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复方醋酸地塞米松乳膏抑菌剂含量测定及其抑菌效力评价林琳【摘要】Objective To establish a HPLC method to determine the antiseptics in compound dexamethasone acetate cream and evaluate the usage rationality of antimicrobial preservatives. Methods The content of ethyl hydroxybenzoate was calculated by external standard with HPLC.The effectiveness of antimicrobial preservatives was measured according to the preservative effectiveness test in ChP(2015edition) by inoculating 5 kindsof test microorganisms including Pseudomonas aeruginosa,Escherichia coli,Staphylococcusaureus,Candida albicans and Aspergillusniger.Results The linear ranges of ethyl hydroxybenzoate was 6.63-132.6 μg/mL ( r=0.999 7 ) .The average recoveries was 99.2%.The samples from different batche had different antimicrobial effectiveness due to the content of ethyl hydroxybenzoate.Conclusion The described method can be used in the determination of the preservatives of ethyl hydroxybenzoate in compound dexamethasone acetate cream.At present the use of antibacterial agent is arbitrary, it is necessary to strengthen research and supervision.%目的：建立高效液相色谱法测定复方醋酸地塞米松乳膏中抑菌剂的含量，并评价抑菌剂使用的合理性。
添加羟苯乙酯的加替沙星滴眼液抑菌效力的检测与评价吴燕燕【期刊名称】《海峡药学》【年(卷),期】2018(030)004【摘要】目的比较国内两个厂家生产的添加羟苯乙酯防腐剂的加替沙星滴眼液与未添加此类防腐剂的加替沙星滴眼液的抑菌效力,探讨其防腐剂添加的合理性及必要性.方法选取未添加防腐剂及添加含0.03％羟苯乙酯的滴眼剂,采用中国药典2015版(ChP2015)四部通则1121抑菌效力检查法,选用硫酸锰作为中和剂消弱其抑菌作用,以铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉5种菌株对其进行抑菌效力测定.结果两个生产企业的滴眼剂,添加含0.03％羟苯乙酯防腐剂的加替沙星滴眼液均达到中国药典2015版抑菌效力标准"A",或至少达到抑菌效力"B";未添加防腐剂的加替沙星滴眼液未能达到抑菌效力标准"B".结论作为0.03％的羟苯乙酯加替沙星滴眼液的防腐剂是合理的;不含防腐剂的滴眼剂可能存在潜在的风险.【总页数】4页(P87-90)【作者】吴燕燕【作者单位】福建省食品药品质量检验研究院福州350001【正文语种】中文【中图分类】R969.4【相关文献】1.HPLC法测定加替沙星滴眼液中抑菌剂羟苯乙酯的含量 [J], 李翔;许威2.添加季铵盐类防腐剂的加替沙星滴眼液抑菌效力的检测与评价 [J], 刘晓玲;吴燕燕3.氯霉素滴眼液的抑菌效力评价 [J], 董自艳;戴翚4.一次性氧氟沙星滴眼液抑菌效力的检测及其结果评价 [J], 张超;赛景影;张晓天;谢静姝;宋晨雪;牟佳;王放5.添加防腐剂的五氯柳胺混悬液抑菌效力的检测与评价 [J], 姜兴粲;李冰;孙继超;王玮玮;张吉丽;张继瑜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
