超声波法提取金银花中的绿原酸

1:仪器与试药

1.1仪器

60目标准筛，KQ-600B型超声波清洗器，索氏提取器，Agilent．1200高效液相色谱仪，四元泵，自动进样器，柱温箱，DAD二极管阵列检测器，AgilentA10．02工作站。

1.2试药

金银花，绿原酸，乙醇，乙酸乙酯，绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号：l10753-200212)。金银花药材(采自山东省平邑县白彦镇1；甲醇为色谱纯．水为重蒸馏水．其它试剂均为分析纯。

2：方法

2．1绿原酸含量检测方法方法依据：中国药典2005年版一部口。

照高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇一水一冰醋酸一三乙胺(15：85：1：03)为流动相；检测波长为324nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于6000。绿原酸保留时间10分钟左右．与其它峰分开，基线分离，达到理想的分离效果。对照品溶液的制备：取绿原酸对照品8．0mg，精密称定，置棕色量瓶中，加水制成每lml中含2O g的溶液，摇匀，邸得。固形物的测定：取金银花提取物约Z0g，精密称定，置称量瓶中105~C烘干至恒重精密称定，计算金银花提取物固形物含量。供试品溶液的制备：取金银花提取物约 0．2g，精密称定，置小烧杯中加50ml水，使其充分溶解置于100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。测定法玢别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.2：提取方法: 将金银花粉碎后过60 目标准筛, 用3 种不同的方法提取。

（1）超声波法（U）：用KQ-600B 型超声波清洗器处理30 min;

（2）索氏法( S)：用索氏提取器处理4 h;

（3） 改良索氏法（U+S）：先用超声波处理30 min, 再用索氏提取器处理4 h。每种方法做3 份。

（4）基本流程: 3 种方法获得的产物用75% 乙醇提取液→减压浓缩→60℃干燥得浸膏→适量水溶解→乙酸乙酯萃取→减压浓缩萃取液→60 ℃干燥得提取终产物。

金银花中绿原酸的提取、分离纯化

绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸组成的缩酚酸，异名咖啡鞣酸，是植物在有氧呼吸过程中经莽草酸途径代谢产生的苯丙素类化合物。化学结构为：

绿原酸

由结构可以看出它是含有羧基和邻二酚羟基的极性有机酸化合物，为酸性。由于分子内含有邻二酚羟基，受热、见光易氧化，因此供试液要在阴凉、避光下保存备用，且高温和长时间加热不利于绿原酸的提取。在碱性条件下，绿原酸易发生水解，植物体内存在的绿原酸往往是混合物而非单一组分。

绿原酸物理性质：

名称 分子式 分子量 性状 熔点 溶解度

绿原酸 C16H18O9 345.30 半水化合物为针状晶（110℃变为无水化合物） 208℃ 水中4%，在热水中溶解度更大，易溶于乙醇、丙酮和甲醇等极性溶剂，难溶于氯仿、苯、乙醚等亲脂性有机溶剂

一、实验目的：

1、了解金银花中有关成分，掌握绿原酸的相关性质，设计提取方案

2、掌握pH梯度萃取法分离所需成分

3、掌握聚酰胺柱层析的方法

二、实验试剂、仪器

试剂：金银花，乙醇（70%、10%），盐酸（6mol/L），乙酸乙酯，NaOH（5%），乙酸，聚酰胺，硅胶

仪器：冷凝回流装置，抽滤装置，旋蒸仪，分液漏斗，层析柱

三、绿源酸的提取、分离和纯化

（1）提取：

称取金银花50g加入1000mL的圆底烧瓶中，加入500mL（10倍量）70%的乙醇，75℃冷凝回流3h，倒出液体，再用400mL（8倍量）、400mL（8倍量）回流两次，每次2h,过滤，合并滤液，然后80℃下浓缩滤液或者是用旋蒸仪旋干滤液至无醇味。

（2）分离纯化：

①取金银花提取浓缩液，以浓度6mol/L的HCl溶液调pH值至3.0左右，以3倍量的乙酸乙酯分3次萃取，合并萃取液（乙酸乙酯层），以5%的NaOH溶液调萃取液pH至8.0左右，分取水层减压浓缩。

②取金银花浓缩液，用聚酰胺拌样，用聚酰胺（80-100目）装柱（用量大概为绿原酸粗品的5倍），装入柱径与柱长比为1：7的层析柱中，常压下用10%的乙醇作为洗脱剂洗脱，收集流分，点样与标准品对照（标准品用50%的甲醇溶解，0.2mg/mL），合并相同流分，旋干即为所要提取的绿原酸。展开剂为乙酸乙酯：乙酸：水=2:1:1（硅胶色谱）。

第４期　２０１３年０８月　湖南人文科技学院学报　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｕｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｈｕｍａｎｉｔｉｅｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｎｏ．４　Ａｕｇ．２０１３　

