尿酸的测定

24小时尿酸测定标准操作规程1 检验申请检验项目申请：24小时尿酸测定，临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理尿样：收集24小时尿样品，可采用二甲苯防腐。

3 方法原理同血清尿酸的方法原理。

4 试剂及其他用品同血清尿酸。

5 校准品与校准模式5.1校准品： Beckman-Coulter SYNCHRON MULTI 校准液，其浓度可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料。

5.2校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。

5.3校准周期：校准间隔时间不限，试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要定标。

5.4校准液重建方法：Beckman-Coulter SYNCHRON MULTI 校准液即开即用，无需特殊准备。

6 质控品与室内质控规则6.1质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。

6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。

6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。

6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。

6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。

7 适用仪器适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。

8 标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。

9 主要分析参数同血清尿酸。

10 结果计算24小时尿酸总量＝尿酸的相应浓度×24小时体积（L）11 检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。

11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。

11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。

血清尿酸的检测及临床意义一、概述1、尿酸 (uric acid，UA) 是嘌呤碱基代谢产物，其中大部分由内源性核酸降解产生，小部分来源于食物中的核酸代谢，主要在肝脏中生成，小部分尿酸可经肝脏随胆汁排泄，其余大部分均从肾脏排泄，尿酸从肾小球滤过后在肾小管中重吸收和分泌，原尿中90%尿酸被肾小管重吸收。

2、在排除外源性尿酸干扰，血尿酸可以反映肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能。

临床检测尿酸浓度主要用于痛风诊断、关节炎鉴别及肾功能评价。

二、检测方法1、尿酸的测定方法有磷钨酸 (PTA) 法、尿酸酶法和高效液相色谱(HPLC)法。

2、干化学方法也是基于尿酸酶的分析方法。

HPLC方法利用离子交换树脂柱将尿酸纯化，在293nm处检测柱流出液的吸光度，计算尿酸浓度。

酶法测定尿酸的特异性高，可分为紫外分光光度法和酶偶联法。

三、注意事项1、检查血清尿酸，需要空腹8小时以上抽血。

2、标本避免溶血，及时分离血清3、尿酸酶-过氧化物酶法适用于各种类型的自动生化分析仪。

4、尿酸酶-过氧化物酶法灵敏度高，且不需要去蛋白，主要干扰物质为维生素C和胆红素。

在反应体系中加人抗坏血酸氧化酶和胆红素氧化酶，可以消除上述两种物质的干扰。

四、参考区间成人血清尿酸：男性208～428μmol/L；女性155～357μmol/L。

五、临床意义（一）血清尿酸升高主要见于：1、在临床上，痛风是血清尿酸升高最为常见的疾病，痛风与嘌呤代谢紊乱及(或)尿酸排泄减少所致的高尿酸血症直接相关，属代谢性风湿病范畴。

痛风可并发肾脏病变，严重者可出现关节破坏、肾功能损害，常伴发高脂血症、高血压病、糖尿病、动脉硬化及冠心病等。

2、血清尿酸升高还见于核酸代谢增高引起的白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等；肾功能减退；氯仿、四氯化碳及铅中毒；子痫；妊娠反应；食用富含核酸的饮食等。

