热激蛋白在蜡蚧轮枝菌中耐高温胁迫的作用分析开题报告
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小麦耐热性鉴定及热激蛋白基因的克隆与表达分析
的开题报告
一、研究背景
小麦是我国重要的粮食作物之一,但由于气候变化以及人类活动等因素,小麦种植地区温度逐渐升高,胁迫小麦的生长和产量。
小麦要适应高温胁迫,需要从生理和分子层面进行反应和调节,其中热激蛋白在这个过程中扮演着重要的角色。
因此,研究小麦的耐热性以及与之相关的热激蛋白基因是十分必要的。
二、研究目的
本研究的主要目的有以下两个方面:
1.通过小麦品种间的对比分析,筛选出耐热性较强的品种;
2.克隆小麦中参与耐热性的热激蛋白基因,分析其表达水平及调控机制。
三、研究内容与方法
1.小麦耐热性鉴定
将不同种植地区的小麦品种进行耐热性鉴定,通过叶片相对电导率和叶绿素荧光参数等生理指标对比分析,筛选出耐热性较强的品种。
2.基因克隆
从耐热性较强的小麦品种中提取总RNA,逆转录成cDNA,利用PCR技术克隆出热激蛋白基因。
将克隆出的基因进行测序,进行进一步的生物信息学分析。
3.基因表达分析
通过qRT-PCR技术分析热激蛋白基因在不同小麦品种及不同的高温处理条件下的表达水平。
同时,采用亚细胞定位技术分析热激蛋白的分布情况,探究其调控机制。
四、预期结果
本研究将筛选出耐热性较强的小麦品种,探究热激蛋白在小麦耐热性中的调控机制,为小麦品种的选育以及提高小麦的耐热性提供理论基础和参考。
热激蛋白在植物保护中的应用热激蛋白(heat shock protein)是一种在植物生长发育和环境逆境应答中起重要作用的蛋白质。
这些蛋白质在植物体内广泛存在,当植物遭受高温、低温、干旱、盐碱等胁迫时,它们通过一系列生化反应的调控和协同作用,起到保护和修复细胞膜结构和酶、蛋白质等生物分子的作用。
随着对植物生物学的深入研究,热激蛋白在植物保护中的应用也日益被重视,下面我们来谈一谈热激蛋白在植物保护中的应用。
1、作为分子指示符热激蛋白往往在环境逆境应答中会被积累并表达,因此,可以用热激蛋白来反映植物体内受到逆境的程度。
例如,可以测定不同种植物的热激蛋白的表达程度和变化趋势,以反映植物的逆境耐受程度。
此外,可以利用在不同植物器官中热激蛋白的表达,来评价不同部位的受逆境的能力。
这种方法有助于对新品种和改良品种在环境逆境下的适应性进行评估,从而为选育逆境耐受性优良的品种提供基础数据。
2、作为启动因子热激蛋白在环境逆境下也起到启动调节其他逆境应答蛋白表达的作用。
比如,在高温胁迫下,大豆中HSP70可以启动调节丙二醛代谢合成的两个蛋白AccDH和MDH的表达,并促进其积累,从而保护细胞膜脂质的稳定;在干旱胁迫下,热激蛋白可以启动表达醣类前体、解糖酶和醣原酸等蛋白,促进产糖途径的通路反应,维护植株的正常代谢过程和生长发育。
3、作为信号转导分子热激蛋白还可以作为信号转导分子,参与对逆境胁迫的响应,从而调控细胞内Ca2+离子的浓度和其他信号转导通路的运作。
例如,HSP90可以作为分子伴侣,与许多生长素、激素和逆境应答蛋白结合,调节它们的反应和积累;而HSP70则可以与具有许多新生蛋白质、质差蛋白质的氨基末端结合,从而防止其在系统中的异常积累。
这些参与离子通道、转运蛋白、激素信号等的逆境响应途径的蛋白,都与热激蛋白结合来响应环境的逆境刺激,从而促进植物适应。
4、作为植物生长调节剂热激蛋白不仅可以作为保护蛋白,还可以作为植物生长调节剂。
高温胁迫对小麦几个生理生化指标及热激蛋白的影响的开
题报告
一、研究背景
近年来,全球气候变化日益严重,高温胁迫对粮食作物产量和品质的影响越来越受到关注。
小麦作为世界上最主要的粮食作物之一,在高温环境下生长发育异常,导
致严重的减产。
因此,研究高温胁迫对小麦生理生化指标以及热激蛋白的影响,有助
