(整理)《药理学》实验讲义.
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药理学实验详悉一、动物实验动物实验是根据研究目的,恰当地选用标准的符合实验要求的实验动物,在设计的条件下,进行各种科学实验、观察、记录动物的反应过程或反应结果,以探讨或检验生命科学中未知因素的专门活动。
动物实验是人类生存和发展的必要手段。
动物实验方法是进行动物实验时的各种实验手段、技术、方法和标准化操作程序。
也探讨实验动物科学中的减少、替代、优化问题。
实验动物的选择:首先应从生物医学研究的目的和实验要求来选择实验动物,进而考虑实验动物是否容易获得、是否经济、是否容易饲养。
一切实验动物应具有个体间的均一性,遗传的稳定性和容易获得三个基本要求。
标准化原则:根据对实验质量的要求选择标准化的实验动物。
动物实验中选择和使用与研究内容相匹配的标准化的实验动物标准化动物:是指遗传背景明确或来源清楚的,对其携带的微生物和寄生虫实行控制,模型性状显著且稳定的动物。
在精确试验中,鉴于动物体内外的微生物和寄生虫会干扰试验的结果,最好选择无菌动物或悉生动物,至少也应SPF级动物。
规格化原则:选择与实验要求一致的动物规格。
实验动物年龄与体重一般呈正相关性,可按体重推算年龄。
一般来说,实验动物年龄、体重应尽可能一致,相差不得超过10%。
不同性别的动物对同一药物的敏感程度是有差异的,如实验无特殊要求应选择雌雄各半做实验,以避免因性别差异所造成的结果误差。
特殊的生理状态下,如发情、妊娠及哺乳期,机体对实验的反应性发生改变。
★实验动物的选择应用应注意有关国际规范:GLP、SOP、“3R”(Replacement替代Reduction减少Refinement优化)(一)实验动物:系指遗传背景明确、来源清楚、对其携带的微生物、寄生虫实行控制,经科学方法人工培育用于科学实验的动物。
(二)实验动物的分类方法1、按遗传学控制分类*近交系:杂种动物经过相当于20代全同胞兄弟单纯连续繁殖,各条染色体上的基因趋于纯合,品系内个体差异趋于零。
近交动物的特征:a、纯合性和一致性——纯合性指的所有动物的基因位点都应是纯合的。
药理学实验讲义南方医科大学药学院2010-7目录实验一实验动物操作的基本机能 (2)实验二不同给药途径对药物作用的影响 (4)实验三全血水杨酸二室模型药物代谢动力学参数测定 (5)实验四肝肾功能对药物作用的影响 (6)实验五药物镇痛实验 (7)实验六巴比妥类药物的抗惊厥作用 (9)实验七利多卡因对抗氯化钡引起的心律失常实验 (13)实验八有机磷酸酯类中毒及解救 (14)附录1 药理学实验基本要求 (19)附录2 药理学在新药研究中的应用 (22)实验一、实验动物操作的基本机能一、目的:学习实验动物编号、捉持、给药、采血等基本操作方法。
二、实验材料(一)动物:小白鼠10只,雌雄各半,体重18g ~ 22g。
家兔1只,雌雄均可。
(二)器材:1 ml注射器,5 ml注射器,针头,灌胃针头,大烧杯,天平。
三、方法1. 性别鉴别小鼠的性别鉴别通常以肛门与生殖孔之间的距离来判断,距离近者为雌性,距离远者为雄性。
家兔可以从生殖器分辨其性别。
2. 编号可根据情况和习惯而定,符合清晰易辨、简便耐久的要求即可。
例如小鼠,右前肢皮肤外侧涂色标记为1号,腹部右外侧皮肤涂色标记为2号,右后肢皮肤外侧涂色标记为3号,头部皮肤涂色标记为4号,背部正中皮肤标记为5号,尾巴根部标记为6号,7、8、9号在左侧同1、2、3号,第10号不色。
3.捉持右手提起鼠尾,放在粗糙物(如鼠笼)上面,轻轻向后拉其尾,此时小鼠前肢抓住粗糙面不动;用左手的拇指和食指捏住其头部皮肤和双耳;其余三指和掌心夹住其背部皮肤及尾部。
这样小鼠便可被完全固定在手中。
4. 给药(1)小鼠的给药方法①灌胃(po):将小鼠固定后,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角处插入口腔,沿上腭插入食道。
如遇阻力,可将灌胃针头抽出再另插,以免穿破食道或误入气管,造成动物死亡。
灌注量一般为0.1~0.2ml/10g,不超过0.5ml/只。
②肌内注射(im):两人合作,注射部位多选后腿上部外侧。
中药药理学实验讲义 Document number:WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT中药药理学实验讲义成都中医药大学药学院药理2005,12中药药理学实验讲义主编曾南主审沈映君编委曾南王平徐世军谢宇环王张杨旋熊静悦杨莉娟童妍周桢昊李佳川第一章中药药理实验基本知识一、中药药理实验报告基本要求1.实验前应仔细阅读实验指导,做到心中有数。
结合实验内容,复习有理论知识。
科研实验还应查阅有关文献资料,吸取他人经验。
实验中应认真、仔细、耐心地观察所出现的各种现象,实事求是记录,切忌夹杂主观因素。
应坚持一丝不苟,严谨的科学作风,决不允许抄袭别人的实验结果写报告。
