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雷帕霉素逆转胰岛素抵抗的动物实验郭颖;高毅;刘永光【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2008(29)3【摘要】目的探讨新型免疫抑制剂雷帕霉素对胰岛素抵抗的作用及可能机制.方法利用肥胖胰岛素抵抗动物模型(obob 小鼠),观察雷帕霉素对小鼠空腹血糖和胰岛素水平的影响,研究雷帕霉素对小鼠胰岛素抵抗的治疗作用及对循环细胞因子IL-1β,IL-6和TNF-α水平的影响,探讨雷帕霉素的可能作用机制.结果雷帕霉素治疗后小鼠的空腹血糖水平明显下降,与对照组比较有统计学意义,空腹胰岛素水平也下降,曲线下面积的比较差异有显著(8.90±0.95 vs 5.27±0.73,P＜0.05);循环中TNF-α[(31.7±3.4)vs(37.7±1.1)pg/ml]和IL-1β[(18.0±3.2)vs(29.5±1.1)pg/ml]水平虽也下降,但差异无显著性,与之对应,IL-6[(46.2±9.8)vs(85.6±5.3)pg/ml]的水平明显降低(P＜0.05).结论雷帕霉素能提高 obob 小鼠胰岛素敏感性,有治疗改善肥胖诱导的胰岛素抵抗的作用.【总页数】3页(P387-389)【作者】郭颖;高毅;刘永光【作者单位】南方医科大学珠江医院器官移植科,广州,510282;南方医科大学珠江医院器官移植科,广州,510282;南方医科大学珠江医院器官移植科,广州,510282【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.雷帕霉素逆转卵巢癌细胞系SKOV3/DDP顺铂耐药及其机制探讨 [J], 徐国才;王东雁;卢淮武;林仲秋;张丙忠;2.新型生物可降解聚合物雷帕霉素靶向洗脱支架预防支架内狭窄的动物实验研究[J], 邱洪;褚雁;袁卫民;田毅;周燕文;孟亮;唐跃;罗彤;胡小莹;吴超;杨跃进;高润霖;唐智荣;阮英茆;徐新林3.紫杉醇与雷帕霉素复合药物涂层支架预防冠脉再狭窄动物实验研究 [J], 王浩;黄丽洁;李泱;张文辉;高伟;栗竞;李晓英;文毅;徐占稳;苟鹏4.两种释放速度雷帕霉素涂层支架预防支架内再狭窄的动物实验 [J], 徐卫亭;洪小苏;陈建昌;霍勇;陈明;洪涛;高炜5.雷帕霉素对核苷类逆转录酶抑制剂治疗人类免疫缺陷病毒感染并发神经病理性痛的影响 [J], 武良玉;程灏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
药物洗脱支架的研究进展【摘要】经皮腔内冠状动脉形成术及支架置入术已经广泛应用于临床，成为冠心病常规治疗的方法之一，但术后再狭窄的问题一直困扰着广大介入工作者。
药物洗脱支架的问世，为解决支架术后再狭窄带来了展新的曙光。
本文简要综述药物洗脱支架的应用现状以及新型药物支架的研发进展。
【关键词】药物洗脱支架；支架内再狭窄；生物工程支架近年来，经冠状动脉介入术（percutaneous translum inal coronary intervention，PCI）已经超过冠脉旁路移植手术（coron-ary artery bypass grafting,CABG）并成为治疗冠脉疾病最常用的治疗办法。
但是球囊扩张术及传统金属裸支架置入术后短、中期再狭窄的发生率达50%～60%，严重限制了PCI的发展。
PCI术后发生再狭窄的主要原因是血管壁弹性回缩和血管内膜增生[1，2]。
研究表明血管损伤后平滑肌细胞迁移至内膜并增生是PCI术后再狭窄的关键环节，而血管平滑肌的增生类似良性肿瘤。
因此，科学家们从这一生物学特性中获得灵感，着手研究多种具有抗增值作用的抗肿瘤药物，并将其应用于抑制和预防PCI术后再狭窄，其中雷帕霉素、紫杉醇等药物已经被制成药物洗脱支架（drug-eluting stentd,DES）[3，4]。
DES通过精确的药物作用特点和起效时间，从而提高药物在局部组织中的浓度且不产生全身毒副作用[5-7]。
药物洗脱支架的问世，使支架内再狭窄率降至10%以下，已经成为介入心脏病学中的第三个里程碑[8，9]。
1 药物洗脱支架的定义药物洗脱支架，又称为药物释放支架，是通过包被于金属表面的聚合物携带药物，在支架置入血管内病变部位后，药物自聚合物涂层中通过洗脱方式有控制的释放至心血管壁组织而发挥生物学效应[10]。
药物洗脱支架既可防止支架置术后早期血管弹性回缩和远期负性重构所致再狭窄，又可降低术后平滑肌细胞增殖，新生内膜过度增生而导致的再狭窄。
