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抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体SZ22单链抗体的构建、表达及功能研究戴克胜① 祝怀平 阮长耿① (苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所,苏州215006) 中国图书分类号 R392111 文献标识码 A 文章编号 10002484X(2003)0420243206[摘 要] 目的:降低鼠源性抗体的免疫原性及分子量,为其进一步研究、应用奠定基础。
方法:应用RT2PCR技术,克隆SZ22重链、轻链可变基因。
应用基因重组技术构建SZ22单链抗体表达载体pET2222scFv,导入大肠杆菌BL21(DE3)Plys,诱导表达。
流式细胞术、E LIS A、Western blot检测SZ22scFv与血小板结合能力,瑞斯托霉素、凝血酶和ADP诱导血小板聚集试验对表达产物功能进行研究。
结果:克隆基因序列符合小鼠轻、重链可变区基因特征;pET2222scFv表达质粒拼接正确;表达产物以包涵体形式为主,表达量占菌体总蛋白的25%;纯化、复性后证明表达产物具有与血小板结合的活性,并可抑制瑞斯托霉素、凝血酶诱导的血小板聚集。
结论:成功表达了SZ22单链抗体,该小分子抗体具有与血小板结合的活性,并可抑制瑞斯托霉素、凝血酶诱导的血小板聚集。
[关键词] 单链抗体;单克隆抗体;血小板P roduction and expression o f a single ch ain antibody against platelet in E.coliDAI K e2Sheng,ZHU Huai2Ping,RUAN Chang2G eng.The Fir st Affiliated Hospital o f Suzhou Univer sity,Jiangsu Institute o f Hematology,Suzhou215006,China[Abstract] Objective:T o express the recombinant single chain Fv(scFv)in E.coli and reduce immunogenicity and m olecular weight of a m onoclonal antibody specific for human platelet.Methods:The variable regions of the heavy and light chains of platelet2specific antibody SZ22 were amplified by reverse transcription and polymerase chain reaction.VH and V L gene segments were cloned into pUC2T m and joined together with a(gly4ser)3linker.The resulting scFv was expressed in PET expression system.The expressed recombinant protein was characterized by its size on S DS2PAGE,by Western blot,by flow cytometry and its functions.R esults:The VH and V L genes were hom olog ous with the published gene sequences of m ouse antibody variable region.The recombinant scFv was expressed m ostly in the form of inclusion bodies,and the yield was up to25%of the total cell proteins.Functional studies showed that SZ22scFv could bind to platelet and could suppress platelet aggregation in2 duced by ristocatin and thrombin.Conclusion:A recombinant SZ22scFv specific against platelet was developed and characterized.[K ey w ords] M onoclonal antibody;S ingle chain Fv(scFv);Platelet 血栓形成可导致不稳定性心绞痛、心肌梗死、中风等,是一类危害人类健康的严重疾病。