2.教学实验往往每次是取一种动物,一种方法写实验报告。
科研实验则应事先设计好实验动物数,随机分组。
新药研制还应设空白与已知药物对照组。
科研实验要说明的某一个作用,至少设2~3个以上计量组,要两种以上的实验方法等。
3.实验条件应详细、明确,如仪器型号、试剂的浓度、中药的品种、复方的组成、提取方法、浓度和剂量、给药途径、动物的来源、品种、体重、年龄、性别、如何分组等都应写出。
4.实验方法可简明扼要地叙述,但关键环节必须写清楚。
科研报告还可以引用文献上的方法,以节省文字。
5.实验结果应根据实验获得的数据进行整理,对一个教学实验小组或全实验室的数据进行整理、归纳、分析和对比,尽量总结出各种图表,进行统计学处理。
6.讨论部分包括实验结果的分析、思考题的探讨、实验设计、实验方法及实验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等。
讨论应注意结合中医药理论。
科研报告还可对比前人的实验进行分析,阐明从本实验获得的新发现或尚存在问题。
7.实验结束应及时地整理和总结实验结果,写出报告。
实验报告内容应包括实验名称、目的、原理、材料(包括仪器、药品、动物)、方法、结果、讨论及结论。
科研实验报告还应有前言,说明课题来源及本实验要解决的问题;报告后应附有参考文献。
中药药理学实验讲义成都中医药大学药学院药理2005,12中药药理学实验讲义主编曾南主审沈映君编委曾南王平徐世军谢宇环王张杨旋熊静悦杨莉娟童妍周桢昊李佳川第一章中药药理实验基本知识一、中药药理实验报告基本要求1。
实验前应仔细阅读实验指导,做到心中有数。
结合实验内容,复习有理论知识.科研实验还应查阅有关文献资料,吸取他人经验。
实验中应认真、仔细、耐心地观察所出现的各种现象,实事求是记录,切忌夹杂主观因素。
应坚持一丝不苟,严谨的科学作风,决不允许抄袭别人的实验结果写报告.2.教学实验往往每次是取一种动物,一种方法写实验报告。
科研实验则应事先设计好实验动物数,随机分组.新药研制还应设空白与已知药物对照组。
科研实验要说明的某一个作用,至少设2~3个以上计量组,要两种以上的实验方法等。
3。
实验条件应详细、明确,如仪器型号、试剂的浓度、中药的品种、复方的组成、提取方法、浓度和剂量、给药途径、动物的来源、品种、体重、年龄、性别、如何分组等都应写出。
4.实验方法可简明扼要地叙述,但关键环节必须写清楚。
科研报告还可以引用文献上的方法,以节省文字。
5。
实验结果应根据实验获得的数据进行整理,对一个教学实验小组或全实验室的数据进行整理、归纳、分析和对比,尽量总结出各种图表,进行统计学处理.6。
讨论部分包括实验结果的分析、思考题的探讨、实验设计、实验方法及实验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等.讨论应注意结合中医药理论。
科研报告还可对比前人的实验进行分析,阐明从本实验获得的新发现或尚存在问题。
7.实验结束应及时地整理和总结实验结果,写出报告。
实验报告内容应包括实验名称、目的、原理、材料(包括仪器、药品、动物)、方法、结果、讨论及结论。
科研实验报告还应有前言,说明课题来源及本实验要解决的问题;报告后应附有参考文献。
二、中药药理实验样品注意事项在进行单味中药或复方中药药理实验时,由于中药不同于西药,多数不是单一化学成分,而是多种成分的综合作用或多种中药的综合作用.因此,在有效成分不明确的情况下,制备药理实验用的中药样品,应注意多种因素的干扰,影响实验结果。
中药药理学实验讲义成都中医药大学药学院药理2005,12中药药理学实验讲义主编曾南主审沈映君编委曾南王平徐世军谢宇环王张杨旋熊静悦杨莉娟童妍周桢昊李佳川第一章中药药理实验基本知识一、中药药理实验报告基本要求1.实验前应仔细阅读实验指导,做到心中有数。
结合实验内容,复习有理论知识。
科研实验还应查阅有关文献资料,吸取他人经验。
实验中应认真、仔细、耐心地观察所出现的各种现象,实事求是记录,切忌夹杂主观因素。
应坚持一丝不苟,严谨的科学作风,决不允许抄袭别人的实验结果写报告。
2.教学实验往往每次是取一种动物,一种方法写实验报告。
科研实验则应事先设计好实验动物数,随机分组。
新药研制还应设空白与已知药物对照组。
科研实验要说明的某一个作用,至少设2~3个以上计量组,要两种以上的实验方法等。
3.实验条件应详细、明确,如仪器型号、试剂的浓度、中药的品种、复方的组成、提取方法、浓度和剂量、给药途径、动物的来源、品种、体重、年龄、性别、如何分组等都应写出。
4.实验方法可简明扼要地叙述,但关键环节必须写清楚。
科研报告还可以引用文献上的方法,以节省文字。
5.实验结果应根据实验获得的数据进行整理,对一个教学实验小组或全实验室的数据进行整理、归纳、分析和对比,尽量总结出各种图表,进行统计学处理。
6.讨论部分包括实验结果的分析、思考题的探讨、实验设计、实验方法及实验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等。
