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林业科技情报2019Vol.51No.1南林895杨适应性生长监测王克林（湖北省鄂州市不动产登记中心，湖北鄂州436000）［摘要］南林895杨是南京林业大学所选育出的新品种，有着速生、优质、高产等诸多特点。
为了更好的推广改良品种，并取得良好的经济效益，对南林895杨适应性生长监测结果进行了分析，更好的了解了南林895杨适应性，也因其特点显著，对其进行了监测及监测分析。
［关键词］南林895杨；适应性；监测Monitoring of Adaptive Growth of Nanjing ForestryUniversity895Populus L．Wang Kelin（Hubei EzhouＲeal EstateＲegistration Center，Ezhou，Hubei436000）Abstract：895Populus L．is a new breed bred by Nanjing Forestry University，which has many characteristics such as fast growth，perfect quality and high yield．In order to popularize improved breed and achieve good economic benefits，the results of adaptive growth monitoring of Nanjing Forestry University895Populus L．were analyzed．Be-cause of its remarkable characteristice，it was monitored and analyzed．Key words：Nanjing Forestry University895Populus L．；adaptability；monitor南林895杨是南京林业大学“九五”科技攻关选育出的新品种，具有速生、优质、高产等特点，2002年通过国家林木良种审定，是国家林业局重点推广的杨树新品种，适宜在黄淮平原、江淮平原及长江中下游平原生长。
农杆菌介导棉花遗传转化体系优化棉花纤维是纺织工业的重要原料,利用基因工程的方法遗传改良棉花纤维品质是棉花分子育种的重要方向。
GbMYB2基因cDNA是从海岛棉中克隆出一段长度为747bp的开放读码框,本实验室前期的研究结果证实:在拟南芥中过量表达GbMYB2基因能够能够增加表皮毛的数目、根的长度。
为了进一步研究GbMYB2基因在棉花中的功能,本研究在完善棉花遗传转化体系的同时,利用农杆菌遗传转化的方法将其转入棉花获得转基因的植株。
农杆菌介导的棉花遗传转化体系通常以下胚轴为外植体,经历愈伤组织、胚性愈伤组织、体胚胎发生等过程获得再生植株。
但该遗传转化体系通常受到基因型限制、转化周期长、成胚率低等因素的限制。
为了解决上述有关问题,本文在前人的工作基础上对体系进行优化,分别从两个方面(以胚性愈伤为受体的转化体系和以茎尖为受体)对农杆菌的遗传转化体系进行了探讨,结果如下:1.对以下胚轴为受体的遗传转化体系进行了优化:首先,针对棉花遗传转化体系的面临的转化效率低的问题,对外植体、农杆菌浓度、共培养时间、农杆菌菌株、C源以及凝固剂等进行研究和对比,结果显示:50mg/L卡纳霉素可以有效筛选抗性愈伤组织;下胚轴是该转化体系的最佳外植体;LBA4405和EHA105均可作为该转化体系的工程菌菌株;农杆菌浓度控制在OD600为0.5左右;最佳共培养时间为48h；以葡萄糖为C源可减少褐化。
其次，针对转化体系中转化周期长和工作量大的问题，对继代次数以及不同形态的非胚性愈伤组织产胚能力以及生长速度等进行了分析，结果显示：MSB5培养基继代次数两次；绿色和灰色相间的颗粒状非胚性愈伤组织生长速度和产胚能力最高；对非胚性愈伤及时进行分化培养可缩短转化周期；最后，针对转化体系中畸形胚发生率高的问题，对转化程序进行了优化，结果显示：应在加有滤纸的分化培养基上诱导产生胚后及时转入营养物质充足在的未加滤纸的培养基中进一步培养，并及时转接。
农杆菌介导的辣椒遗传转化体系优化及Chi和Glu基因转化植株的鉴定专业品质权威编制人：______________审核人：______________审批人：______________编制单位：____________编制时间：____________序言下载提示：该文档是本团队精心编制而成，期望大家下载或复制使用后，能够解决实际问题。
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《三倍体毛白杨遗传转化体系的建立及分子鉴定》一、引言三倍体毛白杨作为一种重要的林木资源，其遗传转化体系的建立对于林木遗传育种、基因功能研究以及林木生物技术发展具有重要意义。
