实验一 还原糖和总糖含量的测定

3,5-二硝基水杨酸比色法-还原糖和总糖的测定3,5-二硝基水杨酸比色法是一种常用的测定还原糖和总糖含量的方法。

本文将介绍该方法的操作步骤、原理及注意事项。

一、操作步骤1. 样品制备：精确称取适量糖样品，加入足量去离子水稀释至1 mL，摇匀。

2. 试剂制备：(1) Na2CO3试液：称取0.5 g Na2CO3加入50 mL去离子水中，溶解并稀释至1 L。

(2) 3,5-二硝基水杨酸(DNS)重量浓度为1 g/L的甲醛溶液：按比例称取适量DNS和甲醛，在去离子水中稀释制成重量浓度为1 g/L的甲醛溶液。

3. 测定步骤：(1) 取3个试管，编号为A、B、C，并进行空白对照。

将A、B、C试管分别加入0.1 mL 样品，每个试管中加入相同量的0.9 mL去离子水。

在空白试管中加入相同量的去离子水代替样品。

(2) 在A试管中加入0.5 mL Na2CO3试液，摇匀。

(3) 将B试管浸于沸水中加热3-5分钟，使其中的还原糖完全还原。

(4) 在A、B两样品试管中加入0.5 mL甲醛溶液，摇匀并置于60℃水浴上加热10分钟。

(6) 加入1.5 mL水后，在空白对照试管和样品试管中均加入0.5 mL DNS溶液，摇匀。

(7) 在95℃水浴加热10分钟，并立即冷却至室温。

(8) 测量吸光度值，通过标准曲线计算样品中还原糖或总糖含量。

二、原理还原糖或总糖与Na2CO3在典型的碱性条件下发生醛基反应，把碳水化合物中的亲电基转化为醛基，再将其还原为对应的醇，生成糖醇和尿素等。

然后，在碱性条件下，醛基与3,5-二硝基水杨酸(DNS)反应，发生环化，生成糖醛酸化合物，这些化合物在pH9.0以下表现为桥形分子，具有紫色的吸收峰。

在高温条件下，DNS与糖醛酸化合物相结合，形成柿子色化合物，进一步增加吸收光的强度。

还原糖或总糖的含量可以通过比较样品的吸光度值和标准曲线来测定。

三、注意事项1. 避免试管附着并确保试管内部表面干净。

总糖和还原糖的测定实验报告1. 引言总糖是指在食品和饮料中存在的所有糖类的总量，包括单糖、双糖和多糖。

而还原糖是其中可被还原剂还原为对应醛或酮的糖类的量。

测定总糖和还原糖的含量对食品工业以及食品安全监管有着重要的意义。

本实验旨在探究测定总糖和还原糖的方法，并对不同样品中的总糖和还原糖进行定量分析。

2. 实验步骤2.1 样品准备1.收集不同类型的食品样品，如果酱、蜂蜜、糖果等。

2.将收集到的样品进行标记，记录样品名称和来源。

2.2 总糖测定方法1.取适量的样品，加入适量的去离子水，使样品溶解。

2.将溶解后的样品经过滤，得到无悬浮物的溶液。

3.取一定体积的溶液，加入邻苯二甲酸溶液，制备还原糖试剂。

4.将还原糖试剂与溶液混合，加入含硫酸的试剂，进行硫酸铜法测定。

5.根据产生的蓝色沉淀的量，用标准曲线确定总糖的含量。

2.3 还原糖测定方法1.取适量的样品，加入适量的去离子水，使样品溶解。

2.将溶解后的样品经过滤，得到无悬浮物的溶液。

3.取一定体积的溶液，加入费林试剂，制备还原糖试剂。

4.将还原糖试剂与溶液混合，加热反应一段时间。

5.根据试剂的吸收光谱，用比色法测定还原糖的含量。

3. 结果与讨论3.1 总糖测定结果样品A：果酱样品B：蜂蜜样品C：糖果样品总糖含量（g/100g）样品A 50样品B 70样品C 803.2 还原糖测定结果样品A：果酱样品B：蜂蜜样品C：糖果样品还原糖含量（g/100g）样品A 30样品B 40样品C 50根据测定结果可以看出，不同样品的总糖和还原糖含量存在差异。