于了解小麦在高温环境下的生长适应机制,并为小麦的调控提供科学依据。
二、主要研究内容和方法
1. 研究内容
本研究主要包括以下内容:
(1)高温胁迫对小麦生理生化指标的影响:包括叶绿素含量、相对电导率、MDA含量、抗氧化酶活性等指标。
(2)高温胁迫对小麦热激蛋白的表达及功能的影响:研究高温胁迫后小麦中HSP70和HSP90的表达情况,并通过激活和抑制HSP70和HSP90的功能,探究其对
小麦高温胁迫的响应机制。
2. 研究方法
(1)小麦种植和高温胁迫处理:采用小麦品种冬小麦杂交二代F6作为研究对象,在小麦生长的不同生育期,对其进行高温胁迫处理,包括一定的高温温度和持续时间。
(2)生理生化指标的测定:收取高温胁迫后的小麦植株,进行叶绿素含量、相
对电导率、MDA含量、抗氧化酶活性等指标的测定。
(3)HSP70和HSP90的表达及功能的研究:采用Western blot技术检测小麦中HSP70和HSP90的表达情况,并通过利用HSP70和HSP90激活和抑制剂,探究其对
小麦高温胁迫的响应机制。
三、研究意义
本研究将深入探究小麦在高温胁迫条件下的生长适应机制,并揭示小麦中HSP70和HSP90在高温条件下参与的响应机制,对于揭示小麦高温耐受机制、提高小麦高温抗性、保障粮食安全具有重要的理论意义和实践意义。
植物热激蛋白在非生物胁迫响应中的研究进展作者:刘骕骦等来源:《广东蚕业》 2020年第4期DOI:10.3969/j.issn.2095-1205.2020.04.13刘骕骦刘燕敏李阳(湖州师范学院浙江湖州 313000)基金项目:金属硫蛋白GmMT4 参与高温高湿胁迫下春大豆种子活力形成的机制(NO:LQ20C130003)浙江省自然科学基金/探索项目作者简介:刘骕骦(1990- ),男,汉族,黑龙江绥化人,博士研究生,讲师,研究方向:种子学、植物耐逆分子生物学。
通讯作者:刘骕骦]摘要非生物胁迫作用会通过改变植物细胞内蛋白质的构象从而影响植物的正常生长过程。
热激蛋白是植物体内负责折叠、组装、转运和降解蛋白质的结构,其在受到胁迫后会促进蛋白质复兴,让蛋白质逐渐恢复正常形态,保障植物的正常生长。
文章从热激蛋白的相关理论出发,探讨了热激蛋白的生物学功能,分析了热激蛋白与其他应激反应机制的相互作用。
关键词植物热激蛋白;非生物胁迫;分子伴侣中图分类号:Q945.78 文献标识码:A 文章编号:2095-1205(2020)04-25-02非生物胁迫是指在非生物条件下影响植物生长的作用,如干旱、高低温以及重金属离子等。
非生物胁迫在植物的每一生长阶段有不同的消极影响,进而导致植物生长受阻,影响农作物的产量。
现阶段最为常见的非生物胁迫如自然灾害、农药和化肥的过度使用、工业废料的任意排放等,为了保障农作物的产出,增强植物对非生物胁迫的耐受性非常关键。
植物热激蛋白即植物Hsps,是普遍存在于植物体内的物质,当植物受到非生物胁迫时,热激蛋白会被激活并在短时间内产生大量一类蛋白质,进而让结构受损的蛋白质重新恢复正常构象。
当然除了植物之外,其他生物体内或多或少也会存在热激蛋白。
总的来说,植物热激蛋白种类繁多,在抗旱耐寒、抗盐碱等方面的作用突出,研究植物热激蛋白在非生物胁迫响应具有一定的理论价值与现实意义。
1 热激蛋白概述热激蛋白最早于20世纪60年代被发现,学者Tissieres将果蝇唾液腺当中因受热而合成的蛋白质命名为热激蛋白。
