实验九 红细胞比容的测定
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血细胞比容测定
【目的】
掌握血细胞比容的温氏测定法。
【原理】
将定量的抗凝血液灌注于温氏管中,经过一定的速度和时间离心沉淀后,观察压紧红细胞层占全血体积的比值。
【实验器材或试剂】
1 器材:温氏比积管、毛细吸管、离心机。
2 试剂:按EDTA-K223.5mg/每试管(或肝素钠0.2mg/每试管)标准,将抗凝剂分装于小试管中干燥。
【操作步骤】
1、抽取静脉血2.0ml,立即注入装有抗凝剂的抗凝管中并混匀。
2、用细长毛细滴管吸取混匀的抗凝血,插入温氏比积管底部,然后将血液缓慢注入至10cm 刻度处,避免产生气泡。
3、将加好血液的比积管置于水平离心机,以3000r/min的速度离心30min,读取压实红细胞层柱高的毫米数,然后再以同样速度离心10min至红细胞层高度不再下降为止。
【结果计算】
血细胞比容=红细胞层柱高的毫米数×0.01
【注意事项】
1、所用器材必须清洁干燥,以防溶血,如遇溶血现象应加以注明。
2、不能使用影响红细胞体积的抗凝剂。
3、离心速度和时间要规范化,否则血细胞比容的误差很大。
【临床意义】
1、参考范围:男性:0.40~0.50
女性:0.37~0.48
2、增高或降低
A、血细胞比容增高:见于各种原因所致的血液浓缩或红细胞绝对性增多。
临床上测定脱水病人的血细胞比容,作为计算补液量的参考。
B、血细胞比容减低:见于各类贫血。
[实验目的]
学习和掌握用温氏分血管测定红细胞比容的方法。
[实验原理]
将定量的抗凝血灌注于特制的、具有刻度的比容管内,定时、定速离心后,有形成分和血浆分离,上层淡黄色液体是血浆,中间一薄层白膜是白细胞和血小板(或栓细胞),下层不透明的暗红色部分为红细胞,彼此压紧而不改变细胞的正常形态。
根据红细胞柱及全血高度,可计算出红细胞在全血中的容积比值,即为红细胞比容(压积)。
[主要仪器与器械]
温氏分血管,普通离心机,长针头,干棉球等。
[实验方法与步骤]
1.取血
2.离心
3000r·min-1,30min。
3.读数
注意事项
☐选择抗凝剂必须考虑到不能使红细胞变形、溶解。
本实验采用柠檬酸钠抗凝。
☐血液与抗凝剂混合、注血时应避免动作剧烈引起红细胞破裂。
☐温氏分血管内壁必须清洁干燥。
血液进入分血管内的刻度读数要精确,血柱中不得有气泡。
思考题
☐在哪些情况下,红细胞的比容明显增加?
☐测定红细胞比容时,常出现的误差来源是什么?☐测定红细胞比容的实际意义是什么?。
血液的组成和红细胞比容的测定[实验目的]:1、了解血液的组成,区别血浆、血清、血细胞及纤维蛋白。
2、测定红细胞比容。
[实验对象]:家兔[实验用品]:兔手术器械、动脉插管、试管、小烧杯、离心机、抗凝剂(肝素钠等)。
[方法与步骤]:1.兔颈动脉采血,徐徐注入试管A、B、C、D (肝素处理),F(未经肝素处理),封口膜封闭试管口,3000r/min离心30min。
取出,读取前4支试管血细胞柱刻度及全血刻度;再次离心5min,若血细胞柱刻度不变,取前4支试管血细胞压积的平均值,即为此家兔的血细胞压积值。
血细胞压积=血细胞柱刻度/全血刻度2.观察A、B、C、D、F试管中血液,分析其不同。
[实验结果]:1. A、B、C、D试管上层为血浆,下层为红细胞,中间一白色薄层为白细胞和血小板;而试管F中,上层为血清。