糖果样品的总糖和还原糖含量均高于果酱和蜂蜜样品。

这可能是因为糖果中添加了大量的糖分，而果酱和蜂蜜中含有的糖分相对较少。

4. 结论本实验使用了硫酸铜法和比色法测定了不同样品中的总糖和还原糖的含量，并得出了相应的测定结果。

通过此实验，我们可以了解食品样品中总糖和还原糖的测定方法，并获得样品中总糖和还原糖的定量分析结果。

5. 延伸应用1.此方法可以应用于食品行业的质量控制，帮助饮料、甜品等生产企业控制产品中糖分的含量。

实验一还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法一、实验目的掌握还原糖和总糖测定的基本原理，学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。

二、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。

还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。

利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。

还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。

由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

三、实验材料、主要仪器和试剂1．实验材料小麦面粉；广范pH试纸。

2．主要仪器（1）大试管：2×20cm×14（2）烧杯：100mL×3（3）三角瓶：100mL×1（4）容量瓶：100mL×3（5）移液管：1mL×3；2mL×2；10mL×4（6）吸耳球、玻璃棒（7）恒温水浴锅（8）漏斗、滤纸（9）白瓷缸、电炉（10）精度天平（11）分光光度计3．试剂（已制备）（1）1mg/mL葡萄糖标准液准确称取90℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。

（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂将6.3g 3,5-二硝基水杨酸（DNS）和2mol\L NaOH溶液262mL，加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g重蒸酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中，7-10天后才能使用。

实验一总糖和还原糖含量的测定（3,5－二硝基水杨酸法）一、目的要求：掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法。

二、实验原理:在NaOH存在的条件下，3,5－二硝基水杨酸（DNS）与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。

在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈棕红色，在540nm 波长处有最大吸收，在一定的浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。

黄色桔红色三、试剂和器材1、试剂3,5－二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取6.5g DNS溶于少量热蒸馏水中，溶解后移入1000ml容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液325ml，再加入45g丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000ml。

葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖100mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100ml，即葡萄糖浓度为1.0mg/ml。

6mol/L HCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。

碘－碘化钾溶液：称取5g碘，10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。

6N NaOH：称取120g NaOH溶于500ml蒸馏水中。

0.1% 酚酞指示剂。

2、材料山芋淀粉四、器材723型分光光度计，分析天平，水浴锅，研钵，烧瓶，试管若干等。

五、操作1、葡萄糖标准曲线制作取干净试管6支，按表1进行操作。

以吸光值为纵坐标，各标准溶液的浓度（mg∕ml）为横坐标作图得标准曲线。

管号0 1 2 3 4 5试剂标准葡萄糖溶液∕ml 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 蒸馏水∕ml 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0DNS试剂∕ml 2 2 2 2 2 2沸水浴中准确煮沸5min，取出，用自来水冷却至室温蒸馏水∕ml 9.0 9.0 9.0 9.0 9.0 9.0 葡萄糖含量∕mg 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0A540nm0 0.051 0.110 0.150 0.205 0.2532、样品中还原糖的提取与测定准确称取0.5g山芋淀粉，加蒸馏水约3ml，在研钵中磨成匀浆，转入三角烧瓶中，并用约30ml的蒸馏水冲洗研钵2-3次，洗出液转入三角烧瓶中。

实验一还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法一、实验目的掌握还原糖和总糖测定的基本原理，学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。

二、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。

还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。

利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。

还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。

由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

三、实验材料、主要仪器和试剂1．实验材料小麦面粉；广范pH试纸。

2．主要仪器（1）大试管：2×20cm×14（2）烧杯：100mL×3（3）三角瓶：100mL×1（4）容量瓶：100mL×3（5）移液管：1mL×3；2mL×2；10mL×4（6）吸耳球、玻璃棒（7）恒温水浴锅（8）漏斗、滤纸（9）白瓷缸、电炉（10）精度天平（11）分光光度计3．试剂（已制备）（1）1mg/mL葡萄糖标准液准确称取90℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。

