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多聚甲醛配制1. 引言多聚甲醛是一种常见的化学品，具有多种应用领域，如建筑材料、纺织品、塑料等。
多聚甲醛的制备过程中，配制是一个关键步骤，合理的配制可以提高产品的品质和性能。
本文将介绍多聚甲醛的配制方法和相关注意事项。
2. 多聚甲醛配制方法多聚甲醛的配制方法可以根据不同的需求进行调整，以下是一种常用的配制方法：2.1 原料准备多聚甲醛的主要原料为甲醛和催化剂。
在配制前需要准备好充足的原料并确保其纯度符合要求。
同时还需要准备一定量的溶剂和其他辅助剂。
2.2 配置反应体系将准备好的甲醛和催化剂溶解在溶剂中，按照一定比例混合。
同时，根据需要可以添加其他辅助剂。
2.3 调整反应条件根据具体情况，调整反应的温度、压力和反应时间等条件。
这些条件的调整需要基于试验和经验，以保证反应的顺利进行。
2.4 反应过程控制在反应过程中，需要控制反应的速率和均匀性。
可以通过搅拌、加热等方式来实现。
2.5 产物分离和纯化反应结束后，通过适当的分离和纯化步骤，将产物从溶剂和其他杂质中分离出来。
这一步骤可以采用过滤、蒸馏等方法实现。
3. 注意事项在多聚甲醛的配制过程中，还需要注意以下事项：3.1 安全防护由于甲醛对人体有刺激性和毒性，制备多聚甲醛时需要采取相应的安全防护措施，佩戴适当的防护服、手套和护目镜等。
3.2 反应条件控制反应条件的控制对多聚甲醛的品质和性能有重要影响，因此需要仔细调整各项反应条件，确保反应的有效进行。
3.3 催化剂选择催化剂的选择对多聚甲醛的成品质量也有一定的影响，需要根据需要选择合适的催化剂并确保其活性和稳定性。
3.4 设备清洁在配制过程中，需要注意保持设备的清洁和无尘状态，以防止杂质的混入。
4. 结论多聚甲醛的配制是一个关键的工艺步骤。
合理的配制方法和注意事项可以提高产品的品质和性能。
通过本文的介绍，读者可以了解多聚甲醛的配制方法以及相关注意事项，并在实践中应用这些知识。
希望本文能为相关从业人员提供一些参考和帮助。
4%多聚甲醛的配制:0.1M PBS配制80g NaCl2g KCl14.4g Na2HPO4KH2PO4溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至，最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中，在放置磁力搅拌棒的容器中,将4克多聚甲醛(EM 级)溶解于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风厨中60℃加热(打开瓶盖)使溶解,冷却至室温, 用HCl调节溶液的pH值至,使用前新鲜配制.4%多聚甲醛固定液：用途：进行免疫组织化学方法研究时常选用该固定液。
动物灌注固定及后固定（动物器官经该液灌注后，然后取材，再用该液浸泡2-24小时）也常选该固定液固定。
试剂：多聚甲醛40gmol/L PH 500 ml混合后加热至60℃，搅拌并滴加1N NaOH 至清亮为止，冷却后加PBS 至总量1000 ml。
注固定时间24小时。
我们实验室一直沿用的4％多聚甲醛固定液（用于固定鼠或者兔的脑组织标本）的配方是：多聚甲醛（粉末状）：40g磷酸二氢钠：2.965g磷酸氢二钠：29g蒸馏水：1000ml然后一块放到三角烧瓶中，在磁力搅拌器上加热（60℃）振荡24小时。
原来一直用的挺好，配出来也很清亮。
但是这几次也是用同样的方法配出来后，在加热时是清亮的，但是瓶底有不少不溶的杂质。
等不再加热，室温后，溶液就混浊了。
再加热到60度又清亮了。
再冷却到室温后又混浊了。