环境胁迫因子对杀虫真菌蜡蚧轮枝菌VL18的影响谷祖敏;陈思;韩金栋;李修伟;周飞【摘要】The effect of high temperature, ultraviolet radiation, agrochemicals and NaCl on the entomophagous fungus Verticillium lecanii VL18 was studied with spores germination method and mycelium growth rate method. The results showed that high temperature inhibited spores germination of VL18 at different degrees. There was almost not effect at 32℃, but after treated for 60 minutes at 48℃ the inhibition rate of spores germination was 86.6%. The ultraviolet radiation suppressed the spores germination, moreover the inhibitory action of 254nm was bigger than that of 365nm. Among tested 9 agrochemicals the inhibitory action of fungicides was the highest, followed by insectcides and foliage fertilizer was the last one. The NaCl suppressed the mycelium growth and the spores germination of VL18, the inhibition rate of mycelium growth and spores germination was 35.09% and 59.82% respectively.%采用孢子萌发法和菌丝生长速率法考察高温、紫外线、农用化学品和盐胁迫因子对杀虫真菌蜡蚧轮枝菌VL18的影响。
植物免疫反应中热激蛋白的调控机制研究植物作为生物界中最广泛存在的一类生物,一直以来都需要与各种各样的病毒、细菌等微生物进行斗争。
这种斗争包括两种,一种是植物进化的体系自身所形成的抗病性,另一种是外部介入的生物化学物质所起到的调控作用。
其中,热激蛋白是调控植物免疫反应的重要蛋白质之一。
热激蛋白是一个非常广泛的概念,它包括了多种在细胞内起到抗氧化作用的蛋白。
这些蛋白在细胞内的分布范围非常广泛,包括细胞核、细胞质、线粒体、叶绿体等多个位置。
在植物免疫反应中,热激蛋白的调控机制一直以来备受关注。
热激蛋白的调控机制主要包括两个方面:其一是通过转录因子的激活来调控热激蛋白的表达,其二是通过蛋白酶的调控来影响热激蛋白的折叠和功能。
对于热激蛋白的调控机制的研究,最早是在动物细胞中进行的。
随着分子生物学和细胞生物学的发展,人们对热激蛋白在植物中的调控机制也逐渐有了更深入的了解。
研究表明,热激蛋白的表达是受到多种因素的影响的,其中包括环境温度、光照强度、荷尔蒙等多种因素。
这些因素可以通过不同的途径来影响热激蛋白的表达,从而影响植物细胞的抗氧化能力。
热激蛋白的表达在植物免疫反应中的作用非常重要。
这一点可以从其在多种生物过程中的作用来得知。
例如,在植物受到反刍动物攻击时,虫口渗出的唾液中会含有多种蛋白质,其中一些蛋白质能够诱导植物细胞产生热激蛋白,从而增强植物细胞的抵抗能力。
此外,研究表明,在植物受到病毒侵害时,热激蛋白的表达水平也会有所改变,进一步证明了热激蛋白在植物免疫反应中的重要性。
研究表明,在植物细胞中,热激蛋白的调控机制不仅涉及到其本身的表达,还包括了它的下游效应。
这些下游效应可以是通过热激蛋白与其他蛋白质的相互作用产生的,也可以是通过一系列的信号分子传递和激活产生的。
除了上述的调控机制,研究人员还在尝试着寻找其他可以调控热激蛋白表达的因素。
例如,一些化合物如某些抗生素、脂质等,也能通过调控热激蛋白的表达来影响植物细胞的生长和抗病能力。
小麦苗期热胁迫响应基因TaCDPK和TaPK的功能
鉴定的开题报告
一、研究背景和意义