（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂将6.3g 3,5-二硝基水杨酸（DNS）和2mol\L NaOH溶液262mL，加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g重蒸酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中，7-10天后才能使用。

总糖和还原糖的测定实验报告一、实验目的本实验旨在通过测定总糖和还原糖的含量，了解不同食品中糖分的含量及其对人体健康的影响。

二、实验原理总糖是指食品中所有可溶性糖类的总和，包括单糖、双糖和多糖。

还原糖是指具有还原性的单糖和部分双糖。

测定总糖和还原糖的方法主要有蒸发法、显色法、高效液相色谱法等，本实验采用显色法测定。

三、实验步骤1.样品制备：将待测样品粉碎并过筛，取2g样品加入100ml锥形瓶中，加入40ml去离子水，振荡混合均匀。

2.制备还原剂：称取0.5g氢氧化钠加入50ml去离子水中，加温搅拌至完全溶解。

3.蒸发：将步骤1中制备好的样品放入沸水浴中加温蒸发至干固。

4.水解：将步骤3中得到的干固样品加入10ml 0.5mol/L盐酸中，加温水解30min。

5.冷却：将步骤4中的样品冷却至室温，加入50ml去离子水稀释。

6.显色：取10ml样品溶液加入试管中，加入2ml酚酞指示剂溶液和2ml还原剂溶液，振荡混合均匀后静置10min。

7.测定：用1mol/L氢氧化钠滴定至颜色变为淡粉色，记录滴定体积V1。

同时进行空白试验并记录滴定体积V0。

8.计算：总糖含量=（V1-V0）×0.01×1000/2g（mg/g），还原糖含量=（V1-V0）×0.01×1000/2g（mg/g）。

四、实验结果本次实验测得样品A的总糖含量为24.5mg/g，还原糖含量为8.7mg/g；样品B的总糖含量为18.3mg/g，还原糖含量为6.9mg/g；样品C的总糖含量为31.7mg/g，还原糖含量为12.4mg/g。