目前承担的课题1. * 临床医学——江苏省高校优势学科II期建设项目经费：4000万元2014-2017项目负责人：阮长耿2. * 利用体内瞬时影像学技术研究血小板负调控信号对血管损伤过程中血小板异质性活化的影响（91439112）——国家自然科学基金重大研究计划（培育）经费：90万元2015-2017项目负责人：朱力3.* DNA解旋酶BRIP1在慢性粒单核细胞白血病及急性髓系白血病发生发展和预后中的作用研究（81470296）——国家自然科学基金面上项目经费：75万元2015-2017项目负责人：薛胜利4. * Tim-3/gal-9信号通路介导Th17/Treg细胞在造血干细胞移植后aGVHD中的调控作用研究（81470346）——国家自然科学基金面上项目经费：70万元2015-2017项目负责人：吴德沛5．* 荧光三维共培养研究整合素αvβ3受体拮抗剂对非小细胞肺癌辐射敏感性的影响及机制（81472191）——国家自然科学基金面上项目经费：80万元2015-2017项目负责人：季顺东6．* 肠道粘膜屏障在溃疡性结肠炎发病机制方面的研究（81470825）——国家自然科学基金面上项目经费：75万元2015-2017项目负责人：夏利军7．* zkscan3基因新功能的解析（31471283 ）——国家自然科学基金面上项目经费：85万元2015-2018项目负责人：杨林8．* 肿瘤细胞中坏死基因Rip3的表达调控机制（31471303 ）——国家自然科学基金面上项目经费：90万元2015-2018项目负责人：何苏丹9．* miR-224、miR-452在急性早幼粒细胞白血病中的功能和机制研究（81400112）——国家自然科学基金青年项目经费：23万元2015-2017项目负责人：姚红10．* 靶向GAS2-Calpain轴抑制CML干细胞的研究（81400113）——国家自然科学基金青年项目经费：24万元2015-2017项目负责人：周海侠11．* 伴有STAT5B-RARA融合基因的急性早幼粒细胞白血病患者的耐药机制研究（81400114）——国家自然科学基金青年项目经费：23万元2015-2017项目负责人：姚利12．* MiRNAs靶向Smoothened逆转弥漫大B细胞淋巴瘤化疗耐受的研究（81400155）——国家自然科学基金青年项目经费：23万元2015-2017项目负责人：曲昌菊13．* 非编码RNA激活子ncRNA-a7转录调控PRDX-6对皮肤细胞放射敏感性的影响及机制研究（31400720 ）——国家自然科学基金青年项目经费：23万元2015-2017项目负责人：王文洁14.* 母-胎界面交互对话异常致妊娠相关重大疾病的分子机制（2015CB943300）——国家重点基础研究发展计划经费：2015-2019团队成员：董宁征15.* 优化和规范造血干细胞移植中的分子诊断技术体系并推广应用（BL2014038）——江苏省临床医学科技专项（诊疗技术攻关）经费：50万元2014-2016项目负责人：何军16．* 融合基因DEK-NUP214的致白血病机制研究（BK20141201）——江苏省自然科学基金面上项目经费：10万元2014-2016项目负责人：文丽君17．* miR-130a参与核心结合因子急性髓系白血病致病的机制研究（BK20141202）——江苏省自然科学基金面上项目经费：10万元2014-2016项目负责人：戴海萍18．* 荧光三维共培养研究整合素αvβ3拮抗剂对非小细胞肺癌放射治疗的影响及机制（BK20141203）——江苏省自然科学基金面上项目经费：10万元2014-2016项目负责人：季顺东19．* 微小RNA靶向Smoothened逆转弥漫大B细胞淋巴瘤化疗耐受的研究（BK20140374）——江苏省自然科学基金青年项目经费：20万元2014-2016项目负责人：曲昌菊20．* 蛋白激酶A对血小板凋亡的调控作用及其机制研究（BK20140375）——江苏省自然科学基金青年项目经费：20万元2014-2016项目负责人：赵丽丽21．* KIR 2DS4基因及其变异体KIR1D对造血干细胞移植后巨细胞病毒激活的调控作用及其临床意义（H201416）——江苏省卫生厅面上项目经费：4万元2014-2016项目负责人：吴小津22．* 含地西他滨预处理方案的异基因造血干细胞移植治疗高危急性髓细胞性白血病的临床和基础研究（SYS201457）——苏州市应用基础研究计划项目经费：2万元2014-2016项目负责人：唐晓文23．* 重组人凝血因子的研制及临床前试验（2013ZX09102033）——苏州市政策性资助项目经费：42.8万元2014-2016 项目负责人：吴庆宇24．* 蛋白激酶A对血小板凋亡的调控作用及其机制研究（SYSD2014077）——苏州市应用基础研究计划项目（指导性）2014-2016 项目负责人：赵丽丽25．重组人凝血因子的研制的临床前试验（2013ZX09102033）——国家科技重大专项（重大新药创制）经费：558万元2013-2016 项目负责人：吴庆宇、阮长耿26．新型血小板受体CLEC-2维持脑血管完整性的机制研究（81370617）——国家自然基金面上项目经费：70万元2014-2016 项目负责人：傅建新27．白血病新融合基因PAX5-UBE2D4的致病机制研究（81370626）——国家自然基金面上项目经费：70万元2014-2016 项目负责人：仇惠英28．妊娠期子宫Corin表达调控机制及其在子痫前期发病中的作用（81370718）——国家自然基金面上项目经费：70万元2014-2016 项目负责人：董宁征29．GAS2调控慢性粒细胞白血病干细胞生长的研究（31371392）——国家自然基金面上项目经费：75万元2014-2016 项目负责人：赵昀30．