讨论应注意结合中医药理论。
科研报告还可对比前人的实验进行分析,阐明从本实验获得的新发现或尚存在问题。
7.实验结束应及时地整理和总结实验结果,写出报告。
实验报告内容应包括实验名称、目的、原理、材料(包括仪器、药品、动物)、方法、结果、讨论及结论。
科研实验报告还应有前言,说明课题来源及本实验要解决的问题;报告后应附有参考文献。
二、中药药理实验样品注意事项在进行单味中药或复方中药药理实验时,由于中药不同于西药,多数不是单一化学成分,而是多种成分的综合作用或多种中药的综合作用。
药理学概论实验讲义药理学概论实验讲义一、药理学实验设计的基本知识1.实验设计的基本原则药理研究的目的是通过动物实验来认识药物作用的特点和规律,为开发新药和评价药物提供科学依据。
由于生物个体之间存在着差异性,且实验过程也存在系统误差和操作误差,因此要取得精确可靠的实验结论,必须进行实验设计。
进行实验设计必须遵循三条原则,即重复、对照、随机。
重复是保证实验结果可靠的重要措施之一。
重复具有两方面的含义,即重现性和重复性。
重现性就是精确可靠的实验结果,应能在相同条件下重复出现。
重复性就是实验要有足够的次数或例数。
由于个体差异和实验误差,仅根据一次实验或少数样本所得的结果,往往难以下结论。
在适当的范围内重复愈多,则放可靠。
究竟用多少动物或多大样本进行药理实验,是研究者遇到的首要问题。
样本过少不行,过多则增加实际工作中的困难,也不符合经济的原则,而且单纯加大样本量也不能完全排除偏差,所以,在实验设计时对样本大小的估计应在保证结论可靠的条件下确定最小的例数。
在实验研究中,为消除个体差异和各种无关因素对实验结果的影响,须设对照组。
对照应符合可比原则,除实验药物或处理因素的差别外,其他一切条件(包括实验对象的种局、年龄、性别、体重和实验方法、仪器、环境、时间等)应力求一致,这样才能从实验组与对照组比较中得出药物作用的准确结论。
对照一般可分为如下两类。
①自身对照。
即在同一个体观察给药前后某种观测指标的变化,或者两种药物前后交叉比较,这样可以减少个体差异的影响。
②组间对照。
即在实验中设若干平行组进行比较,或分不给药物(或不加处理)的空白对照组及已知药物的标准品对照组。
前者最常用,后者便于与已知药物比较,并可检验实验方法及技术的可靠性。
随机分组的目的是使样本的差异平均分配到各组,而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。
例如,动物分组时先被抓到的往往是不活泼考,后抓到的是活泼者,前者分入同一组,后者分入另一组,这样得出的结论是不可靠的。
(整理)《药理学》实验讲义.《药理学》实验讲义实验一药理学实验的基本知识和基本技术一、目的1. 掌握基本操作,锻炼动手、动脑能力;2. 更好地掌握药理学基本理论知识;3. 培养科学思维二、基本要求1. 实验前:预习实验内容并复习相关理论知识;2. 实验时⑴实验器材要妥善保管;⑵实验操作按步骤进行,仔细观察实验中出现的现象,实事求是地做好记录;⑶注意节约实验药品;⑷维持良好的课堂纪律。
3. 实验后⑴各组同学将实验动物处死,实验台擦干净,将实验方盘送回准备室;⑵值日生搞好实验室卫生,将死亡动物送至指定场所;⑶书写实验报告。
三、实验报告的书写1. 题目2. 目的3. 原理4. 材料:实验动物,器材,药品5. 方法:用自己的语言简单扼要描述出来;6. 结果:要求真实、清楚;7. 讨论:将实验结果进行比较、分析;实验中有哪些不足之处;结果异常或失败的原因;8. 结论:将实验结果进行归纳总结,应带有提示性质。
四、药理学实验实验设计原则1.随机原则按照机遇均等的原则进行分组。
其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少,而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。
2.对照原则空白对照(指在不加任何处理的条件下进行观察对照);阴性对照也称假处理对照(给予生理盐水或不含药物的溶媒);阳性对照也称标准对照(指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照)。
3.重复原则能在类似的条件下,把实验结果重复出来,才能算是可靠的实验,重复实验除增加可靠性外,也可以了解实验变异情况。
五、实验动物1. 动物的选择(1)小白鼠:适用于需大量动物的实验,如某些药物的筛选,半数致死量的测定。
也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。
(2)大白鼠:比较适用于抗炎药物实验,血压测定、利胆、利尿药实验,也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。
(3)豚鼠:因其对组胺敏感,并易于致敏,故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。