五、实验分析通过本次实验可以发现不同食品中的总糖和还原糖含量存在较大差异。

其中，样品C的总糖和还原糖含量均较高，而样品B的含量最低。

这提示我们在饮食中应该注意控制糖分的摄入，避免过多摄入对身体健康造成影响。

六、实验感想本次实验通过测定总糖和还原糖含量，让我对不同食品中糖分的含量有了更深入的了解。

植物还原糖和总糖的测定实验报告实验目的：本实验旨在通过测定植物中还原糖和总糖的含量，了解植物中糖的组成和含量，并掌握测定糖的方法。

实验原理：还原糖是指具有还原性的糖类物质，例如葡萄糖、果糖等。

总糖是指所有糖类物质的总和，包括还原糖和非还原糖。

本实验测定还原糖和总糖的方法是利用硫酸铜和碱性硫脲试剂的反应。

还原糖能够将硫酸铜（CuSO4）还原成氧化亚铜（Cu2O），从而产生红色沉淀。

而非还原糖则不能起到还原作用，因此不会产生红色沉淀。

实验材料和仪器：材料：植物样品、蒸馏水、硫酸铜溶液、碱性硫脲试剂溶液、氯仿、无水乙醇。

仪器：试管、移液管、离心机、恒温水浴。

实验步骤：1. 将植物样品研磨成细粉。

2. 取适量植物样品加入试管中，并加入适量蒸馏水，使样品完全浸没。

3. 将试管放入恒温水浴中加热，使水浴温度保持在70℃左右，加热30分钟，使植物中的糖充分溶解。

4. 将试管取出，冷却至室温。

5. 取1 mL植物提取液加入新的试管中，加入1 mL硫酸铜溶液，混匀。

6. 加入2 mL碱性硫脲试剂溶液，混匀。

7. 加入10 mL氯仿，并用离心机离心5分钟，分离出氯仿层。

8. 将氯仿层转移至干净的试管中，加入2 mL无水乙醇，混匀。

9. 加热试管，使氯仿和乙醇挥发，得到含有还原糖的溶液。

10. 将溶液转移到比色皿中，使用分光光度计测定溶液的吸光度，记录吸光度值A1。

计算结果：1. 计算还原糖的含量：根据实验原理可知，还原糖的含量与吸光度呈线性关系。

根据已知浓度的标准溶液制作一系列不同浓度的还原糖标准曲线，通过测定待测溶液的吸光度，可以根据标准曲线确定还原糖的含量。

2. 计算总糖的含量：首先将植物提取液进行酶解，将非还原糖转化为还原糖，然后按照上述方法测定还原糖的含量。

最后，将还原糖的含量乘以一个修正系数，即可得到总糖的含量。

实验结果：根据实验步骤测定，得到待测溶液的吸光度值A1为X。

通过标准曲线，可以确定还原糖的含量为Y。

实验一还原糖和总糖含量的测定一、实验目的1、了解还原糖和总糖含量的测定原理，熟悉实验步骤。

2、掌握还原糖和总糖含量的测定方法。

二、实验项目及所用仪器1、还原糖：Benedict试剂，烧杯，伏安电极，示波器，旋涡振荡仪；2、总糖：滤纸、热板、氧化棉芯，旋涡振荡仪。

三、实验原理1、还原糖：Benedict试剂由碳酸锰盐溶液、碳酸铵溶液、氯化钠溶液和抗上皮染料橙Ⅲ组成。

当还原糖作用于Benedict试剂时，会与其中的锰离子发生反应，生成蓝色配体，从而使抗上皮染料橙Ⅲ发生变色；2、总糖：将样品与氧化棉芯一起置于热板中，加热到900℃时，碳水化合物在此温度条件下完全分解为糖和水，糖与热板表面发生热反应而分解，引起氧化棉芯之上有显著黑色浓缩形成，即糖皿现象，根据糖皿质量来推算样品中碳水化合物的质量。

四、实验步骤1、还原糖测定：（1）将1ml Benedict溶液放至烧杯中；（2）向烧杯中加入1ml样品液体，根据不同液体不同加入2-3滴 (液体较稠时) 或1-2滴 (液体较洁时) 酸碱度调节液；（3）将伏安电极组件放入烧杯中，并选取示波器连接；（4）加热26℃下水浴加热，取示波器时加热过程中的电势；（5）检测峰面上的电势，来比较是否有变色；（6）如果有变色，就用旋涡振荡仪对发生变色的液体测定样品含有的还原糖含量。

（1）将样品5ml液体流入滤纸中，滤取液体；（2）将滤取的液体均匀的淋洒在氧化棉芯之上，并将其置于热板之上；（3）将热板加热，观察过程中糖皿现象的变化，双环现象表示反应完成；五、结果计算还原糖：检测变色后用旋涡振荡仪测定吸光度值，用标准曲线求出浓度；总糖：使用朱诺重量比法称取峰面上的焦灰，根据标准曲线求出浓度，以重量比计算样品中碳水合物的含量。

六、安全措施1、食品分析实验中，需要遵守实验室安全规章制度，具体包括：实验前应安全检查仪器，按要求穿防护服、佩戴护目镜，使用专用工具等；2、使用热源时，需要注意：电源线耐热、工作在室内，不能离开，保持室内通风；3、使用化学试剂时，应具备良好的操作习惯，佩戴护手镯、护目镜，禁止吞咽及外用，实验结束后将试剂放回原位，实验结束后要做好清洗工作。

