锰过氧化物酶试剂盒使用说明
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北京华越洋生物提供QQ:1733351176氧化酶试剂,氧化酶试纸氧化酶试剂,氧化酶试纸使用参见随带包装随带纸质说明书氧化酶试剂,氧化酶试纸介绍:英文名称: Oxidase reagent产品用途:用于O157:H7菌氧化酶试验,以及其他病理类菌属检测鉴别。
氧化酶试剂,氧化酶试纸使用方法:取一条滤纸,沾取试验菌的菌落少许。
然后加一滴1%的四甲基对苯二胺试剂,仅使滤纸湿润,不可过湿,在10s内出现红色者为阳性,10—60s 呈现红色者为延迟反应,60s以上出现红色者,按阴性处理,铁可催化试剂,不能使用,可用白金丝或玻璃棒取菌。
保存:2-8℃避光保存氧化酶试剂,氧化酶试纸试剂:盐酸四甲基对苯二胺1g,水100ml(贮存于褐色瓶中,冰箱中保存2周) 氧化酶试剂,氧化酶试纸方法:(1) 取一条滤纸,沾取试验菌的菌落少许。
然后加一滴四甲基对苯二胺试剂,仅使滤纸湿润,不可过湿,在10s内出现红色者为阳性,10—60s呈现红色者为延迟反应,60s以上出现红色者,按阴性处理,铁可催化试剂,不能使用,可用白金丝或玻璃棒取菌。
(2) 可用1%四甲基对苯二胺液湿润滤纸后,再滴加等量的1%甲萘酚液(甲萘酚1g,酒精100ml),然后,涂抹菌苔,出现蓝色者为阳性反应,出现颜色的时间判定同方法1。
(3) 将新华1号滤纸用1%四甲基对苯二胺液浸湿,在室内风干,放在有橡皮塞的暗色瓶内,在冰箱中可存放数月,如存放过久,颜色过深,显色不明显者,不宜使用。
用法同前。
氧化酶试剂,氧化酶试纸用于奈瑟菌属的菌种鉴定,该属细菌均阳性。
此外,也用于假单胞菌属与肠杆菌科细菌的区别,前者阳性,而后者阴性。
莫拉菌属、产碱杆菌属等均为阳性。
异常结果:奈瑟菌属有脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9种致病菌,引起流行性脑脊髓膜炎氧化酶试剂,氧化酶试纸上呼吸道症状:鼻咽炎等全身感染症状:高热、出血点或瘀血点,脑膜炎症状:头痛、呕吐、颈项强直;引起淋病,引起新生儿淋病性眼结膜炎。
髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)适用范围:该产品用于体外定量测定人血清或血浆中髓过氧化物酶浓度。
1.1 产品规格1.2 组成成分1.2.1试剂组成:液体双试剂。
1.2.2校准品的组成五个水平的冻干校准品,在磷酸盐缓冲液(50mM)中添加髓过氧化物酶纯品。
定值范围:(50-100)ng/mL;(100-180) ng/mL;(200-500)ng/mL;(550-800)ng/mL;(800-1400)ng/mL。
1.2.3质控品的组成两个水平的冻干质控品,在牛血清(20g/L)中添加髓过氧化物酶纯品。
定值范围:(30-150)ng/mL;(500-1000)ng/mL。
2.1 外观液体双试剂:试剂1:无色至淡黄色澄清液体,试剂2:乳白色液体。
校准品:冻干品,复溶后为无色至淡黄色澄清液体。
质控品:冻干品,复溶后为无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度应在0.3-2.0之间。
2.4 分析灵敏度浓度为120ng/mL时,吸光度变化范围应大于0.01。
2.5 线性测试血清或血浆样本,试剂线性在(0,1000]ng/mL范围内,线性相关系数(r)应不小于0.990;在(0,200]ng/mL范围内绝对偏差不超过20ng/mL,在(200,1000]ng/mL范围内的相对偏差不超过±10%。
2.6 批内重复性试剂盒测试项目重复性CV≤10%。
2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应≤15%。
2.8 准确度:回收试验:回收率应在90%-110%之间。
2.9 质控品赋值有效性测定值在质控靶值范围内。
2.10 批内瓶间差校准品批内瓶间差瓶间重复性CV≤5%质控品批内瓶间差CV≤5%。
2.11校准品溯源性根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供髓过氧化物酶校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。
过氧化物酶(POD)试剂盒说明书一、测定原理:利用过氧化物酶(POD)催化过氧化氢反应的原理,通过测定420nm 处吸光度的变化得出其酶活性。
二、实际的组成和配置试剂一:液体60ml×4瓶,4℃保存6个月试剂二:粉剂×3瓶,4℃保存6个月试剂二应用液的配置:临用每瓶粉剂加入10ml 的双蒸水溶解,4℃避光保存试剂三:液体5ml×1瓶,4℃保存6个月试剂三应用液的配制:临用前用双蒸水15倍稀释,使得1cm 光径,双蒸水调零时A240保持在0.4左右,现用现配。
若A 值太高,则加双蒸水稀释,若A 值太低,则加入适量试剂三。
(一般在25倍左右稀释)试剂四:液体50ml×2瓶,4℃保存6个月。
三、操作步骤:1、前处理:植物组织匀浆的制备:准确称取组织重量,按照重量(g):体积(ml)=1:9的比列加入9倍体积的匀浆介质(推荐使用生理盐水或磷酸盐缓冲液:0.1 mol/L pH 7-7.4),冰水浴条件下制备成10%的组织匀浆液,3500r/min 离心10min ,取上清液进行测定。
混匀后,3500r/min 离心10min ,取上清于波长420nm 处,1cm 光径,双蒸水调零,测定各管吸光度值。
四、计算及举例1、定义:在37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化1ug 底物的酶量定义为一个酶活力单位。
2、植物组织中过氧化物酶(POD)活力计算公式:10)/()min 30()()()1(12-)/(⨯÷÷⨯⨯=ml mgprot ml ml cm OD OD mgprot U POD 匀浆蛋白浓度反应时间样本量反应液总体积比色光经值对照值测定活力 3.计算举例取新鲜桑叶,制备成10%匀浆,取100ul 匀浆上清,按照操作表进行操作,测得数据如下:对照OD 0.237;测定OD 0.665;同时测得10%桑叶匀浆蛋白浓度是1.80mgprot/ml 根据公式计算如下:mgprotU ml mgprot ml ml cm OD OD mgprot U POD / 26.42010001.80300.14.01120.237-0.6651000)/()min 30()()()1(12-)/(=⨯÷÷⨯⨯=⨯÷÷⨯⨯=匀浆蛋白浓度反应时间样本量反应液总体积比色光经值对照值测定活力。