不知道为啥请高手指点一二，不胜感激4％多聚甲醛固定液里头的陪法有点小技巧:多聚甲醛是教易溶于碱性条件下的,先加多聚甲醛和氢二钠,直接在通风情况下加热溶解,一般15到20分钟就可以,大概放置20分钟后再加二氢钠,溶解后,调PH直到左右即可,最后别忘记放DEPC.其实武汉博士德就有4％多聚甲醛固定液卖的,我们以前都是自己配,一是麻烦,二是要用到DEPC,有毒而且易挥发,还带香味,闻到后喉龙就不舒服.后来就直接找他们买了,方便便宜,省事,最主要的,他们专业点,东西好用!你要考虑以下几过因素:1.蒸馏水洁净.2.三角烧瓶洁净.3.试剂没问题.多聚甲醛就是很难溶解，你把它放在37度温箱里若干天再去看它会有惊喜。
4%多聚甲醛的配制:0.1M PBS配制80g NaCl2g KCl14.4g Na2HPO42.7g KH2PO4溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中，在放置磁力搅拌棒的容器中,将4克多聚甲醛(EM级)溶解于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风厨中60℃加热(打开瓶盖)使溶解,冷却至室温, 用HCl调节溶液的pH值至7.4,使用前新鲜配制.4%多聚甲醛固定液：用途：进行免疫组织化学方法研究时常选用该固定液。
动物灌注固定及后固定（动物器官经该液灌注后，然后取材，再用该液浸泡2-24小时）也常选该固定液固定。
试剂：多聚甲醛40gPBS0.1 mol/L PH 7.4 500 ml混合后加热至60℃，搅拌并滴加1N NaOH 至清亮为止，冷却后加PBS 至总量1000 ml。
注固定时间24小时。
我们实验室一直沿用的4％多聚甲醛固定液（用于固定鼠或者兔的脑组织标本）的配方是：多聚甲醛（粉末状）：40g磷酸二氢钠：2.965g磷酸氢二钠：29g蒸馏水：1000ml然后一块放到三角烧瓶中，在磁力搅拌器上加热（60℃）振荡24小时。
原来一直用的挺好，配出来也很清亮。
但是这几次也是用同样的方法配出来后，在加热时是清亮的，但是瓶底有不少不溶的杂质。
等不再加热，室温后，溶液就混浊了。
再加热到60度又清亮了。
再冷却到室温后又混浊了。
不知道为啥？请高手指点一二，不胜感激4％多聚甲醛固定液里头的陪法有点小技巧:多聚甲醛是教易溶于碱性条件下的,先加多聚甲醛和氢二钠,直接在通风情况下加热溶解,一般15到20分钟就可以,大概放置20分钟后再加二氢钠,溶解后,调PH直到7.2左右即可,最后别忘记放DEPC.其实武汉博士德就有4％多聚甲醛固定液卖的,我们以前都是自己配,一是麻烦,二是要用到DEPC,有毒而且易挥发,还带香味,闻到后喉龙就不舒服.后来就直接找他们买了,方便便宜,省事,最主要的,他们专业点,东西好用!你要考虑以下几过因素:1.蒸馏水洁净.2.三角烧瓶洁净.3.试剂没问题.多聚甲醛就是很难溶解，你把它放在37度温箱里若干天再去看它会有惊喜。
4%多聚甲醛配置：（4%是指4g多聚甲醛固体溶于00mL PBS中）1.先配好PBS2.称取4g多聚甲醛固体3.将多聚甲醛放入PBS中水浴锅65℃加热3h注意：1.先配现用，多聚甲醛容易挥发。
上午使用，前一天下午配置；下午使用，当天上午配置。
2.多聚甲醛有毒，使用时要在通风橱中进行并配戴口罩40g多聚甲醛固体→1L PBS4%的多聚甲醛溶液从组织中提取总蛋白组织匀浆8mL裂解液8mL RIPA+80µL PMSF（100×）+190.5µLcocktail（100×）1mL RIPA+10µL PMSF（100×）+23.8µLcocktail（100×）1.裂解：取少量组织+600µL裂解液匀浆→4℃振荡裂解45min→4℃离心12000r/min，离心15min2.稀释：取3µL上清+27µL无菌水→BCA试剂盒以A液：B液=50：1的比例混合→样品25µL+混合液200µL（设置三组平行对照）温敷：37℃下温敷30min→570nm下检测OD1.0左右→测蛋白浓度，计算50µg/70µg对应体积和buffer体积→5×buffer，最大上样量÷4=buffer体积3.变性：100℃煮沸10min，-80℃保存组织总RNA提取取小鼠肝组织50~100mg,加人1mL Trizol TM试剂,置于碾钵中快速研磨,样品体积不超过Trizol TM的10%。