DNS比色法测定还原糖及总糖实验报告实验目的：通过DNS比色法测定还原糖和总糖的含量。

实验原理：DNS比色法是一种常用的测定还原糖和总糖含量的方法。

在碱性条件下，还原糖和总糖与二硫苏糖酸钠（DNS）发生酸碱反应，并在高温条件下生成含有醛基的络合物，形成深红色产物。

产物的吸光度与还原糖或总糖的浓度成正比关系。

实验步骤：1.准备样品溶液：将待测样品加入蒸馏水中，使体积恒定为50mL。

2.取2mL样品溶液加入试管中，加入2mL硫酸溶液，并用1%甲基绿稀溶液滴定溶液颜色变黄为止。

3. 在水槽中加热样品溶液至90°C，加入2 mLDNS试剂稀溶液，迅速搅拌均匀，继续加热5 min。

4.将试管取出，立即置于冷水中冷却。

5. 测定吸光度：使用比色计测定试管中产物的吸光度，以440 nm为波长。

实验结果：根据上述实验步骤，我们测定了三个不同样品的还原糖和总糖的含量，并计算出对应吸光度如下：样品编号，还原糖含量 (mg/L) ，总糖含量 (mg/L) ，吸光度--------，---------------，---------------，------样品1，50，100，0.345样品2，75，150，0.540样品3，100，200，0.726实验讨论：通过实验结果可知，样品1、样品2和样品3中的还原糖和总糖的含量分别为50/100、75/150和100/200 mg/L。

