氮离子注入诱变选育恩拉霉素高产菌株

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一种恩拉霉素高产菌株选育方法与流程

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常压室温等离子(ARTP)诱变选育恩拉霉素高产菌株

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＡＲＴＰ；ｅｎｒａｍｙｃｉｎ；Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｆｕｎｇｉｃｉｄｉｏｕｓ；ｐｏｓｉｔｉｖｅｍｕｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１６７４—５０６Ｘ．２０１８．０３一ｏ０７
恩拉霉素（Ｅｎｒａｍｙｃｉｎ），又名恩来霉素、安来霉素、持久霉素。是１９６６年日本武田药品工业株式会社的研究人员从日本兵库县西宫市的土壤中分离出一株杀真链霉菌ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｆｕｎｇｉｃｉｄｉｏｕｓＮｏ．Ｂ５４７７发酵产生的一种多肽类抗生素ｎ］．主要组分有恩拉霉素Ａ和Ｂ。１９７４年，恩拉霉素预混剂在日本注册．作为猪、鸡的促生长剂来使用。１９９３年，日本武田药品株式会社向中国农业部申请登记注册。注册名称为恩拉霉素预混剂］。
第５４卷（总第２０５期）
秦艳飞等：常压室温等离子（ＡＲＴＰ）诱变选育恩拉霉素高产菌株
３３
株中发酵的调控主要以基因簇或功能基团协调作用．单一改造基因位点，难以在工业发酵上大幅提高发酵水平。公司技术中心在借鉴国内外先进育种方法、手段及发酵工艺优化研究的基础上，在菌种筛选上引入ＡＲＴＰ新型诱变设备，结合微孔板高通量筛选，节省人力、缩短菌种筛选周期］。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓｔｏｂｅｏｒｉｇｉｎａｌｓｔｒａｉｎ，ｔｈｅＬＡ一１０ｓｔｒａｉｎｏｆＥｎｒａｍｙｃｉｎｓ’ ｍｕｔａｇｅｎｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｂｙＡＲＴＰ，Ａｒａｐｉｄｉｎｉｔｉａｌｓｃｒｅｅｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｐｅｅｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｉｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｓｅｌｅｃｔｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｍｕｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓｗｉｔｈｈｉｇｈｃｏｎｔｅｎｔ，ｆｅｗｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓａｎｄｓｔａｂｌｅｇｅｎｅｔｉｃｓｔａｂｉｌｉｔｙｂｙＨＰＬＣ，ａｎｄｔｈｅｈｉｇｈ—ｙｉｅｌｄ— ｉｎｇｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅａｍｐｌｉｆｉｅｄａｎｄｖｅｒｉｆｉｅｄ．

低能N^+离子注入诱变选育云芝高产抗病菌株的研究

１．２．质体悬液（１０＂￣＇／ｍＬ）
涂布于无菌平皿中央，于超净工作台中快速涂匀风干后立即
进行低能Ｎ离子注入。１．２．１．２低能Ｎ离子注入离子注人前，ＬＺＤ一９００型离子注
息
龟蚪１苗
２０１４（２）
低能Ｎ离子注入诱变选育云芝高产抗病菌株的研究
种
化瓣
摘要应用低能Ｎ离子注入筛选所得高产抗病融合云芝菌株
蒋益 ‘ 郑惠华。刘广建全卫丰 ‘ 薛臻季宏更汪洁
入机开机预热２ｈ，用紫外线对靶室持续消毒３０ｍｉｎ，调节靶
室真空度为ｌ０。Ｐａ，注入物质Ｎ离子提前加速到２０ＫｅＶ，后
文章编号１０００ — ８３５７（２０１４）０２ — ００１８－０３
液体发酵生物量及同体栽培子实体转化率、对病菌平均抗性水
平为初筛和复筛标准．经遗传稳定性实验验证，筛选到了一株云芝高产抗病菌株，其子实体产量较对照菌株提高了１０．３％，抗病水平提高了５％。结果表明：低能Ｎ离子束注入是一种较为理想的云芝诱变育种手段。关键词云芝低能Ｎ＋离子诱变育种
１．２．２原生质体存活量统计离子注入后用ｌｍＬ０．６Ｍ蔗糖