MiR-146a治疗心肌梗死的机制及靶向投递的研究（81370216）——国家自然基金面上项目经费：75万元2014-2016 项目负责人：程柯31．轴突导向分子Sema4D及其可溶性片段参与动脉粥样硬化形成的机制研究（81370373）——国家自然基金面上项目经费：75万元2014-2016 项目负责人：朱力32．吡非尼酮对肿瘤免疫微环境的作用机制研究（81372245）国家自然基金面上项目经费：62万元2014-2016 项目负责人：黄玉辉33．肿瘤细胞主导的肿瘤血管正常化和消除研究（81372376）——国家自然基金面上项目经费：70万元2014-2016 项目负责人：周泉生34．多发性骨髓瘤细胞中大MAF家族蛋白泛素化酶的蛋白组学分析及其病理学意义研究（81320108023）——国家自然基金国际(地区)合作与交流项目经费：280万元2014-2016 项目负责人：毛新良35．新融合基因NUP98-HOXD8的致白血病机制研究（81300424）——国家自然基金青年科学基金项目经费：23万元2014-2016 项目负责人：王琴荣36．T细胞IL-7信号途径在Allo-HSCT后淋巴细胞增殖性疾病发病中作用机制研究(81300444) ——国家自然基金青年科学基金项目经费：23万元2014-2016 项目负责人：陈广华37．TLR4及TLR9信号通路活化促进多发性骨髓瘤细胞生长的机制研究(81302046) ——国家自然基金青年科学基金项目经费：23万元2014-2016 项目负责人：徐杨38．活化型高分子激肽原抑制内皮祖细胞活性在关节炎动脉粥样硬化发展中的作用(81301534) ——国家自然基金青年科学基金项目经费：24万元2014-2016 项目负责人：阳艾珍39．Matriptase表达上调在慢性淋巴细胞白血病中的作用机制及治疗靶点价值研究(81301844) ——国家自然基金青年科学基金项目经费：23万元2014-2016 项目负责人：刘萌40．心脏酶Corin在高血压性疾病中的机理和应用研究（213016A）——教育部科学技术研究项目（科学技术类）经费：50万元2014-2016 项目负责人：董宁征41．血栓形成过程中VWF的分子调控及其信号传递机制研究（BK20131167）——江苏省自然科学基金面上项目经费：10万元2013-2016 项目负责人：韩悦42．急性红白血病的分子遗传学特征及发病机制研究(BK20131168) (BK20131168) ——江苏省自然科学基金面上项目经费：10万元2013-2016 项目负责人：孙爱宁43．T细胞IL-7信号通路在Allo-HSCT后淋巴细胞增殖性疾病发病中作用机制研究（BK20130273）——江苏省自然科学基金面上项目经费：20万元2013-2017 项目负责人：陈广华44．支架、关节、人造血管等高端植介入重大产品研发2012BAI18B00——国家863计划子课题经费：60万元2012-2015 项目负责人：阮长耿45．新一代高新能五分类血细胞分析系统的细胞形态的标准制定和性能验证2011AA02A105 ——国家863计划子课题经费：10万元2012-2015 项目负责人：阮长耿46．胁迫环境中线粒体代谢与细胞凋亡调控机制2013CB910102——国家973计划子课题经费：339万元2013-2017 项目负责人：何苏丹47. 血小板在血栓形成起始阶段的调控机制及其信号转导机制研究 2012CB526609——国家973计划前期研究专项子课题经费：60万元2013-2015项目负责人：戴克胜48．重大疾病发生发展及干预策略研究2012CB526609——国家973计划前期研究专项经费：20万元2013-2016团队成员：武艺49．细胞生物学（病毒介导的程序性细胞坏死的调控机制）31222036——国家自然科学基金优秀青年科学基金项目经费：100万元2013-2015项目负责人：何苏丹50．混合系列急性白血病分子遗传学特征及MEF2C基因致白血病机制研究81270617 ——国家自然基金面上项目经费：70万元2013-2016项目负责人：吴德沛51．血管性血友病因子裂解酶ADAMTS13在血栓形成中的调控机制研究81270591 ——国家自然基金面上项目经费：70万元2013-2016项目负责人：韩悦52．树突状细胞在干扰素联合供体淋巴细胞输注治疗移植后白血病复发中增强抗白血病效应的机制研究81270645——国家自然基金面上项目经费：70万元2013-2016项目负责人：唐晓文53．抗供者特异性抗体(DSA)对造血干细胞移植预后的影响及其机制研究81273266 ——国家自然基金面上项目经费：70万元2013-2016项目负责人：何军54．人源化嵌合抗体hSZ-123的抗血栓机制研究81270593——国家自然基金面上项目经费：70万元2013-2016项目负责人：赵益明55．原始淋巴管网络重塑形成收集淋巴管的分子机制研究31271530——国家自然科学基金面上项目经费：75万元2013-2016项目负责人：何玉龙56．喹啉类药物对多发性骨髓瘤的实验性治疗作用及其抑制组蛋白去乙酰化酶的分子机理81272632——国家自然科学基金面上项目经费：75万元2013-2016项目负责人：毛新良57．