猪繁殖与呼吸综合征病毒R98弱毒株的分离鉴定与ORFs3～7基因特性研究

第29卷第1期2009年2月郑州牧业工程高等专科学校学报Jour nal of Zhengzho u Co lleg e of A nimal Husbandry Eng ineer ing V o l.29N o.1February 2009收稿日期:2006-12-15基金项目:河南省基础与前沿技术研究计划项目(072300430060),河南省重点科技攻关(072102130023),河南省高校科技创新人才支持计划作者简介:曹素芳(1973- ),女,四川武胜人,博士,副教授。

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因变异分析曹素芳,王 岩,肖松云,唐桂芬(郑州牧业工程高等专科学校,河南郑州450011)摘要:采用RT -P CR 方法对疑似P RRS 阳性病料进行克隆和测序获得了O RF7基因片段。

序列分析结果表明获得的O RF7基因序列不存在缺失现象。

与美洲型代表毒株VR -2332的核苷酸序列的同源性为9113%,氨基酸同源性为9216%;与我国最早的PRR SV 分离株CH -la 相比,核苷酸同源性为9315%,氨基酸同源性为9216%;与我国高致病性P RRSV 毒株SD-Z Q 的核苷酸同源性最高为9811%,氨基酸只有两个不同,同源性为9813%;与本省的Hn-1/06毒株的核苷酸同源性为9713%,氨基酸同源性为9715%;与2004年分离的F J-2株与O RF7基因的核苷酸差异稍大为8514%,氨基酸同源性为8816%;与欧洲型分离株LV 株和N-34株ORF 7基因的核苷酸差异很大,同源性仅为4111%和40%,氨基酸同源性为4711%和4716%。

表明所获得序列的流行毒株属于美洲型,但其毒力已发生了变异。

关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;O RF7基因;变异中图分类号:S852165 文献标识码:A 文章编号:1008-3111(2009)01-0001-03Variation Analysis of Porcine Syndromeand Reproductive and Respiratory Virus ORF 7G eneCAO Su-fang,WANG Yan,XIAO So ng -yun,T ANG Gui-fen(Zhengzhou Co llege o f Animal Husbandry Eng ineering ,H enan Zheng zho u 450011,China)Abstract:T he O RF7genes of patho log ic materia l suspected PR RS w as amplified by R T -PCR 1T he product w as se -quenced after clo ning into pM D18-T v ecto r 1T he sequence was analysed by D NA M A N softw are and com par ed w ith those of V R-2332,CH -la,SD-ZQ ,H n-1/06,F J-2,L v and N -341it show ed that the nucleot ide sequence ho -molog y w ere 9113%,9315%,9811%,9713%,8514%,4111%and 40%respectiv ly 1And the deduced amino acide ho -molog y w ere 9216%,9315%,9813%,9715%,8816%,4711%and 4716%respectivly 1I t indicated that the iso late strain w as related to t he N or th Amer ican P RRSV genoty pe 1A mo ng them the nucleotide sequence and amino acide ho -molog y both wer e the hig hest comparing w ith highly pat ho genic po rcine r epr oductive and r espir ator y syndr ome vir us SD-ZQ strain 1Key words:Po rcine repro ductiv e and respirato ry syndr ome vires;O RF7gene;v ariat ion analy sis猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syn -drome,PRRS)的病原,主要引起母猪早产、流产等繁殖障碍,仔猪、育肥猪呼吸困难[1]。

