蟾蜍的坐骨神经—腓肠肌标本的制备

一、实验目的1. 观察蟾蜍神经系统的基本结构和功能。

2. 掌握蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。

3. 学习神经兴奋传导和反射弧的实验技术。

4. 了解神经肌肉接头兴奋传递的机制。

二、实验原理蟾蜍作为两栖类动物，其神经系统结构与哺乳动物有相似之处，且其离体组织生活条件简单，易于控制和掌握。

本实验通过制备蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本，观察神经兴奋传导和反射弧的实验技术，了解神经肌肉接头兴奋传递的机制。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、生理盐水、剪刀、镊子、大头针、蛙板、玻璃分针、锌铜弓等。

2. 实验仪器：显微镜、刺激器、张力换能器、示波器、记录仪等。

四、实验方法1. 制备蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本- 用剪刀剪去蟾蜍的躯干和上肢，暴露腰骶丛神经。

- 游离大腿肌肉之间的坐骨神经及小腿的腓肠肌。

- 注意不要将胫神经与腓神经分离，神经端结扎后，剪去无关分支。

- 肌肉端结扎在肌腱上，将腓神经也一起结扎，结扎线留长。

- 保留膝关节，剪去腿骨，将标本离体。

- 将标本放入任氏液中，保持湿润。

2. 连接实验装置- 用大头针将标本的膝关节固定于标本盒R2和R3两记录电极之间的石蜡凹槽内。

- 神经中枢端接触刺激电极S1和S2，肌肉接触记录电极R3和R4，之间接触接地电极。

- 肌肉的结扎线从标本盒中穿出，连接张力换能器。

3. 观察神经兴奋传导- 用刺激器对坐骨神经进行电刺激，观察腓肠肌的收缩反应。

- 改变刺激强度和频率，观察腓肠肌收缩的变化。

4. 观察反射弧- 制备脊蛙，观察反射弧的结构和功能。

- 分别刺激感受器、传入神经、反射中枢、传出神经和效应器，观察反射活动的变化。

5. 观察神经肌肉接头兴奋传递- 在神经肌肉接头处滴加药物，观察肌肉收缩的变化。

五、实验结果与分析1. 观察到蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本在电刺激下产生收缩反应。

2. 随着刺激强度的增加，腓肠肌收缩力量逐渐增大。

3. 随着刺激频率的增加，腓肠肌收缩频率逐渐增大。

实验1 蛙坐骨神经––––腓肠肌标本制备、分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响【课程名称】【实验名称】【实验性质】【器材】蟾蜍或蛙；任氏液；二道生理记录仪、双脉冲刺激器、肌槽、常规手术器械、玻璃分针、毁髓针、锌铜弓、解剖盘、烧杯、滴灌、任氏液等。

【实验目的】1.学习坐骨神经–腓肠肌标本的制备方法。

2.分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响。

【实验原理】刺激坐骨神经能引起腓肠肌产生收缩。

在其他条件不变情况下，不断增大刺激频率可引起肌肉收缩形式发生改变。

若刺激频率较小，两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩和舒张所持续的时间（即单收缩）时，肌肉收缩表现为一连串的单收缩；若增大刺激频率，使两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩的收缩期时间，而小于单收缩时，肌肉呈现不完全强直收缩；若继续增加刺激频率，使两次刺激间隔时间小于一次肌肉收缩的收缩期时间，肌肉则表现出完全强直收缩。

【实验步骤】1、双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上。

用食指按压其头部前端，拇指压住躯干的背部，使头向前俯；右手持毁髓针，由两眼之间中线向后方划触，触及两耳后腺之间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。

将毁髓针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，然后针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以毁脑组织。

再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。

脊髓彻底捣毁时，可看到蟾蜍后肢突然蹬直，然后瘫软，此时的动物为双毁髓动物。

2、剥制后肢标本：左手持手术镊提起两前肢之间背部的皮肤，右手持手术剪横向剪断皮肤，然后往后肢方向撕剥皮肤。

剪开腹壁肌肉，用手术镊提起内脏，翻向头部，在看清支配后肢的脊神经发出部位后，于其前方剪断脊柱。

3、分离两后肢：将去皮的后肢腹面向上置于解剖盘上，右手持金冠剪纵向剪开脊柱，再剪开耻骨联合，使两后肢完全分离。

4、分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱端腹面向上，用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经，股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的裂缝，找出坐骨神经，剪断盖在上方的梨状肌，完全暴露坐骨神经，剪去支配腓肠肌之外的分支，再剪去脊柱及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。