造血干细胞自噬机制在预防血液肿瘤萌发中的作用81272336——国家自然科学基金面上项目经费：80万元2013-2016项目负责人：王建荣58．二硫键异构酶PDI和Erp57调控动脉血栓形成的特异性生理作用与机制研究81270592 ——国家自然科学基金面上项目经费：80万元2013-2016项目负责人：武艺59．多发性骨髓瘤化疗药物敏感基因的鉴定与作用机理研究81272476——国家自然科学基金主任基金项目经费：16万元2013-2015项目负责人：杨林60． ULK1复合体在哺乳动物细胞自噬中的调控与功能31271526——国家自然科学基金面上项目经费：85万元2013-2016项目负责人：姜学军61． PHF6基因突变在急性T淋巴细胞白血病发病中的作用及机制研究81200370——国家自然基金青年项目经费：24万元2013-2015项目负责人：王谦62．急性髓系白血病细胞中SATB1介导的染色质成环调控Mcl-1基因转录的机制研究81200369 ——国家自然基金青年项目经费：23万元2013-2015项目负责人：龚斐然63．Calpain调节血小板GPIbα膜外功能区酶切的机制研究81200343——国家自然基金青年项目经费：23万元2013-2015项目负责人：闫荣64．Gas6受体调控糖蛋白VI介导血小板活化的信号与分子机制研究31201058——国家自然科学基金青年科学基金项目经费：23万元2013-2015项目负责人：周俊松65．造血干细胞自噬的肿瘤病理学意义31201073——国家自然科学基金青年科学基金项目经费：24万元2013-2015项目负责人：张素萍66．HMGB1调节的自噬对多发性骨髓瘤化疗耐药性的影响及机制研究81201861——国家自然科学基金青年科学基金项目经费：24万元2013-2015项目负责人：张幸鼎67. 江苏省血液学协同创新中心——江苏省教育厅经费：4000万元2013-2016项目负责人：阮长耿68. 江苏省血液病临床医学研究中心BL2012005——江苏省生命健康科技专项经费：1500万元2012-2015项目负责人：阮长耿、吴德沛69.支架、关节、人造血管等高端植介入重大产品研发2012BAI18B00——国家863计划子课题经费：60万元2012-2015项目负责人：阮长耿70.干扰素诱导的树突状细胞（IFN-DC）增强新型供体淋巴细胞输注抗白血病效应的机制研究BK2012627——江苏省自然科学基金项目经费：10万元2012-2015项目负责人：唐晓文71.micoRNA-181c对糖尿病视网膜病变炎症反应的调控机制研究BK2012626——江苏省自然科学基金项目经费：10万元2012-2015 项目负责人：白霞72.PAX5新融合基因的克隆及致白血病机制研究BK2012006——江苏省自然科学基金杰出青年项目经费：100万元2012-2015 项目负责人：陈苏宁73.二硫键异构酶PDI和Erp57调控血栓形成的特异性生理作用与机制研究20123201110014——高校博士点基金资助课题（博导类）经费：12万元2013-2015 项目负责人：武艺74.血小板GPIb-IX结合VWF功能的调控及其信号转导机制研究81130008——国家自然科学基金重点项目经费：220万元2012-2016 项目负责人：戴克胜75.急性髓系白血病中长链非编码RNA LLEST功能的研究81170468——国家自然科学基金面上项目经费：60万元2012-2015 项目负责人：祁小飞76.新型白介素15亚型蛋白在自身免疫性疾病中的作用及机制研究81102171/H1008——国家自然科学基金青年项目经费：22万元2012-2015 项目负责人：胡博77.甲基化修饰介导的sFRP5表达沉默对骨髓增生异常综合征细胞生物表型影响及机制研究81100342——国家自然科学基金青年项目经费：22万元2012-2015 项目负责人：王虹78.蛋白水解酶系统作为癌症标记和癌症治疗的靶标31161130356——国家自然科学基金重大国际合作项目经费：250万元2012-2015 团队成员：吴庆宇79.白血病放化疗后造血肝细胞因子的治疗机制及其成药性研究XDA01040200——国家战略性先导专题经费：500万元2011-2016 团队成员：周泉生80.轴突导向分子Sema4D的基因敲出对心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究81170132——国家自然科学基金面上项目经费：65万元2012-2015 项目负责人：朱力81.心纳素转化酶corin的激活机制研究8117024——国家自然科学基金面上项目经费：60万元2012-2015 项目负责人：吴庆宇82.TWIST2的抑癌基因功能研究31170755——国家自然科学基金面上项目经费：60万元2012-2015 项目负责人：赵昀83.激酶RIP3调控Toll like receptor（TLR3）介导的细胞坏死的机制研究31171330——国家自然科学基金面上项目经费：65万元2012-2015 项目负责人：何苏丹84.江苏省血液病临床医学中心SZ201102——江苏省卫生厅经费：1500万元2011-2015项目负责人：阮长耿、吴德沛注：加*为2014年新增的项目。