猪繁殖和呼吸综合征病毒ORF7基因的克隆与序列分析吴国平;刘冰心;郭川;曹敏杰;苏文金【期刊名称】《集美大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2006(011)003【摘要】根据猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)已发表的核苷酸序列,设计了1对特异性引物P1/P2,用RT-PCR扩增了PRRSV福建毒株FJ-1和FJ-2的全长核衣壳蛋白基因(ORF7),将扩增产物连接到pUCm-T载体并转化大肠杆菌DH10B,提取阳性重组质粒进行序列测定与分析.结果表明:FJ-1和FJ-2毒株ORF7基因均为372 bp,编码123个氨基酸,与美洲型参考毒株VR-2332及欧洲型参考毒株LV的核苷酸同源性分别为95.16 %,94.35 %和61.40 %,60.65 %,其推导的氨基酸同源性分别为95.93 %,95.12 %和56.49 %,55.73 %. 研究表明,福建流行的FJ-1和FJ-2属于美洲型PRRSV毒株.【总页数】6页(P217-222)【作者】吴国平;刘冰心;郭川;曹敏杰;苏文金【作者单位】集美大学水产学院、水产生物技术研究所,福建,厦门,361021;厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;集美大学生物工程学院,福建,厦门,361021;厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;集美大学生物工程学院,福建,厦门,361021;集美大学生物工程学院,福建,厦门,361021【正文语种】中文【中图分类】S852.65;Q78【相关文献】1.猪繁殖与呼吸综合征病毒HBKM2株ORF7基因的克隆、序列分析及原核表达[J], 梁望旺;徐涤平;熊忠良;刘泽文;杨克礼;伍锐;邓均华;段正赢;余爱冬;唐文娟2.杂交野猪猪繁殖与呼吸综合征病毒分离及其ORF6、ORF7基因的序列分析 [J], 李冰;卢赫;冯方周;丁壮3.11株猪繁殖与呼吸综合征病毒中国分离株NSP2、ORF5、ORF7基因的序列分析 [J], Li J;吴艳4.猪繁殖与呼吸综合征病毒北京分离株的ORF7克隆与序列分析 [J], 高云;杨汉春5.猪繁殖与呼吸综合征病毒山西分离株ORF7基因序列分析 [J], 樊振华; 刘文俊; 武守艳; 吴忻; 孟帆; 焦福林; 薛翼鹏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

从绿头鸭、珍珠鸡等的粪便中也分离出ＰＲＲＳＶ。

定期的向猪场中引进易感猪，导致猪群整体的免疫水平下降；猪舍的饲养密度过高，猪只流动过于频繁往往会加剧ＰＲＲＳＶ剧了ＰＲＲＳ的持续性感染状况。

因此，造成ＰＲＲＳ持续性感染的因素是多方面的。

而ＰＲＲＳ持续性感染的存在给我们防制ＰＲＲＳ带来了很大障碍，要扑灭ＰＲＲＳ必须采取综合性的防制措施。

２ＰＲＲＳＶ分子生物学研究２．１ＰＲＲＳＶ分子生物学特征概述ＰＲＲＳ属于尼多病毒目（Ｎｉｄｏｖｉｒａｌｅｓ），与鼠乳酸脱氢酶升高症病毒（ＬＤＶ）、马动脉炎病毒（ＥＡＶ）矛ＩＩ猴出血热病毒（ＳＨＦＶ）Ｈ属于动脉炎病毒科（Ａｒｔｅｒｉｖｉｒｄａｅ）［２０］ｏ根据抗原性的差异可将ＰＲＲＳＶ分为两个主要基因型，即以ＬＶ为代表的欧洲型和以ＶＲ一２３３２为代表的美洲型。

两个基因型全基因组序列差异性为４０％。

ＰＲＲＳＶ病毒粒子呈球形，具有囊膜结构，内有一个呈二十面体对称的核衣壳。

核衣壳直径为２５～３５ｎｍ，由Ｎ蛋白包裹基因组ＲＮＡ构成。

完整病毒粒子直径５５－６０ｎｍ。

病毒对有机溶剂如氯仿、乙醚等敏感。

完整ＰＲＲＳＶ病毒粒子没有血凝活性，不凝集猪、绵羊、山羊、牛、兔、豚鼠、鸡、鸭、鹅和人Ｏ型红细胞，但病毒用非离子除垢剂和脂溶剂（乙醚和吐温．８０等）处理后，则可凝集小鼠的红细胞，同时也丧失了感染性。

ＰＲＲＳＶ的热稳定性差，对温度和湿度比较敏感，５６。

Ｃ４５ｍｉｎ可以将其灭活。

ＰＲＲＳＶ在潮湿的环境具有具有较好的稳定性，而在干燥的条件下病毒迅速失去感染性。

ＰＲＲＳＶ在小于ｐＨ５或大于ｐＨ７的条件下，其感染力可下降９０％以上【２１｜。

ＰＲＲＳＶ另一个重要的生物学特性是对巨噬细胞（ＰＡＭ）的亲嗜性，ＰＡＭ是首选靶细胞，病毒对多种巨噬细胞具有亲噬性，包括猪肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）、外周血单核细胞、肺血管内巨噬细胞（ＰＩＭ）等。