实验二坐骨神经—腓肠肌标本与坐骨神经标本的制备、骨骼肌的收缩一、目的要求1、掌握蛙类动物单毁髓和双毁髓的方法。

2、掌握坐骨神经-腓肠肌标本和坐骨神经干标本的制备方法。

3、学习肌肉收缩的记录方法。

4、观察与分析肌肉单收缩的三个时相，分析骨骼肌收缩形式与刺激频率之间的关系。

二、实验原理蛙类动物的某些基本生命活动，如神经的生物电活动、肌肉收缩等与哺乳动物相似。

其离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握，而且动物来源丰富，因此在生理学实验中常用蟾蜍的坐骨神经—腓肠肌标本和坐骨神经标本来观察组织的兴奋性、刺激与反应的规律以及骨骼肌收缩的特点。

肌肉受到一次阈上刺激而产生的一次收缩为单收缩，其过程可分为三个时相，即潜伏期、缩短期与舒张期。

肌肉受到连续的阈上刺激时，如果刺激间隔小于单收缩的过程，相邻两单收缩的时相会出现融合，表现为强直收缩现象。

如果后一次收缩的开始发生在上次收缩的舒张期，称不完全强直收缩；如果后一次收缩的开始发生在上次收缩的缩短期，称完全强直收缩。

三、材料与器械•蟾蜍或蛙，蛙类手术器械（手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、金冠剪、毁髓针、固定针），蛙板，锌铜弓，小烧杯，滴管，纱布，细棉线，任氏液。

BL—420生物机能实验系统，肌槽，张力换能器。

四、实验步骤（一）神经肌肉标本的制备1、毁髓（1）单毁髓一手握蟾蜍，食指按压头部前端，拇指压住躯干背部，令其背部向上，头向前俯；另一手持毁髓针在左右耳后腺之间，背部的凹陷处（枕骨大孔的位置，此处与两眼的连线约成等边三角形）将毁髓针垂直刺入，然后将针尖向前刺入颅腔，搅动以捣毁脑组织，此为单毁髓。

（2）双毁髓将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。

毁髓成功的标志：蟾蜍后肢突然蹬直，然后瘫软。

2、剥制后肢标本（1）金冠剪横向剪断脊柱（骶髂关节前1cm)。

（2）延脊柱两侧向下剪开体壁，剪除头、上肢及内脏。

（3）右手向后方剥去皮肤。

（4）将后肢标本放入任氏液中，清洗器械。

生物实验报告坐骨神经腓肠肌标本制备坐骨神经腓肠肌标本的制备和神经干动作电位的观察与传导速度的测定一、实验目的：1.学习蛙类动物双毁髓的实验方法。

2。

学习并掌握坐骨神经—腓肠肌标本的制备方法。

3。

观察蛙坐骨神经干复合动作电位的基本波形，并了解其产生的原理。

4.学习蛙和蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。

二、实验材料:1．实验对象：蟾蜍2.实验器材：常规手术器械（粗剪刀、手术剪、眼科剪、手术镊、眼科镊）蛙板、蛙钉、探针、锌铜弓、玻璃分针、培养皿、任氏液、滴管、手术线、PC机、信号采集处理系统、神经屏蔽盒等。

三、实验原理：神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋.如果在离体神经干的一段施加刺激,从另一端引导传来的神兴奋冲动，可以记录出双相电位，加入在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损伤，阻断其兴奋传导能力，这时候记录出的动作电位就成为单相电位.神经细胞的动作电位是以全或无的方式产生的.但是，复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的增加而增大的。

......感谢聆听如果在远离刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位,两引导点之间的距离为m,在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为s。

即可按照公式v=m／s来计算出兴奋的传导速度。

蛙类的坐骨神经干属于混合性神经，其中包含有粗细不等的各种纤维，其直径一般为３-29um,其中直径最粗的有髓纤维为A类纤维,传导速度在正常室温下为35-40 ｍ／s。