匀浆后的样本于室温孵育5min(使核蛋白复合物完全融解),再加人0.2mL氯仿,盖好样本管盖,用手剧烈振荡15s后室温静置3min；4℃下,12000r/min离心15min(离心后混合物分为下层红色的酚、氯仿相,中间相和无色的上层水相。
RNA分布于上层水相,水相占总体积60%。
4％多聚甲醛配制方法1) 900 ml dd H20 + 500 ul 1N NaOH2) Heat to 65-70℃3) While stirring, add 40 g paraformaldehyde4) Continue heating and stirring until paraformaldehyde is dissolved5) Let cool to room temperature6) Add 100 ml of 10X PBS7) pH to 7.3 with HCl8) Sterile with filter9) Store at 4℃, protected from light称量2g，放置与50ml pbs中，37度孵箱2天后，4%的多聚甲醛就配好了。
配制0.1M的PBS，PH=7.2-7.4,100mlPBS+4g多聚甲醛，放入65℃水浴，一般半天左右就可以溶好因为需要现用现配所以我一般就配10毫升。
用一个带盖的玻璃离心管加0.4克多聚甲醛，加8毫升PBS，加1毫升2N的NAOH，放到60度的水浴里，10分钟，拿出来用手颠倒几次，基本上就都溶了，再用HCL调ph到7.2，最后定容就行了，我最快10分钟搞定。
取4g 多聚甲醛溶到100 PBS缓冲液，加2滴1N的NaOH（pH7.4）,60度水浴磁力搅拌，大约1-2小时可以溶解。
4%多聚甲醛的配制:在放置磁力搅拌棒的容器中,将4克多聚甲醛(EM级)溶解于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风厨中60℃加热(打开瓶盖)使溶解,冷却至室温,调整PH值为7.4,使用前新鲜配制.常用的固定剂种类很多,固定剂的正确选择取决于被研究抗原的性质及所用抗体的特性.固定剂可分为两类:有机溶剂和交联剂.有机溶剂如乙醇和丙酮能够去处脂类物质使细胞脱水,把蛋白质沉淀在细胞结构上.交联剂如多聚甲醛一般通过自由氨基基团把生物分子桥连起来,形成一个相互交联的抗原网.许多人发现用交联剂固定细胞效果较好,尤其是做免疫荧光的时候,当然没有固定的规则可言.不过,单独用多聚甲醛固定的细胞不能使抗体进入细胞内,因此,标本固定后必须用非离子去污剂(triton-x 100)透化标本.4％多聚甲醛（PFA）配制称取40gPFA溶于装有500mlDEPC水的玻璃容器（烧杯或烧瓶）中，持续加热磁力搅拌至60－65℃,使成乳白色悬液。
聚甲醛（也称为福尔马林）是一种用于固定组织样本的常见方法，以便后续的组织学研究。
以下是一种使用4%多聚甲醛进行组织固定的常规方法：准备4%多聚甲醛溶液：将100 mL的PBS（磷酸缓冲盐溶液）加入4 g多聚甲醛中，并搅拌混合，直到多聚甲醛完全溶解。
获取待固定的组织样本：准备好需要固定的组织样本，例如动物组织或细胞。
固定组织样本：将组织样本置于4%多聚甲醛溶液中，确保样本完全浸泡在溶液中。
通常，至少需要10倍于样本体积的溶液来确保充分固定。
固定时间：根据需要固定的样本的大小和特性，将其浸泡在4%多聚甲醛溶液中的时间可在30分钟至24小时之间。
冲洗样本：固定时间过后，将固定的组织样本取出并用PBS缓冲液进行冲洗，以去除多余的多聚甲醛。
后续处理：完成固定和冲洗后，可以将组织样本进行进一步的处理，如去水化、脱脂、包埋等，以便进行切片和染色等组织学研究。