接种ＰＡＭ后２４～７２ｈ可观察到特异的ＣＰＥ。

病毒在猪脾巨噬细胞、脑小胶质细胞以及传代细胞系ＭＡ一１０４、Ｍａｒｃ．１４５、ＣＬ２６２１和ＣＲＬｌｌｌ７等均可复制。

猪繁殖与呼吸综合征病毒病原学研究进展作者：于忠良，温书香，安利民来源：《畜牧兽医科学》 2018年第1期摘要：本文主要对猪繁殖与呼吸综合征病毒病原学特点进行详细叙述，以期为相关研究人员对此病毒有更深入的了解。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒病；理化性质；基因组结构中图分类号：S858. 28文献标识码：BDOI：10. 3969/j．issn．2096-3637. 2018. 01. 0101猪繁殖与呼吸综合征病毒分类和结构猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV)隶属套式病毒目，动脉炎病毒科，动脉炎病毒属。

在电子显微镜下，猪繁殖与呼吸综合征病毒呈椭圆形或者类似球型。

病毒粒子的直径在48到83nm，核衣壳的直径在25到30nm，囊膜表面有纤突。

PRRSV病毒的遗传物质为单链RNA。

2猪繁殖与呼吸综合征病毒的理化性质1992年Benfield等人报道称猪繁殖与呼吸综合征病毒在氯化铯中的密度在1.13到1.19g/cm3。

PRRSV病毒对热源比较敏感，在高温条件下可以迅速死亡。

在低温条件下，较长时间也可以灭活。

如在37℃或者56℃不超过th均可以灭活。

PRRSV能够在血清中维持活力，在-70℃的条件下仍然保持感染性，在4℃的条件下至少存活1个月。

PRRSV在潮湿的环境中活性和感染力都比较强，而在干燥的环境中活性非常低，容易失活。

PRRSV是有囊莫病毒，根据相似相容原理，该病毒对有机溶剂比较敏感。

3猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组结构猪繁殖与呼吸综合征病毒的全基因组序列已经全部测完，根据不同地区分离到的PRRSV病毒核酸的序列差异，Allende等人在1999年将猪繁殖与呼吸综合征病毒分为2个基因型，即欧洲型和美洲型。

1995年，我国养猪场爆发流行猪繁殖与呼吸综合征病，经过测序发现我国流行株是美洲型。

2007童光志等人报道，在2006年我国爆发流行的猪繁殖与呼吸综合征病病毒仍然是美洲型。

PRRSV基因组病毒与其它动脉炎病毒科的病毒类似。

动物生产的免疫档案，并对本地各类猪可能感染的疾病进行调查，做好猪的进行免疫接种工作。

3.2　做好药物保健工作，增强猪群抗病能力规模越大的养殖场越怕遇见大型的传染类疾病，即饲养人常提到的猪瘟。

猪瘟一旦发生想要消灭则太难，所以饲养人应防患于未然，首先做好相应的防疫接种工作，其次是要做好药物保健工作，进一步加强猪的抗病能力。

总之，规模猪场保育猪养殖管理过程，要结合具体工作实际，不断制定完善的养殖模式，以提高管理能力，进一步保证养殖经济效益。

摘要：本文就当前我国猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）不同毒株鉴别检测方法的研究与应用进展进行综述，对提升我国猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的综合防控能力具有一定的参考价值。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒；不同毒株；鉴别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒具有欧洲型和美洲型两个基因型，欧洲型毒株一般不引起严重的临床症状，但易导致混合感染，美洲型毒株可引起严重的临床症状以及感染猪的大批量死亡。

自1995年开始美洲型P R R S V在我国开始流行，流行期间不断发生变异，2006年以J X A1毒株为代表的高致病性美洲型P R R S V 在我国开始流行，高致病性P R R S V的致病性方面发生了很大变化，引起来了猪群的大批量死亡，虽然短时间内即开发出了相应的商品化疫苗，但一直未能完全控制高致病性P R R S V 的流行，2013年以来，一种致病性介于经典株与高致病性毒株之间的美洲型P R R S V开始流行，由于该毒株与美国N A DC30毒株的同源性很高，因此被称为NADC30-like毒株，2011年我国又发现了欧洲型P R R S V感染的病例。

目前，我国PRRSV的流行毒株仍以美洲型为主，但经典株、高致病性株、NADC30-like毒株并存，同时欧洲型的感染时有发生，使PRRSV的鉴别诊断和防治难度加剧。

本文综述了PRRSV不同毒株鉴别检测方法的研究与应用进展，为提升我国PRRSV的综合防控能力提供参考。

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起怀孕母猪发热、厌食、早产、晚期流产、死胎、弱仔和木乃伊胎等繁殖障碍以及仔猪的呼吸系统症状和高病死率的接触性传染病。