N +注入诱变选育氨肽酶高产菌株及发酵条件初步优化

ｐ６．Ｈ４。
逐步筛选高酶活菌株；高酶活菌株进一步分离，培养，
再通过发酵测定，筛选目标高产菌ｌ。６Ｊ１４发酵条件的初步优化．在原有发酵培养基基础上，一步优化碳源和氮进源配方，定最佳浓度、适的碳氮比、始ｐ条确合初Ｈ
泛应用于调味品和干酪的生产、白水解液的脱苦、蛋
７２ｈ。
发酵培养：３ ±１ ℃ ，２／ｉ床振荡培养（１）２０ｒｒｎ摇ａ
６４ｈ。
蛋白质深度水解和多肽的制备等方面 … 。随着食品
工业的发展，肽酶的应用呈现出愈来愈广阔的前氨
斜面培养基（／）麦汁培养基，～６麦汁，ｇＬ：５。
琼脂粉１７ｐ６０．，Ｈ．。种子培养基：皮：：ｌ１麸水：。发酵培养基（／：玉米浆３，麸皮６，ＭｇｇＬ）００ —
Ｓ・Ｈ２０．Ｏｄ７Ｏ５，ＫＨ２０４１０，ＣＣ２１０，ｐ．。Ｐ，０．ａ１．Ｈ６８
）０．，ｗ丁５１本实验室保藏。
米曲霉（ｐｒｉｕＡｓｇｌｓｅｌ０
１、０ｓ４、０ｓ８不同时间作注入处理－，０ｓ２、０ｓ６、０ｓ５靶ｊ
室真空度为ｌＰ。取出平皿，５ｍＬ无菌水洗０ａ以脱，释涂布分离平皿，（１）培养７。稀于３ ±１ ℃ ２ｈｌ３３高产菌株的筛选，．从分离平皿中挑选生长状态良好、解圈相对较水大的单菌落，别接斜面培养基再培养，接二代后分转接种子培养基，接种于发酵摇瓶，再经几轮发酵测定，

N +和Ti +离子注入井冈霉素生产菌诱变筛选高产菌株的研究

１筛选方法．４
１．初筛据文献报道，形态为中心吸水状的单．１４菌落发酵生产抗生素水平比其它形态的高［。本实５】
１材料与方法
１１菌种．吸水链霉菌井冈变种（ｔｐｏｃｓｈｇｏｃ— Ｓｒｔｍｙｅｙｒｓｕｅｐｃｓａ．ｉｇａｇｅｓｅ．，本实验室保藏。ｉｒＪｎｇｎｇｎｉＹｎ）ｕｖｓ
方法得到的突变菌株。菌种对这些诱变手段产生了
固体培养基（・－：葡萄糖１、Ｌ天冬酰胺ｇＬ）０一０５２Ｐ４．、琼脂１、ｐ自然。．、ＫＨＯ０５５Ｈ摇瓶发酵培养基（・－：ｇ大米粉９、Ｌ）０黄豆粉２、０花生粉１、酵母粉１、－Ｐ４．５Ｎａ１．、ｐ００ＫＩＯ０８、Ｃ５ＨＩ２１
色，低毒对人畜无害的生物农药，井冈霉素的应用
１培养基．２
价值越来越得到认可。目前我国井冈霉素的生产企业多达３多家，０产品严重供过于求，售价逐年下降，竞争十分激烈。井冈霉素生产厂家所用的井冈霉素生产菌株几乎都是经过紫外诱变【】微波诱变、６ｏ辐射诱变等５、 ’ ６ＯＣ
将实验室保存的吸水链霉菌井冈变种的孢子悬液以不同的稀释度在平板培养基上进行涂布分散，３￣培养三四天，挑选形态圆整的单菌落至斜面培８Ｃ养二三天，接种至发酵培养基中培养９～９，测２６ｈ定井冈霉素Ａ的效价。摇瓶装液量为４Ｌ，０ｎ接种ｒ
量为一环孢子，培养温度３￣，８Ｃ摇床转速２０／ｉ。２ｍｎｒ
Ｎ＋Ｔｉ离子注入井冈霉素和＋