抗肿瘤治疗相关性冠状动脉疾病的研究进展张若溪;杨爽【摘要】Tumour and cardiovascular disease are the two main causes of death in China.At present,the research on the impact of tumour on the cardiovascular field is mainly focused on the effects of antitumor drugs on myocardial toxicity,blood pressure,myocardial ischemia and soon.However,recent clinical and molecular biology studies have shown that coronary atherosclerosis may be the most commonchronic,multisystemic,and inflammatory disease.The mechanism of antitumor therapy related to coronary artery disease is multilevel and multipoint.Some antitumor treatments are expected to be the new targets for the treatment of coronary artery disease.%肿瘤和心血管疾病是中国主要的两种导致死亡的疾病.目前,针对肿瘤在心血管领域影响的研究,主要集中在抗肿瘤药物对心肌毒性、血压、心肌缺血等带来的损伤方面.然而临床、基础医学及分子生物学的最新研究表明,冠状动脉粥样硬化可能是一种慢性、多系统性、炎症性疾病,炎性反应贯穿在动脉粥样硬化形成、发生和发展的自始至终的过程.抗肿瘤治疗相关性冠状动脉疾病的机制是多层次、多位点的.某些抗肿瘤治疗有望成为治疗相关性冠状动脉疾病的新靶点.【期刊名称】《心血管病学进展》【年(卷),期】2018(039)002【总页数】4页(P147-150)【关键词】抗肿瘤治疗;炎症;冠状动脉疾病【作者】张若溪;杨爽【作者单位】哈尔滨医科大学附属第二医院心内科,黑龙江哈尔滨150086;哈尔滨医科大学附属第二医院心内科,黑龙江哈尔滨150086【正文语种】中文【中图分类】R543.3;R730.5肿瘤和心血管疾病是中国主要的两种导致死亡的疾病。
下肢动脉硬化闭塞症术后支架内再狭窄的危险因素研究进展【中图分类号】R543【文献标识码】B【文章编号】2095-6851（2018）03--01下肢动脉硬化闭塞症是由于下肢动脉粥样硬化斑块的形成引起下肢动脉闭塞、狭窄，从而导致肢体慢性缺血。
随着人们生活方式的改变及人口老龄化日益严重，下肢动脉硬化闭塞症（ASO）的发病率逐年增高。
ASO患病率在国外>75岁的人群中接近20%[1]，而在我国老年人中>10%[2]。
经皮腔内血管成形术（PTA）已经成为下肢ASO的一线治疗选择，但其术后支架内再狭窄（InstentRestenosis，ISR）是影响疗效及预后的主要问题。
1术后支架内再狭窄的机制术后ISR的原因及机制非常复杂，从病理生理学角度讲，血管腔内修复术后ISR涉及平滑肌细胞的增殖、迁移，血管内皮损伤，血栓形成，血管负性重构以及各种细胞因子的释放、局部炎症反应，血管弹性回缩力等，其中平滑肌细胞增殖为ISR发生的主要原因，管壁损伤后促发了炎症因子的合成与释放，在血管进行损伤修复的同时，平滑肌细胞增殖，从而促进ISR形成[3]。
Denes等[4]认为，NO等活性物质减少、血管内皮损伤是ISR早期的主要病理机制，血管内皮损伤后，产生一系列的趋化因子、炎症因子等，在一定程度上引起管壁的炎症反应，随后淋巴细胞、中性粒细胞等附着于内皮细胞，触发早期的血管炎性反应，纤维蛋白以及血小板在管壁损伤位置聚集，最终形成血栓堵塞血管，从而出现ISR。
Inoue等[5]則认为机械损伤引起的局部炎症反应是ISR的主要作用机制，在支架植入后，病变位置的血管出现扩张，由于机械的支撑作用导致血管回缩力明显减小。
同时，由于长时间对血管壁进行压迫会造成支架内广泛的内膜组织增生，增生可能包含血管平滑肌细胞增殖、细胞外基质增生以及内皮细胞增生等，最终导致支架植入后出现再狭窄的危险因素[6]。
2术后支架内再狭窄的危险因素2.1吸烟吸烟是动脉粥样硬化的危险因素，早期研究发现吸烟会导致术后ISR的发生[7]。
球囊导管药物涂层后处理工艺技术探讨摘要：目的：以球囊导管为原材料，在球囊表面喷涂药物涂层后，再经过后处理，使药物涂层形成晶体状态，考察样品涂层性状以及在健康猪模型体内扩张后不同时间点血管组织残留量，以评估后处理涂层技术对于产品开发的可行性。
方法：制作载药密度4±1μg/mm2的雷帕霉素药物球囊，扫描电镜观察药物涂层外观；在健康猪冠状动脉扩张后，分别在术后即刻、7d、28d时，取药物球囊治疗段血管，检测其药物含量。
结果：药物涂层晶型呈多边体柱状外观，长度50um以下；靶血管在术后即刻药物浓度41.8ng/mg，在术后7D药物浓度5.2ng/mg，在术后28D药物浓度为2.3ng/mg。
结论：后处理涂层技术可解决目前雷帕霉素药物球囊面临的保留时间短技术痛点问题，工艺可行。
关键词：药物球囊雷帕霉素药物含量1、研究背景药物涂层球囊导管（DCB）是在球囊扩张术或球囊成形术等介入技术基础上发展起来的新型治疗性球囊药物释放技术，它是将抗血管内膜增生的药物涂覆于球囊表面，当球囊到达病变血管壁并被撑开、扩张，与血管壁内膜接触时，通过对血管内膜加压，快速释放、转移药物至局部血管壁内的技术，药物在局部起到抗血管内膜增生的作用，从而预防血管介入术后再狭窄［1-2］，DCB不会植入长期存留在血管内壁的金属物以及聚合物涂层，体现了“介入无植入”的新型介入理念，其在冠心病介入治疗中扮演的角色日益显著。
目前已上市的药物球囊药物涂层均为紫杉醇，因紫杉醇在单次接触后血管壁对其的摄取及生物利用度明显高于雷帕霉素。