药理学实验须知一、明确药理实验的目的要求药理学实验课是药理学教学的一个重要组成部分。
它的目的任务一方面是验证理论,巩固并加强对理论知识的理解;另一方面是通过实验掌握研究药物作用的基本操作方法和技能,培养对科学工作严肃的态度,严肃的方法和严格的要求,培养根据客观实际分析问题和解决问题的能力,为今后进行科学研究,打下初步基础,以便为实现中西医药结合作出贡献。
药理实验包括进行实验操作(有些部分可进行病例讨论)、整理实验结果写出实验报告等环节。
为了提高实验效果,实验前应作好预习,明确本次实验目的、方法步骤和原理,做到心中有数,避免实验中出现忙乱和差错。
实验过程中要在教师指导下加强培养独力操作能力,克服对教师的依赖性。
通过实验操作要求在生理生化实验的基础上掌握固定动物和各种给药方法,掌握剂量换算和麻醉方法,学会观察记录主要生理生化指标,掌握注射器、天平、磅秤、二导生理记录仪、药理生理多用仪及描记装置等用法,掌握离体心脏、肠管、子宫和在体动物血压、呼吸及各系统药物的主要实验方法。
二、作好实验结果的处理药理实验结果有生理记录仪等记录的曲线、测量资料(如血压、心率、瞳孔大小、睡眠时间等测量的数据)和计数资料(如动物死活数、阴性和阳性反应数等数据)等几种。
要如实地准确地对观察到的数据及时加以记录,决不可想当然地用主要观想象或书本理论代替实验观察到的客观事实。
实验完毕对结果分别加以整理。
记录曲线要加以剪裁。
注明动物性别、体重、日期、实验题目、给药剂量等。
计数资料和测量资料应酌情列表或画图以便比较,使结果一目了解。
三、写好实验报告写实验报告是培养文字表达能力和概括综合分析问题能力的重要训练方法。
每次实验后要求用统—实验报告本写好报告,交负责教师评阅。
在实验报告中要求列出实验题目、实验方法和实验结果。
有时要对实验结果产生的原理或对实验结果异常的原因略加讨论。
讨论不可离开实验结果去抄书。
实验指导所列思考题或讨论题是为加深对实验的理解,如果与实验结果无关,不必写入实验报告。
药理学实验讲义药理学实验指导实验一药理学实验基础知识与常用动物捉拿、给药【目的】 1、学习药理学实验基础知识;2、掌握药理学实验常用动物捉拿、给药方法。
【器材】 1ml、5ml、20ml注射器,大、小鼠灌胃针头,250ml烧杯、鼠笼(或铁丝笼),电子称。
【药品】 0.9%生理盐水。
【动物】小白鼠1只、大鼠1只、家兔1只。
【内容】一、实验动物的捉拿方法1、蛙和蟾蜍左手握持蛙或蟾蜍,食指和中指夹住左前肢,拇指压住右前肢;右手将双下肢拉直,左手无名指及小指将其压住而固定。
此法用于淋巴囊注射。
毁脑和毁脊髓则用左手食指和中指夹持蛙或蟾蜍的头部,拇指和无名指小指握持双下肢,右手持刺针进行操作。
2、小白鼠可采取双手法和单手法两种形式。
双手法:右手提起鼠尾,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,向后方轻拉,小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。
此时迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤,并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部,固定于手中。
单手法:小白鼠置于笼盖上,先用左手食指与拇指抓住鼠尾,手掌尺侧及小指夹住尾根部,然后用左手拇指与食指捏住颈部皮肤。
3、大白鼠大白鼠容易激怒咬人,捉持时左手应戴防护手套或用厚布盖住大鼠,先用右手抓住鼠尾,再用左手拇指和食指握住头部,其余手指与手掌握住背部和腹部。
不要用力过大,切勿捏其颈部,以免窒息致死。
4、家兔用左手抓住颈背部皮肤(抓的面积越大,其吃重点越分散)。
将兔提起,以左手托住其臀部,使兔呈坐位。
二、实验动物的给药途径与方法1、小白鼠给药途径与方法灌胃(ig):左手固定小鼠,右手持灌胃器,灌胃针头自口角进入口腔,紧贴上腭插入食道。
如遇阻力,将灌胃针头抽回重插,以防损伤。
常用灌胃量为0.1~0.2ml/10g。
皮下注射(ih):可用腹部、背部、腹股沟的皮下,此处皮肤比较松弛,也可由助手协助。
注药量一般为0.1~0.2ml/10g。
肌肉注射(im):一人抓住小鼠头部皮肤和尾巴,另一人持连4号针头的注射器,将针头刺入后腿外侧肌肉。
实验一一、药理学实验的基础知识1、实验动物的标记大、小鼠和白色家兔的标记常用3-5%黄色苦味酸溶液涂于皮毛上标号。
常用的方法:1号——左前腿 2号——左腰部3号——左后腿 4号——头部5号——正中 6号——尾根部7号——右前腿 8号——右腰部9号——右后腿 10号——不标记2、小鼠的捉持和给药方法⑴ ig: 一般给药量为0.1~0.3ml/10g。
⑵ H: 一般给药量为0.05~0.2ml/10g。
⑶ ip: 一般给药量为0.1~0.3ml/10g。