请注意，这只是一种常用的方法，具体的固定条件可能因实验目的和样本特性而有所不同。
因此，在进行固定实验之前，建议参考相关文献或向专业人士寻求建议，以获得最佳的实验方案。
4%多聚甲醛的配制:欧阳光明（2021.03.07）0.1M PBS配制80g NaCl2g KCl14.4g Na2HPO42.7g KH2PO4溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中，在放置磁力搅拌棒的容器中,将4克多聚甲醛(EM级)溶解于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风厨中60℃加热(打开瓶盖)使溶解,冷却至室温, 用HCl调节溶液的pH值至7.4,使用前新鲜配制.4%多聚甲醛固定液：用途：进行免疫组织化学方法研究时常选用该固定液。
动物灌注固定及后固定（动物器官经该液灌注后，然后取材，再用该液浸泡2-24小时）也常选该固定液固定。
试剂：多聚甲醛 40gPBS0.1 mol/L PH 7.4 500 ml 混合后加热至60℃，搅拌并滴加1N NaOH 至清亮为止，冷却后加PBS 至总量1000 ml。
注固定时间24小时。
我们实验室一直沿用的4％多聚甲醛固定液（用于固定鼠或者兔的脑组织标本）的配方是：多聚甲醛（粉末状）：40g磷酸二氢钠：2.965g磷酸氢二钠：29g蒸馏水：1000ml然后一块放到三角烧瓶中，在磁力搅拌器上加热（60℃）振荡24小时。
原来一直用的挺好，配出来也很清亮。
但是这几次也是用同样的方法配出来后，在加热时是清亮的，但是瓶底有不少不溶的杂质。
等不再加热，室温后，溶液就混浊了。
再加热到60度又清亮了。
再冷却到室温后又混浊了。
不知道为啥？请高手指点一二，不胜感激4％多聚甲醛固定液里头的陪法有点小技巧:多聚甲醛是教易溶于碱性条件下的,先加多聚甲醛和氢二钠,直接在通风情况下加热溶解,一般15到20分钟就可以,大概放置20分钟后再加二氢钠,溶解后,调PH直到7.2左右即可,最后别忘记放DEPC.其实武汉博士德就有4％多聚甲醛固定液卖的,我们以前都是自己配,一是麻烦,二是要用到DEPC,有毒而且易挥发,还带香味,闻到后喉龙就不舒服.后来就直接找他们买了,方便便宜,省事,最主要的,他们专业点,东西好用!你要考虑以下几过因素:1.蒸馏水洁净.2.三角烧瓶洁净.3.试剂没问题.多聚甲醛就是很难溶解，你把它放在37度温箱里若干天再去看它会有惊喜。
4%（一）多聚甲醛的配制:0.1M PBS配制80g NaCl2g KCl14.4g Na2HPO42.7g KH2PO4溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中，在放置磁力搅拌棒的容器中,将4克多聚甲醛(EM级)溶解于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风厨中60℃加热(打开瓶盖)使溶解,冷却至室温, 用HCl调节溶液的pH值至7.4,使用前新鲜配制.4%多聚甲醛固定液：用途：进行免疫组织化学方法研究时常选用该固定液。
动物灌注固定及后固定（动物器官经该液灌注后，然后取材，再用该液浸泡2-24小时）也常选该固定液固定。
试剂：多聚甲醛 40gPBS0.1 mol/L PH 7.4 500 ml 混合后加热至60℃，搅拌并滴加1N NaOH 至清亮为止，冷却后加PBS 至总量1000 ml。
注固定时间24小时。
我们实验室一直沿用的4％多聚甲醛固定液（用于固定鼠或者兔的脑组织标本）的配方是：多聚甲醛（粉末状）：40g磷酸二氢钠：2.965g磷酸氢二钠：29g蒸馏水：1000ml然后一块放到三角烧瓶中，在磁力搅拌器上加热（60℃）振荡24小时。
原来一直用的挺好，配出来也很清亮。
但是这几次也是用同样的方法配出来后，在加热时是清亮的，但是瓶底有不少不溶的杂质。