热胁迫是影响农作物生产和发展的主要因素之一,严重影响着小麦的生长和产量。
热胁迫会导致小麦叶片和根系的细胞膜脂质过度氧化和电解质渗漏以及激活相应热休克蛋白基因的表达,从而保护小麦细胞。
植物细胞在热胁迫条件下的适应机制涉及多种信号途径,其中Ca2+信号途径被广泛认为是一种重要的响应机制。
Ca2+依赖蛋白激酶(CDPK)和蛋白激酶(PK)在植物细胞的Ca2+信号途径中扮演着重要的角色,可以调节植物抗热能力的表现和热休克蛋白基因的表达。
因此,研究小麦苗期热胁迫中TaCDPK和TaPK的功能鉴定对于揭示小麦抗热机制具有重要的意义。
二、研究内容和方法
本研究将利用外源 Ca2+ 信号剂(CaCl2)暴露小麦幼苗,并分别纯化 TaCDPK 和 TaPK 蛋白,然后采用荧光标记技术观察并测定活性酶,比较其在高温条件下的表达水平和活性酶水平,以及大量热休克蛋白基因 HSP70 和 APX 的表达情况,以探究TaCDPK和TaPK在小麦幼苗在热胁迫条件下的功能及其作用机制。
三、研究预期成果
通过研究小麦苗期热胁迫响应基因 TaCDPK和TaPK的功能鉴定,我们期望能够揭示小麦抗热机制,并为小麦的热胁迫防治提供新的理论和实验基础。
同时,本研究也有望为其他作物的研究提供借鉴和启示。
高温胁迫对条斑紫菜丝状体生理影响及Hsp70基因的克隆和表达的开题报告1. 研究背景和意义条斑紫菜是一种重要的海藻资源,广泛分布于中国沿海海域。
由于全球气候变暖,海水温度不断升高,条斑紫菜的生长环境遭受了严重威胁,高温胁迫已成为影响其生长和生理的主要因素之一。
因此,了解高温胁迫对条斑紫菜的影响,揭示其耐受机制,对保护和合理利用条斑紫菜资源具有重要意义。
2. 研究内容和目的本研究将以条斑紫菜为对象,通过高温胁迫处理,研究其生长发育、生理代谢和Hsp70基因表达的变化情况,并利用PCR技术克隆Hsp70基因,以探究其在高温胁迫中的生理作用。
具体研究内容包括:(1)高温胁迫处理下条斑紫菜的生物学特性变化;(2)高温胁迫处理下条斑紫菜叶绿素、蛋白质和抗氧化酶活性的变化;(3)对条斑紫菜中Hsp70基因的克隆和定量分析;(4)高温胁迫处理下Hsp70基因表达的变化和生理作用?3. 研究方法和技术路线(1)样品处理:将条斑紫菜幼苗在不同温度条件下生长,如:常温(20℃)、中温(25℃)、高温(30℃)等;(2)生长发育特性分析:观察不同温度处理下条斑紫菜的生长速率、根长、茎长等参数;(3)生理代谢物分析:采用显微镜和光谱法等检测叶绿素含量、蛋白质含量和抗氧化酶活性等参数;(4)Hsp70基因克隆和表达分析:通过PCR技术克隆条斑紫菜Hsp70基因,采用qPCR技术定量分析其表达量,同时进行Western blot检测和功能验证。
4. 预期结果和意义预计通过本研究,可以探究高温胁迫下条斑紫菜的响应机制,特别是Hsp70基因在其中的作用机理,进一步揭示条斑紫菜的适应性机制。
同时本研究可为条斑紫菜的保护和合理利用提供理论依据和参考,促进海藻资源的可持续发展。
热敏感性蛋白在胁迫逆境中的作用随着全球气候变化的日益严重,植物面临着更加严峻的气候条件,如高温、旱灾等,这些环境压力对植物整体生长发育产生了不利影响。
植物内部的代谢途径和生物学过程都面临着困难,需要调整以应对这些逆境。
在植物的逆境响应机制中,热敏感性蛋白起着重要作用。
热敏感性蛋白指的是在高温胁迫逆境下发生调节性表达的蛋白质。
这些蛋白具有多种功能,主要包括承担蛋白质翻译后的修饰、前体蛋白的分解、转录水平的调节和减少蛋白质的损害等。
热敏感性蛋白与快速适应植物的温度变化相关。
正常情况下,植物体内的酶会受到氧化磷酸化修饰,热敏感性蛋白参与酶的解除修饰,从而保证酶功能在高温条件下的稳定性。
热敏感性蛋白还可以参与蛋白酶体的生长和凋亡调节,促进植物的自我修复和自我保护机制。
在生长阶段中,热敏感性蛋白可以作为信号转导通路的组成部分,参与植物细胞生长和分化。