⑷ im: 一般每腿不超过0.1ml。
⑸ iv(尾静脉):一般给药量为0.1~0.2ml/10g。
2、大鼠的捉持和给药方法实验动物的给药剂量一般按mg/kg(有时也用g/kg)。
为了方便,大鼠和豚鼠可按每100g 计算,小鼠可按每10g计算。
那么,给药剂量=药物浓度×给药体积。
例:小白鼠体重22g,ip盐酸吗啡10mg/kg,药物浓度0.1%,应注射多少?计算方法:0.1%=0.1g/100ml=100mg/100ml=1mg/ml10mg/kg→10ml/kg22g→0.022kg10ml/kg×0.022kg=0.22ml或:10ml/kg→0.1ml/10g给药量:0.1ml/10g×(2.2×10g)[小鼠体重] =0.22ml3、实验记录的内容和实验报告的整理实验记录一般应包括:(1)时间、天气、温度(2)实验标本:如动物的种类、体重、标记和标号等。
(3)实验药物:如药物的来源、批号、剂型、浓度、剂量及给药途径等。
(4)实验进程、步骤及方法的详细记录。
(5)观测指标的变化或原始描记图纸的资料。
每次实验必须随时做记录。
告一段落后对所获结果进行整理,画出必要的表格进行统计、分析做出结论。
实验报告的写作实验报告一般应包括:[实验目的][实验材料]包括仪器、药品和动物。
[实验方法]简明扼要的叙述,关键步骤写清。
药理学实验教程 (中、英文版)主编 叶春玲 钟玲暨暨南南大大学学药药学学院院药药理理教教研研室室22000077年年55月月药理学实验教程目目 录录第一篇 药理学实验基本知识第一章 药理学实验须知一、药理学实验课的目的和要求二、实验结果的整理和实验报告的撰写第二章 药理学实验设计的基本知识一、实验设计的基本原则二、药理实验设计中的剂量问题三、药理实验设计中的预试问题第三章 药理学实验的统计处理原则一、计量资料的统计分析二、计数资料的统计分析三、药效和剂量依赖关系(相关性)的统计分析四、两药药效的等效性分析第四章 常用实验动物的基本操作一、实验动物的选择及捉拿固定二、实验动物的编号三、实验动物的给药方法四、实验动物的麻醉和取血第五章 药理学实验常用仪器操作技术BL -410生物机能实验系统第六章 药物剂型与处方学一、药物剂型二、处方学第二篇 药理学总论实验第一章 药动学实验实验一 磺胺类药物静脉给药后的药时曲线实验二 磺胺类药物非血管内给药后的药时曲线实验三 3P87 计算药物动力学参数实验四磺胺类药物在体内的分布实验五磺胺嘧啶的血浆蛋白结合率测定实验六磺胺类药物在麻醉大鼠体内经胆汁和尿排泄的实验第二章药效学总论实验实验一不同给药途径对药物作用的影响实验二肝功能状态对药物作用的影响实验三量效关系曲线和有关药效学参数测定第三章安全性试验实验一药物急性半数致死量(LD50)的测定实验二最大耐受量(MTD)测定第三篇药理学各论实验第一章传出神经系统药物实验实验一药物对麻醉动物血压的影响实验二药物对麻醉动物血流动力学的影响实验三药物对离体兔主动脉环的作用第二章中枢神经系统药物实验实验一药物对小鼠自发活动的影响实验二药物对益智作用的影响实验三抗癫痫药和抗惊厥实验实验四镇痛药实验第三章心血管系统药物实验实验一利多卡因对哇巴因诱发心律失常的拮抗作用实验二强心苷对家兔在体衰竭心脏的作用实验三药物对垂体后叶素所致的急性心肌缺血心电图变化的影响第四章内脏系统药物实验实验一呋塞米对小鼠尿量及电解质的影响实验二药物对组胺诱发豚鼠哮喘的作用实验三药物对大鼠的利胆作用第五章激素类及抗炎药物实验实验一糖皮质激素对毛细血管通透性的影响实验二糖皮质激素对单核巨噬细胞吞噬功能的影响实验三抗炎药物对大鼠足跖肿胀的影响第四篇实际应用能力训练第一章设计性实验第二章病历讨论附录一、常用动物离体实验的生理溶液二、动物实验常用麻醉药的用法与用量三、不同动物采血部位与采血量的关系四、常用实验动物的最大安全采血量与最小致死采血量五、不同种属动物单位体重(kg)剂量折算系数六、动物常用正常数据七、成年动物的年龄、体重和寿命比较第一篇药理学实验基本知识第一章药理学实验须知一、药理学实验课的目的和要求1目的药理学实验课的目的在于通过实验,使学生掌握药理学实验的基本方法,了解获得药理学知识的科学途径,验证药理学中的重要理论,更牢固地掌握药理学的基本概念和基本知识。
实验一:不同给药途径对药物作用的影响【目的】1.掌握硫酸镁的药理作用。
2.掌握小鼠灌胃给药及腹腔注射的方法。
3.观察硫酸镁不同给药途径产生的药理作用是否相同。
【原理】硫酸镁是一个典型的不同给药途径产生不同药理作用的药物,其口服在胃肠道形成高渗透压,使肠腔外水份向肠腔内渗透,最终导致肠容积增大,对肠壁刺激增加,导致肠蠕动加快,出现泻下作用。
静脉注射硫酸镁主要作用有:抑制中枢神经系统、扩张血管降低血压、阻断神经肌肉接头产生肌松作用等。
【材料】1. 动物小白鼠6 只2. 药品15% 硫酸镁3. 器材小鼠灌胃器、注射器、针头、小天平【方法】1. 小白鼠标号、称重、分组。