2.家兔血细胞比容测定:编号血细胞柱长度(cm) 全血柱长度(cm) 红细胞比容(%)ABCD此家兔红细胞比容为[分析讨论]:血液、血浆、血细胞比容血清、血浆[结论]:1、2[思考题]:1.测定红细胞比容的实际意义是什么?血液凝固及其影响因素[实验目的]:1、了解血液凝固的基本过程及加速或延缓血液凝固的因素。
2、学会兔颈部手术的基本操作。
[实验对象]:家兔[实验器材]:哺乳动物手术器械、兔手术台、动脉插管、动脉夹、气管插管、注射器、小试管8支、小烧杯2个、竹签、恒温水浴槽、冰块、棉花。
[药品]:25%乌拉坦溶液、石蜡油、肝素、草酸钾、肺组织浸液。
[实验步骤]:1.麻醉与固定仰卧位固定在兔台上,用1%普鲁卡因溶液局部麻醉。
2.手术颈动脉插管3. 观察项目(1) 观察加速或延缓血液凝固的因素,比较内源性凝血和外源性凝血将8支试管准备好(1,对照管;2,放棉花少许;3,蜡油润滑内表面;4,置于37℃水浴槽中;5,置于冰水浴槽中;6,加肝素8单位;7,加草酸钾1~2mg;8,加肺浸液1ml),打开动脉夹,每管加入血液2ml,即刻开始计时(6,7,8号试管加入血液后轻轻摇匀,使血液与试剂充分混合),每隔15s,将试管倾斜一次,至血液不再流动为止。
红细胞比容测定实验原理
红细胞比容的测定原理是将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。
具体来说,将抗凝血灌注于特制的毛细玻璃管中,离心一定时间,血浆和血球分离,在毛细玻璃管内形成两个明显的相分离层,上层为血浆,下层为红细胞。
通过读取分离层的高度差,即可计算出红细胞比容。
这种方法被称为离心法,主要有两种常见的实验方法:温氏法和微量法。
其中,温氏法是将血样加到温氏管中,经过适当的加热让血液凝固,并保持放置一定时间,最后进行离心操作。
而微量法则是直接将血样加到毛细玻管中,并进行离心操作。
总之,红细胞比容测定的原理是根据离心法,在一定条件下将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中进行离心操作,通过计算红细胞层占全血的体积比来测定红细胞比容。
红细胞比容名词解释
血细胞比容测定的临床意义基本同红细胞计数或血红
蛋白测定,常用作贫血诊断和分类的指标。
还可用于临床决定病人是否需要补液的实验检查依据。
通常以HCT30%-35%
为出现缺氧临界值,此时除输入晶体液及胶体液外,还应输入CRBC。
英文全称Redbloodcellspecificvolume
正常范围
男性40%~54%;
女性37%~47%;
新生儿48%~68%。
HCT
检查介绍
红细胞比容是指一定容积全血中红细胞所占的百分比。
又称红细胞比容(比积/压积)。
临床意义
血细胞比容测定的临床意义基本同红细胞计数或血红蛋白测定,常用作贫血诊断和分类的指标。
还可用于临床决定病人是否需要补液的实验检查依据。
通常以HCT30%-35%为出现缺氧临界值,此时除输入晶体液及胶体液外,还应输入CRBC。
红细胞比容测定实验报告实验目的:1.了解红细胞比容的概念和意义;2.掌握红细胞比容测定的方法和技巧;3.分析不同因素对红细胞比容的影响。
实验原理:1.取一定量的血液样本,加入抗凝剂进行抗凝处理;2.用离心机进行离心,使血液离心沉积,红细胞沉积到底部形成红细胞柱;3.读取红细胞柱的体积,即为红细胞比容。
实验仪器和试剂:1.离心机;2.采血器;3.抗凝剂(例如EDTA);4.离心管;5.读数尺。