防腐剂在几种中药口服液中的效力测定
刘桂荣;刘红
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】1994(016)009
【摘要】将中药口服液以已知微生物进行人为污染，然后按不同时间间隔，测定和计算存活微生物数目，从而测定防腐剂的效力。
【总页数】2页(P10-11)
【作者】刘桂荣;刘红
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R286.0
【相关文献】
1.食品药品制剂中抑菌剂(防腐剂)效力测定与标准 [J], 成秉辰
2.药品口服液中防腐剂抗菌防腐效力的测定 [J], 李亚南;付利明
3.人工泪液氯霉素滴眼液中防腐剂防腐效力的测定 [J], 王卫平
4.五味子糖浆中防腐剂的防腐效力测定 [J], 吴潇
5.二种防腐剂在药品中的效力测定 [J], 王立华;马婧;孙蕴华
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食品中防腐剂的检测与评价食品防腐剂是一种广泛应用于食品工业的重要添加剂，其主要作用是延长食品的保质期，防止食品腐败变质。
然而，随着人们对食品安全的度不断提高，食品中防腐剂的检测与评价成为了公众的焦点。
本文将介绍食品中防腐剂的重要性和检测方法，并通过实验设计、实验结果和实验分析，对食品中防腐剂的含量进行评价。
食品防腐剂的主要作用是通过抑制微生物的生长繁殖，防止食品腐败变质。
在食品工业中，防腐剂的应用范围广泛，包括肉类、蔬菜、水果、饮料等多种食品。
然而，过量使用或使用不当的防腐剂可能会对人体健康造成潜在危害，因此，对食品中防腐剂的检测与评价显得尤为重要。
食品中防腐剂的检测方法包括物理方法、化学方法和生物方法等。
其中，物理方法主要包括高效液相色谱法、气相色谱法等；化学方法主要包括滴定法、分光光度法等；生物方法主要包括微生物法、酶联免疫法等。
在实际应用中，应根据不同食品基质和不同防腐剂种类选择适宜的检测方法。
本文选取了市场上常见的三种食品：饮料、果酱和罐头，对其中的防腐剂含量进行检测。
实验材料包括样品采集工具、实验器材和试剂、色谱柱、标准品等。
实验步骤包括样品预处理、萃取、定容、进样、分离、检测等。
实验条件包括流动相配比、柱温、流速、检测波长等。
所选取的三种食品中均含有一定量的苯甲酸和山梨酸两种防腐剂；从含量数据来看，饮料中苯甲酸和山梨酸的含量最高，果酱次之，罐头最低；对比国家标准限值（GB 2760-2014），饮料中苯甲酸和山梨酸的含量均符合标准，果酱中苯甲酸含量超标，罐头中山梨酸含量超标。
通过本次实验，我们发现所选三种食品中均含有一定量的防腐剂，其中饮料中苯甲酸和山梨酸含量符合国家标准，果酱中苯甲酸含量超标，罐头中山梨酸含量超标。
建议食品生产厂家在使用防腐剂时严格遵守国家标准规定，避免过量使用对人体健康造成潜在危害。
消费者在选购食品时也应注意查看食品标签中的防腐剂含量，合理选择食品。
本文将探讨食品中五种常见防腐剂的同时检测技术。
食品中抗菌物质的测定与评价方法研究近年来，随着人们对食品安全和营养价值的关注不断提高，食品中抗菌物质的测定与评价方法成为食品科学领域的热点研究话题。
抗菌物质是指能够抑制细菌、真菌或其他病原微生物生长和繁殖的物质。
它们在食品生产和保鲜过程中发挥着重要的作用，因此开展对其测定与评价方法的研究具有重要意义。
在食品中，常见的抗菌物质包括天然存在的植物提取物、香料和调味品等，以及人工合成的防腐剂等。
测定食品中抗菌物质的方法多种多样，主要包括化学方法、生物学方法和物理方法等。
其中，化学方法是目前应用最为广泛的方法之一。
化学方法主要依靠分析仪器和化学试剂进行测定。
例如，高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的测定方法，该方法通过将食品中的抗菌物质溶解，经过样品前处理后，利用液相色谱仪测定出目标物质的含量。
该方法准确、快速，能够同时测定多种抗菌物质的含量。
此外，生物学方法也被广泛运用于抗菌物质的测定与评价中。
生物学方法主要是通过生物学活性实验来评价食品中抗菌物质的抑菌效果。
例如，采用微生物发酵试验可以初步判断食品中抗菌物质的活性及抗菌能力。
