药理学实验与设计课件

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②单因素多水平设计 单因素：一种药物 多水平：多个剂量或多个指标 如一种药物，三个剂量对庆大霉素肾毒性的 影响，指标包括尿蛋白、Cr、BUN、肾组织 形态的影响。 单因素多水平设计效率高，使用广泛。
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③多因素单水平设计 多因素：几种药物 单水平：一种模型 几种药物对四氯化碳肝毒性的影响包括 GPT、GOT、肝组织形态的影响。 多因素单水平设计效率高，但复杂，主要 用药物筛选。
药理学实验与设计
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实验设计的重要性和必要性
• 是科学研究的计划； • 是研究方法与步骤的一项非常重要的内 容； • 是实验研究所涉及各项基本问题的合理 安排； • 是研究工作顺利进行的保证，也就最大 限度地减少实验误差，以获得精确可靠 实验结论的保证。
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一、实验设计的基本要素 二、实验设计的基本原则 三、实验设计的步骤与内容
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实验效应（指标）
指标分类及统计方法 计数指标（定性指标） 如惊厥或不惊厥、死亡或存活等。 用2方检验。 计量指标（定量指标） 如血压值、酶活性单位、时间等。 用t-检验、配对检验等。
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指标的选定需符合以下原则 (1)特异性 能反映某一特定现象且不与其他现象相混。 肝功能的金指标：AST、ALT 肾功能的金指标：BUN、Cr 高血压病的特异指标：血压(尤其是舒张压)
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选择指标时，还应注意以下关系及特点 ①计量指标优于计数指标
②动态指标优于静态指标， 把静态指标变为动态指标 如体温、疗效、体内激素水平变化等， 可按时、日、年龄等作动态观察
③所选指标要便于统计分析。
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(3)处理因素的标准化 处理因素在整个实验过程中应做 到标准化，即保持不变，否则会影响 实验结果的评价。 如实验设计中处理因素是药物， 则药物的剂型、给药途径、质量(成 分、出厂批号等)必须保持不变。
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实验对象
实验对象的选择十分重要，对实验结果有着极 为重要的影响。 实验对象包括： 整体动物：正常动物，麻醉动物，病理模型； 离体器官：子宫、心脏、小肠、血管条、气管 条、肛尾肌 等； 组织及细胞：肝细胞、心肌细胞、系膜细胞、 肿瘤细胞等。
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④多因素多水平设计 观察几种药物对几个指标的影响；或几种 药物对几种模型的作用比较。 多因素：普萘洛尔、硝苯地平、卡托普利 多水平：血压、心率、心收缩力的影响 或者 多因素：普萘洛尔、硝苯地平、卡托普利 多水平：肝、肾、脑损伤的影响 多因素多水平设计效率高，复杂。
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(2) 明确非处理因素 非处理因素虽然不是我们的研究因素，是 干扰实验结果的因素，产生混杂效应，所 以这些非处理因素又称混杂因素。 如年龄、休重、性别的影响 若两组年龄、休重、性别构成不同，则可 能影响结果比较。
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动物种属的选择 在药理实验中，选用的动物包括小鼠、大鼠、 豚鼠、兔、猫、狗和猴等哺乳动物。其中小鼠 和大鼠应用广泛，它们具有种系清楚，容易获 得，易于管理，大量供应等优点。
这些动物除可整体应用外，也可取其离体器 官、组织或细胞进行不同实验水平的研究。
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பைடு நூலகம்
在药理研究中，实验动物的种属、品系及 性别的不同时，其对药物的反应性就有质 和量的差别。因此，动物的种属、品系、 性别、体重、 生长、发育和内分泌等状况 对药理学研究起重要作用。 在实验中，应选择合格的并符合实验要求 的动物对药理学研究具有的重意义。
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⑴所选的动物必须健康，要求SPF级动物。 ⑵对呕吐敏感的动物：鸽子、猫、狗； 小鼠、大鼠、豚鼠、家兔对呕吐反应不 敏感。 ⑶抗高血压的药物：应选择家兔。 心肌缺血药：宜选用狗、猫、兔和大鼠。 ⑷抗凝血药：选择家兔和大鼠，雄性为好，避 免动物发情周期性的影响。
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⑸呼吸系统药物 镇咳药：首选豚鼠，因为豚鼠对化学剌激 和机械剌激都敏感，易引起咳嗽； 祛痰药：宜选用雄性小鼠、兔、猫，易于 观察呼吸道分泌及纤毛运动。 ⑹泌尿系统药：选用雄性大鼠或狗，因尿量 较多，易于收集。 ⑺消化系统药：宜用大鼠或狗。
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一、实验设计的基本要素
处理因素 实验对象 实验效应
无论是新药的研制，还是药物的药效学研究 或毒理学研究，其药理学实验设计都包括最 基本的三大要素。
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处理因素
实验中根据研究目的确而定的，由实验者 人为施加给受试对象的因素称处理因素，如 给病用药物、给病人实行某种手术等。
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在设置处理因素时应注意以下几个问题
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(4)灵敏性 根据实验要可相应显示出微小的变化。 如肝功能指标：GPT 98单位，100单位 它是由实验方法和仪器的灵敏度共同决定 的。 如果灵敏性差，对已经发生的变化不能及 时检测出来，或常常得到假阴性结果，这 种指标应该放弃。
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(5)可行性
指标既有文献依据 符合本实验室条件 符合研究者实际水平
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(2)客观性 易于量化、经仪器测量而获得的指标 如心电图、血常规分析、生化检测等化验室 的检查结果； 病理学的诊断意见； 菌学培养结果等。
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(3)重复性 即在相同条件下，指标应可以重复，并重复的 差异应很小。 GPT 98单位，100单位。
影响重复性的因素 ①动物：品种、体重、年令、性别、饲养条件 ②药物：批号、纯度、剂量、注射容量、速度 ③仪器：灵敏度、精确度、电压稳定性 ④其它：室温、气压、季节、上、下午时间 条件控制越严格，重复性越高
(1)处理因素的强度
强度亦称水平，对药物来说是指药物的剂量大小。
处理因素及其水平可以是一个或多个，它们的组合
包括： 单因素单水平 单因素多水平 多因素单水平
多因素多水平
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①单因素单水平设计 是指给予一种处理因素， 观察一种药物 处理前后的变化。 如一种药物，一个剂量对血压的作用。 单因素：普萘洛尔或硝苯地平 单水平：一个剂量或一个指标 单因素设计实验简单，效率低。
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所选动物的体重、年龄和性别应该是合适的， 一般实验常用成年动物 小鼠 18-25g 大鼠 180-280g 兔 2-3kg 观察药物对生长、发育、内分泌等系统的 用，应选择幼年动物。
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观察药物的抗衰老作用，应选择老年 动物或衰老过快的专用模型动物。
对性别不作要求的实验，常采用雌雄 各半或雄性动物。