该病于1987年首次在北美发现[1]，1991年欧洲发生本病,并在荷兰首次分离到PRRSV，命名为Lelystad病毒(LV) [2]；美国于1992年分离PRRSV，命名为VR-2332[3-4]；郭宝清等[5]于1996年首次从我国疑似PRRS病猪中分离到PRRSV，从而证实了该病毒在我国的存在。

本病可经水平和垂直两种方式传播，其流行已给养猪业造成了巨大的经济损失。

PRRSV是一种有囊膜的正股单链RNA病毒，与马动脉炎病毒（EAV）、鼠乳酸脱氢酶病毒（LDV）和猴出血热病毒（SHFV）同属于最近分类的动脉炎病毒科(Arteriviridae)[6]。

PRRSV病毒基因组长约15kb，含8个开放阅读框架(ORFs)，LeCall等［7］研究表明，8个开放阅读框架中ORF7高度保守，即使是在体内传代也很少引起ORF7的核苷酸序列变异。

此外，ORF7编码的核衣壳蛋白（N蛋白）具有良好的免疫原性及反应原性[8-9]，机体产生的PRRSV抗体主要是针对N蛋白。

因此，N蛋白常可作为诊断抗原来检测PRRSV。

本实验以ORF7基因为研究对象，应用分子克隆技术对ORF7基因进行扩增、构建原核表达载体、序列分析，为今后进一步深入研究该片段奠定基础。

1材料1.1病毒、细胞及载体PRRSV毒株（北京分离株）、猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因原核表达载体的构建及序列分析张永富1,2,3，马国文1，刘月焕2，刘永宏2,4，李明刚3，张秋雨3，刘锋3(1.内蒙古民族大学动物科技学院内蒙古通辽028000；2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京100089；3.北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司,北京100043；4.内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特010018)摘要：根据GenBank中美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF7基因序列，设计合成一对引物，应用RT-PCR方法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的ORF7基因（N基因）。

猪繁殖与呼吸综合征病毒新型基因工程疫苗研究的开题报
告
1、项目背景
猪繁殖与呼吸综合征是一种由家猪繁殖呼吸道综合征病毒（PRRSV）引起的高传染性疾病，其症状包括呼吸困难、流涕、发热、疲劳等。

该疾病对猪的健康和养殖业
产生了重大影响，致使猪的生长速度减慢，肉质和产量受到影响，经济损失极大。

目前，传统的疫苗已经无法完全预防和控制PRRSV的感染，因此发展新型基因工程疫苗是解决这一问题的关键。

2、研究目的
本项目旨在研究猪繁殖与呼吸综合征病毒新型基因工程疫苗的制备、评估和应用，为预防和控制该疾病提供新的解决方案。

3、研究内容
（1）PRRSV毒株的筛选：根据不同地区PRRSV毒株的差异，筛选出适合我国地域的PRRSV毒株。

（2）疫苗构建：使用基因工程技术，将PRRSV毒株的变异抗原基因序列克隆至适宜的表达载体中，并经过多次酵母重组和转染，产生新型基因工程疫苗。

（3）疫苗评估：通过实验室和动物检测评估新型基因工程疫苗的免疫效果和安
全性。

（4）疫苗应用：在临床应用中进行疫苗免疫实验，并根据实验结果对其疗效和
投入效益进行分析。

4、预期成果
通过本项目的研究，将得到猪繁殖与呼吸综合征病毒新型基因工程疫苗的制备技术，为解决这一疾病给我国农业发展带来的困境提供技术支持。

此外，新型基因工程
疫苗的开发还将为家畜养殖业的信息化、智能化和产业升级提供新的理论和实践支持。

猪繁殖与呼吸综合征病毒转录调控机制研究的开题报告标题：猪繁殖与呼吸综合征病毒转录调控机制研究研究背景和意义：猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus，PRRSV）是一种造成猪医学上重要疾病的病毒，其主要特点是严重影响了猪价值链的发展，导致了严重的经济损失。

PRRSV的生物学特性和致病机制，以及病毒-宿主相互作用机制研究一直是当前研究的热点和难点，其对于控制和预防PRRS疾病具有重要的理论和应用价值。

研究内容和目标：本研究项目通过综合运用定量PCR、免疫印迹、RNA测序和生物信息学分析等手段，重点研究PRRSV的转录调控机制，从而深入探究PRRSV感染过程中的宿主细胞反应和病毒感染逃逸机制。