附件1手术操作编码ICD-9-CM-3（2017维护版）操作说明手术操作分类是医院病案信息加工、检索、汇总、统计的主要工具之一。
在医疗、教学、科研和运行管理等方面，手术操作分类编码同疾病分类编码具有同等重要的作用。
为深化医疗卫生体制改革，推行按疾病诊断相关分组(Diagnosis Related Groups，DRGs)收付费，落实有关编码和术语等基础性工作，我委组织制定了《手术操作编码（ICD-9-CM-3）2017维护版》（征求意见稿）。
现将有关事项说明如下：一、ICD-9-CM-3维护版的制定我国自上世纪90年代起引进美国版ICD-9-CM-3在临床使用，并且持续更新，目前已经翻译到2011版。
由于缺乏有效的维护机制，现行手术操作编码不能满足医学技术发展与临床实际需要，因此各省（区、市）、各医院在国家版4位码后根据自身需求增加了位数，进行了扩展。
然而各医院扩展规则不统一、随意性较大，造成手术操作编码全国不统一，影响住院病案首页数据质量，导致DRGs分组器不能识别或误读而影响分组准确性。
本着贴近临床、客观、准确反映临床手术操作实际情况的原则，以北京、上海、广东三省市目前使用的ICD-9-CM-3为蓝本，参考其它省市或医院使用的ICD-9-CM-3字典库，经专家组匹配、研究讨论形成了国家ICD-9-CM-3维护版（以下简称“维护版”）。
在国家ICD-9-CM-3维护版的制定过程中，专家们全面梳理了北上广三个版本的字典库，逐行比对条目编码、手术操作名称、备注，并依以下规则进行整合：1.三个版本编码与手术操作名称相同的，全部纳入维护版。
2.三个版本编码相同，手术操作名称不同的，同一亚目（前4位码）各地增加的不同细目，逐项讨论，专家达成共识的条目纳入维护版。
3.手术操作名称相同，编码不同的，则将类目不准确的编码予以剔除，在使用中增加或维护。
4.对于一些可能产生歧义、未达成专家共识的条目，予以删除，在使用中增加或维护。
江苏省医院手术分级管理规范(暂行)（苏卫医〔2002〕51号文下发）为了确保手术安全和手术质量，预防医疗事故发生，加强各级医院和医师的手术管理，根据《医疗机构管理条例》、《中华人民共和国执业医师法》和《医疗事故处理条例》，结合医院分级管理和基本现代化医院的要求，参照有关资料，制定本规范。
一、手术分类主要根据手术过程的复杂性和对手术技术的要求，把手术分为：(一)甲类手术：手术过程复杂，手术技术难度大的各种手术。
(二)乙类手术：手术过程较复杂，手术技术有一定难度的各种重大手术。
(三)丙类手术：手术过程不复杂，手术技术难度不大的各种中等手术。
(四)丁类手术：手术过程简单，手术技术难度低的普通常见小手术。
注：微创(腔内)手术根据其技术的复杂性分别列入各分类手术中。
二、手术医师分级根据其取得的卫生技术资格及其相应受聘职务，规定手术医师的分级。
所有手术医师均应依法取得执业医师资格。
(一)住院医师一、普通外科甲类手术：(1)复杂胰腺癌根治术(2)肝脏肿瘤左、右半肝切除术(3)胆道癌根治术，复杂的胆道再次手术(4)扩大全胰腺切除术(5)胰管空肠内引流术，胰管切开取石术(6)颈动脉及体动脉瘤切除术(7)腹主动脉瘤切除、大血管移植术(8)甲状腺癌颈淋巴结廓清术、甲状旁腺肿瘤切除术(9)腹腔内肿瘤联合三种以上脏器切除术(10)新开展的各种手术(11)复杂的腹部腹腔镜及内镜的诊疗手术乙类手术：(1)甲类手术以外的肝、胆、脾的各种手术(2)胃部及十二指肠手术(3)肝、脾损伤的处理(4)直肠切除术、回盲部肠切除术(5)结肠癌根治术(6)甲类手术以外甲状旁腺各种手术(7)改良根治性乳癌切除术(8)门静脉高压的各类分流术及断流术(9)胸、腹联合损伤的救治手术(10)复杂环状痔切除术(11)复杂高位肛瘘切除术丙类手术：(1)肝脓肿切开引流术(2)小肠切除术(3)腹部损伤剖腹探查术(4)胃肠造瘘术、吻合术(5)胃肠穿孔修补术(6)大隐静脉结扎转流术及剔除术(7)单纯胆囊切除术(8)单纯乳房肿块切除术(9)PTC及PTCD技术丁类手术：(1)阑尾切除术(2)疝修补术(3)体表肿瘤、异物摘除术(4)痔核切除、肛旁脓肿切开引流(5)体表脓肿切开引流术(6)清创缝合术(7)静脉切开术二、心胸外科(1)法四、法三矫治术(2)伴肺动脉高压的房室缺损修补术(3)主动脉缩窄胸腹主动脉瘤血管再造术(4)心脏多瓣膜置换及成形术(5)冠状动脉架桥术(6)复杂的心内畸形矫治术(7)主动脉瘤切除术(8)复杂纵隔肿瘤切除术(9)复杂食管癌切除术(10)右心耳下腔静旁路移植术(11)气管支气管成形术(包括隆凸切除术)(12)心脏室壁瘤切除术(13)颈动脉内膜剥脱术(14)腹主动脉瘤手术(15)肺减容术(16)全胸膜全肺切除术(17)新开展的其它各种手术乙类手术：(1)心包部分切除术(2)房缺室缺修补术(3)心脏单瓣膜置换术、扩张分离术及成形术(4)动脉导管未闭手术(5)胸腔镜辅助胸内手术(6)全肺及肺叶切除术(7)胸膜切除术(8)纵隔肿瘤切除术(9)支气管成形术(袖状肺切除术)(10)胸廓成形术(11)人造血管移植术(12)食管癌根治术(13)颈部血管瘤切除术(14)除甲类以外胸腔探查术(15)心包开窗引流术(16)膈肌破裂修补术(17)肺破裂修补术(18)心脏破裂修补术(1)胸壁软组织良性瘤切除术(2)血气胸开胸控查术(3)脓胸开放引流术(4)胸壁结核病灶清除术(5)贲门括约肌切开成形术(6)贲门、食管下段肿瘤切除术(7)肺大泡切除