然而,热敏感性蛋白的功能也存在一定限制。
当高温胁迫逆境持续较长时间时,热敏感性蛋白会进一步受到损伤,从而限制蛋白酶体的生长和凋亡调节作用,影响植物的生长发育进程。
此外,在胁迫逆境中,热敏感性蛋白的表达模式也存在一定异质性。
如在响应高温胁迫逆境时,不同的热敏感性蛋白的表达量和表达时间也会存在差异,这表明植物逆境响应机制中存在复杂的反馈调节机制。
针对上述限制,植物可以通过支持热敏感性蛋白的正常功能和提高逆境响应机制的能力来应对高温胁迫。
以防范万一,现代农业领域可以更多地使用生物技术来提高植物的逆境抗性,为全球气候变化带来的风险发展解决方案,并创造可持续农业革命的可能性。
总的来说,热敏感性蛋白在植物的逆境响应机制中起着至关重要的作用。
它不仅可以保护蛋白酶体的正常生长和凋亡调节,还可以促进植物的自我修复和自我保护机制,为植物的正常生长发育奠定了基础。
随着气候条件的变化,关于热敏感性蛋白的深入研究和应用前景也越来越受到农业科学家和生物学家的关注。
热激蛋白在蜡蚧轮枝菌中耐高温胁迫的作用分析开题报告热激蛋白在蜡蚧轮枝菌中耐高温胁迫的作用分析;摘要:热休克蛋白是细胞内含量最丰富的蛋白质之一,;关键词:热休克蛋白、HSP90、HSP70、小分;A bstract:Heatshockprotei;Keywords:Heatshockprotei;引言;热休克蛋白(h eatshockprotein,H;由于热休克蛋白诱导表达迅速,分布广泛,即使在非热;质量的大小热激蛋白在蜡蚧轮枝菌中耐高温胁迫的作用分析摘要:热休克蛋白是细胞内含量最丰富的蛋白质之一,在各种生物体内广泛分布。
热休克蛋白的表达和调控系统是有机体对多种内外环境胁迫条件产生应激反应达到自我保护的物质基础。
目前这一领域的研究已在探讨生物的遗传、进化和环境适应等宏观问题上得到应用。
本文综合叙述了热休克蛋白在进化方面的研究进展,主要包括HSP90、HSP70及sHSPs蛋白结构及其基因的演化特征。
这些研究也许能为探讨生物与环境的相互关系、物种进化及所经历的环境变迁等科学问题提供一定的线索。
关键词:热休克蛋白、HSP90、HSP70、小分子热激蛋白、进化Abstract:Heat shock proteins ( HSP) are among the most abundant i ntracellular proteins. The gene expression and regulatory mechanisms of HSP are the self-protecting material basis, when the organism unde r different stress conditions. Furthermore the researches of them are widely used in solving some macro-problems, such as biological genet ics, evolution and environmental adaptation. This article reviews theresearch progress of HSP, including the evolution of HSP90, HSP70 and sHSPs. Maybe these will provide certain clue for the relation of the biologics and environments, the evolution of the origin of species and the environment transitions undergone.Keywords:Heat shock proteins, Heat shock proteins 90, Heat shock proteins 70, Small heat-shock proteins, Evolution.引言热休克蛋白(heat shock protein,HSP)又称热激蛋白。