实验步骤:1.用采血器采集一定量的患者血液样本;2.加入适量的抗凝剂进行抗凝处理;3.将抗凝后的血液样本转移到离心管中;4.将离心管放入离心机中,进行高速离心;5.离心结束后,取出离心管,观察离心后血液的形态变化;6.用读数尺读取红细胞柱的高度,即为红细胞比容。
实验结果和数据处理:通过实验测得的红细胞比容数值可以用来判断机体的贫血程度。
正常人的红细胞比容数值一般在37%~54%之间,如果低于37%,则表明机体存在贫血。
实验探究:在实验中,还可以通过改变不同因素来观察对红细胞比容的影响。
例如,可以观察不同抗凝剂对红细胞比容的影响,不同离心速度对红细胞比容的影响等。
通过这些观察和比较,可以得出一些关于红细胞比容的规律。
实验总结:红细胞比容测定是一种简单而常用的实验方法,可以用来评估机体的贫血程度。
通过实验,我们不仅了解了红细胞比容的概念和意义,还掌握了测定红细胞比容的方法和技巧。
同时,通过观察和比较不同因素对红细胞比容的影响,我们也对红细胞比容这一指标有了更深入的了解。
开放性实验血细胞比容测定(温氏法)(多媒体)【要求】了解血细胞比容测定的原理及方法,掌握血细胞比容参考值及其临床意义。
【原理】抗凝全血经离心沉淀后,可测出下沉的血细胞在全血中所占体积的百分比,即血细胞比容。
【试剂】EDTA-K2或双草酸盐抗凝剂。
1.5ml注射器、试管。
2.毛细滴管长约12cm,口径不大于2mm。
3.温氏(Wintrobe)管上以1mm为间隔,刻有0~100mm的刻度(图1-5)。
【操作】1.试管内加入抗凝剂,每管内加EDTA-K2或双草酸盐溶液0.5ml,烤干备用。
2.静脉采血2ml,立即注入抗凝管中,混匀。
3.用细长的毛细滴管取摇匀的抗凝血,从温氏管底部徐徐注入血液,随血液平面上升而渐渐向上抽提毛细滴管,直到血液至“100”刻度处,切勿产生气泡。
4.将注入血液的温氏管置水平离心机中,以相对离心力2264g(即有效半径22.5cm),即300rpm速度离心30min,读取红细胞层高度,然后再离心10min至红细胞不再下降为止,离心后血液分为5层,从上至下依次是:血浆层;白色乳糜层(主要为血小板);灰红色层(主要为白细胞和有核细胞);暗红色层(主要为被血细胞代谢还原的还原血红蛋白);鲜红色层(为含习红细胞)。
5.读取以暗红色红细胞层为准的红细胞柱高的毫米数,乘以0.01报告(或以百分比报告)。
【注意事项】1.所有器材必须清洁干燥,以防溶血。
2.抗凝剂与血液要充分混合,防止部分血液发生凝固,出现小凝块。
3.离心力大小直接影响结果,本试验一定要在达2264g的条件下进行离心。
4.采血后应尽快试验,最好不超过3h。
【参考值】男性 0.42~0.49(42%~49%)女性 0.37~0.48(37%~48%)【临床意义】1.血细胞比容减少见于各种贫血。
2.血细胞比容增多见于,①呼种原因所致的血液浓缩,如大量呕吐、腹泻、失水、大面积烧伤等;②真性红细胞增多症有时血细胞比容可高达0.80左右;③继发性红细胞增多症,如新生儿、高原居民及慢性心肺疾患。
血细胞比容参考方法血细胞比容(Hematocrit,HCT)是指血液中红细胞所占的体积比例,通常用于评估贫血、脱水和输液情况。
测定血细胞比容的方法有多种,本文将介绍常用的离心法和微量法两种测定血细胞比容的参考方法。
一、离心法测定血细胞比容。
离心法是一种常用的测定血细胞比容的方法,其原理是利用血液中不同比重的成分在离心作用下分层的特性。
具体操作步骤如下:1. 取一定量的全血标本,通常采用抗凝血管采集新鲜全血。
2. 将采集的全血标本放入离心管中,注意不要晃动或振动,以免破坏血细胞的层析。