本文旨在介绍三倍体毛白杨遗传转化体系的建立过程，并对其分子鉴定进行详细阐述。
二、材料与方法1. 材料（1）植物材料：三倍体毛白杨；（2）分子生物学试剂与仪器：各种限制性内切酶、连接酶、PCR试剂等，电击转化仪、PCR仪、凝胶成像系统等。
2. 方法（1）遗传转化体系的建立：包括选择适宜的外植体、建立农杆菌介导的遗传转化体系等；（2）分子鉴定：包括基因组DNA的提取、PCR扩增、酶切鉴定、测序等。
三、三倍体毛白杨遗传转化体系的建立1. 外植体的选择与处理选择生长健壮、无病虫害的三倍体毛白杨作为外植体。
将外植体进行消毒处理，去除表面杂质及微生物，为后续的遗传转化做好准备。
2. 农杆菌介导的遗传转化采用农杆菌介导的方法，将目的基因与载体连接后转入农杆菌中。
将处理好的外植体与农杆菌共培养，使目的基因转入三倍体毛白杨的基因组中。
3. 转化体的筛选与鉴定通过PCR扩增、酶切鉴定等方法，对转化体进行初步筛选。
将筛选得到的阳性转化体进行分子水平的鉴定，确认目的基因是否已成功转入三倍体毛白杨的基因组中。
四、分子鉴定1. 基因组DNA的提取采用适当的DNA提取方法，提取三倍体毛白杨的基因组DNA。
确保DNA的质量和纯度，为后续的分子鉴定提供可靠的样品。
2. PCR扩增与酶切鉴定以提取的基因组DNA为模板，进行PCR扩增。
通过酶切鉴定等方法，对PCR产物进行初步鉴定。
若PCR产物与预期的目的片段大小相符，则可初步确定目的基因已成功转入三倍体毛白杨的基因组中。
3. 测序与分析将PCR产物进行测序，将测序结果与已知的目的基因序列进行比对。
通过比对结果，可以进一步确认目的基因的插入位置、插入方向以及是否存在突变等情况。
同时，还可以对目的基因的表达情况进行初步分析。
中国生物工程杂志China Biotechnology, 2005, 25(9):94～98植物遗传转化新技术和新方法*陈英黄敏仁**王明庥（南京林业大学林木遗传和基因工程重点实验室南京210037）摘要目前通过遗传转化技术获得了许多植物的转基因植株，一些重要农作物转基因新品种已进入产业化阶段，展现出极好的应用前景。
但随着研究的不断深入，在如何提高遗传转化效率和转基因安全性等方面，一些新的技术和方法不断出现并得到应用，如胚状体再生系统、叶绿体转化系统、超声波辅助农杆菌介导法、位点特异重组MAT vector系统、正选择系统以及新的转基因分子检测方法，使遗传转化技术向高效、安全方向发展，新一代的转基因植物也将会更适应人们和生态环境的需求。
关键词植物基因工程遗传转化效率转基因安全性收稿日期：2005 04 28修回日期：2005 06 09*江苏省高技术研究项目（BG2003304）和校高学历人才基金项目** 通讯作者，电子信箱：mrhuang@随着植物遗传转化技术的不断改进，越来越多的植物获得了转基因植株，一些重要的农作物，如棉花、玉米、番茄等，通过转基因技术培育的优良新品种，已得到大面积推广，获得了可观的经济效益。
近年来，在进一步提高转基因效率，外源基因定点、定量、稳定地转移到植物基因组，外源基因在转基因植物及后代中的遗传和表达等方面进行了深入地研究。
而同时，基于公众对转基因植物的安全性产生的疑虑和争议，促使人们继续探索和发现新的更为安全和有效的转化体系，如叶绿体转化研究和无选择标记研究也取得了重要进展，引起人们的普遍关注。
本文就目前应用于植物遗传转化领域的新技术和新方法进行综述。
1新的遗传转化受体系统——胚状体再生系统成功的遗传转化首先依赖于良好的植物受体系统。
胚状体再生系统是最理想的基因转化受体系统：体细胞胚是由具有卵细胞特性的胚性细胞发育而来，接受外源DNA的能力强，是理想的基因转化感受态细胞；体胚发生多为单细胞起源，转基因植株嵌合体少；体胚具有两极性，在发育过程中可同时分化出芽和根，形成完整植株；体细胞胚个体间遗传背景一致，无性系变异小；体胚发生繁殖效率高、可通过生物反应器进行大规模生产。
杨树抗逆转录因子基因遗传转化与功能验证林木作为重要的可再生资源,对维持和保护生态环境具有重要作用,随着目前生态系统退化情况加剧情况的加剧,林木的产量和质量及森林生产力受到严重影响。
因此培育抗逆林木新品种,改良利用干旱、半干旱及盐碱荒地,推动土地资源的开发利用,改善环境资源,已经成为当前研究热点。
基因工程技术可以从基因水平上改良林木的目的性状,为林木遗传改良育种开辟新的途径。
本研究以杨树新品种凌丰2号杨（Populus×euramericana cl.?Lingfeng 2‘）为受体材料,采用农杆菌介导法首次进行三个抗逆转录因子基因——茉莉酸乙烯应答元件基因（JERF36）、锌指蛋白基因（ZxZF）、ABA响应元件结合蛋白基因（ckAREB）多组合遗传转化研究。
通过室内抗性生理测定,根系Na<sup>+</sup>、K<sup>+</sup>、H<sup>+</sup>离子流测定,定量抗逆相关基因表达,进行转基因杨树抗逆能力测定,获得抗性效果显著的转基因杨树。