同时，细胞毒性实验也常用于评估食品添加物的安全性。
物理方法在测定食品中抗菌物质方面也发挥着重要作用。
其中，纳米技术在近年来得到广泛应用。
纳米技术结合传统物理方法，可以对食品中的微量抗菌物质进行灵敏、准确的测定。
通过纳米技术的应用，可以更加有效地提高食品中抗菌物质的测定和评价效果。
除了测定方法，对于食品中抗菌物质的评价也是十分重要的。
评价抗菌物质的指标主要包括抗菌效果、抗微生物活性及安全性等。
通过定量的评价体系，可以客观地评价食品中抗菌物质的抗菌性能和应用潜力，为食品安全和保鲜提供科学依据。
然而，食品中抗菌物质的测定与评价方法仍存在一些挑战。
首先，抗菌物质的种类繁多，不同的抗菌物质对不同的细菌具有不同的抑菌效果，因此需要针对不同抗菌物质选择合适的测定方法。
其次，食品中抗菌物质的含量往往较低，对于含量较低的抗菌物质的测定方法需要更高的灵敏度和准确度。
摘要：对建立化妆品防腐体系的各种要素进行了分析，就国内外有代表性的微生物挑战试验的评价方法进行了比较，提出了符合实践情况并适用于我国化妆品行业的化妆品防腐体系的效能测试方法的评价标准，还为化妆品防腐体系筛选过程的快速判定提供了经验依据。
关键词：化妆品；防腐剂；防腐体系；微生物挑战试验大多数化妆品富含微生物生长所需的养分，环境中的微生物一俟进入，即可迅速繁殖，破坏产品的感官品质，损害消费者的健康。
因此，一个良好的防腐体系，对于化妆品产品来说是必不可少的。
1 化妆品的防腐体系化妆品的防腐体系实际上是由若干种防腐剂（和助剂）按一定比例构建而成。
防腐体系的基本要素是防腐剂，但其效能大小又与其用量和使用对象的剂型（液态、粉状、乳状、膏霜状等）特性、组成（是否含碳水化合物、蛋白质、动植物抽提物等）、pH值、可能污染的微生物种类和数量等密切相关。
1.1化妆品防腐剂早期使用的防腐剂有：尼泊金脂类、苯甲醇、烷基二甲基苄基铵氯化物、对氯间二甲酚、苯氧基乙醇、布罗波尔（Bronopol，2-溴-2-硝基丙烷-1，3-丙二醇）、道维希尔200（Dowicil-200,六亚甲基四胺衍生物）、杰马-115(Germall-115，咪唑烷基脲)、脱氢醋酸、甲醛、山梨酸等。
这些防腐剂至今很多仍在使用。
近期推广商品化的化妆品防腐剂见表1。
至于复配而成的防腐剂商品更是数不胜数。
防腐剂对微生物的最低抑制浓度（cmc）是判断一种防腐剂效果的首先考虑的基本指标，MIC值越小，表明其效力越高。
表2是某些化妆品防腐剂对主要测试微生物的MIC。
表1一些化妆品防腐剂商品及化学成分商品名称化学成分Enxylk400 甲基二溴戊二腈和苯氧乙醇Biopure100 咪唑烷基脲Nipaguard DMDMH 二甲基二羟基乙内酰脲Nipaguard TCC N-（4-氯苯基-N-3，4-二氯苯基）脲Nipacide PX (PCMX) 对氯间二甲苯酚GERMALLⅡ双咪唑烷基脲GERMALL PLUS 双咪唑烷基脲和碘丙炔基氨基甲酸丁酯（IPBC）ALLANTOIN 乙醛双酰脲SUTTOCIDE A 羟甲基甘氨酸钠华科-98、凯松CG、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和5-氯-2-2甲基-4-异JX-515、YN-H3 噻唑啉-3-酮GLYDANT 二甲基二羟基乙内酰脲GLYDANT PLUS DMDM和IPBCIRGASAN DP300（玉洁新DP-300）、2，4，4’-三氯-2’-羟基二苯醚Oletron1.2化妆品的防腐体系的构建1.2.1防腐剂的复配一种万能的防腐剂是不存在的。
检测报告：珍视明博士伦眼药水防腐剂含量高作者：孙晶晶来源：《中国质量万里行》2014年第09期近年来，各种电子产品让很多的学生、白领变成了“屏幕族”、“低头族”，青少年近视的比例也逐年增高，眼药水也成了缓解眼睛疲劳的必备药品。
不过，长期以来，关于眼药水中的防腐剂一直非议不止。
6月6日“爱眼日”这一天，社交媒体中甚至刷屏式的转载着一篇名为《超九成眼药水被曝含有防腐剂，长期使用易致眼部损伤》的文章。
同时也有专家建议消费者使用不含防腐剂的眼药水。
那么，到底眼药水中的防腐剂含量到底有多少呢？其对眼睛的伤害如何？7月初，《消费者报道》送检了珍视明、新乐敦、乐敦莹、闪亮、润洁、瑞珠、亮视、三顺等8品牌9款眼药水产品到第三方检测机构进行检测。
检测结果显示，珍视明四味珍层冰硼滴眼液防腐剂苯氧乙醇含量最高，为0.29%，其次为博士伦润洁复方硫酸软骨素滴眼液，其防腐剂三氯叔丁醇含量为0.28%。