3. 将离心管放入离心机中进行离心,通常离心速度为3000转/分钟,离心时间为5分钟。
4. 离心结束后,观察离心管内血液分层情况,可见上层为血浆、中间为白细胞和血小板层,底层为红细胞。
5. 使用比色计或离心管刻度尺测量红细胞层的高度,再除以离心管内总血液的高度,即可得到血细胞比容。
二、微量法测定血细胞比容。
微量法是一种快速、准确的测定血细胞比容的方法,其原理是利用微量血液在离心作用下的分层特性。
具体操作步骤如下:1. 取一定量的全血标本,通常采用抗凝血管采集新鲜全血。
2. 将采集的全血标本放入微量离心管中,注意不要晃动或振动,以免破坏血细胞的层析。
3. 将微量离心管放入微量离心机中进行离心,通常离心速度为12000转/分钟,离心时间为1分钟。
4. 离心结束后,观察微量离心管内血液分层情况,可见上层为血浆、中间为白细胞和血小板层,底层为红细胞。
5. 使用微量离心管刻度尺测量红细胞层的高度,再除以微量离心管内总血液的高度,即可得到血细胞比容。
在进行血细胞比容测定时,需要注意以下几点:1. 采集全血标本时,应避免气泡和异物的进入,以免影响测定结果。
2. 离心过程中,应注意离心管的摆放位置和离心速度的调节,以保证血液的均匀分层。
3. 在测量血细胞比容时,应注意读数的准确性,避免误差的发生。
综上所述,血细胞比容的测定方法有离心法和微量法两种,各有其特点和适用范围。
实验报告实验名称血液学实验实验目的1、掌握实验用兔颈动脉采血的方法2、了解红细胞比容及其测定方法3、血液凝固的基本过程及影响血凝的一些因素实验原理1、红细胞比容测定原理将抗凝血放在特制有刻度的玻璃管(温氏分血管)中,经过离心沉淀,使血细胞与血浆分离。
红细胞下沉,彼此压紧而又不改变每个血细胞的正常形态。
根据玻璃管刻度的读数,可以计算出红细胞在全血中所占的容积百分比——即红细胞比容。
2、血液凝固原理血液凝固可分为三个主要步骤。
第Ⅰ阶段是凝血因子FX 激活成FXa 并形成凝血酶原复合物(凝血酶原激活物)第Ⅱ阶段是凝血酶原(Prothrombin ,F Ⅱ)激活成为凝血酶(thrombin ,F Ⅱa )第Ⅲ阶段是纤维蛋白原(FI )转变成纤维蛋白(filbrin ,FIa )。
在这三个主要步骤中都需要Ca 离子的参与。
实验材料及设备材料:大兔一只,兔手术保定台, 设备:烧杯(500ml ,50ml ),常用手术器械(手术刀、毛剪、手术剪、止血钳),线动脉套管,动脉夹 温氏分血管,长颈滴管,5毫升试管,离心机,天平,5ml 注射器试管,试管架,吸管,2%戊巴比妥钠,3.8%柠檬酸钠,肝素,1%氯化钙,5%草酸钾,液体石蜡,带有开叉橡皮管的玻棒等。
试验方法及步骤(一)手术操作1、2%戊巴比妥钠按1ml/kg 的剂量从耳缘静脉注入实验用兔2、麻醉后仰卧固定于手术台上(同时准备实验用试管等)3、剪去颈部术野的被毛,切开皮肤,找出两侧颈动脉4、将颈动脉剥离2厘米左右,然后在颈动脉下面穿两条线。
将一侧颈动脉在远心端用线结扎,再于近心端用动脉夹夹住。
结扎处与动脉夹之间最好不少于1.5厘米5、用眼科剪刀在这段动脉上靠近结扎处1/4的地方,斜向近心方向剪一小口,将动脉套管插入,用线扎好,以免滑脱,待用(需采集血样时打开动脉夹即可)专业: 动物科学 姓名: 张思佳学号: 3090100252 日期: 2011/ 5/5 地点: 生物实验楼装订线(二)比容的测定1、用配有长注射针的注射器吸取含肝素的抗凝血,然后将注射针插入温氏分血管的底部,缓缓地将滴管内的血液注入分血管内(不得有气泡),使血液正确地装到刻度10处。