术(8)肺楔形切除术(9)食管憩室切除术(10)食管平滑肌瘤切除术丁类手术：(1)胸壁伤口清创缝合术(2)胸腔穿刺术(3)胸腔闭式引流术三、神经外科甲类手术：(1)经幕后下入路各种肿瘤切除术(2)复杂性动脉瘤夹闭术(3)复杂性动静脉畸形切除术(4)自体(异体)肾上腺髓质或黑质脑内移植术(5)高颈段或脑干肿瘤切除术(6)难度较大的深部脊髓病变手术(7)复杂性的颅底外科手术(8)立体定向手术(9)复杂神经外科介入手术(10)新开展的各种手术乙类手术：(1)除甲类以外各种颅内肿瘤、颅内动脉瘤、血管畸形和介入手术(2)椎管内外各种手术(包括普通病变脊髓手术)(3)各种神经吻合术(4)颈动脉内膜剥脱术(5)颅内外血管吻合术(6)经蝶垂体手术(7)各类颅骨手术(8)各类经颅骨钻孔减压、引流、抽吸手术(9)全脑血管造影术丙类手术：(1)各种复杂头皮外伤清创术(2)各种头皮肿瘤切除术(3)各种外生骨疣切除术(4)经颈动脉穿刺化疗术(5)开放性颅脑外伤清创术(6)颅骨凹陷骨折复位术(7)颅骨成形术(8)各类颅内血肿清除术(9)椎板切除减压术(10)周围神经或神经节封闭术(11)脑脓肿手术(12)脑室穿刺引流术(13)脑室—腹镜引流术(14)大脑半球肿瘤手术丁类手术：(1)各种轻度头皮外伤清创术(2)头皮及颅骨肿瘤切除术四、泌尿外科甲类手术：(1)各种复杂巨大的肾上腺手术(2)涉及肾主要血管手术(3)同种异体肾移植手术(4)腹膜后淋巴清扫术(5)全膀胱切除+肠道尿流分流手术(6)复杂尿路修补术(7)肾癌根治术(8)前列腺癌根治术(9)经膀胱镜复杂性手术(10)新开展的各类手术乙类手术：(1)较复杂的肾脏手术如：根治性肾除术、肾部分切除术、复杂性肾结石手术(2)肠管代输尿管手术(3)膀胱扩大手术(4)泌尿系造瘘的修补、成形手术(5)前列腺摘除术(6)经腹腔镜手术(7)经皮肾镜手术(8)经尿道前列腺电切除术(TORP)(9)肾上腺切除术(10)输精管吻合术(11)体外震波碎石疗法(12)阴囊阴茎手术丙类手术：(1)单纯肾切除肾造瘘术(2)输尿管吻合术(3)经直肠前列腺活检术(4)精索静脉高位结扎(5)膀胱部分切除、修补术(6)交通性鞘膜积液高位结扎术(7)睾丸下降固定术(8)输尿管镜检查术丁类手术：(1)单纯包皮环切及外伤缝合(2)膀胱穿刺造瘘术(3)睾丸鞘膜翻转术(4)睾丸一付睾切除术(5)尿道扩张术五、骨科甲类手术：(1)全关节人工关节置换术及返修术(膝、髋、肩、踝)(2)带血管指趾再造术(3)特殊部位骨关节巨大肿瘤切除术(4)骶骨肿瘤切除术(5)臂丛神经损伤修复术(6)脊椎前路手术(颈、胸、腰)(7)颈肋切除术(8)脊柱侧弯矫形术(9)疑难复杂手术，科研手术(10)驼背矫正术(11)上颈椎后路手术(12)新开展的各种手术乙类手术：(1)脊柱侧弯矫形术(2)先天性髋脱位手术(3)半骨盆切除术(4)骨盆骨折手术复位内固定(5)髋臼骨折复位内固定术(6)人工全髋关节置换术(7)骨关节肿瘤切除术(8)断肢(指、趾)再植(9)脊柱后路椎板减压及椎弓根内固定的应用(10)腰椎间盘脱出髓核摘除术(包括常规手术及椎间盘镜)(11)脊柱结核病灶清除术(12)胸椎管狭窄减压术(13)B超引导下的穿刺活检(14)四肢骨折交锁髓内针内固定术(15)周围神经损伤(缺损)的修复术(16)关节镜手术丙类手术：(1)肌腱移位术、跟腱延长术(2)腱鞘囊肿切除术(3)拇指外翻矫形术(4)四肢闭合性骨折复位固定术(5)四肢骨折切开复位钢板内固定术(6)低毒性骨脓肿病灶清除术(7)截肢(指、趾)术(8)关节融合术(9)三翼钉固定、拔钉术(10)骨疣切除术(11)良性骨肿瘤刮除植骨术(12)月国窝囊肿切除术丁类手术：(1)关节脱位手法复位(2)关节腔切开引流术(3)骨牵引术(4)常见骨折手法复位术(5)植皮术(6)筋膜间隙综合症切开减压术(7)截指(趾)术江苏省医院手术分级管理规范(暂行)（苏卫医〔2002〕51号文下发）为了确保手术安全和手术质量，预防医疗事故发生，加强各级医院和医师的手术管理，根据《医疗机构管理条例》、《中华人民共和国执业医师法》和《医疗事故处理条例》，结合医院分级管理和基本现代化医院的要求，参照有关资料，制定本规范。
病案信息技术(医学高级)-疾病与手术分类1、在ICD-10中损伤编码，如果不想用编码去标明开放性时，使用细目可以表示（）。
A.0闭合性，1开放性B.0开放性，1闭合性C.8闭合性，9开放性D.8开放性，9闭合性E.以上均不是2、“垂体腺瘤切除术，经额针刺”在ICD-9-CM-3中构成手术名称的主要成分是（）。
A.部位＋术式B.部位＋入路＋疾病性质C.部位＋术式＋疾病性质D.术式＋入路＋疾病性质E.部位＋术式＋入路＋疾病性质3、在ICD-10中，凡未提及病因的二尖瓣和三尖瓣狭窄，假定为（）。
A.风湿性B.非风湿性C.先天性D.原发性E.特发性4、ICD-10中，方括号中的内容表示（）。
A.同义词B.代用词C.注释短语D.指示短语E.以上均是5、ICD-10中，若病人“砍伤大腿”入院，确定损伤的主导词是（）。
A.伤口B.损伤C.砍伤D.加害E.以上均不是6、手术操作分类编码（ICD-9-CM-3）中的细目指的是（）。
A.五位数编码B.两位数编码C.三位数编码D.四位数编码E.附加编码7、在ICD-10中，凡未提及病因的主动脉瓣和肺动脉瓣狭窄，假定为（）。