等不再加热，室温后，溶液就混浊了。
再加热到60度又清亮了。
再冷却到室温后又混浊了。
不知道为啥？请高手指点一二，不胜感激4％多聚甲醛固定液里头的陪法有点小技巧:多聚甲醛是教易溶于碱性条件下的,先加多聚甲醛和氢二钠,直接在通风情况下加热溶解,一般15到20分钟就可以,大概放置20分钟后再加二氢钠,溶解后,调PH直到7.2左右即可,最后别忘记放DEPC.其实武汉博士德就有4％多聚甲醛固定液卖的,我们以前都是自己配,一是麻烦,二是要用到DEPC,有毒而且易挥发,还带香味,闻到后喉龙就不舒服.后来就直接找他们买了,方便便宜,省事,最主要的,他们专业点,东西好用!你要考虑以下几过因素:1.蒸馏水洁净.2.三角烧瓶洁净.3.试剂没问题.多聚甲醛就是很难溶解，你把它放在37度温箱里若干天再去看它会有惊喜。
4%多聚甲醛固定液：用途：进行免疫组织化学方法研究时常选用该固定液。
动物灌注固定及后固定（动物器官经该液灌注后，然后取材，再用该液浸泡2-24小时）也常选该固定液固定。
试剂：多聚甲醛40gPBS0.1 mol/L PH 7.4 500 ml混合后加热至60℃，搅拌并滴加1N NaOH 至清亮为止，冷却后加PBS 至总量1000 ml。
注固定时间24小时。
我们实验室一直沿用的4％多聚甲醛固定液（用于固定鼠或者兔的脑组织标本）的配方是：多聚甲醛（粉末状）：40g磷酸二氢钠：2.965g磷酸氢二钠：29g蒸馏水：1000ml然后一块放到三角烧瓶中，在磁力搅拌器上加热（60℃）振荡24小时。
原来一直用的挺好，配出来也很清亮。
但是这几次也是用同样的方法配出来后，在加热时是清亮的，但是瓶底有不少不溶的杂质。
等不再加热，室温后，溶液就混浊了。
再加热到60度又清亮了。
再冷却到室温后又混浊了。
不知道为啥？请高手指点一二，不胜感激4％多聚甲醛固定液里头的陪法有点小技巧:多聚甲醛是教易溶于碱性条件下的,先加多聚甲醛和氢二钠,直接在通风情况下加热溶解,一般15到20分钟就可以,大概放置20分钟后再加二氢钠,溶解后,调PH直到7.2左右即可,最后别忘记放DEPC.其实武汉博士德就有4％多聚甲醛固定液卖的,我们以前都是自己配,一是麻烦,二是要用到DEPC,有毒而且易挥发,还带香味,闻到后喉龙就不舒服.后来就直接找他们买了,方便便宜,省事,最主要的,他们专业点,东西好用!你要考虑以下几过因素:1.蒸馏水洁净.2.三角烧瓶洁净.3.试剂没问题.多聚甲醛就是很难溶解，你把它放在37度温箱里若干天再去看它会有惊喜。
以前用过磁力搅拌棒转一上午都不行，放在一边过几天再看就溶解了。
如果要求中性多聚甲醛就用pbs或者用磷酸氢二钠+二氢钠，如果不要求中性用水就可以啦我要做免疫组化实验。
用ABC法，DAB显色。
组织的固定液，查外文资料用的都是4％多聚甲醛／0.1M PBS。
4％的多聚甲醛溶液通常是作为流式标本的储存液，保存在2－8℃。
要使用时，可用PBS稀释至工作液（应用液）。
因为甲醛有毒，所以在配置4％的多聚甲醛固定液时要做好防护措施。
下面详细介绍4%多聚甲醛固定液配制步骤和方法。
4%多聚甲醛固定液配制需材料和设备：
去离子水、HCl (稀)、NaOH (1 N)、多聚甲醛粉末、1X PBS（0.137 M NaCl, 0.05 M NaH2PO4, pH 7.4）、0.22μm滤膜、玻璃器皿、手套和保护眼镜、磁力搅拌器、温度计、通风柜
步骤：
要配制1 L的4%多聚甲醛，在通风柜中，将800 mL的1X PBS加入玻璃烧杯，边搅拌边加热至约60℃，注意不能让溶液沸腾。
往热PBS溶液中加入40g多聚甲醛粉末。
多聚甲醛粉末可能不会立即溶解，可通过滴入1N NaOH搅拌逐步提高pH值，直至多聚甲醛粉末完全溶解。
待溶液冷却，过滤溶液，用PBS调节溶液体积至1L。
检查pH值，用稀盐酸调节pH值至6.9左右。
保存：
4％的多聚甲醛溶液可分装成多管冻存，或者保存在2－8℃大约1个月。