（二）测定尿酸应在严格控制嘌呤摄入量的条件下进行，最好同时测定尿尿酸更具诊断价值。

1、血尿酸升高，而尿尿酸降低提示肾小球滤过功能损伤；血尿酸降低而尿尿酸升高提示肾小管重吸收功能损伤或竞争抑制。

一、实验目的1. 学习和掌握尿素和尿酸测定的原理和方法。

2. 了解尿液成分分析在临床诊断中的重要性。

3. 培养实验操作技能和数据处理能力。

二、实验原理1. 尿素测定：尿素酶-吲哚酚法。

该法利用尿素酶将尿素分解为氨和二氧化碳，氨与吲哚酚试剂反应生成吲哚酚氨，在特定波长下测定其吸光度，从而计算尿素的含量。

2. 尿酸测定：磷钨酸比色法。

该法利用磷钨酸与尿酸形成稳定的蓝色络合物，通过测定其吸光度，从而计算尿酸的浓度。

三、实验材料1. 试剂：尿素酶、吲哚酚试剂、磷钨酸试剂、尿素标准液、尿酸标准液、尿液样本等。

2. 仪器：分光光度计、移液管、比色皿、振荡器等。

四、实验步骤1. 尿素测定：a. 将尿液样本充分混合，取适量加入比色皿中。

b. 加入适量的尿素酶试剂，混匀后放入振荡器中振荡5分钟。

c. 加入适量的吲哚酚试剂，混匀后静置5分钟。

d. 使用分光光度计在特定波长下测定吸光度。

e. 根据标准曲线计算尿素的含量。

2. 尿酸测定：a. 将尿液样本充分混合，取适量加入比色皿中。

b. 加入适量的磷钨酸试剂，混匀后静置5分钟。

c. 使用分光光度计在特定波长下测定吸光度。

d. 根据标准曲线计算尿酸的浓度。

五、实验结果1. 尿素测定结果：本实验中，尿液样本的尿素含量为XX mmol/L。

2. 尿酸测定结果：本实验中，尿液样本的尿酸浓度为XX μmol/L。

六、实验讨论1. 尿素和尿酸是人体代谢废物，通过尿液排出体外。

测定尿液中的尿素和尿酸含量，有助于了解肾脏功能，诊断肾脏疾病。

2. 尿素酶-吲哚酚法和磷钨酸比色法是常用的尿素和尿酸测定方法，操作简便，准确度高。

3. 本实验中，尿液样本的尿素和尿酸含量均在正常范围内，表明受试者的肾脏功能正常。

七、实验总结1. 通过本次实验，我们学习了尿素和尿酸测定的原理和方法，掌握了实验操作技能。

2. 我们认识到尿液成分分析在临床诊断中的重要性，为今后从事相关领域的工作打下了基础。

3. 在实验过程中，我们发现了以下问题：a. 尿素酶和吲哚酚试剂的浓度对测定结果有较大影响，需要严格控制。

尿酸测定的标准操作规程【目的】体外检测血清中尿酸（UA ）的含量。

【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ，室负责人监督落实。

2.本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ，不饮酒24h 后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。

应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理本试剂采用改良Trinder ’s 方法，其反应为：22222O H CO 尿囊素尿酸酶O H O 尿酸++−−−→−++O H 醌亚胺色素过氧化物酶TBHBA AAP O H 222+−−−−−→−++式中 AAP = 4-氨基安替比林TBHBA = 3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸在上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比，通过可在520nm 波长处测定吸光度的变化值，从而计算出尿酸的浓度。

试剂中亚铁氰化钾可抑制样本中胆红素的干扰。

一、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司UREA试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂1（R1）过氧化物酶 300U/L3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸 2.5mmol/L亚铁氰化钾 0.05mmol/L磷酸盐缓冲液 150mmol/L4-氨基安替比林0.7mmol/L含非反应性填充物及稳定剂试剂2（R2）磷酸盐缓冲液 150mmol/L尿酸酶 500U/L2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清（货号：4490050/4590050）对测定进行校准。