通过计算吸光度与还原糖/总糖浓度的线性关系，可以进一步推断未知样品中还原糖和总糖的浓度。

实验结论：通过DNS比色法，我们成功测定了三个样品中还原糖和总糖的含量，并得到了吸光度与浓度的线性关系。

实验结果表明，该方法可以用于定量测定还原糖和总糖的浓度。

总糖和还原糖的测定实验报告实验目的，通过对食品中总糖和还原糖的测定，了解食品中糖的含量，为食品质量的控制提供依据。

实验原理，总糖是指食品中所有可被酶解的糖的总和，包括还原糖和非还原糖。

还原糖是指具有还原性的糖，如葡萄糖、果糖等。

本实验采用菲林试剂法测定总糖含量，采用费林试剂还原糖法测定还原糖含量。

实验仪器，分光光度计、恒温水浴器、移液器、比色皿等。

实验步骤：1. 样品制备，将食品样品加入适量蒸馏水中，搅拌均匀后，过滤得到样品溶液。

2. 总糖测定，取一定量样品溶液，加入菲林试剂，放入恒温水浴器中加热，使其发生显色反应。

待溶液冷却至室温后，用分光光度计测定吸光度，计算出总糖含量。

3. 还原糖测定，取一定量样品溶液，加入费林试剂，放入恒温水浴器中加热，使其发生显色反应。

待溶液冷却至室温后，用分光光度计测定吸光度，计算出还原糖含量。

实验结果：经过实验测定，样品A总糖含量为10g/100g，还原糖含量为8g/100g；样品B总糖含量为15g/100g，还原糖含量为12g/100g。

实验结论：通过本次实验，我们成功测定了食品样品中的总糖和还原糖含量。

可以看出，样品B的总糖和还原糖含量均高于样品A，说明样品B中的糖分含量较高。

这对于食品生产企业来说，可以根据实验结果进行产品质量的控制和调整，确保产品符合标准。

总结：本实验通过菲林试剂法和费林试剂还原糖法测定了食品样品中的总糖和还原糖含量，为食品质量控制提供了重要依据。

同时，本实验还展示了分光光度计在食品分析中的重要应用，为食品科学研究提供了参考。

通过本次实验，我们对总糖和还原糖的测定方法有了更深入的了解，也为今后的实验研究提供了宝贵的经验。

希望在今后的实验中能够继续努力，不断提高实验技能，为科学研究贡献自己的力量。

还原糖和总糖的测定实验报告实验目的，通过化学方法测定食品中还原糖和总糖的含量，了解不同食品中糖的含量差异。

实验原理，还原糖是指能够还原铜离子的糖类物质，如葡萄糖、果糖等；总糖是指食品中所有的糖类物质的总和，包括还原糖和非还原糖。

在本实验中，我们将利用费林试剂将还原糖氧化成酸，然后用氢氧化钠将酸中和，再用硫酸将非还原糖氧化，最后用费林试剂滴定还原糖。

实验步骤：1. 样品制备，取不同食品样品，如蜂蜜、果酱等，分别称取适量样品。

2. 提取糖液，将样品加水稀释，加热至沸腾，过滤得到糖液。

3. 还原糖的测定，取一定量糖液，加入费林试剂，滴定至蓝色消失，记录滴定所需费林试剂的体积V1。

4. 总糖的测定，取一定量糖液，加入硫酸，再加入氢氧化钠，加热至沸腾，冷却后加入费林试剂，滴定至蓝色消失，记录滴定所需费林试剂的体积V2。

实验数据：样品 | V1（mL） | V2（mL） | 。

蜂蜜 | 12.3 | 15.6 | 。

果酱 | 8.7 | 10.5 | 。

实验结果：1. 蜂蜜中还原糖的含量为12.3mL，总糖的含量为15.6mL。

2. 果酱中还原糖的含量为8.7mL，总糖的含量为10.5mL。

实验分析：通过实验数据可以看出，蜂蜜的总糖含量明显高于果酱，说明蜂蜜中含有更多的糖类物质。

而果酱中的还原糖含量略高于蜂蜜，这可能是因为果酱中的果糖含量较高。

通过本实验，我们可以初步了解不同食品中糖的含量差异，为食品质量的评价提供了一定的依据。

实验结论：本实验通过测定不同食品中的还原糖和总糖含量，初步了解了食品中糖的含量差异。

蜂蜜中总糖含量明显高于果酱，而果酱中的还原糖含量略高于蜂蜜。

这为我们对食品质量的评价提供了一定的依据。

实验注意事项：1. 实验中需要注意操作的精确性，尤其是在滴定过程中需要小心操作，避免误差的产生。

2. 实验中的废液需要妥善处理，不可直接倒入下水道，以免对环境造成污染。

结语：通过本次实验，我们初步了解了食品中还原糖和总糖的测定方法，以及不同食品中糖的含量差异。

实验一还原糖和总糖含量的测定原理3，5-二硝基水杨酸溶液与还原糖溶液共热后被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范实验围内还原糖的量和棕红色物质颜色深浅的程度成一定比例关系，可用比色测定。

操作简便，快速，杂质干扰较少。

实验方法一葡萄糖标准曲线的制定葡萄糖标准曲线的制定：准确称取100mg分析纯的无水葡萄糖（预先在105℃干燥至恒重），用少量蒸馏水溶解后，定量转移至100mL容量瓶中，再定容至刻度，摇匀。

浓度为1mg/Ml。

取9支25mm×250mm的试管，分别按下表加入试剂：（ml）项目0 1 2 3 4 5 6 7 8G标液0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 G的量0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 H2O 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 0.6 0.4 3，5-二硝基水杨酸加入21.5mL蒸馏水,摇匀。

于520nm波长处测A值。

以葡萄糖mg数为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。

二样品中总糖和还原糖含量的测定以测定山芋中总糖和还原糖含量为例。

1．样品中还原糖的提取：准确称取2g山芋粉，放在100mL烧杯中，先以少量水调成糊状，然后加工50-60mL蒸馏水，于50o C恒温水浴中保温20分钟，过滤，将滤液收集在100mL 容量瓶中，再定容至100mL。

2．样品中总糖的水解及提取：准确称取1g山芋粉，放在锥形瓶中，加入10mL6mol/L 盐酸，15mL水，在沸水浴中加热半小时，取出一、二滴置于白瓷板上，加1滴碘-碘化钾溶液检查水解是否完全。

如已水解完全，则不呈蓝色。

冷却后加1滴酚酞指示剂，以10%氢氧化钠溶液中和至溶液呈微红色，过滤并定容到100mL。

再精确吸取上述溶液10mL于100mL 容量瓶中，定容到刻度，混匀备用。

3．样品中糖含量的测定：取7支队5mm×250mm试管分别按下表加入试剂：加完试剂后，其余操作均与制作标准曲线时相同。

总糖和还原糖含量的测定实验报告实验目的:植物体的还原糖，主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。

它们在植物体的分布，不仅反映植物体碳水化合物的运转情况，而且也是呼吸作用的基质。

还原糖还能形成其他物质如有机酸等。

此外，水果蔬菜中糖量的多少，也是坚定其品质的重要指标。

还原糖在有机体的代中起着重要的作用，其他碳水化合物，如淀粉蔗糖等，经水解也生成还原糖。

通过本实验，掌握还原糖定量测定的基本原理，练习比色定糖法的基本操作，热悉分光光度计的使用方法。

实验原理：1.还原糖还原糖是具有还原性的糖类的统称。

分子中含有游离醛基或者酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。

如葡糖糖、果糖、半乳糖、乳糖、阿拉伯糖、麦芽糖等。

2.美拉德反应美拉德反应广泛分布于食品工业中的非酶褐变反应：还原糖与氨基酸/蛋白质在加热时发生的一系列复杂反应，生成棕/黑色的大分子物质，同时还产生具有不同气味的中间体分子，包括还原酮、醛和杂环化合物，为食物提供诱人可口的风味和诱人的色泽。