2 .1组i.p. 15%MgS0 4 溶液0.2ml/10gH组i.g. 15%MgSO 4 溶液0.2ml/10g3.以存活或死亡观察小鼠灌胃及腹腔注射等量硫酸镁所致药物效应不同。
【思考题】1 .给药途径不同,为什么会影响药物作用?2. 比较各种给药途径的优缺点?实验二:有机磷农药中毒与解救【目的】观察有机磷农药中毒的症状及阿托品、解磷定二药对有机磷农药中毒的解救效果,初步分析其解救原理。
【实验原理】有机磷农药能与胆碱酯酶牢固结合,使之失去水解Ach 的活性,造成突触间隙Ach大量堆积而产生一系列中毒症状(M样、N样症状等)。
阿托品是M 受体阻断药、氯磷啶是胆碱脂酶复活药,可不同程度的解救其中毒症状。
如阿托品解除M样症状,但对肌震颤无效;解磷定可使胆碱酯酶复活,对肌震颤有效。
【材料】1.动物:家兔2.药品:10%敌百虫溶液、0.1%硫酸阿托品溶液、2.5%解磷定溶液3.器材:兔箱、注射器、5#针头、台式磅秤、瞳孔尺【方法】1.取家兔1 只,称重后分别观察下列各项指标:全身状况、活动情况、呼吸(次数、有无呼吸困难、呼吸道有无分泌等),瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤等,记录在表内。
2.耳缘静脉注射10%敌百虫溶液1ml/kg ,密切观察上述的各项指标。
药理学实验课一、实验药理学实验课是药学专业学生进行实验学习的重要环节之一。
通过实验课的学习,学生能够亲自参与药物的制备、分析和评价等方面的实际操作,加深对药物的认识和理解。
本文将介绍药理学实验课的主要内容和实验步骤。
二、实验内容药理学实验课的内容包括以下几个方面:1. 药物制备实验药物制备实验是通过实际操作制备药物,了解药物的制备过程和药物的物理化学性质。
学生将亲自参与药物的配制、溶解、稀释等操作,掌握制备药物的基本技术和方法。
2. 药物分析实验药物分析实验是通过实际操作对药物进行分析和检测,了解药物的质量控制和分析方法。
学生将学习使用常用的分析仪器和试剂,进行药物的定性和定量分析,掌握药物分析的基本原理和技术。
3. 药物评价实验药物评价实验是通过实际操作对药物进行评价,了解药物的疗效和安全性。
学生将进行药物的药理实验、毒性实验等,评估药物的作用效果和不良反应,加深对药物临床应用的认识。
三、实验步骤以下是药理学实验课的基本步骤:1.实验前准备:学生需要提前了解实验的目的和原理,准备相关的实验材料和仪器设备。
2.实验操作:根据实验要求,学生按照实验步骤进行操作,注意安全和操作规范。
3.数据记录:学生需要记录实验过程中的关键数据和观察结果,以便后续分析和。
4.数据分析:学生根据实验结果进行数据分析和解释,实验的结果和。
5.实验报告:学生根据实验要求,撰写实验报告,包括实验目的、原理、步骤、结果和等内容。
四、实验注意事项在进行药理学实验课时,学生需要注意以下几个方面:1.实验安全:学生需要遵守实验室的安全操作规程,佩戴个人防护用品,注意操作过程中的安全风险。
2.精确操作:学生需要按照实验步骤进行操作,注意细节和精确度,保证实验数据的准确性和可靠性。
3.实验环境:学生需要保持实验环境整洁,及时清理实验废弃物,做到实验室卫生和环境保护。
4.团队合作:在实验课中,学生需要与同学们进行密切合作,互相帮助和支持,共同完成实验任务。
《药理学》实验讲义实验一药理学实验的基本知识和基本技术一、目的1. 掌握基本操作,锻炼动手、动脑能力;2. 更好地掌握药理学基本理论知识;3. 培养科学思维二、基本要求1. 实验前:预习实验内容并复习相关理论知识;2. 实验时⑴实验器材要妥善保管;⑵实验操作按步骤进行,仔细观察实验中出现的现象,实事求是地做好记录;⑶注意节约实验药品;⑷维持良好的课堂纪律。
3. 实验后⑴各组同学将实验动物处死,实验台擦干净,将实验方盘送回准备室;⑵值日生搞好实验室卫生,将死亡动物送至指定场所;⑶书写实验报告。
三、实验报告的书写1. 题目2. 目的3. 原理4. 材料:实验动物,器材,药品5. 方法:用自己的语言简单扼要描述出来;6. 结果:要求真实、清楚;7. 讨论:将实验结果进行比较、分析;实验中有哪些不足之处;结果异常或失败的原因;8. 结论:将实验结果进行归纳总结,应带有提示性质。
四、药理学实验实验设计原则1.随机原则按照机遇均等的原则进行分组。
其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少,而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。
2.对照原则空白对照(指在不加任何处理的条件下进行观察对照);阴性对照也称假处理对照(给予生理盐水或不含药物的溶媒);阳性对照也称标准对照(指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照)。
3.重复原则能在类似的条件下,把实验结果重复出来,才能算是可靠的实验,重复实验除增加可靠性外,也可以了解实验变异情况。