血清中尿酸的测定实验原理血清中尿酸的测定是临床常用的一种生化检验方法，用于评估尿酸代谢和诊断相关疾病，特别是痛风等疾病。

尿酸是嘌呤代谢产物，其浓度的改变与嘌呤代谢紊乱有关。

下面将详细介绍血清中尿酸的测定实验原理。

1.尿酸的测定方法血清中尿酸的测定方法多种多样，包括比色法、荧光法、比重法、高效液相色谱法和酶法等。

其中，比色法和酶法常用于临床实验室。

2.比色法比色法是目前血清中尿酸测定的常用方法，其原理是利用尿酸与酶类（如尿酸氧化酶）作用生成过氧化氢或者相变物质，通过比色测定来间接测定尿酸的浓度。

2.1反应原理尿酸与尿酸氧化酶作用生成过氧化氢和乙烯醇或水。

过氧化氢与苯乙酮缺乏反应，加入间苯二胺后可形成有色产物，其最大吸光度波长为560n m。

可根据产物浓度与尿酸浓度呈比例关系，通过光密度测定反应液的吸光度，从而确定尿酸浓度。

2.2反应过程尿酸+尿酸氧化酶→乙烯醇+过氧化氢过氧化氢+间苯二胺→产物（有色产物）2.3测定步骤（1）准备工作：校准比色计，将比色计置零。

（2）标准曲线的制备：选取尿酸浓度不同的标准品，分别加入适量的尿酸酶，经过一系列反应后加入间苯二胺，测得各标准品产生的吸光度值。

（3）待测标本的处理：将待测血清标本加入尿酸酶，经过一系列反应后加入间苯二胺，测得样本产生的吸光度值。

（4）计算结果：根据标准曲线，将待测样本的吸光度值换算为尿酸浓度。

3.酶法相较于比色法，酶法更为直接地测定尿酸浓度。

酶法通常采用尿酸氧化酶催化尿酸与氧气反应生成过氧化尿酸和水的原理进行。

3.1反应原理尿酸+尿酸氧化酶+O₂→过氧化尿酸+H₂O₂3.2反应过程过氧化尿酸+酒石酸+ 4-氨基间苯二磺酸钠→产物（有色产物）3.3测定步骤（1）准备工作：校准比色计，将比色计置零。

（2）标准曲线的制备：选取尿酸浓度不同的标准品，分别加入适量的尿酸酶，经过一系列反应后加入产生有色产物的试剂，测得各标准品产生的吸光度值。

（3）待测标本的处理：将待测血清标本加入尿酸酶，经过一系列反应后加入产生有色产物的试剂，测得样本产生的吸光度值。

尿酸（UA ）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆及尿液中尿酸（UA ）测定。

【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。

【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。

【方法学原理】【方法】使用TBHBA （2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸）的酶比色测定法。

【原理】尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。

在过氧化物酶存在下，过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA （2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸），产生红色醌亚胺（Trinder 反应产物）。

尿酸酶尿酸 + H 2O + O 2 尿囊素 + CO 2 + H 2O 2过氧化物酶TBHBA + 4-氨基安替比林 + 2H 2O 2 醌亚胺 + 3 H 2O【试剂】在测定时的各组分和浓度试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液 pH 7.0100 mmol/L TBHBA (2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸)抗坏血酸氧化酶 1 mmol/L 1KU/L试剂2（R2）：磷酸盐缓冲液 pH 7.0 100 mmol/L4-氨基安替比林0.3 mmol/L铁氰化钾10 mol/L过氧化物酶（POD）≥1000 U/L尿酸酶≥2000 U/L试剂稳定性与贮存试剂和标准品避光保存于2－8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

当520 nm处的试剂空白吸光度小于0.5时，试剂可正常使用。

以试剂起始的反应试剂为即用式。

以样品起始的反应混合“试剂1”4份+“试剂2”1份（例如“试剂1”20 ml +“试剂2”5 ml）成为单试剂（R）单试剂稳定性：15－25℃保存可稳定2周2－8℃保存可稳定3个月单试剂须避光保存。

【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本，适用标本为血清或肝素抗凝血浆（肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l），不可从正在静脉滴注手臂上采血，上机标本不能有凝块，样品采集后2天内离心标本，分离血清，血清或血浆标本室温保存4天，冷藏7天，冷冻保存6个月。

尿酸测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清尿酸测定(缩写UA)；组合项目申请：肾功能测定。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定1天，普通冰箱中（2～8℃）稳定3天。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

2.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。

3 方法原理反应生成的醌亚胺在520nm 波长有最大吸收，所产生的颜色强度与血清中尿酸含量成正比，再通过与同样处理的尿酸标准溶液比较，经过计算可求出血清中尿酸的含量。

试剂中的抗坏血酸氧化酶可排除抗坏血酸对结果的影响，测定尿酸所用的酶反应如下: 尿酸酶尿酸 ＋ O 2 ＋ 2H 2O ------------ 尿囊素 ＋ CO 2 ＋ 2H 2O 2过氧化物酶H 2O 2＋4-氨基安替比林＋ 2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸---------------醌亚胺＋H 2O4 试剂及其他用品4.1 试剂：尿酸测定试剂盒（货号UA6133），由北京利德曼生化股份有限公司出品。