但雷帕霉素作为低毒、无肾毒性的免疫抑制剂，其使用安全性更高。
现在临床广泛应用的药物支架所载药物均为雷帕霉素或其衍生物类，研究已证实从疗效和安全性上考虑，雷帕霉素或其衍生物类DES要优于第一代PES。
因此，新一代DCB的研发中，雷帕霉素药物涂层工艺成为研究热度。
如何避免DCB球囊表面的药物在介入过程被快速冲洗掉,并使之能够被局部血管壁有效摄取是药物涂层工艺的关键所在，也是目前DCB产品的技术痛点问题。
自体静脉移植再狭窄与MMP-1、MMP-2及TIMP-2的表达郝建;孙勇【期刊名称】《中国现代普通外科进展》【年(卷),期】2005(008)004【摘要】目的:通过测定自体静脉移植术后移植静脉管腔狭窄度、金属基质蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-2,金属蛋白酶特异性抑制剂-2(TIMP-2)的表达,探讨自体静脉移植术后再狭窄与金属蛋白酶家族(MMPs)及其特异性抑制剂(TIMPs)的关系.方法:60只Wister大鼠均行颈静脉腹主动脉移植术,在术后28d后取出移植静脉行病理学检查测量移植静脉管腔狭窄度,根据移植静脉管腔狭窄程度,分成正常、轻、中、重4组,并采用免疫组织化学方法(ABC法)行MMP-1,MMP-2及TIMP-2的检测.结果:静脉移植后,移植静脉出现不同程度的狭窄.在狭窄的移植静脉,MMP-1、MMP-2和TIMP-2高水平表达;静脉狭窄程度越重,MMP-1、MMP-2和TIMP-2表达强度越高,MMP-1、MMP-2的升高幅度高于TIMP-2的升高幅度.结论:自体静脉移植术后移植血管再狭窄的发生和发展与MMPs及TIMPs的表达失衡密切相关.【总页数】2页(P229-230)【作者】郝建;孙勇【作者单位】山东省邹平县人民医院,外科,山东,邹平,256200;山东省邹平县人民医院,外科,山东,邹平,256200【正文语种】中文【中图分类】R543.5【相关文献】1.MMP-2、TIMP-2与32P液体球囊照射预防血管成形术后再狭窄的关系研究[J], 董红志;刘寅;徐美林;徐乃勋;殷雅琴;高静;赵炳让2.MMP-1/TIMP-2在子宫内膜异位症大鼠子宫内膜上的表达 [J], 张登霞;杨雪萍3.CD147、MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在不同级别的脑胶质瘤中的表达及其意义 [J], 居红格;蒋剑英;沈淑萍;耿虹4.MMP-1、TIMP-2在下肢静脉曲张血管中的表达及意义 [J], 许建辉;刘程伟;王石;金松;王树卿5.乙酰肝素酶反义寡核苷酸对SGC-7901细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响Ⅰ.乙酰肝素酶反义寡核苷酸对SGC-7901细胞MMP-2和TMP-2表达的影响 [J], 汪素文;周世庆;真岩波;张淑红;楮传莲;袁孟彪;岳贤华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
1. 小血管病变的定义？小血管病变与再狭窄的关系？答：小血管病变的概念来源于STRESS试验和BENESTENT试验，将通过QCA确定的参照血管直径<3mm的病变规定为小血管病变。
但也有较多研究将其定义为参照血管直径<2.75mm的病变。
临床上倾向于将≤2.5mm的病变定义为小血管。
小血管病变PCI再狭窄率高，主要冠脉事件发生率高。
再狭窄率较大血管高（32% VS 20%），具有再狭窄高危因素（糖尿病、复杂病变及长病变）的小血管病变支架术后再狭窄率高达55%。
PCI后即刻管腔面积越大再狭窄率越低，因此IVUS指导对小血管病变意义较大。
2. 小血管病变介入治疗的技术要领？答：导管管腔小易造成嵌钝，需要6F的指引导管甚至带侧孔指引导管，保证同轴性和支撑力；导丝在小血管内操作导丝难度增加，导丝前端的J形变头应短，以适应较小的管腔，增进导丝控制能力；应采用头端较软导丝，最好不用中硬导丝或更硬的导丝；硬杆导丝支撑力好，有助于支架放置；球囊选用小直径球囊以提高通过病变能力，小血管病变常常较硬，需要高压扩张，宜选用半或非顺应性球囊以减少并发症；小血管长病变两端直径差别较大，有时需选用不同直径的球囊分段扩张；症状许可下球囊扩张时间尽量长球囊扩张理想结果的标准：无明显撕裂、残余狭窄<20%、远端血流好和无弹性回缩；IVUS 可准确判断是否是真正的小血管；“假小血管”与大血管同，根据IVUS测的血管直径选择球囊（B/A=1：1）和支架；无IVUS时仍应根据QCA选择B/A=1：1球囊，盲目选择较大球囊会增加撕裂及其所致的急性闭塞率，真小血管根据QCA测的直径选择球囊（B/A=1：1），根据扩张结果可增加球囊直径；其它对较硬的病变采用去斑术或切割球囊会减少撕裂及急性闭塞的发生率；高压球囊不能扩张的病变如果无严重夹层可换用旋磨，但是对长的小血管病变旋磨后“无血流”并发症发生率高。