旨在揭示PRRSV与宿主细胞相互作用的分子机制，为进一步阐明PRRSV的致病机理、防制和治疗提供重要的基础理论支撑。

研究方法和流程：1. 构建PRRSV-AY病毒株感染PAMs、Marc-145和CHO等不同细胞系。

2. 系统研究不同细胞系PRRSV感染蛋白表达、细胞凋亡等基本生物学特性，并利用RNA测序技术进行以侵染后3、6、12、24小时为时间点的转录组测序。

3. 利用生物信息学和统计学分析转录组测序数据，筛选出差异表达基因，利用KEGG等通路富集分析揭示PRRSV感染过程中的重要信号通路。

4. 利用免疫印迹、定量PCR等方法检测有代表性的转录组富集通路成员的表达水平，分析其受PRRSV感染影响的具体机制。

5. 通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，对感染过程中的典型基因敲除，验证其对PRRSV感染逃逸和宿主细胞免疫反应的影响。

预期结果：通过对PRRSV的转录调控机制进行深入研究，揭示病毒感染和宿主反应的分子机制，为进一步阐明PRRSV的致病机理和防治提供新的理论和应用基础。

同时，本研究也具有一定的参考价值，可为其他病毒的研究提供方法借鉴和理论支持。

重庆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株的分子遗传与变异分析的开题报告题目：重庆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株的分子遗传与变异分析背景：近年来，猪呼吸道疾病常常给养猪业带来很大的经济损失，其中猪繁殖与呼吸综合征(Swine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是引起猪呼吸道疾病的主要病原体之一。

PRRS是一种由PRRS病毒引起的病毒性疾病，主要通过空气传播和直接接触传播，对肺部组织和泌尿生殖系统造成严重损害，影响猪的生长和繁殖。

重庆地区是我国猪肉生产的重要区域之一，猪繁殖与呼吸综合征在该地区也广泛存在。

病毒的分子遗传与变异特性是影响病毒毒力、毒株变化和流行特性的关键因素。

因此，对PRRS病毒分离株的分子遗传与变异分析具有重要的意义，对于了解病毒的分布和变异规律，开展有效的预防和控制具有重要的科学意义和应用价值。

研究目的：本研究旨在分离和鉴定重庆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株，对其分子遗传与变异特性进行分析，为防控该病提供基础数据和科学依据。

研究内容：1. 采集重庆地区猪肺和组织样本，进行PRRS病毒的分离和鉴定。

2. 对所分离的PRRS病毒株进行全基因组测序和分析，对其基因组结构、ORF组成和序列特征进行分析。

3. 对所分离PRRS病毒株进行基因型鉴定，比较其与外源PRRS病毒的相似性和差异性。

4. 对所分离PRRS病毒株进行病毒毒力和致病性实验，比较其与外源PRRS病毒的差异。

5. 分析重庆地区PRRS病毒株的变异规律，比较其与国内其他地区和外源PRRS病毒的差异，探讨其流行特征和演化机制。

研究方法：1. 采集样本：采集重庆地区猪群的肺和淋巴组织样本，用氯仿和冰乙酸对样品进行RNA提取、精制和扩增。

2. 病毒分离和鉴定：采用细胞培养、RT-PCR和免疫荧光技术对样品进行病毒分离和鉴定。

3. 病毒基因组测序和分析：对所分离的PRRS病毒全基因组进行测序和分析，包括流程的第一步是RNA提取，RNA提取后通过RT-PCR进行扩增，并进行Sanger测序或高通量测序（如Illumina或PacBio）。