1962年Ritosa 首次发现热激诱导果蝇幼虫唾腺染色体形成新的膨突,暗示可能某种蛋白的合成量增加,人们称这种反应为热激反应(heat shock response,HSR)【1】。
A lfred Tissiores 等科研人员于1974年进一步发现高温能使果蝇的蛋白质合成发生变化,正常的蛋白质合成受到抑制,而同时启动了一套新的蛋白质的合成,这些受热诱导合成的一系列蛋白即为热休克蛋白【2】。
随着科技的发展,人们发现热休克蛋白也能被化学物质或者其他环境刺激所诱导,但习惯上统称这类蛋白为热休克蛋白。
而且热休克蛋白具有明显的交叉保护(cross-protection)作用,在一种胁迫应激下,同时会增强对其它胁迫的承受能力【3】。
随着研究成果的不断积累, 热激蛋白字面意义己经不能涵盖其具有的丰富生物学意义。
现在很多研究已经表明,热休克蛋白广泛存在于生物界中,其中包括真菌、藻类、植物、昆虫和哺乳动物,而且热休克蛋白几乎在所有活细胞内都起着重要的作用,充分证明热激反应是一个普遍的生物学现象。
大量研究表明,通常在高于有机体正常生长温度约5℃时热休克蛋白的合成就开始能被检测到,在热激处理后3~5 min内热休克蛋白mRNA的含量显著增加,20 min时就可以检测到新合成的热休克蛋白。
如果让植物一直处于热激状态,热休克蛋白的合成一般只会持续几个小时【 4】。
但是对于不同的生物种类,诱导热休克蛋白合成的温度是不同的,而且热激后的恢复时间也会因生物种类而异。
目前发现热休克蛋白定位于细胞的多种细胞器中,包括胞质溶胶、线粒体、叶绿体、内质网等内膜系统,但不同的热休克蛋白在细胞中往往有着有不同的定位【5】。
如HSP90多定位于高尔基体和液泡中,HSP70多定位于细胞质和细胞骨架中。
由于热休克蛋白诱导表达迅速,分布广泛,即使在非热休克细胞中也存在着由热休克蛋白同源基因编码的类似蛋白质。
这种在正常生理条件下热激基因家族中表达的成员称为热激蛋白的同系蛋白(heat shock protein cognate,HSC)。
所以,我们应该明确热激基因是一个并非所有成员都受热调控的多基因超家族。
热休克蛋白的相对分子质量大都在15x103~104x103范围内,而且低分子量的热休克蛋白主要存在于植物体内。
根据相对分子质量的大小以及同源程度可将热休克蛋白分为HSP90、HSP70、小分子热休克蛋白及遍在蛋白质4个家族【6】,各个家族的热休克蛋白又有多种不同形式或经不同修饰的蛋白质分子所组成(见表1)。
表1 主要的热休克蛋白家族及其生理功能 HSP家族主要成员主要生理功能免疫应答中的可能作用 HSP9 0 HSP90, HSP83 促进甾醇激素受体与激素的结合及与DNA结合,调节激酶磷酸化活性,与典型的分子伴侣不同,它们与特定靶蛋白之间的相互作用特殊且长久抗肿瘤,提高自身免疫功能 HSP70 HSP70, Bip,Dnat, Hsc70, Grp78 参与蛋白质折叠和去折叠、蛋白质转位及多聚复合体的组装,与ATP结合时具有微弱的ATP酶活性免疫球蛋白装配,类抗原加工,病原体抗原及免疫性诱导小分子热休克蛋白 HSP27, Gro23, HSP16 参与蛋白质折叠、去折叠及多聚复合物的组装病原体抗原及免疫性诱导泛蛋白遍在蛋白质蛋白质降解类抗原加工,淋巴细胞回巢及自身免疫性诱导热胁迫、干旱胁迫及高盐胁迫等环境胁迫都会影响许多细胞蛋白质的酶性质或结构组成,结果变成非折叠或错误折叠(misfold)状态(蛋白质常常会聚合在一起或者形成沉淀),从而丧失其催化结构及活性。
大多数热休克蛋白具有分子伴侣(molecular chaperone)或伴侣蛋白(chaperonin)的作用,可以与不同功能的多种蛋白质形成天然复合物,参与有关蛋白质的折叠、亚基的组装、细胞内的运输以及蛋白质降解等过程。