低能N^+离子注入诱变选育琼胶酶高产菌株

２；ＣａｎａｄａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＡｇｒｉ — Ｆｏｏｄ。ＧｕｅｌｐｈＦｏｏｄＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，ＧｕｅｌｐｈＮ１Ｇ５Ｃ９，Ｃａｎａｄａ）
第４１卷第１期２０１３年２月
浙江工业大学学报
ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＺＨＥＪＩＡＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ
Ｖｏ１．４１Ｎｏ．１Ｆｅｂ．２Ｏ１３
低能Ｎ＋离子注入诱变选育琼胶酶高产菌株
在２３．４× １０ ¨ｉｏｎ／ｃｍ。诱变剂量下，筛选得到１株高产琼胶酶的菌株ＷＬ－１５，酶活力达到
４７．３ｕ／ｍＩ，较出发菌株提高５３．６，该菌株经５次传代培养，产酶活力稳定．之后优化了产酶培
ＭＥＩＪｉａｎ — ｆｅｎｇ，ＴＡＮＧＺｈｏｎｇ — ｘｉｕ，ＷＡＮＧＱｉ，ＹＩＹｕ，ＷＡＮＧＨｏｎｇ，ＹＩＮＧＧｕｏ — ｑｉｎｇ
（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００３２，Ｃｈｉｎａ；
养基中的主要成分，在琼胶、ＮａＮＯ。和ＮａＣ１的质量浓度分别为２．５ｇ／Ｌ，６．０ｇ／Ｌ，１５．０ｇ／Ｌ时，类

多杀菌素高产菌株的诱变选育

斜面培养：８２ ℃恒温培养箱中培养７１ｄ —０。种子培养：３Ｌ单孢子悬浮液（子浓度至取ｍ孢
１１ｍ）接于装有５ｍ０～０个／Ｌ０Ｌ种子液的５０Ｌ三０ｍ
素水平主要决定于环境条件和自身的遗传因子两个方面。良发酵条件只能在较低水平上提高目的菌株改的产素水平，通过高产菌株育种技术改变菌株的部分遗传信息，有效地提高目的菌株的产素水平。能
下（Ｉａ１可以生长。１％ＮＣ）］
科院物研所）Ｚ；ＨＷＹ１２上海智城）立式压力蒸２１Ｂ（；汽灭菌器（上海华线）高效液相色谱（ｌｃ）；Ａｔｈｅ
１．培养条件４
与其它抗生素产生菌一样，多杀菌素产生菌的产
１．离子束注入诱变．１５取０５Ｌ单孢子悬浮液均匀涂布于无菌空白培．ｍ养皿上，置于超净工作台风干制成菌膜。离子注人机为ＬＤ０Ｚ９０多功能离子注入机，使用以能量１ｋＶ０ｅ氮离子不同剂量进行注入，靶室真空度为ｌａ将０Ｐ。培养皿置于靶台上，５脉冲式注入，隔１ｓ然以ｓ间５，
ＡｂｔａｔＷｉｈｐｏｅｔｓｆｂｔａｅｂｏｏｉａｅｔｉｅｎａｔｆｃｏｇｏｈｍｉａ，ｓｉｏａｓａｎｗｓｒｃ：ｔｔｅｒｐｒｉｏｏｈｓｆｉｌｇｃｌｐｓｉｄａｄｆｓｆｔｆａｒｃｅｃｈｅｃｅｅｌｐｎｓｄｉｅｓｌｃｏｉｌｇｃｎｅｔｉｅｔｅｍｉｒｂｏｏｉａｉｓｃｉｄ．Ａｓｔｅｓａｔｇｓｒｉａｃｒｐｌｓｒｐｎｓ．ＳｓｉｏａＡ６ｗａｂａｎｄｆｏｌｂｙｖｈｔｒｉｔａｎＳｃａｏｏｙｏａｓｉｏａｎ．ｎｓｓｏｔｉｅｒｍａ — ｐｏａｏｙｒｓｒａｉｅｔａｎｒｔｒｐｅｅｖｔｓｒｉＡ０ｙａｕａｓｌｃｉｎｖｂｎｔｒｌｅｅｔ．ＴｅｏｈｍｕａｉｎｒｅｉｇｏｗａｃｒｉｄｕｙｉｏｅｉｎｔｔｂｅｄｎｆＡ６ｏｓａｒｏｔｂｎｔｇｎｏｅｒｂａｕｄｒｔｅｃｎｉｏｆｅｅｇｏ０ｋＶａｄｉｌｎａｉｎｄｓｏ１ｘ１ ‘ ｏｓｃ．ａｄｍｕａｔｓｒｉｅｍｎｅｈｏｄｔｎｏｎｒｙｆ１ｅｎｍｐａｔｔｏｅｆ．０ｉｎ／ｍｎｔｎｔｎＡＮ－ｉｏ４ａ０９ｗａｂａｎｄ９ｓｏｔｉｅ．Ｔｅｈｎ．ｔｅｔｉｈｓａｎＡＮ一９ｗａｉａｉｔｄｏ３ｓｕｄｒｄｓｎｅｆ３ｃｒ０９ｓｒｄａｅｆｒ０ｎｅａｉｔｃｏ０ｍｆｍａｒａｒｏＵＶ５１Ｗｌｍｐ．Ｅｖｎｕｌ，ａｓｒｉａｅｔａｌｙｔａｎＡＮＵ－６ｓｏｔｉｅｈｏｇｃｍｐｓｅ０９ｗａｂａｎｄｔｒｕｈｏｏｉｍｕａｅｅｉ，ｗｔｈｒｄｃｉｎｏｐｎｓｄｔｔｇｎｓｓｉｔｅｐｏｕｔｆｓｉｏａｈｏｒａｈｄｏ７．２ｘ／ｅｃｅｔ１５６１ｍＬ，ｗｉｈｗａｎｒａｅ．２ｇｈｃｓｉｃｅｓｄ７１％ａｄ０２％ｉｏａｉｏｉｔａｆＡ６ａｄ４ｎ３．２ｎｃｍｐｒｎｗｔｈｔｏｎＡＮ－９ｓｈ０９，ｒｓｅｔｅｙｈｔａｎｅｐｃｉｌ．ＴｅｓｒｉＡＮ０９ａａｔｂｅｈｒｄｔｒｈｒｃｅ，ａｄｉｃｎｂｕｅｎｔｅｆｒｎａｉｎｓｕｙｖＵ－６ｈｓｓｌｅｅｉｙｃａａｔｒｎｔａｅｓｄｉｈｅｍｅｔｔｔｄａａｏ