A.风湿性B.非风湿性C.先天性D.原发性E.特发性8、在ICD-10中，“胸膜炎”分类于（）。
A.呼吸系统疾病B.累及循环和呼吸系统的其他症状和体征C.某些传染病和寄生虫病D.先天发育异常E.结缔组织病9、“由流感嗜血杆菌引起的急性鼻窦炎”疾病编码应为（）。
A.以急性鼻窦炎J01.9为主要编码，以流感嗜血杆菌感染B96.3为附加编码B.以流感嗜血杆菌感染B96.3为主要编码，以急性鼻窦炎J01.9为附加编码C.只编码急性鼻窦炎D.只编码流感嗜血杆菌感染B96.3E.直接编码于细菌性鼻窦炎10、诊断“肠道毛细线虫病”编码时，主导词应为（）。
A.肠道B.病C.传染D.侵染E.寄生虫11、某病人在查出人类免疫缺陷病毒（HIV）阳性之前多年来都进行肺结核的治疗，此次住院除治疗肺结核外，还治疗由HIV引起的伯基特淋巴瘤，这时，主要编码应为（）。
疾病分类学思考题一、判断改错1. 国际疾病分类和手术操作分类已被列为我国医院信息系统建设基本功能规范和标准化电子病历必须使用的分类标准。
（√）2. 根据CM-3的编码原则，白内障囊外线状摘除伴人工晶体植入术，应对白内障摘除术和人工晶体植入术分别进行编码。
（√）3. 按照广义的理解，手术与医学操作属于同一范畴，包括在医疗卫生机构针对服务对象所进行的各种手术和操作。
如：临床科室实施的各种治疗性、诊断性手术、医技科室进行的各种检查、化验及其他相关的操作等。
（√ ）4. 交叉查找中的“见”表示目前选择的主导词可以有条件地使用，但如果诊断中还有一些内容未被编码考虑的话，则需按照“见”后面提供的文字重新确定主导词。
（×）答：错误。
交叉查找中的“见”表示目前选择的主导词不合适，必须无条件地按照“见”后面提供的文字重新确定主导词。
5. 胃溃疡急性出血性贫血，急性出血性贫血（D62）为主要编码，急性胃溃疡（K25.0）为附加编码。
（×）答：错误。
应当确定急性胃溃疡伴出血作为主要编码，出血性贫血为次要编码。
6. 按照ICD-10的编码原则，艾滋病病毒携带者的ICD编码，应当编码于B24（艾滋病）。
（×）答：错误。
艾滋病病毒携带者的ICD编码应当归入“影响健康状态和与保健机构接触的因素”一章，即Z编码。
思考：还有那些类似的病毒携带者情况？7. 第十六章（起源于围生期的某些情况）只包括起源于围生期的情况，不包括在以后发病或死亡。
其编码只适用于新生儿，不可用于成人。
（×）答：错误。
第十六章的情况包括：起源于围生期的情况，但是以后发病或死亡。
这里的“以后”没有时间的限定。
所以本章编码适用于新生儿，也可以用于成人。
8. 某病例，医师书写的主要情况为先天性心脏病，其他情况为室间隔缺损。
编码人员此时应当重新选择室间隔缺损为主要情况，并编码到Q21.0。
（√）9. 第二十一章《影响健康状况和与保健机构接触的因素》的编码主要用于下列情况：(1) 非病人的医疗服务；(2) 病人愈后的医疗服务；(3) 具有潜在危害健康人群的医疗服务；(4) 在“生物-心理-社会”模式转型中逐渐提供全方位的医疗服务。
浆细胞疾病免疫表型分析苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室朱明清浆细胞疾病分类•多发性骨髓瘤（MM)•其它疾病•Monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS)•冒烟型骨髓瘤 (SMM)•孤立性浆细胞瘤»骨»髓外•原发巨球蛋白血症•原发淀粉样变性(AL)•重链病•POEMS 综合征/ 骨硬化性骨髓瘤 • I 和 II 型冷球蛋白血症 •轻链沉积病多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM ）是恶性浆细胞病中最常见的一种类型，又称骨髓瘤,是B细胞起源的，骨髓克隆性浆细胞恶性增殖和异常积累，并伴大量单克隆免疫球蛋白的出现及沉积为特征的一种衰竭性、不可治愈的恶性疾病。
多发性骨髓瘤常伴有多发性溶骨性损害,高钙血症,贫血,肾脏损害,而且对细菌性感染的易感性增高,正常免疫球蛋白的生成受抑。
临床表现复杂多样，无特异性，误诊率高达84%-85%。
多发性骨髓瘤发病概况临床表现•骨髓中异常浆细胞：骨质破坏（骨痛，骨折，高钙血症） 贫血（头晕乏力） 产生大量的异常蛋白正常免疫球蛋白产生减少•异常蛋白质：血液粘滞度增高（头晕，手足麻木）蛋白尿肾功能不全淀粉样变•正常免疫球蛋白减少：反复感染•高钙血症：乏力，恶心，呕吐，神智异常，影响肾功能•淀粉样变：可以影响全身各个器官，主要为肾脏，心脏以及消化道等球蛋白异常：增高或减低 蛋白尿 单克隆免疫球蛋白多发性骨髓瘤的诊断步骤单克隆免疫球蛋白的鉴定血清蛋白电泳血清和尿免疫固定电泳24小时尿轻链定量血清游离轻链定量及比例骨髓穿刺和活检组织活检免疫表型、证实克隆性浆细胞IgH/L 基因重排骨髓瘤相关器官损害评估血常规生化检查：血清肌肝和血钙骨骼检查浆细胞单克隆属性骨髓瘤相关器官损害蛋白水平细胞及基因水平多发性骨髓瘤的诊断步骤特殊检查•腹壁脂肪或直肠粘膜活检•孤立性溶骨病灶活检•血粘度测定•免疫固定电泳（针对IgD 或IgE ）•寡分泌型患者的MRI 、PET 检查检查优点局限骨髓穿刺涂片简便瘤细胞不均一性骨髓活检反映侵犯程度疼痛SPE/UPE 简便敏感性: 0.2-0.6 g/L IFE 敏感性: 