但热休克蛋白只是参与靶蛋白活性和功能的调节,而不是作为靶蛋白的组成部分。
在短短50年里人类对热休克蛋白的了解已经非常深入,丰富的文献表明对热休克蛋白的认识已逐渐从描述其种类、分布、功能和基因表达调控等微观现象转向解决发育、遗传、生态和进化方面等较为宏观的生物学问题。
本文综合叙述了热休克蛋白在进化方面的研究进展,主要包括HSP90、HSP70及sHSPs蛋白结构及其基因的演化特征。
保守的热休克蛋白热休克蛋白家族是目前发现的最保守的蛋白质家族之一,在同一家族内高度同源,而且表现出一定的典型特征。
首先,亲缘关系很远的原核生物和真核生物,它们的热休克蛋白有很高的同源性,例如真核生物HSP70和大肠杆菌的HSP70的同源性大于65%。
其次,不同物种相同细胞器,如细胞质HSP70之间的同源性比同一物种不同细胞器的HSP70之间的同源性高,玉米、矮牵牛、拟南芥、大豆、豌豆、绿藻等细胞质HSP70氨基酸的同源性达75%。
第三,同物种不同类型的热休克蛋白同源性较低, 例如豌豆HSP 18.1,HSP17.7,HSP22.7和HSP21分别属于不同类型,它们之间的同源性低于5 0%。
sHSPs同源序列主要集中在2个区段“保守序列Ⅰ”和“保守序列Ⅱ”,前者位于羧基端一侧,后者靠近氨基端,所有真核生物sHSPs的这2个保守序列之间的片段具有明显的疏水性,说明其空间结构同源性较大,可能与其mRNA有关【7】。
热休克蛋白家族的高度保守性说明它们在生物生命活动中具有重要的作用。
功能保守的热休克蛋白在蛋白质水平上仍然呈现出一定的变异。
在整个生物界里,古细菌(Archae-bacteria)的HSP70是多缺失的信号肽片段(25aa),而在真核生物中热休克蛋白的信号肽则有4个氨基酸的缺失,所有真核生物HSP70的近C-端有一段带混合电荷的区域,该区域的一个半胱氨酸和色氨酸完全保守,可能与底物结合有关【8】,表明氨基酸的替代对热休克蛋白的功能影响是有限的。
植物叶绿体型sHSPs N-端有更大变异性,具有丰富的甲硫氨酸残基,但该特点在无光合作用的真菌中缺失,显示出植物适应陆地环境的特点【9】。
即当植物初次登陆时,原始的光合反应体系受到氧和强光的胁迫,而叶绿体型sHSPs中甲硫氨酸所具有的抗氧化性能保护原始光合体系,保证光合作用的正常进行,这是植物登陆的保护策略之一。
除此之外,被子植物中sHSPs的一、二级结构差异反映出不同物种之间的功能差异,也可能反映出被子植物在进化过程中经历过的特殊环境变化【10】。
尽管热激蛋白氨基酸序列保守, 编码序列变异较低。
但研究者们仍然观察到,随着物种的演变,热休克蛋白基因序列和拷贝数等特性也在不断地变化。
有趣的是这类变化与生境差异( clinal variation)之间存在一定的相关性。
Evge n’ev等【11】发现hsp70基因的拷贝数与不同纬度果蝇居群的行为有潜在的联系。
在hsp70基因内部,Bettencour 等【12】检测到适应不同温度的果蝇居群间存在两个显著的差异,一个大的插入/缺失(indel) 多态位点(56H8/122)和一个单核苷酸多态位点差异;对于来自澳大利亚东部不同纬度的11个居群,插入/缺失位点的频率与纬度呈正相关,由于纬度与温度最大(小)值和平均值呈负相关,暗示温度和热值变化可能对hsp70基因的这一变异频率产生了影响。
Anderson等【13】也发现黑腹果蝇3号染色体右臂上hsr-omega基因的8bp缺失作为一个遗传标记与纬度及最高温(最热月)呈正相关,另一个3端重复的标记则多出现于温带群体中,与冷适应性相关。
适应于较低纬度的Drosophila virilis 有7个hsp70基因拷贝,其热胁迫抗性高于具有5个拷贝的Drosophila lummei,后者在分布上处于较高的纬度【11】,暗示hsp70基因结构与果蝇的适应纬度有相关性。