......感谢聆听神经每兴奋一次极其在兴奋以后的回复过程中，其兴奋性都要经历一次周期性的变化，其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期4个时期.为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生的周期性变化，首先要给神经施加一个条件性刺激引起神经兴奋，然后在前一兴奋及其恢复过程不同时相再施加一个测试性刺激，用于检查神经的兴奋阈值和所引起的动作电位的幅度，以判定神经兴奋性的变化。

实验一坐骨神经腓肠肌标本制备目的学习坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。

原理两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织所需要的生活条件比较简单，易于控制和掌握。

因此在生理实验中常用蟾蜍的神经肌肉标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的规律以及骨骼肌收缩的特点等。

实验对象蟾蜍实验用品蛙类手术器械、烧杯、培养皿、棉球、纱布、细丝线、任氏液、粗剪刀、蛙板等。

实验步骤1.破坏脑和脊髓左手持蛙，用食指压其头部前端，使头前俯。

右手持探针由头端沿正中线向后划，触到凹陷即为枕骨大孔，将探针由此垂直刺入。

再将探针折向前方，插入颅腔内并左右搅动捣毁脑组织。

再将探针退回至进针处，针尖转向后方，刺入椎管捣毁脊髓。

此时蟾蜍四肢瘫软，表明脑脊髓已完全破坏。

2.剪除躯干上部及内脏用粗剪刀在骶髂关节水平以上1cm处剪断脊柱。

左手握住后肢，右手持剪刀沿脊柱的断口向下剪开两侧的皮肤及肌肉，再剪除已下垂的躯干上部及内脏。

3.剥皮剪掉肛门周围的皮肤，左手捏脊柱断端（勿触碰神经），右手捏住断端边缘的皮肤，向下剥掉两后肢皮肤。

将标本背位放于表面有少许任氏液的蛙板上，洗净双手及用过的器械。

4.游离坐骨神经沿脊柱两侧用玻璃分针分离坐骨神经，用线在坐骨神经靠近脊柱处结扎并剪断。

左手捏住脊柱，右手持剪刀从背面剪去向上突出的尾骨。

然后从腹面沿中线将脊柱剪成两半。

捏住两侧下肢带骨用力向两侧掰，使耻骨联合处脱臼，再从耻骨联合中央剪开两后肢，一后肢放入盛有任氏液的平皿中备用，一后肢用玻璃分针划开梨状肌及其附近的结缔组织，循坐骨神经沟（股二头肌与半膜肌之间的裂隙处）找出坐骨神经的大腿部分，用玻璃分针将腹部的坐骨神经小心勾出来，手执结扎神经的线，剪断坐骨神经的所有分支，一直游离至膝关节。

5.完成坐骨神经腓肠肌标本的制备将分离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉，并用普通剪刀将股骨刮干净，在股骨中部剪去`上段股骨。

再在跟腱处以线结扎，剪断并游离腓肠肌至膝关节处，在膝关节以下将小腿其余部分剪掉。

实验1 坐骨神经腓肠肌标本制备【实验目的】掌握蛙类的捉拿和破坏脑脊髓的方法，掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备技术、获得兴奋性良好的标本。

【实验原理】蟾蜍及蛙类的一些基本生命活动与哺乳动物相似，又因其离体组织在短时间内所需的生活条件简单，易于控制和掌握，因此在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋和兴奋性、刺激与反应及肌肉收缩等基本生理现象。

因而制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验中必须掌握的一项基本技能。

【实验对象】蟾蜍或青蛙。

【实验用品】蛙类手术器械一套，（普通剪刀、手术剪刀、眼科剪、组织镊子、眼科镊子、探针、锌铜弓、玻璃分针、蛙板、玻璃板、蛙钉）任氏液、方瓷盘、培养皿、棉线、纱布、滴管等。

【实验步骤】1.破坏脑和脊髓取蟾蜍一只，用左手握住蟾蜍，食指按压头部前端，拇指按压背部，使头部前俯；右手持金属探针由头端沿中线向尾方划触、触及凹陷处即枕骨大孔的所在。

将探针由凹陷处垂直刺入2~3mm，刺破皮肤即入枕骨大孔，这时将探针尖端水平转向头方，向前探入颅腔内，然后向各方搅动探针，以捣毁脑组织。

脑组织捣毁后，将探针退出；再由枕骨大孔刺入，并水平转向尾方，与脊髓平行刺入椎管，来回抽动探针以彻底破坏脊髓。

当动物四肢肌肉的紧张性完全消失时，提示脑和脊髓完全破坏（见图2-1）。

2.剪除躯干上部及内脏在骶髂关节水平以上1～1.5cm处剪断脊柱。

左手握止蟾蜍后肢、用拇指压止骶骨，使蟾蜍头与内脏自然下垂，右手持普通剪刀（严禁用手术剪剪骨骼），沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及紧贴于脊柱两侧的坐骨神经。

