含多量淀粉的食品：称取10-20g样品，置于250ml容量瓶中，加200ml水，在45℃水浴中加热1h，并时时振摇。

冷后加水至刻度，混匀，静置。

吸取200ml上清液于另一250ml 容量瓶中，慢慢加入5mL乙酸锌溶液及5mL10.6%亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀。

静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。

还原糖的测定方法
还原糖是一种重要的碳水化合物，广泛存在于植物和动物体内。

它在食品加工中起着重要作用，也是一种重要的营养物质。

因此，
准确测定还原糖的含量对于食品加工和营养评估具有重要意义。

下
面将介绍几种常用的还原糖测定方法。

首先，最常用的还原糖测定方法是费林试剂法。

该方法利用费
林试剂与还原糖发生化学反应，生成可见的蓝色产物，通过比色法
测定产物的光密度来计算还原糖的含量。

费林试剂法操作简便，结
果准确，广泛应用于食品工业和科研领域。

其次，还原糖的测定方法还包括硫酸铜法。

该方法利用硫酸铜
与还原糖在碱性条件下发生化学反应，产生沉淀物，通过沉淀物的
重量来计算还原糖的含量。

硫酸铜法操作简单，结果准确，适用于
各种类型的食品样品。

此外，还原糖的测定方法还包括酚酞法。

该方法利用酚酞与还
原糖在碱性条件下发生化学反应，产生可见的红色产物，通过比色
法测定产物的光密度来计算还原糖的含量。

酚酞法操作简便，结果
准确，适用于各种类型的食品样品。

最后，还原糖的测定方法还包括高效液相色谱法。

该方法利用高效液相色谱仪对食品样品中的还原糖进行分离和测定，具有分离效果好、分析速度快、准确度高的优点，适用于各种类型的食品样品。

综上所述，还原糖的测定方法多种多样，各有其特点和适用范围。

在实际应用中，可以根据样品的特点和实验条件选择合适的测定方法，以获得准确的测定结果。

希望本文介绍的内容对您有所帮助。

还原糖的测定方法（1）食物中还原糖的测定方法：高锰酸钾滴定法和直接滴定法。

一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量，再查表得还原糖量。

2.适用范围GB5009.7-85，本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。

3.仪器（1）滴定管（2）25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚（3）真空泵（4）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。

4.1 6 mol/L盐酸：量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。

4.2 甲基红指示剂：称取10mg甲基红，用100ml乙醇溶解。

4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。

4.4 碱性酒石酸铜甲液：称取34.639g 硫酸铜（CuSO4·5H2O），加适量水溶解，加0.5ml硫酸，再加水稀释至500ml，用精制石棉过滤。

4.5 碱性酒石酸铜乙液：称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。

4.6 精制石棉：取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2～3天，用水洗净，再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2～3天，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时，用水洗净。

再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。

然后加水振摇，使成微细的浆状软县委，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可用做填充古氏坩埚用。

4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。

4.8 1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠，加水溶解并稀释至100ml。

4.9 硫酸铁溶液：称取50g硫酸铁，加入200ml水溶解后，慢慢加入100ml硫酸，冷却后加水稀释至1L。

4.10 3mol/L盐酸：量取30ml盐酸，加水稀释至120ml。

食品中还原糖的测定一、原理：（直接滴定法）将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。

在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，沉淀由蓝色变为无色，即为滴定终点。

根据样液消耗量计算还原糖含量。

二、试剂：碱性酒石酸甲液：称取15g 分析纯硫酸铜（CuSO 4•5H 2O ）及0.05g 次甲基蓝，溶于蒸馏水中并稀释至1000ml 。

碱性酒石酸乙液：取50g 酒石酸甲钠及54gNaOH ，及4g 亚铁氰化钾，完全溶解后稀释至1000ml 中，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。

葡萄糖标准溶液：精取1.0000g 经过98—100℃烘至恒重的葡萄糖，加水溶解后加入5ml 浓盐酸，并以水稀释至1000ml 。

1ml 此液相当1mg 葡萄糖。

三、操作方法：1.空白滴定（碱性酒石酸铜溶液标定）：吸取碱性酒石酸甲液、乙液各5.0ml ，置于250ml 锥形瓶中，加水10ml,从滴定管滴加约9ml 葡萄糖标准溶液，控制在2min 内加热至沸，沸腾30S,趁沸以每2s/滴的速度滴加葡萄糖标准液，并保持微沸状态，直至蓝紫色刚好消失为终点，记录消耗葡萄糖总体积。