支架不同支架对小血管病变结果会不同，以下特性与之有关，柔顺性、小的截面积、支架两端与球囊交界处移行光滑、在高压球囊上(>16atm)捆绑牢固、支架之外的球囊不宜过长以减小对非支架覆盖血管的损伤；QCA支架/血管直径比1：1；长病变和小血管病变往往伴随，曾经提倡支架长度应尽量短，以能覆盖列余狭窄>30%的血管段为标准，即“点支架”（spot stenting）技术；支架通过病变用力适中，避免长时和过度用力操作，如果支架不易通过病变可采用deep sitting技术，但deep sitting后能过分操作指引导管；球囊扩张13atm以上或对远端变细的血管用相对较大的短球囊在支架近端扩张有助于获得最佳支架结果；扩张之前多体位透视支架位置准确；对小血管病变支架后不能有扩张不充分和支架远端残余狭窄及撕裂，如果支架以远有狭窄，应选用与血管直径1 :1的球囊和低压力时间扩张。
雷帕霉素抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞增生(1)】目的免疫抑制剂雷帕霉素对血管紧张素Ⅱ诱导的脐静脉内皮细胞（HUVEC）抑制作用机制。
方法血管紧张素Ⅱ联合不同浓度雷帕霉素刺激体外培养的HUVEC，3H-胸腺嘧啶核苷掺入法和3H-亮氨酸掺入法测定瞎胞DNA和蛋白质合成，流式细胞术检测细胞周期变化，免疫印迹（Western blot）检测细胞信号蛋白p70S6K，ERK2及细胞周期蛋白CyclinD1、CyclinA、和CyclinB1表达的变化。
结果雷帕霉素抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞蛋白质和DNA的合成，并呈剂量依赖效应（P<0.01），雷帕霉素抑制p70S6K和CyclinD1的表达，阻滞细胞于G1期（P<0.01），而不影响ERK2，CyclinA、和CyclinB1的表达。
结论 PI3K-p70S6K信号通路在血管紧张素Ⅱ诱导的HUVEC增殖及细胞周期进程中起关键作用，p70S6K是免疫抑制剂雷帕霉素阻断血管内皮细胞增殖靶点。
【关键词】雷帕霉素血管紧张素Ⅱ 信号传导 DNA合成血管内皮细胞Rapamycin inhibits the proliferation of vascular endothelia l【Abstract】 Objective To investigate the inhibition of rapamycin in angiotensin Ⅱ -induced vascular endothelial cell proliferation.Methods Cultured HUVEC were stimulated by AngⅡalone or in combination with different concentrations of rapamycin. The cell proliferation was measured by 3H-thymidine incorporation and 3H-leucinne incorporation. Cell cycle were analysed by flow cytometry. Expression of p70S6k ，ERK2， cyclinA， cyclinB1 and cyclinD1 were detected by Western blots.Results Rapamycin inhibited AngⅡ-induced increase in protein content and DNA synthesis with dosedependently(P<0.01). Rapamycin inhibited the expression of p70S6k and cyclinD1 while inducing G1 cell cycle arrest (P<0.01) withoutaffecting the expression of ERK2， cyclinA and cyclinB1.Conclusionp70S6k signaling appears to be necessary for G1-S phase progression and proliferation in AngⅡ-induced HUVEC.Rapamycin targeted p70S6k could have great potential in therapeutic intervention in the proliferation of vascular endothelial cells.【Key words】rapamycin angiotensinⅡ signal transduction DNA synthesis vascular endothelial cell血管紧张素Ⅱ不仅是一种肽类激素，具有多种生物学功能包括促进血管收缩，刺激醛固酮分泌和肾脏对钠重吸收，而且，血管紧张素Ⅱ对成纤维细胞、肾上腺皮质细胞、血管平滑肌细胞和心肌细胞等多种细胞发挥生长因子的作用［1，2］。
雷帕霉素诱导细胞自噬在衰老相关疾病中的作用吴伯艳;刘新光;陈维春【摘要】哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( mammalian target of rapamy-cin, mTOR)是衰老和衰老相关疾病的一个关键调节因子。
雷帕霉素( rapamycin, RAPA)可通过抑制mTOR通路,诱导和促进细胞自噬的发生。