剪除过程中注意勿损伤坐骨神经。

3.剥皮左手握紧脊柱断端（注意不要握住或压迫神经），右手捏住其上的皮肤边缘、用力向下剥掉全部后肢的皮肤（图2-2 ）4.清洗把剥皮后的标本放在盛有任氏液的培养皿中。

将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净，再继续下面步骤。

注意剥皮后的标本不能用自来水冲洗。

5.分离两腿用镊子夹住脊柱标本背面朝上，剪去向上突起的尾骨（注意勿损伤坐骨神经）。

坐骨神经腓肠肌标本制备步骤《坐骨神经腓肠肌标本制备步骤坐骨神经腓肠肌标本制备步骤》嘿，朋友！今天咱们来聊聊坐骨神经腓肠肌标本的制备步骤。

这事儿啊，说起来还挺有趣的，您可得听我慢慢道来。

呢，咱们得准备好一些工具和材料。

像是蛙类动物，常用的是蟾蜍，还有一些手术器械，像解剖刀、镊子、剪刀之类的，当然还少不了一些生理盐水，这可是保持标本活性的关键哦。

准备好这些，咱们就可以开始动手啦！把蟾蜍捉来，先得让它安静下来。

这时候可以给它来一下“温柔的抚摸”，让它放松放松。

然后，用大头针把蟾蜍的四肢固定在解剖盘上。

这一步可得小心点，别弄疼了它。

找到脊柱后，在它的两侧找到坐骨神经，这两条神经就像是藏在深处的宝贝，得仔细找才能发现。

找到后，用镊子轻轻把周围的组织清理干净，让坐骨神经完全暴露出来。

然后，顺着坐骨神经往下，就能找到腓肠肌。

这腓肠肌就像是一个小肌肉块，连着坐骨神经。

用剪刀把坐骨神经和腓肠肌周围的其他组织剪掉，但要注意，千万别把神经和肌肉剪断了，这可需要点耐心和细心。

不过，还没完呢！把取下的标本放在盛有生理盐水的培养皿里，让它好好泡个澡，保持湿润和活力。

经过这一系列的操作，咱们的坐骨神经腓肠肌标本就制备好啦！是不是感觉还挺有意思的？这当中每一步都需要咱们小心谨慎，就像对待一件珍贵的宝贝一样。

朋友，您要是自己动手做这个标本，一定要按照这些步骤慢慢来，相信您一定能成功的！。

实验二坐骨神经－腓肠肌标本的制备一．目的和要求1．学习蛙类动物双毁髓的实验方法2．学习掌握坐骨神经－腓肠肌标本的制备方法3．了解急性离体器官，组织实验二．动物与器材1．动物：蟾蜍2．器材：常用手术器械（手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针）、辣盘、锌铜弓、培养皿、蛙钉、滴管、烧杯、棉线3．试剂：任氏液――提供母液，需按1：10稀释三．原理把蟾蜍的腓肠肌和连同它相连的坐骨神经从体内剥离出来，制成“神经－肌肉”标本；如果在神经的游离端一侧轻轻的触动神经，或者通以适当的电流作为刺激，那么在经过一个极短的时间后，可以看到肌肉出现一次快速的缩收和舒张。

而且，只要刺激不造成组织的损伤，上述反应可以重复出现。

这说明，神经或肌肉表面受到刺激的点，一定产生了某种信号，他们沿着神经纤维或肌细胞传导，最后导致整个肌肉发生受挫。

按该信号的传导速度和可重复性分析，只能是电信号。

用近代精密的电测量设备，即可确定在神经被刺激的点产生了一个微弱的电信号，它以一定的速度传向肌肉，而肌肉的收缩则发生在这种电反应之后。

上述神经－肌肉标本实际是整个体内反射弧的一部分，后者在进行正常活动时，先由感受器细胞对外在环境变化进行跨膜信号传导，随后才发生电信号在传入和传出神经纤维上的传导和细胞间的信息传递。