N +注入中性蛋白酶高产菌株诱变选育的研究

ｏｎｕｔｉｌＭｉｒｂｏｏｙｏｌｇｆＢｉｔｃｎｌｇ，ａｊｎＵｎｖｒｉｆＳｉｎｅ＆ＴｃｎｌｇＴｉｉｆＩｄｓｒａｃｏｉｌｇ，ＣｌｅｅｏｏｅｈｏｏｙＴｉｎｉｉｅｓｔｏｃｅｃｙｅｈｏｏｙ，ａｎ３０５，ｈｎ２ＣｏｌｅｏｇｎｅｉｇＳｅｙｎｒｃｌｕａｉｒｉＳｅｙｎ１１１Ｃｉａ０４７Ｃｉａ．ｌｇｆＥｎｉｅｒｎ，ｈｎａｇＡｇｉｕｔｒｌＵｎｖｓｔｈｎａｇ１０６，ｈｎ）ｅｅｙ，
ＭｕａｉｎｂｅｄｎｆｎｕｒｌｒｔａｅｐｏｕｉｇｓｒｉｙＮｉｌｎａｉｎ．ＪｕｎｌｆＺｅｉｎｉｅｓｔｔｔｒｅｉｇｏｅｔａｏｅｓ－ｒｄｃｎｔａｎｂｏｐｍｐａｔｔｏｏｒａｈｊｇＵｎｖｒｉｙｏａ
ｉｓｃ ” 条件下，ｏ．ｍ＿的ｎ经过筛选最终获得１遗传稳定性良好的高产菌株ＮＰ３，所产中性蛋白酶活株１１其
力稳定在１２０Ｕ．左右，出发菌株提高了７．．５３ｍＬ较１２比较突变菌株ＮＰ３１１与出发菌株的产酶曲
张敏，赵丛，路福平，蔡兴旺，杜连祥
（天津科技大学生物工程学院天津市工业微生物重点实验室，１天津３０５；．阳农业大学工程学院，宁沈阳１０６）０４７２沈辽１１１
摘
要：用低能Ｎ利注入技术对产中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌（ａｉｕｂｉｓ进行诱变选育，Ｂｃｌｓｕｔｉ）ｌｓｌ以提