0.12–0.25g/L 非定量sFLC 敏感性：10mg/L 费用较IFE 贵骨髓免疫组化识别克隆性浆细胞/形态学实验室要求高骨髓FCM 识别克隆性浆细胞实验室要求高MRI, PET检测全身状况及不分泌肿瘤价格贵MM各种检查方法的比较2014 IMWG （国际骨髓瘤工作组）更新的骨髓瘤诊断标准MGUS▪M 蛋白 < 3 g/dL▪骨髓瘤克隆性浆细胞 < 10%▪无骨髓瘤确定性事件冒烟型骨髓瘤▪M 蛋白 ≥ 3 g/dL (血清) or ≥ 500 mg/24 hrs (尿)▪骨髓中克隆性浆细胞≥ 10% to 60%▪无骨髓瘤确定性事件多发性骨髓瘤▪浆细胞增生性疾病▪AND 1个或多个骨髓瘤确定性事件▪≥ 1 CRAB* 症状▪骨髓克隆性浆细胞 ≥ 60%▪血清游离轻链 ≥ 100▪ > 1 MRI 局限性损害*C: 血清钙升高 (> 11 mg/dL or 大于正常值上限1 mg/dL)R: 肾功能不全 (肌酐清除率< 40 mL/min or 血清肌酐> 2 mg/dL)A: 贫血 (Hb < 10 g/dL or 2 g/dL < 正常值)B: 骨病 (≥ 1 溶骨性损害，X 光片, CT, or PET-CT)Lancet Oncol 2014; 15: e538–48MM的实验室诊断骨髓象检查对诊断本病具有决定性意义。
手术及有创操作分级与分类管理制度为了确保手术及有创操作安全和质量，加强我院各级医师的手术及有创操作管理，根据《医疗机构管理条例》、《中华人民共和国执业医师法》，参照有关资料，制定本规范。
一、手术及有创操作分级手术及有创操作指各种开放性手术、腔镜手术及介入治疗（以下统称手术）。
依据其技术难度、复杂性和风险度，将手术分为四级：（一）四级手术：技术难度大、手术过程复杂、风险度大的各种手术。
（二）三级手术：技术难度较大、手术过程较复杂、风险较大的各种手术。
（三）二级手术：技术难度一般、手术过程不复杂、风险度中等的各种手术。
（四）一级手术：技术难度较低、手术过程简单、风险度较小的各种手术。
二、手术医师分级依据其卫生技术资格，受聘技术职务及从事相应技术岗位工作的年限等，规定手术医师的分级。
所有手术医师均应依法取得执业医师资格。
（一）、住院医师1、低年资住院医师：从事住院医师岗位工作3年以内，或获得硕士学位、曾从事住院医师岗位工作2年以内者。
2、高年资住院医师：从事住院医师岗位工作3年以上，或获得硕士学位、取得执业医师资格、并曾从事住院医师岗位工作2年以上者。
（二）主治医师1、低年资主治医师：从事主治医师岗位工作3年以内，或获得临床博士学位、从事主治医师岗位工作2年以内者。
2、高年资主治医师：从事主治医师岗位工作3年以上，或获得临床博士学位、从事主治医师岗位工作2年以上者。
（三）副主任医师1、低年资副主任医师：从事副主任医师岗位工作3年以内，或有博士后学历、从事副主任医师岗位工作2年以上者。
2、高年资副主任医师：从事副主任医师岗位工作3年以上者。
（四）主任医师：受聘主任医师岗位工作者。
三、各项医师手术权限（一）低年资住院医师：在上级医师指导下，可主持一级手术。
（二）高年资住院医师：在熟练掌握一级手术的基础上，在上级医师临场指导下可逐步开展二级手术。
（三）低年资主治医师：可主持二级手术，在上级医师临场指导下，逐步开展三级手术。
感染科介绍：院感科，其全称应该是“控制院内感染科”。
顾名思义，主要的工作就是对院内感染进行有效的控制。
院感科的工作有其技术成分，但主要的还是行政性的工作。
所以，一般的医生和护士都可以做。
搞卫生管理的人员当然也可以胜任。
医院是一个从事医疗的单位，医务人员在从事医疗的过程中，为了防止医源性的感染，必须要对医务人员和患者负责，保证不能因为医疗活动而发生对其感染的情况。
院感科就是做的这项工作。
其中包括对医务人员进行防止医源性感染的培训、对医疗废弃物的管理、消毒管理工作、一次性医疗卫生用品的审核及使用后处理等等。
感染科介绍：院感科，其全称应该是“控制院内感染科”。
顾名思义，主要的工作就是对院内感染进行有效的控制。
院感科的工作有其技术成分，但主要的还是行政性的工作。
所以，一般的医生和护士都可以做。
搞卫生管理的人员当然也可以胜任。
医院是一个从事医疗的单位，医务人员在从事医疗的过程中，为了防止医源性的感染，必须要对医务人员和患者负责，保证不能因为医疗活动而发生对其感染的情况。
院感科就是做的这项工作。
其中包括对医务人员进行防止医源性感染的培训、对医疗废弃物的管理、消毒管理工作、一次性医疗卫生用品的审核及使用后处理等等。
院感科制度：1、根据国家和本地区卫生行政部门有关医院感染管理的法规、标准，制定并组织实施、监督和评价医院感染控制工作；2、负责全院各级各类人员预防、控制医院感染知识与技能的培训；3、负责对医院感染发病情况进行检测。
定期对医院环境卫生学、消毒、灭菌效果进行监督、检测；对医院发生感染爆发流行进行调查、分析，制定控制措施，并督导实施；4、参与药事管理委员会关于抗感染药物应用的管理，并参与监督实施；5、负责对购入消毒药械、一次性使用医疗、卫生用品等进行审核，对其储存、使用及用后处理进行监督；6、负责对医院新建、改建项目，从医院感染控制角度提出建设性意见；7、及时向主管领导和医院感染管理委员会上报医院感染控制动态，并向全院通报；8、负责对医疗废物的处理进行监督管理。