细胞自噬是维持细胞内稳态的主要方式与途径,通过降解多余的、受损的及衰老的蛋白与细胞器,为细胞重建、再生和修复提供必需原料。
早老症( hutchinson-gil-ford progeria syndrome, HGPS )患者细胞中伴随早老蛋白( progerin)的异常聚集；此外,诸如亨廷顿病、帕金森病、阿尔茨海默病等神经退行性疾病细胞内同样出现异常蛋白质的聚集,而这些异常蛋白的清除正依赖于细胞的自噬作用。
由此可见,雷帕霉素是潜在的抗衰老、治疗早老症及衰老相关疾病的重要药物。
该文主要阐述雷帕霉素促进细胞自噬方面的功能及在HGPS、神经退行性疾病方面的应用。
%Mammalian target of rapamycin( mTOR) is a key reg-ulator of aging and aging-related diseases. Rapamycin ( RAPA) induces and promotes the process of cell autophagy through in-hibiting mTOR pathway. Autophagy exerts a crucial role inmain-taining the cellular meostasis, which provides essential materials for cell reconstruction, regeneration and repair via degradating the redundant, damaged, or senescent proteins and organelles. Hutchinson Gilford progeria syndrome ( HGPS ) patients are al-ways accompanied with abnormally accumulated progerin in cells. Similar to HGPS, abnormal protein accumulation is the common pathological feature of neurodegenerative diseases, in-cluding Huntington′s disease, Parkinson′s disease, Alzheimer′s disease and so on. Degradation of these abnormalproteins pre-dominantly depends on cell autophagy. Thus, rapamycin is a po-tential anti-aging drug for HGPS and aging-related diseases thera-py. This view focuses on the effects of rapamycin on cell autoph-agy and clinical application in HGPS and neurodegenerative dis-eases.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】4页(P11-14)【关键词】雷帕霉素;雷帕霉素靶蛋白;自噬;早老症;早老蛋白;神经退行性疾病【作者】吴伯艳;刘新光;陈维春【作者单位】广东医学院衰老研究所，广东东莞 523808; 广东省医学分子诊断重点实验室，广东东莞 523808; 广东医学院生物化学与分子生物学研究所，广东湛江 524023;广东医学院衰老研究所，广东东莞 523808; 广东省医学分子诊断重点实验室，广东东莞 523808; 广东医学院生物化学与分子生物学研究所，广东湛江524023;广东医学院衰老研究所，广东东莞 523808; 广东医学院生物化学与分子生物学研究所，广东湛江 524023【正文语种】中文【中图分类】R-05;R329.25;R339.38;R745.7;R916.4;R977.3雷帕霉素靶蛋白(target of rapamycin, TOR)是一种进化上十分保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)信号途径的关键蛋白。
雷帕霉素对前脂肪3T3-L1细胞脂质稳态和分泌功能的影响李金红;刘迎九;张国娟;尹洪超;陶建瓴;李航【摘要】目的探讨雷帕霉素对前脂肪3T3-L1细胞脂质稳态、分泌功能的影响,阐明雷帕霉素引起高脂血症的可能机制.方法体外培养前脂肪细胞3T3-L1细胞株,分成对照组、雷帕霉素50、100、200 nmol/L组.用油红O染色(定性)及高效液相色谱法(定量)检测3T3-L1细胞内胆固醇水平,酶联免疫吸附实验分析瘦素、脂联素的分泌量,实时荧光定量PCR法及Western blot法检测3T3-L1细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ) mRNA和蛋白的表达.