而肌肉运动主要时由于产生的动作电位。

四．方法与步骤1．双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上，用无名指和小指夹在其后肢，中指抵制前肢，食指按压其头部前端，拇指压住躯干背部，使头向前俯；右手持毁髓针，找到两耳后腺之间的凹陷处即枕骨大孔位置，垂直刺入约1～2mm，然后将针尖向前刺入颅腔，搅动数下，捣毁脑组织（可感觉针触及颅骨）。

此时为单毁髓动物。

再将毁髓针退回垂直刺入状态，扔留1～2mm的针尖位于枕骨大孔处，将针尖转向右方，与脊椎平行刺入椎管，捣毁脊髓。

只蟾蜍后肢瘫痪，不再动弹。

2．剥制后肢标本：将双毁髓的蟾蜍背面向上放于蜡盘上，左手拿眼科镊轻提起两前肢间背部的皮肤，右手持眼科剪横向剪开皮肤，暴露耳后腺后缘水平的脊柱。

实验一坐骨神经-腓肠肌标本制备一、实验背景☻蛙类的一些基本生理活动规律与温血动物相似，而维持其离体组织正常活动所需的理化条件比较简单，易于建立和控制。

☻在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋与兴奋性、刺激与肌肉收缩等基本生理现象和过程。

☻制备坐骨神经腓肠肌标本是生理实验中必须掌握的一项基本技能。

二、实验目的☻学习蛙类动物单毁髓和双毁髓的方法。

☻学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。

三、实验材料☻实验动物：蟾蜍☻实验器材和药品：蛙板、普通剪刀、手术剪、镊子、纱布、玻璃分针、蛙钉、蜡盘、滴管、培养皿、锌铜弓、粗棉线、毁髓针、任氏液四、实验流程洗干净实验动物毁髓剥制后肢分离后肢分离坐骨神经游离腓肠肌分离股骨头标本检验五、实验步骤1）蟾蜍的双毁髓①取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。

②左手握住蟾蜍，用食指按压其头部前端，拇指按压背部，右手持毁髓针于枕骨大孔刺入颅腔，左右搅动充分捣毁脑组织。

③将探针抽回至进针处，再向后刺入脊椎管，反复抽插捣毁脊髓。

如果蟾蜍四肢松软，呼吸消失，表明脑和脊髓已完全破坏，否则应按上法反复进行。

注意：勿挤压耳后腺，防止分泌物射入眼睛。

2）剥制后肢标本①在骶髂关节水平以上0.1cm~1cm处剪断脊柱，左手握住蟾蜍后肢，用拇指压住骶骨，使蟾蜍头与内脏自然下垂，右手持普通剪刀，沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及脊柱两侧的坐骨神经。

②剪除过程中注意勿损伤坐骨神经。

③握紧脊柱断端（注意不要握住神经），右手握住其上的皮肤边缘，向下剥掉全部后肢皮肤。

把标本放盛有任氏液的培养皿中。

将手及部手术器械洗净，进行下面步骤。

3）分离两后肢①用镊子夹住脊柱将标本提起，背面朝上。

②沿正中线用剪刀将脊柱和耻骨联合中央辟开两侧大腿，完全分离。

③两后肢浸入任氏液的培养皿中，一只制标本，一只备用。

4）游离坐骨神经♣标本腹面朝上，脊柱旁游离坐骨神经，并穿线结扎。

♣将标本背面朝上，把梨状肌及其附近的结缔组织剪去。

第1篇一、实验目的1. 熟悉蟾蜍腓肠肌标本的制备方法。

2. 掌握刺激强度、频率对肌肉收缩的影响。

3. 观察神经肌肉接头兴奋传递和骨骼肌兴奋的电变化与收缩之间的时间关系及其各自特点。

4. 理解神经肌肉兴奋性的生理机制。

二、实验原理蟾蜍腓肠肌标本是生理学实验中常用的实验材料，因其离体组织生活条件易于掌握，且与哺乳类动物生理功能相似。

通过观察蟾蜍腓肠肌在不同刺激强度、频率下的收缩反应，可以了解神经肌肉兴奋性的生理机制，以及刺激与反应之间的关系。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、生理盐水、手术刀、剪刀、镊子、电刺激器、换能器、记录仪等。