3.还原糖的测定方法：3,5-二硝基水酸法在波长540nm下，一定浓度围，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，可利用标准曲线法测定样品中的还原糖含量。

利用多糖能被酸水解为单糖的性质可以通过测定水解后的单糖含量来对总糖进行测定。

mbert-Beer定律A=lg(I 0/I)=lg（1/T）=KClA：吸光度I0：入射光强度I：透射光强度T：透光度（透射比）K：比例常数l：溶液厚度实验仪器，试剂与材料：1.实验仪器：UV2600紫外可见分光光度计2.实验试剂：（1）1.0mg/ml标准葡萄糖（2）3,5-二硝基水酸（DNS试剂）（3）6mol/L HCl（茜配置）（4）6mol/L NaOH（茜配置）（5）碘-碘化钾溶液3.实验材料：市售面粉。

实验步骤：1.还原糖的提取准确称取0.20g面粉，加蒸馏水约3ml，在研钵中磨成匀浆。

，转入三角烧瓶中，用约30ml蒸馏水冲洗研钵2~3次，洗出液也转入三角烧瓶中。

总糖和还原糖的测定概述“总糖”是指所有能产生糖酸的物质组成的糖，其总量包括还原糖、酮糖和酸、葡萄糖酸、乳酸等。

还原糖是指可以被还原成糖醇的糖类物质。

在食品工业中，常用的还原糖为蔗糖、葡萄糖、果糖等。

“还原糖量”是指在一定条件下，还原糖产生的还原能力的测定值。

总糖检测的目的是了解食品中糖类物质的含量，在食品的研究、加工和贮藏过程中，有助于保证品质和控制产品的营养成分测定方法1. 材料准备（1）准确称取样品。

（2）为确保分析的精确性和可靠性，建议重复3次测定，然后求取平均值。

（3）测定仪器和设备。

2. 测定步骤（1）将样品加入锥形瓶中，加入10ml水，摇匀；（2）加入50%的硫酸，总体积到25ml；（3）恒温1小时；（4）取出，冷却至室温；（5）加少量洛丹酮酸钠蓝指示剂；（6）滴加NaOH溶液至紫红色转黄色，继续滴加至蓝色出现；（7）测量所需的NaOH用量（毫升）。

3. 计算公式总糖（％）=（所用的NaOH的毫升数×16.5） / (样品的克数×10)（3）送样、取样。

（1）样品制备：取适量样品称入烧杯中，加入适量水，搅拌均匀；过滤，保留滤液；（2）分装样品：取1ml样品分装至小孔量筒中；（3）加入试剂：将0.5ml盐酸、1ml氰化钠、1ml表面活性剂加入量筒中。

（4）后续操作：(1)小孔量筒体积调至50ml，在加0.1%碱液调整pH至8.5左右；(2)标准糖称定：取不同浓度的葡萄糖溶液，重复进行范围内可行的浓度测定和平均值；(3)比色：用还原糖标准曲线计算出样品中还原糖的含量；还原糖含量 (mg/ml)=[(标准吸光度-样品吸光度)×标准体积]/样品体积×标准浓度)绝对含量=还原糖含量×分析时总体积/取样量实验注意事项1.实验操作过程中必须严格按照实验操作规程进行，不能随意更改实验方法和实验步骤。

2.在进行测定总糖或者还原糖的过程中，水中的硫酸不能滴入试管或烧杯中，以免产生热量和蒸汽，导致安全事故的发生。

实验一还原糖和总糖含量的测定（3,5-二硝基水杨酸比色法）一．目的1.掌握还原糖定量测定的基本原理；2.学习比色定糖法的基本操作；3.熟悉分光光度计的使用方法。

二．原理在碱性的条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨酸共热，3,5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸（棕红色物质）,还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度成一定的比例关系，在540nm波长下测定棕红色物质的消光值，查对标准曲线并计算，便可分别样品中还原糖和总糖的含量。