结果油红O染色显示雷帕霉素组脂肪细胞脂滴数量较对照组明显减少；对照组、雷帕霉素50、100、200 nmol/L组细胞内游离胆固醇含量分别为(12.89±0.16)、(9.84±0.45)、(9.39±0.46)和(8.61 ±0.34) mg/ml,与对照组相比,雷帕霉素能抑制3T3-L1前脂肪细胞内胆固醇的蓄积(P＜0.05).对照组、雷帕霉素50、100、200 nmol/L组瘦素分泌量分别为(19.02±0.52)、(16.98±0.01)、(15.62±0.01)和(13.84±0.66)ng/ml,与对照组相比,雷帕霉素能减少成熟后3T3-LI脂肪细胞瘦素的分泌水平(P＜0.05).雷帕霉素50、100及200 nmol/L组PPARγ mRNA表达量分别为对照组的94％、62％和47％,均显著低于对照组(P＜0.05)；PPARγ蛋白表达量分别为对照组的80％、74％和61％,均显著低于对照组(P＜0.05).雷帕霉素100 nmol/L、PPARγ阻断剂GW9662 10 μmol/L、PPARγ增敏剂曲格列酮10 μmol/L分别处理细胞96 h,检测PPARγmRNA的表达分别为对照组的(0.60±0.14)、(0.67 ±0.03)和(1.30±0.14)倍,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05); PPARγ蛋白表达与mRNA的表达变化趋势相似,差异具有统计学意义(P＜0.05).雷帕霉素100 nmol/L、PPARγ阻断剂GW9662 10 μmol/L、PPARγ增敏剂曲格列酮10 μmol/L分别处理细胞96 h,ELISA检测各处理组瘦素表达量分别为(19.02 ±0.52)、(15.62±0.10)、(14.45±1.01)和(18.07 ±0.66) ng/ml,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论雷帕霉素通过下调PPARγ的表达减少脂肪细胞内的脂质蓄积,并且抑制其瘦素分泌,这为临床上雷帕霉素引起的高脂血症提供了一个可能的解释.%Objective To investigate the effects of rapamycin on cholesterol homeostasis and secreto-ry function of 3T3-L1 cells. Methods The in vitro cultured 3T3-L1 cells ( preadipocytes) were divided into control group, rapamycin 50 nmol/L group, rapamycin 100 nmol/L group, and rapamycin 200 ntnol/L group. Intracellular cholesterol level was measured by oil red 0 staining and high performance liquid chromatography. The secretion levels of leptin and adiponectin were assayed by enzyme-linked immunosorbent assay. The mRNA and protein expressions of peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR-y) were assayed by quantitative real-time polymerase chain reaction and Western blot. Results Oil red O staining showed rapamycin down-regulated 3T3-L1 cells differentiation and lipid accumulation. Quantitative measurement of cholesterol with high performance liquid chromatography showed that the concentrations of free cholesterol in rapamycin treatment groups had a significant reduction. The concentrations of free cholesterol in the control group, rapamycin 50 nmol/L group, rapamycin 100 nmol/L group, and rapamycin 200 nmol/L group were ( 12. 89 ± 0. 16) , (9. 84 ± 0. 45 ) , (9. 39 ± 0. 46) , and (8. 61 ± 0.34) mg/ml, respectively (P < 0. 05 ) , and the concentrations of total cholesterol were (12. 91 ±0. 50) , (9. 94 ±0. 96) , (10. 45 ±2. 51) , and (9. 53 +0. 