2. 实验仪器：显微镜、电刺激器、换能器、记录仪、生理盐水浴槽等。

四、实验步骤1. 制备蟾蜍腓肠肌标本：a. 将蟾蜍处死，用生理盐水冲洗干净。

b. 用手术刀沿脊柱两侧剪开皮肤，暴露腰骶丛神经。

c. 游离坐骨神经和腓肠肌，剪去无关分支。

d. 将腓肠肌和坐骨神经分别结扎，用生理盐水浸泡。

2. 连接仪器：a. 将坐骨神经连接到电刺激器。

b. 将腓肠肌连接到换能器。

c. 将换能器连接到记录仪。

3. 观察刺激强度对肌肉收缩的影响：a. 调整电刺激器的输出强度，从低到高依次刺激坐骨神经。

b. 观察并记录腓肠肌的收缩反应，分析刺激强度与肌肉收缩之间的关系。

4. 观察刺激频率对肌肉收缩的影响：a. 调整电刺激器的输出频率，从低到高依次刺激坐骨神经。

b. 观察并记录腓肠肌的收缩反应，分析刺激频率与肌肉收缩之间的关系。

5. 观察神经肌肉接头兴奋传递和骨骼肌兴奋的电变化与收缩之间的时间关系：a. 观察并记录腓肠肌在刺激前后的电位变化。

b. 分析电位变化与肌肉收缩之间的关系。

五、实验结果与分析1. 刺激强度与肌肉收缩的关系：实验结果显示，随着刺激强度的增加，腓肠肌的收缩幅度也随之增加。

当刺激强度达到一定阈值时，肌肉收缩达到最大幅度。

当刺激强度继续增加时，肌肉收缩幅度不再增加。

2. 刺激频率与肌肉收缩的关系：实验结果显示，随着刺激频率的增加，腓肠肌的收缩幅度逐渐减小。

机能学实验课教案机能学基础一、实验学概述机能实验学，也叫实验生理学。

它是把生理学、病理生理学、药理学三门学科的实验有机结合在一起的一门新型的实验性课程。

它的内容不但包括各科实验中的一些经典实验，比如生理学实验：蛙类坐骨神经腓肠肌标本的制备及不同刺激强度、刺激频率对骨骼肌收缩的影响和离体蛙心灌流实验；药理学实验：PD2的测定、药物半衰期的测定、钙镁拮抗、有机磷中毒及解救；病理生理学实验如休克实验。

它还包括一些综和性的实验如心衰、肾衰和呼衰，这些实验通过对各种动物的正常状态、病理模型复制、药物解救，把生理、病理生理、药理三门学科的知识融会贯通起来。

通过这些实验的学习，不但可以巩固我们所学的理论知识，而且还能掌握一些基本的实验操作、仪器器械的使用，提高实际动手能力，为以后进入临床打好基础。

二、机能学实验的基本要求1.实验前要复习一下与本次实验有关的生理、药理和病理生理三学科的知识，预习一下实验讲义，想一想实验中可能出现的一些情况，以便在实际操作中及时纠正。

2.实验中⑴要遵守课堂纪律,不要迟到早退,不要在课堂上大声喧哗，保持正常的课堂秩序。

⑵爱护我们的实验仪器设备，特别是今天要用到的微机、张力换能器，其中的生物信号采集软件不太好使用。

⑶爱惜我门的实验器械，领器械时仔细检查，发现有损坏的器械，及时向老师反应。

⑷仔细耐心地观察实验中出现的各种现象，客观真实地记录实验结果；对于实验结果，应做如下思考：①取得了什么结果？②为什么会出现这种结果？③出现这种结果有何实际或理论意义？④出现非预期结果的原因何在？3.实验后⑴班长要安排同学值日,把实验室整理干净。

⑵同学门自己要填写实验记录，清洗器械，把桌子擦干净，认真书写实验报告。

三、实验报告的书写文字简练，通畅，书写清楚，整洁，正确使用标点符号四、实验室守则要求同学们自己学习。

软件的使用上区1、标题栏2、菜单栏输入信号CH1、2、3、4通道可接受压力、张力、动作电位、神经放电、肌电、脑电、心电、慢速电信号、呼吸及温度等生物信号。

生物实验报告姓名：班级：日期：同组者：实验序号：实验题目：坐骨神经-腓肠肌标本的制备实验目的：1.学习蛙类动物双毁髓的实验方法。

2．学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。

实验原理：两栖类动物的离体组织所需要的生活条件比较简单，易于控制和掌握。

因此在生理实验中常用蟾蜍的坐骨神经——腓肠肌标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激强度、刺激频率与肌肉收缩反应的一些规律以及骨骼肌的收缩特性等。