金银花中绿原酸的微波提取工艺研究　

何　培，丁慧娟，刘芷成，刘　欢，申湘忠　

（湖南人文科技学院化学与材料科学系，湖南娄底４１７０００）　

［摘要］以乙醇和水作为提取溶剂，用微波炉提取金银花中的绿原酸，用紫外可见分光光度计对金　银花中绿原酸的浓度进行测定，采用单因数测定和正交实验得出金银花中绿原酸最佳提取工艺。测定　波长选择３２４　ｎｍ，实验表明，金银花中绿原酸的最佳微波提取条件为：以浓度为８０％的乙醇做为提取溶　剂，加醇量为金银花４倍量，微波处理时间为６０　ｓ，水浴提取温度为７０℃，提取水的用量为金银花ｌ５倍　量，提取时间为５０　ｍｉｎ。得出金银花中绿原酸的含量为８．３３７９　ｍｇ・ｇ～。　［关键词］金银花；绿原酸；微波；提取　［中图分类号］０６—３３２　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１６７３—０７１２（２０１３）０４—００９７—０５　

金银花又名忍冬花、银花、双花、茶叶花等，为　

忍冬科植物，是我国常用中药，金银花常用于治疗　

温病发热、热毒血痢、痈疡等症，亦用于风热感冒、　

支气管炎等病症…＿ｏ现代药理研究表明，金银花　

具有抗病原微生物、抗炎、抗生育、解热、保肝、止　

血、降血脂、抗氧化、免疫调节等作用，临床主要用　

于治疗多种感染、各种炎症、高热症、高血脂症、肿　瘤放疗等＿２］。金银花中富含多种对人体健康有益　

的营养物质　Ｊ，诸如绿原酸、异绿原酸、挥发油、咖　

啡酸、黄酮化合物、三萜皂苷、木犀草素及无机元　

素等，具有很高利用价值。金银花的主要成分为　

绿原酸、类黄酮，而绿原酸是金银花主要的抗菌成　

分，绿原酸含量的高低是目前衡量金银花品质优　劣的指标之一＿４Ｊ。提高金银花制剂中绿原酸含量　

对保证金银花制剂的药效具有重要作用。　

金银花含有的药用成分和临床药理分析

摘要:目的：探讨金银花的药用成分和药理作用，为金银花的正确使用提供参考。方法：回顾金银花的文献和理论研究，总结金银花的药用成分和药理作用。结果：金银花的药用成分包括黄酮类、挥发油、三萜皂类、无机元素和有机酸等。金银花的药理作用是清热消炎、止血、抗病毒、养肝护肝等。结论：金银花药用成分丰富，药性强，值得进行应用。

关键词:金银花；药用成分；药理作用

金银花本身含有多种药用成分，临床可发挥多种药理作用。金银花味甘性寒，能清热解毒疏散风热，治疗发热、咽喉肿痛、消炎凝血、皮肤感染、痈疽疮疡等疾病，增强机体免疫力有一定疗效，但脾胃虚寒气虚者需要谨慎使用。在临床药物中，很多制剂都含有金银花成分，本文分析了金银花的药用成分和药理作用。

1资料与方法

1.1 基本资料

对中医著作进行查阅，分析中药金银花的文献和理论研究，以及期刊论著。

1.2方法

对金银花的生物学研究、品质研究、药用成分、药理作用进行分析，观察中药金银花的药用成分、药理作用。

2结果

2.1金银花药用成分

金银花的药用成分主要包括黄酮类化合物、挥发油、三萜皂类化合物、无机元素类、有机酸类化合物等。

2.1.1 黄酮类化合物 黄酮类化合物中的金银花和木犀草素首先是日本学者从金银花中提取的，随后中国研究人员从金银花中发现了4种黄酮类化合物。 一般采用溶剂萃取、超高压萃取、水提、醇提等方法进行提取，其中水提和醇提的回流时间、提取溶剂、温度等因素都会有一定的影响，超高压提取可以获得更高的提取率。资料研究表明，木犀草素具有抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、脊髓灰质炎病毒等作用，并抑制杜氏利什曼原虫的生长。金丝桃具有明显的局部镇痛作用，比阿司匹林强，不会使患者产生依赖性，是临床上一种新的镇痛成分。

2.1.2 挥发油

挥发油是金银花中最重要的药用成分之一。 常用于合成香精或香水，具有散风散热的药用功效。 金银花的藤、枝、花中含有最多的挥发油。由于挥发油沸点低、亲油性、分子量相对较小，提取时可选择二氧化碳萃取或水蒸气蒸馏，提取时必须控制好温度，以保证金银花挥发油的提取率。不同部位提取的挥发油含量在不同开花期也存在差异。目前气相色谱法提取的挥发油主要成分有苯乙醇、棕榈酸、洋槐丙酮、芳樟醇、十六烷酸、肉豆蔻酸、十四烷酸、亚麻酸、亚油酸等。挥发油的核心药用成分是萜类化合物 ，主要可分为倍半萜类和单萜类。 新鲜金银花和晒干金银花的精油含量存在显着差异。新鲜和晒干的金银花精油主要成分是芳香醇和棕榈酸。芳樟醇的抗菌作用与香茅醇相同，是苯酚的5倍。