猪繁殖呼吸综合征病毒S3毒株的分离及其免疫特性研究祁贤;张婉华;叶向阳;朱永军;陆鑫芳【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2002(023)004【摘要】从某猪场仔猪体内分离到一株PPRSV毒株,该毒株能在Marc-145细胞上增殖产生致细胞病变,该病变能被PPRSV美洲型阳性血清所抑制,不被乙脑病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒阳性血清所抑制,经美洲型PPRSV荧光抗体染色呈阳性反应,电镜观察到直径55～60 nm的病毒粒子,接种阴性仔猪未见临床症状异常,但抗体检测阳性.命名该分离毒为PPRSV-S3毒株.在S3弱毒株分离鉴定的基础上,进一步在猪体上对其致病性和免疫力进行研究.S3毒株接种仔猪后,仔猪不表现任何症状,也不向外排毒.4～5周龄的仔猪接种S3株后可产生坚强的免疫力,免疫后4～6个月能抵抗强毒攻击.后备母猪配种前2～3周免疫接种S3株,怀孕90～95 d攻强毒,未发生流产、死胎、木乃伊胎、产弱仔等繁殖障碍现象.结果表明,S3是一株自然分离的弱毒株,且具有良好的安全性和免疫力.【总页数】4页(P87-90)【作者】祁贤;张婉华;叶向阳;朱永军;陆鑫芳【作者单位】上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106;上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106;上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106;上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106;上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106【正文语种】中文【中图分类】S852.65【相关文献】1.猪繁殖与呼吸综合征病毒17-ZJ-HZ毒株的分离鉴定与分子流行病学分析 [J],巴少波;石林;李群景;刘正奎;陈琳;王晓杜;宋厚辉2.一株NSP2蛋白连续缺失48个氨基酸的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒株的分离及其主要生物学特征的研究 [J], 白云;刘益民;陈家锃;张洪亮;张秋月;王倩;张武超;叶超;彭金美3.猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株的分离鉴定 [J], 阮海宇; 郭振华;李翔; 乔松林; 张改平4.8株分离自四川、贵州地区猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株的全基因组特征分析[J], 周泷;康润敏;张毅;谢波;于吉锋;李春;张斌;汤承;王红宁5.猪繁殖与呼吸综合征病毒R98弱毒株的分离鉴定与ORFs3～7基因特性研究 [J], 李玉峰;姜平;蔡宝祥;简中友因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗弱毒株的克隆与鉴定蔡家利;蔡宝祥;等【期刊名称】《西南农业大学学报》【年(卷),期】1999(21)2【摘要】自美国和荷兰引进的猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）疫苗弱毒株，经MARC-145细胞培养复壮，采取有限稀释法对疫苗株进行纯化克隆，克隆毒株在MARC-145细胞上培养72h出现典型的细胞病变（CPE）。

取接种病毒后36h的MARC-145细胞作超薄切片电镜观察，于感染细胞浆内及空泡化内质网内均有散上的病毒培养物初步纯化作用抗原，检测了PRRS可疑猪场的血清80份，其中阳性34份，阳性率为42.5%，并探讨了疫苗毒株作为抗原的可能性。

【总页数】5页(P115-119)【作者】蔡家利;蔡宝祥;等【作者单位】西南农业大学动物养殖学院，重庆400716;南京农业大学动物医学院，南京210095【正文语种】中文【中图分类】S858.285.3【相关文献】1.猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒株嵌合感染性克隆的构建及鉴定 [J], 吕健;韦祖樟;高飞;郑海红;童光志;袁世山2.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株致弱毒株特异性抗原表位的鉴定 [J],姜一峰;李国新;闫丽萍;张善瑞;童光志;周艳君;田志军;安同庆;肖燕;韦天超;王瑜;彭金美;于海3.猪圆环病毒2型ORF2和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5重组杆状病毒疫苗的研究 [J], 张翔峰;何逸民;曹宗喜;孔留五;张得玉;秦宏阳;张桂红4.高致病性猪繁殖与呼吸综合征GD强弱毒株感染对猪外周血淋巴细胞亚群的影响[J], 张文利;王海光;孙丰廷;刘灿;英聪;宁宜宝5.猪繁殖与呼吸综合征病毒R98弱毒株的分离鉴定与ORFs3～7基因特性研究 [J], 李玉峰;姜平;蔡宝祥;简中友因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子生物学研究进展
王永志;曹三杰;文心田
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2005(26)4
【摘要】猪繁殖与呼吸综合征是目前养猪业中一种严重的病毒性传染病,引起猪严重繁殖障碍和呼吸道疾病.该病的病原体属于动脉炎病毒属,是一种不分节段的单股正链RNA病毒,含有8个开放阅读框(ORFs),ORF1编码非结构蛋白,ORF2～ORF7编码结构蛋白.其中ORF7编码的核衣壳(N)蛋白和ORF6编码的非糖基化基质(M)蛋白为优势结构蛋白.猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组存在广泛的遗传变异性,M蛋白和N蛋白在所有的毒株之间相对比较保守,可作为血清学诊断的靶抗原.文章就猪繁殖与呼吸综合征病毒在分子生物学方面的研究情况做作一综述.
【总页数】4页(P50-53)
【作者】王永志;曹三杰;文心田
【作者单位】四川农业大学动物科技学院,四川雅安,625014;四川农业大学动物科技学院,四川雅安,625014;四川农业大学动物科技学院,四川雅安,625014
【正文语种】中文
【中图分类】S857.22
【相关文献】
1.猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展 [J], 张梅;刘光瑞
2.猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展 [J], 李国娟;田永强;李建强;李宝
玉;柳纪省
3.猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展 [J], 李彩珠
4.猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展 [J], 袁宝;任文陟
5.猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染研究进展 [J], 温永俊;蔡雪辉
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猪繁殖与呼吸综合征实验室检测方法研究进展作者：于自民鲍玉芳何召庆来源：《兽医导刊》 2015年第6期于自民鲍玉芳何召庆/ 中国动物保健品有限公司猪繁殖与呼吸综合征俗称“蓝耳病”，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起，主要侵害不同日龄、品种猪的呼吸和生殖系统，在发病过程中表现为仔猪断奶前高死亡率、育成猪呼吸困难、母猪繁殖障碍为特征的高度接触性病毒传染病，近年来已成为严重危害全球养殖业最严重的疾病之一。