实验对象：蟾蜍实验器材：常规手术器械（粗剪刀、手术剪、眼科剪、手术镊、眼科镊）蛙板、蛙钉、探针、锌铜弓、玻璃分针、培养皿、任氏液、滴管、手术线等。

实验方法及步骤：1、破坏脑脊髓部位枕骨大孔。

如果蟾蜍四肢松软，呼吸消失，表示脑脊髓已完全破坏，否则按上述方法再进行捣毁。

2、剪去躯干上部及内脏在骶髂关节前1 cm处用金冠剪（粗剪）剪断脊柱（可在下肢前端）。

沿脊柱切口向下剪开两侧腹部皮肤至耻骨处，将头、前肢、内脏及腹部软组织全部剪掉，放于污物盘，只保留下端脊柱和下肢。

在腹侧脊柱两旁可看到腰骶神经丛。

注意切勿触及或损伤坐骨神经。

3、剥后肢皮肤左手持镊子夹住脊髓断端，右手捏住断端边缘，剥掉全部后肢皮肤。

将标本放于盛有任氏液的培养皿内，将手和手术器械洗净。

4、分离两腿用金冠剪剪去尾骨杆（骶骨），沿脊椎中线将脊柱剪开，再沿耻骨联合正中央剪开两侧大腿，使两腿完全分离（切勿伤及神经），将两腿浸于任氏液中。

5、游离坐骨神经取一后肢，腹面向上（背位），固定于蛙板上，沿脊柱侧用玻璃分针轻轻勾起坐骨神经，逐一剪去神经分支至股端。

用金冠剪剪断脊柱，只保留一小段椎骨片与坐骨神经相连。

将标本改为背面向上（腹位）固定，用镊子提起梨状肌，剪断，用玻璃分针将坐骨神经小心勾至背部。

再沿坐骨神经沟（半膜肌和股二头肌的肌间缝）分离坐骨神经。

用镊子夹住与神经相连的脊椎骨，提起神经，用眼科剪将神经分支及结缔组织膜顺序剪断，将神经一直游离到腘窝处。

6、游离腓肠肌用镊子夹住脊椎骨，将神经搭在腓肠肌上，用剪刀将膝关节周围的大腿肌肉完全剪除，用金冠剪将膝关节上方的股骨刮干净，暴露骨股并在距膝关节上1 cm处剪断，分离腓肠肌的跟腱，用线结扎，然后自跟腱的附着点剪断，提起跟腱，将腓肠肌分离至膝关节处，将小腿其余部分剪掉。

坐骨神经-腓肠肌标本的制备【实验目的】：掌握蛙类的捉拿和破坏脑脊髓的方法，掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备技术，了解神经-肌肉标本在实验中的应用。

【实验原理】：蛙或蟾蜍的一些基本生命活动与哺乳动物相似，其离体的神经-肌肉标本在一定时间内能保持其功能，体现活组织的某些共同的生理特性。

因此在生理学实验中常用坐骨神经-腓肠肌标本来观察兴奋性、刺激与反应的关系、骨骼肌的收缩形式等。

【实验对象】：蛙或蟾蜍【实验器材与药品】蛙类手术器械一套（粗剪刀、手术剪、眼科剪、镊子、金属探针、玻璃分针、蛙板与玻璃板、蛙钉、锌铜弓）、烧杯、培养皿、手术线、滴管、任氏液等。

