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检验科浆膜腔积液常规检测标准操作规程1.【目的】为了使浆膜腔积液常规检验标准化，特制定本规程。
2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
3.【样本类型及实验前准备】3.1样本类型：新鲜浆膜腔积液3.2患者准备：患者处于安静状态精神、体力、情绪等因素的影响较小。
3.3容器添加剂类型：乙二胺四乙酸二钠或二钾（EDTA钠盐或钾盐）抗凝管3.4实验试剂：冰醋酸3.5【标本的采集和保存】由穿刺取得的标本为防止细胞变性，出现凝块或细菌破坏、溶解等，送检及检查必需及时。
为防止凝固，最好加入1g/L乙二胺四乙酸二钠或二钾（EDTA钠盐或钾盐）抗凝，每0.1ml可抗凝6ml浆膜腔积液，及时完成细胞涂片检查。
PH测定应用肝素抗凝专用采样器。
4.【测定原理】蛋白定性原理：渗出液中可含多量浆膜粘蛋白，在酸性条件下可产生白色雾状沉淀。
5.【操作步骤】5.1一般性状检查5.1.1记录标本送检量、颜色及透明度；有无凝固物质或沉淀物，可按浆液性、粘液性、黄色透明、脓样混浊、乳糜样、血样等报告。
测比密前，标本应充分混匀，其方法与尿比重测定相同。
量少时可用折射计法测定。
5.2浆膜粘蛋白定性试验（Rivals应）5.2.［原理］:渗出液中可含多量浆膜粘蛋白，在酸性条件下可产生白色雾状沉淀。
5.2.［操作］:取1ml量筒，加蒸馏水1ml，滴入冰乙酸0.1ml（PH3-5）充分混匀，静止数分钟，将穿刺液靠近量筒液面，逐滴轻轻滴下，在黑色背景下，观察白色雾状沉淀的发生及其下降速度等。
5.2.［结果判断］:阴性：清晰不显雾状。
阳性（土）：渐呈白雾状。
（+）：加后呈白雾状。
（2+）:白雾云状。
（3+）:白浓云状。
5.2.［附注］:在滴下穿刺液后，如见浓厚的白色云雾状沉淀很快地下沉，而形成较长的沉淀物，即Rivalt反应阳性；如产生白色混浊不明显，下沉缓慢，并较快消失者为阴性反应。
第十三章浆膜腔积液检验正常情况下，人体的胸腔、腹腔和心包腔、关节腔统称为浆膜腔，内有少量的起润滑作用的液体。
病理情况下，浆膜腔内有大量液体潴留而形成浆膜腔积液。
根据产生的原因及性质不同，将浆膜腔积液分为漏出液和渗出液。
漏出液与渗出液产生机制和原因见表1-13-1。
表1-13-1漏出液与渗透液产生机制和原因第一节胸腔、腹腔和心包腔积液检查本节考点：（1）标本采集与保存（2）理学检查（3）化学检查（4）显微镜检验（5）质量控制（6）临床应用（一）标本采集与保存积液标本分别行胸腔穿刺术、腹腔穿刺术和心包腔穿刺术采集。
胸腔穿刺适应证为：①原因不明的积液或伴有积液症状。
②需进行诊断性或治疗性穿刺的患者。
腹腔穿刺的适应证为：①新发生的腹腔积液。
②已有腹腔积液且有突然增多或伴有发热的患者。
③需进行诊断或治疗性穿刺的患者。
心包腔穿刺的适应证为：①原因不明的大量心包积液。
②有心包填塞症状需进行诊断性或治疗性穿刺的患者。
穿刺成功后，留取中段液体于无菌的容器内。
理学检查、细胞学检查和化学检查各留取2ml，厌氧菌培养留取1ml，结核杆菌检查留取1Oml。
由于积液极易出现凝块、细胞变性、细菌破坏和自溶等，所以留取标本后应及时送检，不能及时送检的标本可加入适量乙醇以固定细胞成分。
理学检查和细胞学检查宜采用EDTA-Na2抗凝，化学检查宜采用肝素抗凝。
另外，还要留取1份不加任何抗凝剂，用于检查积液的凝固性。
（二）理学检查1.量：正常浆膜腔内均有少量的液体。
病理情况下液体增多，其量与病变部位和病情严重程度有关，可由数毫升至上千毫升。
2.颜色：肉眼观察浆膜腔积液颜色，分别以淡黄色、黄色、红色、白色、绿色等描述。
一般渗出液颜色随病情而改变，漏出液颜色较浅。
正常浆膜腔液为淡黄色。
病理情况下可出现不同的颜色变化及临床意义（表1-13-2）。
表1-13-2 浆膜腔积液的颜色变化及临床意义的浑浊，乳糜液因含有大量脂肪呈浑浊外观。
漏出液因其所含细胞、蛋白质少，且无细菌而呈清晰透明外观。
实验十四浆膜腔积液检查实验学时：4学时实验类型：综合性实验【实验目的与要求】1.熟悉牛鲍氏计数板结构原理及应用。
2.熟悉浆膜腔积液常规检查方法。
3.掌握渗出液与漏出液的鉴别。
一．牛鲍氏计数板结构原理及使用方法【实验原因及结构】牛鲍氏计数板即血细胞计数板（图1-1），计数板中央有两个刻度平台（即细胞计数池），每个平台划分为9个大方格，每个大方格长宽各为1mm，其面积为1mm2，加盖玻片后的深度为0.1mm，故每一大方格的容积为0.1mm3（0.1ul）。
四角的四个大方格等分为16个中方格，作为白细胞计数用（图1-2）；中央一大方格用双线等分为25个中方格，每个中方格又等分为16个小方格，作为红细胞计数之用（图1-2，图1-3）。
【实验方法与步骤】直接用微量吸管吸取一滴浆膜腔积液，充入改良牛鲍氏计数板上下两个计数池，静置2-3min后，低倍镜下计数两个计数池的四角和中央大方格，共十个大方格内的细胞数，此为浆膜腔积液细胞数/ul，×106即得出每升浆膜腔积液细胞总数。
为了准确计数，对于压在线上的细胞计数可采用数上不数下，数左不数右的原则，以避免重复或漏数。
见图1-4。
图1-4 细胞计数原则（计数黑点，不计数白点）二．浆膜腔穿刺液一般性状检查人体的胸腔、腹腔、心包腔统称为浆膜腔，生理状态下，腔内有少量液体起润滑作用，不易采集到。
病理状态下，腔内有多量液体潴留，称为浆膜腔积液。
根据积液产生原因及性质不同将其分为漏出液和渗出液两大类。
漏出液为非炎性积液，形成原因有：毛细血管流体静压增高、血浆胶体渗透压减低及淋巴回流受阻。
渗出液为炎性积液，炎性时由于微生物的毒素、组织缺氧以及炎性介质等作用使血管内皮细胞受损，导致血管通透性增加以致血液中大分子物质如清蛋白、球蛋白、纤维蛋白原等及各种细胞成分都能渗出血管壁。
渗出液形成主要原因：①感染性：如化脓性细菌、分枝杆菌、病毒或支原体等。
②非感染性：如外伤、化学性刺激（血液、尿素、胰液、胆汁和胃液）。