过氧化值试纸使用方法
过氧化值试纸是一种用于测量水中氧化性物质浓度的试纸。
以下是过氧化值试纸的使用方法:
1. 准备样品:将待测样品收集到一个干净的容器中。
确保样品足够多以涵盖试纸完全。
2. 提取试纸:使用干燥的手指或工具将一张试纸从试纸包中取出。
注意避免触摸试纸感应区。
3. 浸泡试纸:将试纸的感应区完全浸入样品中。
在浸泡期间,可以轻轻搅动试纸以确保与样品充分接触。
4. 拿出试纸:根据试纸包上的建议时间,浸泡一段时间(通常为10-60秒)。
然后小心地取出试纸,并轻轻摇晃或轻轻拍打试纸以去除多余的样品。
5. 对比颜色:将试纸与试纸包上的颜色参照进行比较。
注意,目测颜色有时可能不准确,因此使用可靠的照明条件和视觉比较。
6. 测量结果:对照试纸颜色参照图,确定试纸颜色与某一特定数值相关联的氧化性物质浓度。
注意事项:
- 避免触摸试纸感应区,以防止污染或对试纸结果产生干扰。
- 严格按照试纸包上的浸泡时间进行操作,避免过长或过短时
间的浸泡。
- 遵循试纸包上的使用说明和建议,以确保正确操作和准确的结果。
植物过氧化物酶(POD)ELISA试剂盒使用说明书药品名称:通用名:过氧化物酶(POD)酶联免疫诊断试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定组织,细胞及其它相关样本中过氧化物酶(POD)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中过氧化物酶(POD)水平。
用纯化的过氧化物酶(POD)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入过氧化物酶(POD)抗原,再与HRP标记的过氧化物酶(POD)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的过氧化物酶(POD)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中过氧化物酶(POD)抗原浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为240 U/L,160 U/L ,80 U/L,40U/L,20 U/L)。
NADH氧化酶(NOX)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC0635规格:100T/48S产品内容:试剂一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体1mL×1瓶,-20℃保存。
试剂四:液体35mL×1瓶,4℃保存。
试剂五:液体5mL×1瓶,4℃保存。
试剂六:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入4.5mL双蒸水,用不完的试剂仍-20℃保存。
产品说明:NOX(EC1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将NADH氧化为NAD。
该酶不仅参与NAD的再生,而且与免疫反应密切相关。
NOX能够将NADH氧化为NAD,NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝(DCPIP)的还原相偶联,蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP,在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水操作步骤:一、样品测定的准备:1、组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:2、准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
3、将匀浆600g,4℃离心5min。
4、将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
5、将上清液转移至另一EP管中,用于线粒体中泄露NOX活性测定。
6、沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL试剂三,用于NOX活性测定。
7、NOX总酶活即为上清中NOX活性与沉淀中NOX活性之和。
二、测定步骤和加样表:1、可见分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至600nm,蒸馏水调零。
2、试剂四37℃保温放置。
试剂名称(µL)测定管对照管试剂四175175试剂五2525样本1010蒸馏水40试剂六40-将上述试剂按顺序在微量玻璃比色皿/96孔板中操作,加入试剂六后立即混匀,同时开始计时,在600nm 波长下记录20秒时的初始吸光度A1,迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃水浴中,准确反应1分钟。
髓过氧化物酶测定试剂盒(酶法)适用范围:用于体外定量测定人血清中髓过氧化物酶的活性。
1.1规格试剂1: 1×24mL,试剂2: 1×12mL,试剂3: 1×9mL;试剂1: 2×24mL,试剂2: 2×12mL,试剂3: 2×9mL。
1.2主要组成成分试剂1主要组分:试剂2主要组分:试剂3主要组分:2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或淡黄色透明溶液;试剂3:无色或淡黄色透明溶液。
外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在505nm处测定试剂空白吸光度,应≤1.2;2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.3。
2.4 分析灵敏度测试150 ng/mL的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0055。
2.5 准确度在样品中加入一定体积的纯品,计算回收率,应介于90%-110%之间。
2.6 重复性批内变异系数(CV)应不超过10%。
2.7 线性2.7.1在[50,1300] ng/mL区间内,线性相关系数r应不低于0.990;2.7.2 [50,156 )ng/mL L区间内绝对偏差不超过±18.7 ng/mL;[156,1300] ng/mL 区间内相对偏差不超过±12%。