PRRSV感染引起的病毒血症、持续感染等，对我国养猪业疫病防控构成威胁并造成惨重的经济损失，目前是影响我国养猪业最重要疫病之一。

本文拟对该病的实验室检测方法进行归纳总结，以利于快速准确地诊断该病。

一、PRRS 概述PRRS 是猪“高热综合征”的主要疫病之一，属于免疫抑制性疾病，常常引起继发感染，造成免疫失败等。

因此国际兽疫局将其列为B 类传染病，我国将其列为二类传染病。

20 世纪80 年代末美国南部首次报道了PRRSV，随后在德国、加拿大、荷兰一些国家广泛传播。

由于起初不清楚何种病原体引起，根据临床上断奶仔猪呼吸困难、严重肺炎、生产性能下降、母猪严重的繁殖障碍等，称之为“猪流行性和呼吸道综合征”、“猪蓝耳病”、“猪神秘病”等。

1991 年荷兰学者Wensvoort 等用猪肺泡巨噬细胞（PAM）首次分离病毒（LV 株），1992 年美国学者分离到VR-2332 株病毒。

1995 年我国北京地区暴发PRRS，随后类似PRRS 疾病蔓延到华东、华北等地区，1996 年经哈尔滨兽医研究所鉴定为PRRSV 感染。

2006 年夏以来我国又暴发了以变异美洲型病毒（JX-A1 为代表的Nsp2 缺失）为病原的高致病性蓝耳病，据初步统计，猪感染PRRSV 的发病率达50% 以上，死亡率20% ～ 100%。

分子流行病学调查数据显示，2006-2008 年高致病性PRRSV 毒株占国内流行株的78%，2009 年占86%，2010-2011 年占88.9%，加重了许多地区养猪业的经济负担。

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因变异分析曹素芳;王岩;肖松云;唐桂芬【期刊名称】《郑州牧业工程高等专科学校学报》【年(卷),期】2009(029)001【摘要】采用RT-PCR方法对疑似PRRS阳性病料进行克隆和测序获得了ORF7基因片段.序列分析结果表明获得的ORF7基因序列不存在缺失现象.与美洲型代表毒株VR-2332的核苷酸序列的同源性为91.3%,氨基酸同源性为92.6%;与我国最早的PRRSV分离株CH-la相比,核苷酸同源性为93.5%,氨基酸同源性为92.6%;与我国高致病性PRRSV毒株SD-ZQ的核苷酸同源性最高为98.1%,氨基酸只有两个不同,同源性为98.3%;与本省的Hn-1/06毒株的核苷酸同源性为97.3%,氨基酸同源性为97.5%;与2004年分离的FJ-2株与ORF7基因的核苷酸差异稍大为85.4%,氨基酸同源性为88.6%;与欧洲型分离株LV株和N-34株ORF7基因的核苷酸差异很大,同源性仅为41.1%和40%,氨基酸同源性为47.1%和47.6%.表明所获得序列的流行毒株属于美洲型,但其毒力已发生了变异.【总页数】4页(P1-3,14)【作者】曹素芳;王岩;肖松云;唐桂芬【作者单位】郑州牧业工程高等专科学校,河南,郑州,450011;郑州牧业工程高等专科学校,河南,郑州,450011;郑州牧业工程高等专科学校,河南,郑州,450011;郑州牧业工程高等专科学校,河南,郑州,450011【正文语种】中文【中图分类】S852.65【相关文献】1.北疆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因克隆与遗传演化分析 [J], 吴鹏;张勋;梁田;陈新凯;肖媛媛;盛金良2.猪MBL-C及DUSP1基因变异对猪繁殖与呼吸综合征病毒抗性影响的初步分析[J], 袁焰平;任钰为;江一波;贾启涛;徐亚杰;肖犟;方瑞;李其安;赵俊龙3.杂交野猪猪繁殖与呼吸综合征病毒分离及其ORF6、ORF7基因的序列分析 [J], 李冰;卢赫;冯方周;丁壮4.11株猪繁殖与呼吸综合征病毒中国分离株NSP2、ORF5、ORF7基因的序列分析 [J], Li J;吴艳5.猪繁殖与呼吸综合征病毒山西分离株ORF7基因序列分析 [J], 樊振华; 刘文俊; 武守艳; 吴忻; 孟帆; 焦福林; 薛翼鹏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株遗传进化分析及通用实时荧光RT-PCR检测方法的建立和应用猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus, PRRSV)引起的一种危害全球养猪业的病毒性传染病。