平行作三次，取平均值。

2.预备滴定：吸取甲液、乙液各5.0ml,于250ml 锥形瓶中,加水10ml,再加入1%样品稀释液1ml,根据待测样品含糖量的高低,可用糖液滴定管先加入不定量的0.1%葡萄糖标准溶液（详见注意事项）,摇匀后加热,沸腾30S 后,以每2s/滴的速度滴至蓝紫色正好褪去为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液的体积。

3.正式滴定：精确称取1.000g 样品(精确至0.001)于小烧杯中加少许水溶解,定容至100ml 待用。

吸取甲液及乙液各5.0ml,于250ml 锥形瓶中,加水10ml,再加入1%样品稀释液1ml,滴加比预测体积少1ml 的0.1%葡萄糖标准溶液，以上述方法滴定，记录消耗葡萄糖标准液体积，平行三次取其平均值。

1⾷品中还原糖的测定1、⾷品中还原糖的测定（碱性铜盐法[直接滴定法、⾼锰酸钾滴定法]、铁氰化钾法、碘量法、⽐⾊及酶法）掌握直接滴定法1）原理：试样经处理除去蛋⽩质后在加热条件下，以次甲基蓝作为指⽰剂，滴定标定过的碱性酒⽯酸铜溶液，由于酒⽯酸铜具有氧化性，加热条件下可以将还原糖氧化成醛酸，⽽本⾝还原成氧化亚铜沉淀，使溶液呈蓝⾊，由于所⽤指⽰剂为氧化还原指⽰剂，当还原糖将⼆价铜全部还原后，过量的还原糖则可以把次甲基蓝还原，溶液由蓝⾊变成⽆⾊，即为滴定终点。

2）样品预处理（看实验册！！）3）步骤：①样品预处理：取样→提取液（50ml⽔）→250ml锥形瓶→⼄酸锌溶液、亚铁氰化钾溶液各5ml→定容、摇匀，静置30min→过滤（弃去初滤液）→滤液备⽤；②碱性酒⽯酸铜溶液的标定：碱性酒⽯酸铜甲⼄液各5ml，⽔10ml于150ml锥形瓶（玻珠3粒）→从滴定管放⼊9ml葡萄糖标准溶液→加热（2min内沸腾）→准确沸腾30min→⽤葡萄糖标准溶液以1滴/秒的速度进⾏滴定→蓝⾊刚好褪去时记录葡萄糖标准溶液的消耗量（ml）；③样品溶液预测：碱性酒⽯酸铜甲⼄液各5ml，⽔10ml于150ml锥形瓶（玻珠3粒）→加热（2min 内沸腾）→以先快后慢的速度从滴定管中滴加试样溶液，保持溶液沸腾状态，待颜⾊变浅，以1滴/2秒的速度滴定，直⾄溶液蓝⾊刚好消失为终点，记录样液消耗量（应与标定碱性酒⽯酸铜溶液时说消耗的葡萄糖标准溶液体积接近，若太⾼则要适当稀释才进⾏正式滴定，过低则可以直接加10ml的样液⽽不加10ml⽔，在⽤还原糖标准溶液滴定⾄终点，记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液的体积之差，那么⼀会正式滴定则加这差值）④试样溶液测定：碱性酒⽯酸铜甲⼄液各5ml，⽔10ml于150ml锥形瓶（玻珠3粒）→从滴定管滴加⽐预测体积少1ml的试样溶液⾄锥形瓶→加热（2min内沸腾）→趁沸继续以1滴/2秒的速度滴定→直⾄溶液蓝⾊刚好消失为终点，记录样液消耗量（平⾏三次）4）主要试剂及作⽤①⼄酸锌-亚铁亚铁氰化钾溶液：作为澄清剂，主要是利⽤⼄酸锌和亚铁亚铁氰化钾反应⽣成的氰亚铁酸锌沉淀带⾛或吸附⼲扰物质（主要是蛋⽩质），这种澄清剂除蛋⽩质能⼒强，但脱⾊能⼒弱，适合于⾊泽较浅、蛋⽩质含量较⾼的样液澄清，如乳制品、⾖制品。