【实验步骤与观察】1. 破坏脑和脊髓第一种破坏脑的方法：取蛙一只，用纱布包住蛙身，左手握蛙，右手持粗剪刀从口裂插入，沿两眼后缘剪去蛙头。

此法操作简单，但应注意止血。

第二种破坏脑的方法：左手握蛙，并用食指压其头部前端，使头前俯；然后右手持金属探针沿蛙头部的正中线下划，可触及一凹陷处即为枕骨大孔。

将探针从枕骨大孔垂直刺入1～2mm，再向前刺入颅腔，左右搅动破坏脑组织。

将探针刺入椎管，破坏脊髓。

此时蛙四肢松软，表示脑、脊髓已完全破坏（图2-1）。

图2-1 用探针损毁蟾蜍脑和脊髓图2-2 剪断脊柱2. 剪去躯干上部及内脏在蛙两腋稍下方的背部，用粗剪刀剪断脊柱（图2-2）。

左手握住蛙后肢，用拇指按压其骶骨，使蛙头和内脏自然下垂，沿背部两侧剪去其一切内脏和头胸部，仅保留一段脊柱及其两侧的坐骨神经和后肢（图2-3）。

剪除过程中注意勿损伤坐骨神经。

图2-3 剪除躯干上部和内脏3. 去皮左手用镊子夹住脊柱断端，右手握住断端边缘皮肤，向下剥去全部皮肤。

将标本放在盛有任氏液的培养皿中。

将手和用过的器材洗净。

4.分离两腿用镊子夹住脊柱标本背面，用粗剪刀沿脊柱正中至耻骨联合中央剪开分成两半（注意不要伤及坐骨神经），将一条腿浸入盛有任氏液的培养皿中。

5. 游离坐骨神经取一蛙腿放在玻璃板上，用蛙钉将标本的脊柱固定在蛙板上，趾蹼朝上拉直下肢后再用蛙钉固定在蛙板上。

⽣物实验报告坐⾻神经腓肠肌标本制备坐⾻神经腓肠肌标本得制备与神经⼲动作电位得观察与传导速度得测定⼀、实验⽬得:1.学习蛙类动物双毁髓得实验⽅法、2。

学习并掌握坐⾻神经—腓肠肌标本得制备⽅法。

3.观察蛙坐⾻神经⼲复合动作电位得基本波形,并了解其产⽣得原理。

4.学习蛙与蟾蜍离体神经⼲上神经冲动传导速度得⽅法与原理、⼆、实验材料:1.实验对象:蟾蜍2、实验器材:常规⼿术器械(粗剪⼑、⼿术剪、眼科剪、⼿术镊、眼科镊)蛙板、蛙钉、探针、锌铜⼸、玻璃分针、培养⽫、任⽒液、滴管、⼿术线、PC机、信号采集处理系统、神经屏蔽盒等。

三、实验原理:神经⼲在受到有效刺激以后可以产⽣复合动作电位,标志着神经发⽣兴奋。

如果在离体神经⼲得⼀段施加刺激,从另⼀端引导传来得神兴奋冲动,可以记录出双相电位,加⼊在引导得两个电极之间将神经⼲⿇醉或损伤,阻断其兴奋传导能⼒,这时候记录出得动作电位就成为单相电位、神经细胞得动作电位就是以全或⽆得⽅式产⽣得。

但就是,复合动作电位得幅值在⼀定刺激强度下就是随刺激强度得增加⽽增⼤得。

如果在远离刺激点得不同距离处分别引导离体神经⼲动作电位,两引导点之间得距离为m,在两引导点分别引导出得动作电位得时相差为ｓ。

即可按照公式ｖ=m/s来计算出兴奋得传导速度、蛙类得坐⾻神经⼲属于混合性神经,其中包含有粗细不等得各种纤维,其直径⼀般为3-29um,其中直径最粗得有髓纤维为A类纤维,传导速度在正常室温下为35－4０ m/ｓ。

神经每兴奋⼀次极其在兴奋以后得回复过程中,其兴奋性都要经历⼀次周期性得变化,其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期与低常期４个时期。

为了测定坐⾻神经在发⽣⼀次兴奋以后兴奋性所发⽣得周期性变化,⾸先要给神经施加⼀个条件性刺激引起神经兴奋,然后在前⼀兴奋及其恢复过程不同时相再施加⼀个测试性刺激,⽤于检查神经得兴奋阈值与所引起得动作电位得幅度,以判定神经兴奋性得变化。

四、实验⽅法及步骤:1、坐⾻神经⼲标本制备(1) 破坏脑与脊髓:取蛙⼀只,⽤⾃来⽔冲洗⼲净,左⼿持蛙,⽤⾷指下压其吻部,拇指按压在其骶髂关节下⽅,使其头尽量前俯,右⼿持探针沿两眼之间中线向后⽅轻划,⾄触及头颈部正中得凹陷处,即为枕⾻⼤孔得位置。