2.8 批间差对同一份样品进行重复测定,相对极差≤12%。
2.9 稳定性取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。
货号: QS3110 规格:50管/24样锰过氧化物酶(Manganese peroxidase,Mnp)试剂盒说明书可见分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:锰过氧化物酶(EC1.11.1.13)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,主要存在于担子菌中,属于木质素降解酶系,能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物,叠氮化合物、DTT,多环芳烃等。
测定原理:锰过氧化物酶在Mn2+存在的条件下,将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚,在465nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制:试剂一:液体75mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体5mL×1瓶,4℃保存。
酶液提取:1.组织:按照质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL试剂一)加入试剂一,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。
2.细胞:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。
3.培养液或其它液体:直接检测。
测定操作:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至465nm,蒸馏水调零。
2、测定前将试剂一、二、三、四在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)放置10min以上。
465nm下30s时的吸光值A1和2min30s后的吸光值A2。
计算ΔA=A2-A1。
注意:若一次性测定样本较多,可将试剂一、二、三、四按比例配成混合液,在37℃(哺乳第1页,共2页动物)或25℃(其它物种)放置10min以上,测定时加入100µL样本和900µL混合液测定。
锰过氧化物酶试剂盒使用说明
分光光度法货号:BC1620
规格:50管/24样
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
产品内容:
试剂一:液体75mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体5mL×1瓶,4℃保存。
产品说明:
锰过氧化物酶(EC1.11.1.13)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,主要存在于担子菌中,属于木质素降解酶系,能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物,叠氮化合物、DTT,多环芳烃等。
锰过氧化物酶在Mn2+存在的条件下,将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚,在465nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
操作步骤:
一、酶液提取
1.组织:按照质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL
试剂一)加入试剂一,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。
2.细胞:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万
细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时
间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。
3.培养液或其它液体:直接检测。
二、测定操作
对照管测定管
试剂一(μL)600500
试剂二(μL)100
试剂三(μL)200200
样品(μL)100100
试剂四(μL)100100
充分混匀,于37℃反应10min,于1mL玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定465nm处吸光值,记为A对照管和A测定管,△A=A测定管-A对照管。
三、酶活计算公式
1.按照蛋白浓度计算
酶活性定义:每毫克蛋白每分钟氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
MnP活性(nmol/min/mg prot)=△A÷(ε×d)×V反总÷(V样×Cpr)÷T=83×△A÷Cpr
2.按照样本质量计算
酶活性定义:每克样品每分钟氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
MnP活性(nmol/min/g)=△A÷(ε×d)×V反总÷(V样×W÷V样总)÷T=83×△A÷W
3.按照细胞数量计算
酶活性定义:每104个细胞每分钟氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
MnP活性(nmol/min/104cell)=△A÷(ε×d)×V反总÷(V样×细胞数量÷V样总)÷T
=83×△A÷细胞数量
4.按照液体体积计算
酶活性定义:每升培养液每分钟氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
MnP活性(nmol/min/L)=△A÷(ε×d)×V反总÷V样÷T=8.3×104×△A
ε:愈创木酚摩尔消光系数:12100L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,1mL;V样:反应中样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,10min。