目前,在我国猪群中经典毒株、高致病性毒株和类NADC30毒株等美洲型PRRSV以及欧洲型PRRSV同时存在,导致国内PRRS流行状况十分复杂。

为掌握我国PRRSV的流行状况及其遗传变异特点,本研究对2008-2015年间在国内分离的61株PRRSV毒株进行全基因测序和序列比对,并对主要易变区Nsp2、GP5、GP3蛋白进行分析。

全基因分析结果显示,61个毒株中有5个欧洲型PRRSV和56个美洲型PRRSV。

56个美洲型PRRSV中有2个类NADC30 PRRSV和54个高致病性PRRSV。

54个高致病性PRRSV分离株之间的同源性为95.2%-99.9%,与高致病性PRRSV代表毒株JXA1的同源性为97.2%～99.3%。

2个类NADC30分离株之间的同源性为99.9%,与类NADC30 PRRSV代表毒株NADC30的同源性为95.4%。

5个欧洲型分离株之间的同源性为84.4%～99.7%,与欧洲代表毒株LV的同源性为87.2%-90.9%。

重要蛋白基因分析结果显示,PRRSV在不断变异中,以非结构蛋白Nsp2和结构蛋白GP5的变异最快。

61个分离株在非结构蛋白Nsp2部位均发生了 1-150aa 不等的缺失。

大部分分离株在重要结构蛋白GP5发生氨基酸突变,尤其是糖基化位点的位置和数量发生了不同程度的变化。

欧洲型分离株GP3高变区含有多个缺失及突变。

我们还发现了 4株新的PRRSV基因缺失毒株,这些毒株核苷酸或氨基酸的缺失位置及数量在中国尚未见相关报道。

猪繁殖与呼吸综合征病毒的控制策略研究进展邹伟斌; 林梓栋; 齐冬梅【期刊名称】《《中国兽医杂志》》【年(卷),期】2018(054)011【总页数】4页(P66-69)【作者】邹伟斌; 林梓栋; 齐冬梅【作者单位】广东永顺生物制药股份有限公司广东广州511356【正文语种】中文【中图分类】S852.65猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种具有高度传染性的猪病毒性疾病,其主要临床症状表现为母猪繁殖障碍和仔猪呼吸困难与高死亡率,对世界猪养殖业造成了严重的经济损失。

免疫PRRS 灭活疫苗或减毒活疫苗是目前防控猪繁殖与呼吸综合征的主要手段,但由于PRRSV 具有抗原变异快、持续性感染和免疫抑制等特点,临床上常常会出现免疫失败或疫情加重的情况。

目前我们对PRRSV 的病毒学、起源和进化的了解以及宿主对PRRSV 免疫应答的认知还十分不足,这极大地阻碍了对根除PRRSV 有效方法的开发。

本文主要通过对PRRSV 控制策略和技术研究的最新进展进行综述,为未来PRRSV 的控制和预防以及PRRS 新型疫苗的研发提供参考。

1 PRRSV 的简介1987 年,美国北卡罗来纳州的农场暴发了一种神秘猪病,主要表现为母猪繁殖障碍、断奶猪肺炎和生长发育猪的死亡率增加[1]。

1991 年,该神秘猪病的病原在欧洲被分离发现,是一种以前未被鉴定的RNA 病毒,并被命名为莱利斯塔德病毒(Lelystad virus)[2]。

随后北美地区也很快分离到了病原,并最初称之为猪不育和呼吸综合征病毒(Swine infertility and respiratory syndrome virus,SIRSV)。

1992 年,这种病原被引进了新的命名“猪繁殖与呼吸综合征病毒”[1],后来被广泛接受并被沿用至今。

从两个不同大陆分离的PRRSV 被分为两个基因型：1 型(或称为欧洲型,代表株为Lelystad 株)和2 型(或称为北美型,代表株为VR -2332 株)[3],两个基因型之间的基因相似率约为60%。