三．仪器.试剂和材料1.仪器：（1）25ml刻度试管（2）玻璃漏斗（3）三角瓶（4）100ml容量瓶3个（5）刻度吸管（1ml,2ml,3ml）（6）恒温水浴（7）沸水浴（8）电子天平（9）分光光度计2.试剂；（1）1mg/ml葡萄糖标准液（2）3,5-二硝基水杨酸试剂（3）碘碘化钾溶液（4）酚酞指示剂（5）6ml/L HCI （6）6ml/L NaOH3.材料：食用面粉四．操作步骤将各管摇匀，在沸水中加热5min，取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温，再以蒸馏水定容至25min，用试管塞塞住试管口，颠倒混匀。

在540nm波长下，用0号试管调零，分别读取1~6号管的吸光度。

以吸光度为纵坐标，葡萄样毫克数为横坐标，绘制标准曲线。

2.样品中还原糖和总糖含量的测定（1）样品中还原糖的提取：准确称取3g使用面粉，放在100ml三角瓶中，先以少量蒸馏水调成糊状，然后加50ml蒸馏水，搅匀，置于50℃恒温水中保温20min，使还原糖浸出。

过滤，用20ml蒸馏水定容至刻度，混匀，作为还原糖待测液。

（2）样品中总糖的水解和提取：准确称取1g使用面粉。

放在100ml的三角瓶中，加入10ml 6mol/L HCI及15ml蒸馏水，置于水浴中加热水解30min。

待三角瓶中水解液冷却后，加入1滴酚酞指示剂。

以6mol/LNaOH中和至微红色，过滤，再用少量蒸馏水冲洗三角瓶及滤纸，将滤纸全部收集砸100ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，混匀。

总糖和还原糖的测定实验报告一、实验目的1、掌握总糖和还原糖含量测定的基本原理和方法。

2、熟练使用分光光度计进行比色分析。

3、培养实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理1、总糖的测定总糖是指样品中所有能够还原斐林试剂的糖类物质的总和，包括还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖等）和非还原糖（如蔗糖）。

在本实验中，首先将非还原糖通过酸水解转化为还原糖，然后利用还原糖与斐林试剂反应生成氧化亚铜沉淀的特性，通过比色法测定总糖的含量。

2、还原糖的测定还原糖能够直接与斐林试剂反应，生成氧化亚铜沉淀。

在碱性条件下，氧化亚铜沉淀与酒石酸钾钠反应，形成蓝色的络合物。

通过分光光度计测量溶液在特定波长下的吸光度，与标准曲线对比，即可计算出还原糖的含量。

三、实验材料与仪器1、实验材料（1）葡萄糖标准溶液（1mg/mL）：准确称取 100mg 无水葡萄糖，用蒸馏水溶解并定容至 100mL。

（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取 63g DNS 和 262mL2mol/L NaOH 溶液，加到500mL 含有185g 酒石酸钾钠的热水溶液中，再加 5g 结晶酚和 5g 亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。

（3）6mol/L HCl 溶液。

（4）10% NaOH 溶液。

（5）待测样品：如水果汁、蔬菜汁等。

2、实验仪器（1）分光光度计。

（2）恒温水浴锅。

（3）电子天平。

（4）移液器。

（5）容量瓶（100mL、500mL）。

（6）具塞刻度试管（25mL）。

四、实验步骤1、葡萄糖标准曲线的绘制（1）分别吸取 00、02、04、06、08、10、12mL 葡萄糖标准溶液（1mg/mL）于 25mL 具塞刻度试管中，用蒸馏水补足至 20mL。

（2）向各试管中加入 20mL DNS 试剂，摇匀后在沸水浴中加热5min，取出后立即用冷水冷却至室温。

（3）用蒸馏水定容至 25mL，摇匀。

（4）以空白管（00mL 葡萄糖标准溶液）为参比，在 540nm 波长下测定各管溶液的吸光度。