五、实验动物1. 动物的选择(1)小白鼠:适用于需大量动物的实验,如某些药物的筛选,半数致死量的测定。
也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。
(2)大白鼠:比较适用于抗炎药物实验,血压测定、利胆、利尿药实验,也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。
(3)豚鼠:因其对组胺敏感,并易于致敏,故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。
也常用于离体心脏、心房、肠管实验。
又因它对结核敏感,常用于抗结核病药的实验。
(4)家兔:常用于观察研究脑电生理作用,药物对小肠的作用。
由于家兔体温变化敏感,也常用于体温实验,用于热原检查。
(5)狗:狗是记录血压,呼吸最常用的大动物。
还可利用狗做成胃瘘、肠瘘,以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。
在进行慢性毒性实验时,也常采用狗。
2. 实验动物的编号狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。
大鼠、小鼠如为白色可用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。
3. 动物固定及给药(1)小鼠捉拿小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。
通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。
在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或专用小鼠固定筒。
如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。
(2)小鼠灌胃用左手固定鼠,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠的口腔插入,压迫鼠的头部,使口腔与食道成一直线,将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道,可感到轻微的阻力,此时可略改变一下灌胃针方向,以刺激引起吞咽动作,顺势将药液注入。
一般灌胃针插入小鼠深度为3~4cm,大鼠或豚鼠为4~6cm。
常用灌胃量小鼠为0.2~1ml,大鼠1~4ml,豚鼠1~5ml。
(3)小鼠腹腔注射先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5 厘米,再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。
此法大小鼠用的较多。
(4)皮下注射注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤,右手持注射器将针头刺入,固定后即可进行注射。
一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;蛙可在脊背部淋巴囊注射;狗多在大腿外侧注射,拔针时,轻按针孔片刻,防药液逸(5)家兔捉拿右手握住兔颈背部皮肤轻轻提起,再以左手托起其臂部,使兔呈坐位姿势。
(6)家兔耳缘静脉注射采用外耳缘静脉,因其表浅易固定。
注射部位除毛,用75%的酒精消毒,手指轻弹兔耳,使静脉充盈,左手食指和中指夹住静脉的近心端,拇指绷紧静脉的远心端,无名指及小指垫在下面,右手持注射器,尽量从静脉的远端刺入血管,移动拇指于针头上以固定,放开食、中指,将药液注入,然后拔出针头,用手压迫针眼片刻以止血。
实验二影响药物效应的因素(给药途径)[目的] 观察药物从不同途径引入机体可能产生不同的作用;观察不同给药途径对药物作用速度、强度的影响。
[原理]①肌肉注射或静脉注射对中枢神经系统抑制、解痉。
镁离子抑制运动神经末梢对乙酰胆碱的释放,阻断神经和肌肉传导,使骨骼肌松弛,故能有效地预防和控制抽搐(子痫),但是注射过量镁离子会镁因会与钙发生拮抗作用导致乙酰胆碱与钙离子的偶联作用减弱,使心肌细胞兴奋性减弱,从而脑供血不足,而死亡;②口服难以吸收,使肠腔内渗透压升高,大量水分使肠道扩张,使肠壁感受器受到刺激,导致腹泻;[器械] 1ml注射器2支,小白鼠胃管一支,。
[药物]饱和硫酸镁溶液(饱和度为1000ml,水中溶解440g 硫酸镁)。
[动物]小白鼠2只。
[方法]取体重大小相似的小白鼠两只,称好体重,按下面两种途径给药,观察并记录。
①按每10g体重0.2ml作肌肉注射饱和硫酸镁,②用同样剂量灌胃。
[结果] 记录: 将实验结果填入下表。
[思考题]同一种药物以不同途径给药时为什么会影响药物效应?实验三药物的镇痛作用一、目的:了解热板法的实验原理,观察阿司匹林的镇痛作用。