本研究对多组合转录因子导入改良杨树抗性作用机制的探讨及转录因子基因在林木育种中的应用,培育高效林木基因工程新品种具有一定的理论指导意义。
论文主要研究结果如下:1.成功构建抗逆转录因子双基因载体和三基因植物表达载体。
首次将来源于强旱生灌木霸王（Zygophyllum xanthoxylum）的锌指蛋白基因（ZxZF）和柠条（Caragana Korshinskii）的ABA响应元件结合蛋白基因（ckAREB）及来源于草本植物番茄（Lycopersicon esculentum Mill.）的茉莉酸乙烯应答元件基因（JERF36）三个不同调控途径转录因子以多种组合方式构建到同一植物表达载体上,成功构建JERF36-ckAREB双基因植物表达载体（pBIJEAR）及ZxZF–ckAREB-JERF36三基因植物表达载体（pMDCZXARJE）,实现多抗逆调控基因相对稳定串联。
核农学报2023，37（8）：1516~1522Journal of Nuclear Agricultural Sciences发根农杆菌介导的闽楠遗传转化体系构建与优化吴梦洁1洪家都1李芳燕1周生财2林二培1程龙军1， *（1浙江农林大学林业与生物技术学院/亚热带森林培育国家重点实验室，浙江杭州311300；2丽水职业技术学院，浙江丽水323000）摘要：闽楠［Phoebe bournei（Hemsl.） Yang］为我国重要的珍贵树种。
为建立闽楠遗传转化体系，以闽楠幼苗为材料，利用pCAMBIA1300-GFP质粒转化的发根农杆菌介导植株转化。
在比较注射和菌液浸泡两种侵染方式侵染效率的基础上，进一步利用正交［L9（33）］试验从菌株种类、菌液侵染浓度和侵染植株苗龄三个方面优化了遗传转化体系。
另外，对不同光强影响闽楠毛状根诱导及转化率情况进行了分析。
结果表明，注射法的毛状根诱导率和遗传转化率分别为80.0%、66.7%；而菌液浸泡法的诱导率和遗传转化率分别为41.2%、35.3%。
正交试验中，影响闽楠毛状根诱导率和遗传转化率的主要因素为菌株种类。
最大诱导率和转化效率分别达到了87.5%、70.6%。
该体系的最优组合为：K599菌株在菌液浓度OD600=1.2条件下注射侵染三叶期的闽楠幼苗。
此外，较弱光强（50 µmol·m-2·s-1）的培养条件比较强光照（100 µmol·m-2·s-1）更有利于闽楠幼苗的生长和遗传转化。
本研究创建并优化了一套高效、稳定的闽楠遗传转化体系，成功获得了具有转基因毛状根的闽楠植株，为闽楠重要基因挖掘、新种质创建和遗传改良奠定了基础。
关键词：闽楠；遗传转化；发根农杆菌DOI：10.11869/j.issn.1000‑8551.2023.08.1516闽楠属于樟科（Lauraceae）楠属（Phoebe）植物，是我国重要的珍贵树种［1］。
《兴安落叶松UGPase基因在84K杨遗传改良中的应用》篇一一、引言遗传改良是林业发展的关键环节，能够提升树种的生产效率和适应各种生长环境。
随着生物科技的快速发展，越来越多的基因技术被应用到林业遗传改良中。
兴安落叶松（Larix gmelinii）作为一种重要的林木资源，其UGPase（尿苷二磷酸葡萄糖磷酸化酶）基因在植物代谢中扮演着重要角色。
本文将探讨兴安落叶松UGPase基因在84K杨遗传改良中的应用，以期为林业的可持续发展提供新的思路。
二、兴安落叶松UGPase基因简介UGPase是一种重要的酶，参与植物细胞中糖代谢的调节。
它通过催化尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）与磷酸形成尿苷二磷酸葡萄糖磷酸（UDPG-P）的转化，对植物的生长和发育产生重要影响。
兴安落叶松作为典型的北方针叶树种，其UGPase基因的表达特性对植物的抗逆性、光合作用等具有重要作用。
三、84K杨的遗传改良背景84K杨是我国自主选育的一种优良杨树品种，具有生长迅速、抗逆性强等特点。
然而，为了进一步提高其生长效率和适应性，需要对其进行遗传改良。
通过将其他优良树种的基因导入84K杨，可以增强其抗病性、抗虫性以及适应性等。
而兴安落叶松UGPase基因的引入，将为84K杨的遗传改良提供新的方向。
四、兴安落叶松UGPase基因在84K杨遗传改良中的应用1. 抗逆性增强：通过克隆兴安落叶松UGPase基因并转入84K杨，可以提高其在逆境条件下的生存能力。
例如，在干旱、低温等条件下，该基因的表达可以增强植物的抗逆性，从而提高其适应性。
2. 生长速度提升：UGPase基因的导入可以改善植物的光合作用效率，提高光合产物的积累和分配，从而促进植物的生长速度。
通过将兴安落叶松UGPase基因与84K杨的遗传体系相结合，可以进一步加快其生长速度，提高其生物量。
3. 优化代谢途径：通过调控UGPase基因的表达，可以影响植物细胞中糖代谢的途径和速率。
这有助于优化植物的营养分配和代谢过程，提高其整体生长效率和品质。