N +离子注入诱变选育中性蛋白酶高产菌株及发酵条件的研究

前在国内微生物育种中取得显著成效［，原因７其・
基础发酵培养基（：％）豆饼粉３５薯干粉６５．，、，
麸皮５３Ｋ２Ｏ００，ａＨＯ０７。．，ＨＰ４．３ＮｚＰ４．８
牛奶培养基（：％）脱脂奶粉１，脂２０琼。
在于低能离予注人生物体时同时存在能量交换、能
量沉积、量沉积及电荷交换四大效应。由于注入质
离子的电荷数、量数、质能量和剂量的组合不同，可
选和存活率的计算。１４突变株的筛选．
以提供众多的诱变条件，使离子注入诱变具有突变谱宽，突变率高的特点，从而可以筛选到符合生产要
－
２％，３℃ －４￣～３℃ 变温发酵４ｈ酶活力最高可达１６０ｍＬ，０以２００２，９８ｕ／为初始菌株的２１。．倍
关键词：枯草芽孢杆菌；中性蛋白酶；离子注入；诱变选育中性蛋白酶是一种能将大分子蛋白质迅速水解成肽类和部分游离氨基酸的胞外酶，其最适作用ｐＨ介于６０．间］．～７５之。作为一种生物催化剂，该
性宽，广泛地应用于食品、药、被制化妆品、涤剂、洗
丝纺、毛皮软化等行业］。
种子培养基（：浸粉０５胰蛋白胨０５％）酵母．，．，
葡萄糖１ＫＰ４、５ＮａＨＰ４、。，Ｈ２Ｏ００，２Ｏ０４

氮离子注入林可霉素产生菌诱变高产菌株

，文报道氮离子注入技术用于林可本
霉素产生菌的诱变，得了一定的效果。取
分别吸取２上述处理孢子液于直径６ｍｍ四ｍｌ０
１１１出发菌株．．１１２生测检定菌．．
林可霉素产生菌６— 。５１藤黄八叠球菌３０１２０。
１２培养基．
１．斜面培养基（／淀粉２，．２１ｇＬ）０ＫＮＯ。１ＫＣ，１
０．５，ａ２ＮＨＰＯ４０．ＭｇＳＯ４・７２０．５，ＳＯ４・７５，ＨＯＦｅＨ２Ｏ
１７孢子诱变后的培养．
刘瑞华李铁
（徽省皖北药业股份有限公司，宿州２４０）安３００
摘要：林可霉素产生菌６— ５１株经１５１ｏｓｃ氮离子束诱变处理得到７ — ． × ０ｉｎ／ｍ。５８菌株。摇瓶相对效其价较出发菌株６— ５１提高了３，酵培养基优化后，瓶相对效价提高了３。应用于１０吨发酵罐生产，１发摇５０
１３试剂．
２２氮离子束诱变处理林可霉素产生菌对菌落类型．
比例的影响
三种不同剂量处理林可霉素产生菌对菌落类型比
例的影响见表１。