4％多聚甲醛配制
4％多聚甲醛配制方法
1) 900 ml dd H20 + 500 ul 1N NaOH
2) Heat to 65-70℃
3) While stirring, add 40 g paraformaldehyde
4) Continue heating and stirring until paraformaldehyde is dissolved
5) Let cool to room temperature
6) Add 100 ml of 10X PBS
7) pH to 7.3 with HCl
8) Sterile with filter
9) Store at 4℃, protected from light
称量2g，放置与50ml pbs中，37度孵箱2天后，4%的多聚甲醛就配好了。
配制0.1M的PBS，PH=7.2-7.4,100mlPBS+4g多聚甲醛，放入65℃水浴，一般半天左右就可以溶好
因为需要现用现配所以我一般就配10毫升。
用一个带盖的玻璃离心管加0.4克多聚甲醛，加8毫升PBS，加1毫升2N的NAOH，放到60度的水浴里，10分钟，拿出来用手颠倒几次，基本上就都溶了，再用HCL调ph到7.2，最后定容就行了，我最快10分钟搞定。
取4g 多聚甲醛溶到100 PBS缓冲液，加2滴1N的NaOH（pH7.4）,60度水浴磁力搅拌，大约1-2小时可以溶解。
4%多聚甲醛的配制:
在放置磁力搅拌棒的容器中,将4克多聚甲醛(EM级)溶解于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风厨中60℃加热(打开瓶盖)使溶解,冷却至室温,调整PH值为7.4,使用前新鲜配制.
常用的固定剂种类很多,固定剂的正确选择取决于被研究抗原的性质及所用抗体的特性.固定剂可分为两类:有机溶剂和交联剂.有机溶剂如乙醇和丙酮能够去处脂类物质使细胞脱水,把
蛋白质沉淀在细胞结构上.交联剂如多聚甲醛一般通过自由氨基基团把生物分子桥连起来,形成一个相互交联的抗原网.许多人发现用交联剂固定细胞效果较好,尤其是做免疫荧光的时候,当然没有固定的规则可言.不过,单独用多聚甲醛固定的细胞不能使抗体进入细胞内,因此,标本固定后必须用非离子去污剂(triton-x 100)透化标本.
4％多聚甲醛（PFA）配制
称取40gPFA溶于装有500mlDEPC水的玻璃容器（烧杯或烧瓶）中，持续加热
磁力搅拌至60－65℃,使成乳白色悬液。
用1.0mmol/L 的NaOH调PH至7.0使呈清亮状（滴加），再加入约500ml 2×PBS，充分混匀（在冰浴或冷水浴中）。
可再检测一下PH，过滤后定容至1000ml，室温或4℃（保存备用）。
注意：1.配制时应在通风条件下操作，并避免接触皮肤及吸入（戴口罩及手套），因PFA
有较强的毒性，对粘膜及皮肤有刺激作用。
2.加热时，温度不可过高，常为60－65℃。
否则PFA降解失效，配制好的PFA虽可有效一点时间，但过久的液体，固定效果下降，应用前新鲜配制。
4%多聚甲醛固定液配制
多聚甲醛(PFA) 40g ,双蒸水500ml在60-65度加热成乳白色悬液（用1.0mol/LNaOH调制7.0或7.2-7.4 ）用0.1molPBS定容至1000ml。
除了用DEPC水配制PFA外，也可以用灭菌蒸馏水或经DEPC处理的0.01－0.1％/L的PBS 配制，方法及主要事项同上。
制备的单细胞悬液用70%乙醇固定，4℃过夜。
次日生理盐水洗脱液洗涤去除固定液。
加PI 染液混匀，至4℃避光30min，上机测试。
正常对照细胞呈红色荧光，凋亡细胞呈蓝色荧光，
在流式细胞仪DNA直方图上，由于凋亡细胞的出现，二倍体细胞(G细胞)减少，G1峰左侧出现亚二倍体细胞群的峰型(即凋亡细胞峰)。
将涂片置于新配制的冷4%多聚甲醛PBS(pH7.4)30min RT下，PBS冲洗。