63) mg/ml, respectively. The leptin concentrations in the control group, rapamycin 50 nmol/L group, rapamycin 100 nmol/L group, and rapamycin200 nmol/L group were ( 19. 02 ± 0. 52 ) , ( 16. 98 ± 0. 11 ) , ( 15. 62 ± 0. 01) , and (13. 84 ± 0. 66) ng/ml, respectively. The mRNA expressions of PPAR-y in the rapamycin 50 nmol/L group, rapamycin 100 nmol/L group, and rapamycin 200 nmol/L group were significantly lower than that in control group ( P < 0. 05 ). The protein expressions of PPAR"y in the rapamycin 50 nmol/L group, rapamycin 100 nmol/L group, and rapamycin 200 nmol/L group were 80% , 74% , and 61% of that in control group (P <0.05). After the cells were treated with rapamycin 100 nmol/L, PPAR7 blocking agent GW9662 10 jimol/L, and PPAR-y agonist troglitazone 10μmol/L, re spectively, for 96 hours, the mRNA expression of PPAR7 was (0.60+0. 14) , (0.67 ±0.03) , and (1.30±0. 14) of that in control group (P<0.05). The protein expression showed a similar trend with mRNA expression ( P < 0. 05 ). After the cells were treated with rapamycin 100 nmol/L, PPAR-y blocking agent GW9662 10μmol/L, and PPAR-y agonist troglitazone 10 |I,mol/L, respectively, for 96 hours, the expression of leptin in the control group, rapamycin 50 nmol/L group, rapamycin 100 nmol/L group, and rapamycin 200 nmol/L group was (19. 02 +0. 52) , (15. 62 ±0. 10) , and (14.45 ± 1. 01 ) and ( 18. 07 ± 0. 66 ) ng/ml, respectively ( P < 0. 05 compared with the control group) . Conclusions By downregulating the expression of PPAR-y, rapamycin can decrease cholesterol accumulation in 3T3-L1 cells and inhibit its leptin-secreting capability. This finding may provide a possible explanation for rapamycin-induced hyperlipidemia in clinical practice.【期刊名称】《中国医学科学院学报》【年(卷),期】2011(033)005【总页数】6页(P560-565)【关键词】雷帕霉素;3T3-L1前脂肪细胞;过氧化物酶体增殖物激活受体γ;瘦素;胆固醇【作者】李金红;刘迎九;张国娟;尹洪超;陶建瓴;李航【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肾内科,北京100730;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肾内科,北京100730;北京同仁医院肾内科,北京100730;中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理系,北京100005;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肾内科,北京100730;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肾内科,北京100730【正文语种】中文【中图分类】R589.2雷帕霉素在脏器移植术后抗排斥治疗［1－6］、肿瘤治疗［7］及预防冠脉支架形成术后再狭窄［2，8］等方面的有效作用使之已成功地应用于临床。