０１ｌＬｐ．．ｍｏ／Ｈ７２磷酸缓冲液。

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ｓ．ｆｕｎｇ／ｃ／ｄ／ｃｕｓ发酵产生的一种多肽类抗生素。由杀真菌素链霉菌发酵生产抗生素恩拉霉素，在上世纪
六十年代后期就有报道。１９６６年日本武田药品工
电荷形成静电吸附而结合在脂质膜上，然后恩拉霉素分子中的疏水端借助分子链的柔性插入到质膜
畜体内较少，微量加入即发挥作用。具有高稳定性、低毒性、低药物残留，是目前比较理想的新型饲用抗生素，可以收到良好的社会效益和环境效益，有广阔的市场前景。恩拉霉素具有不被动物组织吸收，无
同。目前，关于恩拉霉素的作用机制主要包括以下几种：１）离子通道的形；４）抑制细胞壁的形成。恩
胞壁缺损，导致细胞内渗透压升高，细胞外液渗入菌体，使细菌变形、肿大、破裂而死亡！。
由于恩拉霉素对革兰氏阳性菌有强烈抑菌作
用，能改变肠道内菌群分布，有利于饲料营养，促进
动物消化吸收增重，提高饲料利用率，在胃液低ｐＨ条件下，有很高的稳定性，禽畜长期服用不易产生抗
冬氨酸上。根据末端脂肪酸分子的不同分为恩拉霉素Ａ和恩拉霉素Ｂ，恩拉霉素是这两种组分的混合
物。恩拉霉素的作用机制与传统抗生素有很大的不
药性能改变肠道内细菌群落，常作为饲料添加剂，口
服后恩拉霉素只留在消化道中，不易被吸收，残留禽
中，进而牵引整个分子进入质膜，扰乱质膜上蛋白质和脂质原有排列秩序，再通过恩拉霉素分子间的相
业株式会社研发，自土壤中分离的放线菌Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ－ｃｅ８ｆｕｎｇｉｃｉｄｉｃｕｓＮＯ．Ｂ５４７７发酵生产一种新型抗生
氮离子对杀真菌放线茵Ｓ．ｆｕｎｇｉｃｉｄｉｃｕｓＮＬ６２９ — ３菌株进行诱变处理，研究低能氮离子注入对其存活率及产恩拉霉素能力的影响。低能氮离子注入剂量在６０ × １０＂ｉｏｎｓ／ｃｍ时对链霉茵的诱变效应显
１２美元，效益可观（据２０１３年网上信息），但竞争十分激烈。恩拉霉索是一种环状多肽类抗生素，由１３种不同氨基酸、１７个氨基酸分子和脂肪酸分子组
成，氨基酸组成环状多肽脂肪酸分子连在末端的天
用是维持外形，保持渗透压稳定，主要成分为黏肽，
在革兰阳性菌中，黏肽占细胞壁总量的６５％～９５％。研究表明：恩拉霉素能阻止黏肽的合成，使细
业，年产６０００多吨。我国恩拉霉素的出口量达到３０００多吨，创汇４０００多美元，出口单价达到每公斤
氮离子注入诱变选育恩拉霉素高产菌株
蔡作新’ ，郑传伟’ ，田伟波’ ，魏亚萍，艾咚咚
１．齐鲁制药有限公司，山东济南２５０１００；
２。山东齐发药业有限公司，山东平阴２５０４００
摘
要：利用氮离子注入对链霉菌的诱变效应，筛选高产恩拉霉素的变异菌株。利用不同剂量的
第４５卷第３期
２０１５年６月
工
业
微
生
物
Ｖｏ１．４５Ｎｏ．３
ＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ
Ｊｕｎ．２０１５
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－６６７８．２０１５．０３．０１０
互位移聚合形成跨膜离子通道。细菌细胞壁主要作
素，当初定名为Ｅｎｄｕｒａｃｉｄｉｎ，现称Ｅｎｒａｍｙｃｉｎ＿ｌ｜２］。
１９９３年该抗生素在我国注册。现在恩拉霉素的主要生产国就是中国，浙江海正药业是最大的生产企
著，试验得到了５株恩拉霉素产量较高的突变茵株，其中Ｎ３－６４３茵株经连续传代４次，遗传稳定性
较好，其摇瓶发酵水平较对照提高了４１％，放大发酵生产后平均发酵水平提高２５．８％。离子注入
诱变是获得高产恩拉霉素突变菌株的有效方法。关键词：链霉菌；氮离子注入；恩拉霉素；诱变育种恩拉霉素（Ｅｎｒａｍｙｃｉｎ），又名恩来霉素、安来霉素、持久霉素，是由土壤中分离出来的链霉菌拉霉素分子的构成氨基酸中大多数为带正电荷的氨基酸，分子通过正电荷与细菌胞浆磷脂分子上的负
作者简介：蔡作新（１９６９一），男，研发中心部长，工程师。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｚｈｕｏｘｉｎ＠１６３．ｃｏｎ。ｒ
一
５８ —
第３期
蔡作新等：氮离子注入诱变选育恩拉霉素高产菌株