二、原理:小鼠的足底无毛,皮肤裸露,在温度55±0.5℃的金属板上产生疼痛反应,表现为舔后足,踢后腿等现象。
镇痛药可提高痛阈,推迟小鼠疼痛出现时间。
三、材料:雌性小鼠2只、热板仪、0.4%乙酰水杨酸溶液、生理盐水、四、方法:1.准备工作调定热板仪温度使之恒定于55±0.5ºC。
2.小鼠的选择及正常痛阈的测定取小鼠数只,依次热板仪上,按“开始”键记录时间。
自放入热板仪至出现舔后足所需的时间(秒)作为该鼠的痛阈值。
凡在30秒内不舔足或逃避者弃置不用。
取筛选合格的小鼠3只,各鼠编号后重复测其正常痛阈值一次,将所测两次正常痛阈平均值作为该鼠给药前痛阈值。
3.给药及给药后痛阈值测定各组的动物注射下列药品0.1ml/kg,并记录给药时间。
一只用0.4%乙酰水杨酸溶液(400mg/kg);另一只,用生理盐水。
给药后10min、30min后各测小鼠痛阈值1次。
60秒仍无反应,应将小鼠取出,痛阈值以60秒计。
4.实验完毕后,收集全实验室数据按下列公式计算不同时间的各鼠痛阈提高百分率:痛阈提高百分率(%)= 给药后平均痛阈值–给药前平均痛阈值×100%给药前平均痛阈值5.以时间(min)为横坐标,痛阈提高百分率为纵坐标,绘制各组的时-效曲线。
【注意事项】⒈本实验应选用雌性小鼠,雄性小鼠遇热时阴囊松弛下垂,与热板接触影响实验结果。
⒉室温应控制在13±18℃,此温度小鼠对痛反应较稳定。
⒊正常痛阈≥30s、≤10s以及喜跳跃的小鼠均应弃用。
⒋测痛阈时若60s仍无反应,应立即取出小鼠,以免烫伤足趾,且痛阈按60s计。
实验四药物对小鼠自发活动的影响一、目的:观察药物对小鼠自发活动的影响,以分析药物作用表现为兴奋作用还是抑制作用。
二、原理:自发活动是正常动物的生理特征。
自发活动的多少往往能反映中枢兴奋或抑制作用状态。
镇静催眠药均可明显减少小鼠的自发活动。
小鼠自发活动减少的程度与镇静催眠药作用强度成正比。
三、材料:小鼠2 只小鼠自主活动记录仪、注射器(1ml×2)、天平、4%水合氯醛溶液。
四、方法:取小鼠2只,称体重,分别进行腹腔注射,对照组一只注射生理盐水,另一只注射4%水合氯醛溶液10ml/kg 。
给药30min后将各组小鼠分别放人自主活动箱中,每隔5min记录1次各组小鼠活动数。
连续观察到20min比较给药组与对照组小鼠活动数,用公式计算各给药组小鼠20min累计自发活动抑制率:对照组小鼠自发活动数-给药组小鼠自发活动数自发活动抑制率=×100%对照组小鼠自发活动数【注意事项】⒈小鼠应尽量选取活泼者,同性。
⒉实验前禁食禁水24h。
⒊实验最好在20℃以上室温下进行,室温过低常影响小白鼠活动。
⒋实验最好在上午做,以为小鼠的活动通常在中午及下午减少。
实验五药物半数致死量(LD50)的测定一、实验目的和原理掌握药物半数致死量(LD50)的测定方法;掌握简化机率单位法的计算方法;了解急性毒性实验的相关内容及新药安全性评价的内容。
药物的急性毒性常以LD50来表示,即能够引起试验动物—半死亡的剂量。
在实验设计合理并严格掌握实验技术的条件下,药物致死量的对数大多在半数致死量的上下形成常态分布。
通过计算可求出LD50。
本实验了解药物(以水合氯醛为例)引起一半动物死亡的药物剂量(median lethal dose, LD50)的测定方法和计算过程。
二、实验方法(一)探索剂量范围取小鼠9~12只,以3只为一组,分成3~4组,包括组距较大的一系列剂量,按组分别灌胃水合氯醛溶液,观察出现的症状并记录死亡数,找出引起0及100%死亡率剂量的所在范围,此即上下限剂量Dm及 Dn)。
(二)确定组数并计算各组剂量1. 确定组数(G):可根据适宜的组距确定组数,一般用5~8个剂量组,按等比级数增减。
2. 计算各组剂量:在找出Dm、Dn和确定组数后,可按下列公式求出公比r (r = lg-1[(lgDm-lgDn)/(G-l)],再按公比计算各组剂量D1~Dm,其中 D1=Dn=最小剂量。
3. 配制等比稀释药液系列,使每只小鼠给药容量相等,一般为0.l ~0.25 ml/10 g体重。
(三)进行正式实验在预实验所获得的0%和100%致死量范围内,选用几个剂量,尽可能使半数组的死亡率都在50%以上,另半数组的死亡率都在50%以下。
各组动物的只数应相等或相差无几,每组10只左右,动物的体重和性别要均匀分配。
完成动物分组和剂量计算后,按组腹腔注射给药。
最好先从中剂量组开始,以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适,否则可随时进行调整。
(四)统计实验结果给药后经一定时间,清点各组的死亡小鼠数。
用改良寇氏法计算药物的LD50。
公式为LD50=lg-1[lgDm–lgr(∑P–0.5)]四、实验结果要点:实验日期、检品的批号、规格、厂名、理化性状、溶液的浓度、实验时室温、小鼠的性别、体重、给药途径、剂量(药物的绝对量与溶液的容时量)、给药时间、中毒症状、死亡时间、死亡率和LD50的计算过程。