食品中还原糖的测定方法还原糖是指能够被还原剂还原为相应的糖醇或糖醛的单糖或双糖。

在食品中，还原糖是一种常见的添加剂，它能够增加食品的甜度和口感。

然而，过量的还原糖会对人体健康造成不良影响，因此需要对食品中的还原糖含量进行测定。

下面介绍几种常用的还原糖测定方法。

1. 蒽酮法蒽酮法是一种经典的还原糖测定方法，它基于还原糖与蒽酮反应生成有色产物的原理。

该方法操作简单，灵敏度高，适用于各种食品中还原糖的测定。

具体操作步骤如下：（1）取适量样品，加入适量水，加热至沸腾，使样品中的还原糖全部还原为糖醇。

（2）将样品冷却至室温，加入适量蒽酮试剂，摇匀。

（3）加入适量氢氧化钠溶液，使样品呈碱性。

（4）在紫外光下测定样品的吸光度，根据标准曲线计算还原糖的含量。

2. 酚硫酸法酚硫酸法是一种常用的还原糖测定方法，它基于还原糖与酚硫酸反应生成有色产物的原理。

该方法操作简单，适用于各种食品中还原糖的测定。

具体操作步骤如下：（1）取适量样品，加入适量水，加热至沸腾，使样品中的还原糖全部还原为糖醇。

（2）将样品冷却至室温，加入适量酚硫酸试剂，摇匀。

（3）加入适量氢氧化钠溶液，使样品呈碱性。

（4）在紫外光下测定样品的吸光度，根据标准曲线计算还原糖的含量。

3. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种精确、快速、灵敏的还原糖测定方法，它基于还原糖在色谱柱中的分离和检测。

该方法操作简单，适用于各种食品中还原糖的测定。

具体操作步骤如下：（1）取适量样品，加入适量水，加热至沸腾，使样品中的还原糖全部还原为糖醇。

（2）将样品冷却至室温，加入适量甲醇，摇匀。

（3）用过滤膜过滤样品，取上清液注入色谱柱中。

（4）在色谱柱中分离还原糖，检测各组分的峰面积或峰高，根据标准曲线计算还原糖的含量。

总之，还原糖是一种常见的食品添加剂，需要对其含量进行测定。

蒽酮法、酚硫酸法和高效液相色谱法是常用的还原糖测定方法，它们操作简单、灵敏度高、适用范围广，可以满足不同食品中还原糖的测定需求。

《还原糖的测定方法_国标》还原糖是利用还原性固体物质与硫酸酸作用而形成的糖类物质，是各种天然糖和蔗糖等碳水化合物的主要成分。

还原糖的测定方法主要包括酚酞法和锁紫法两种。

一、酚酞法1.原理还原糖在酸性溶液中能够与酚酞形成红色络合物，按照这个特性可以利用测定还原糖的含量。

酚酞法是将酚酞加入葡萄糖溶液，并加入硫酸，使葡萄糖反应生成邻磺酸基苯甲醛，酚酞与邻磺酸基苯甲醛产生红色络合物，根据颜色变化来测定还原糖的含量。

2.步骤（1）样品处理：将样品取适量加入标准瓶中，加入适量蒸馏水稀释。

（2）试剂溶液制备①酚酞指示剂：0.1%酚酞水溶液，加入适量氢氧化钠溶液调节其pH值到8左右；②还原剂：0.05mol/L的亚硫酸钠溶液。

（3）测定操作①在滴定管中加入5ml淀粉指示液；②将50ml试剂用热水浴加热至60℃，在加热的过程中不断振荡，直到试剂完全溶解；③加入3ml样品，再加入1.5ml的硫酸；④加入恰好的量的还原剂，至混合溶液变成淡绿色，继续振荡至反应彻底；⑤从头部滴入酚酞指示液，直至溶液变为粉色，记录滴定管体积。

（4）计算还原糖的质量浓度二、锁紫法1.原理锁紫法是一种定量测定还原糖的方法，其原理是利用还原性糖在酸性条件下氧化生成醛酸物质，再与锁紫剂作用形成深紫色络合物，根据反应色深与被测样品中还原糖含量成正比关系的特点，来定量测定还原糖的含量。

2.步骤（1）样品前处理：将样品取适量加入到锥形瓶中加入适量蒸馏水稀释，搅拌溶解。

（2）试剂溶液制备①锁紫试剂：将0.2g锁紫用少量水样吸湿后加入10mL浓氢氧化钠（4mol/L），用水稀释到100ml，在加入5ml浓硫酸搅拌，备用；②还原剂：0.05mol/L的亚硫酸钠溶液。

（3）操作流程①在锥形瓶中加入1ml锁紫试剂和30ml蒸馏水；②加入3ml样品后加入2ml还原剂，充分搅拌均匀；③经过10分钟左右，样品溶液颜色变为紫色，放置待沉淀，用滤纸滤掉沉淀；④将过滤后的溶液转移到光度计试样池，用蒸馏水稀释至标线；⑤根据光度计读数计算样品中还原糖的质量浓度。

还原糖的测定方法国标 Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】还原糖的测定方法（1）食物中还原糖的测定方法：高锰酸钾滴定法和直接滴定法。

一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量，再查表得还原糖量。

2.适用范围，本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。

3.仪器（1）滴定管（2） 25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚（3）真空泵（4）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。

6 mol/L盐酸：量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。

甲基红指示剂：称取10mg甲基红，用100ml乙醇溶解。

5 mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。

碱性酒石酸铜甲液：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O），加适量水溶解，加硫酸，再加水稀释至500ml，用精制石棉过滤。

碱性酒石酸铜乙液：称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。

精制石棉：取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2～3天，用水洗净，再加L氢氧化钠溶液浸泡2～3天，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时，用水洗净。

再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。

然后加水振摇，使成微细的浆状软县委，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可用做填充古氏坩埚用。

L高锰酸钾标准溶液。

1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠，加水溶解并稀释至100ml。

硫酸铁溶液：称取50g硫酸铁，加入200ml水溶解后，慢慢加入100ml硫酸，冷却后加水稀释至1L。

3mol/L盐酸：量取30ml盐酸，加水稀释至120ml。

还原糖得测定方法(1)食物中还原糖得测定方法：高锰酸钾滴定法与直接滴定法。

一、高锰酸钾滴定法ﻫ1、原理样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成得亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量，再查表得还原糖量. ﻫ2、适用范围ﻫＧB5009、７－8５,本法适用于所有食品中还原糖得测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖得非还原性糖类物质得测定。

3、仪器（1）滴定管ﻫ(2）2５ml古氏坩埚或G4垂融坩埚（３）真空泵ﻫ(4）水浴锅４、试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。

４、1 ６ｍｏl／Ｌ盐酸：量取５0ml盐酸加水稀释至100 ｍl。

４、2 甲基红指示剂：称取1０mｇ甲基红,用100ml乙醇溶解. ﻫ4、3５mｏl／L氢氧化钠溶液:称取2０g氢氧化钠加水溶解并稀释至１00ml。

4、4 碱性酒石酸铜甲液：称取３４、６39g 硫酸铜(CuＳＯ４·５H2Ｏ），加适量水溶解,加０、5ml硫酸,再加水稀释至5００ml，用精制石棉过滤。

ﻫ4、5 碱性酒石酸铜乙液：称取１73g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解，并稀释至5００ｍl，用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。

ﻫ４、６精制石棉：取石棉先用3mol/Ｌ盐酸浸泡2～3天，用水洗净,再加2、5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2～3天，倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。

再以３mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。

然后加水振摇，使成微细得浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用. ﻫ４、7 0、1000 mｏl/L高锰酸钾标准溶液。

4、8 1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠,加水溶解并稀释至１00mｌ。

ﻫ４、９硫酸铁溶液：称取５0ｇ硫酸铁,加入2０0mｌ水溶解后，慢慢加入1０0ml硫酸,冷却后加水稀释至1L。

还原糖的测定方法还原糖是一种重要的碳水化合物，在食品工业以及生物化学领域具有广泛的应用。

测定还原糖的含量对于食品质量的控制以及生物化学实验的进行具有重要意义。

本文将介绍几种常用的还原糖测定方法，希望能够为相关领域的研究工作提供一些参考。

一、费林法测定法。

费林法是一种经典的还原糖测定方法，其原理是将还原糖与铜离子在碱性条件下发生氧化还原反应，生成红色沉淀。

通过测定沉淀的重量或者颜色深浅来确定还原糖的含量。

这种方法操作简单，结果准确，被广泛应用于食品工业中。

二、硫氰化铁法测定法。

硫氰化铁法是一种比较快速的还原糖测定方法，其原理是将还原糖与硫氰化铁在酸性条件下反应生成蓝色络合物，通过测定络合物的吸光度来确定还原糖的含量。

这种方法具有操作简便、结果快速的特点，适用于实验室中大批量样品的测定。

三、酶法测定法。

酶法是一种高灵敏度、高特异性的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖酶将还原糖催化转化成葡萄糖，再利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化生成过氧化物，通过测定过氧化物的吸光度来确定还原糖的含量。

这种方法适用于对还原糖含量要求较高的实验，如生物化学实验和医学检测。

四、色谱法测定法。

色谱法是一种高分辨率、高灵敏度的还原糖测定方法，其原理是利用色谱柱将混合物中的还原糖分离出来，再通过检测器检测还原糖的峰值面积或者浓度来确定其含量。

这种方法操作复杂，但具有高分辨率、高灵敏度的特点，适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。

五、红外光谱法测定法。

红外光谱法是一种非破坏性的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖分子的振动和转动引起的红外吸收来确定其含量。

这种方法操作简单，无需样品的处理，适用于对还原糖含量要求不是很严格的实验。

六、电化学法测定法。

电化学法是一种高灵敏度、高精度的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖在电极上的氧化还原反应来确定其含量。

这种方法操作简单，结果准确，适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。

总结。

以上介绍了几种常用的还原糖测定方法，每种方法都有其特点和适用范围。