防腐剂含量都不合规？眼药水打开后会接触空气，被细菌感染，为了防止药物变质，会添入抑菌剂（俗称防腐剂）。
此前有多篇新闻报道表示，根据国家食品药品监督管理总局（SFDA）对滴眼液的上市审批规定，多剂量滴眼液允许加入适量的抑菌剂，通常含量是万分之一至万分之二。
报道还指出，长期使用含有防腐剂的眼药水，会损害自然泪膜。
随之而来的后果可能是导致角膜损伤，引起过敏反应。
事实是否真的如此？依据9款眼药水的标示，媒体分别送检了6款标注含有防腐剂的眼药水，涉及4种防腐剂——三氯叔丁醇、苯扎氯铵、苯扎溴铵、苯氧乙醇的含量。
检测结果显示，闪亮复方门冬维甘滴眼液防腐剂苯扎氯铵含量最低，为0.023%。
防腐剂含量最高的为珍视明四味珍层冰硼滴眼液，其苯氧乙醇含量为0.29%。
另外，博士伦润洁萘敏维滴眼液与乐敦莹复方硫酸软骨素滴眼液中未检出所标注的防腐剂苯扎溴铵。
如果按照此前一些报道中所说的防腐剂含量应在“万分之一至万分之二”，那么此次检测中，所有产品的防腐剂含量均超出这一限量范围。
抗菌药物的疗效评价和药物治疗监测抗菌药物是治疗感染性疾病的重要工具，但由于药物抗性的出现，导致疗效不稳定。
因此，评价抗菌药物的疗效以及进行药物治疗的监测变得至关重要。
本文将就这一话题进行探讨。
一、抗菌药物的疗效评价抗菌药物的疗效评价是衡量药物疗效的重要指标，可以判断药物是否有效、对病原菌的抑制程度以及疗效的持续时间等。
以下是几种常用的抗菌药物疗效评价方法。
1. 最小抑菌浓度（MIC）测定最小抑菌浓度是指在体外条件下，抗菌药物能够抑制病原菌生长的最低药物浓度。
通过对细菌进行体外实验，可以确定不同细菌株对不同抗菌药物的敏感性，从而评价药物的疗效。
2. 致死动力学参数评估致死动力学参数是对抗菌药物疗效评价的另一种方法。
通过测定初始细菌数量、药物浓度以及时间的变化，可以明确药物对细菌的杀灭作用。
常见的参数包括最大细菌杀灭速度、最大细菌杀灭量和时间依赖性指数等。
3. 细菌生长曲线分析细菌生长曲线分析是一种定量评估抗菌药物疗效的方法。
通过观察细菌在药物作用下的生长情况，可以评估药物对细菌生长的抑制能力。
二、药物治疗监测药物治疗监测是指在抗菌药物治疗期间，对患者进行定期监测，确保药物治疗的效果和安全性。
以下是几种常见的药物治疗监测方法。
1. 血药浓度监测血药浓度监测可以帮助确定患者体内药物的浓度，从而判断药物的疗效和副作用情况。
根据药物的半衰期和药代动力学参数，可以制定出合理的给药方案，以达到最佳治疗效果。
2. 肝肾功能监测抗菌药物的代谢和排泄主要依赖于肝脏和肾脏功能。
因此，在药物治疗期间，需要对患者的肝肾功能进行监测，确保药物的代谢和排泄正常，避免药物在体内积聚导致毒副作用。
3. 细菌培养和耐药基因检测细菌培养和耐药基因检测是判断药物疗效和抗菌药物选择的重要手段。
通过对细菌进行培养和基因检测，可以明确细菌的抗药性，从而选择出有效的抗菌药物。
结论抗菌药物的疗效评价和药物治疗监测是确保抗菌治疗有效性和安全性的重要环节。
化妆品防腐效能评价方法操作指南化妆品防腐效能评价比较常用的方法是微生物挑战性实验。
其基本原理是：将一定量的微生物加入到化妆品中，每隔一定时间检测微生物增减的数量，以此来判断防腐剂的防腐效能。
通过该方法既可以评价防腐剂的效能，又能在安全剂量内确定化妆品使用的防腐剂的最低浓度。
微生物挑战性实验可采用单一培养或混合培养方式。
单一培养即分别接种每种实验菌株的菌悬液于测试化妆品中，在接种后的一定时间内对化妆品进行平板计数（APC），以此判断防腐剂的防腐效能。
混合培养为将几种细菌或真菌的混合液接种于化妆品中，在接种后一定时间内，测定化妆品的APC，以此判断防腐效能。
可根据实际情况选择培养方式挑战性实验测试菌株的选用原则为：尽量覆盖革兰氏阳性、阴性细菌，酵母菌和霉菌至少各一种，并且对各防腐剂抵抗性较高，能代表化妆品中可能污染的微生物对防腐剂的抵抗性的菌株。
可根据化妆品的性质，生产、使用环境等增加菌株。
一般较常用的菌株为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌和黑曲霉等。
检测时间：一般为在样品中加入微生物时，以及第1、7、14、21、28天检测化妆品中的菌落数。
判定标准：推荐采用《欧洲药典》的结果评定标准，即细菌于第7天时菌落总数下降99.9%，至第28天时无增长；真菌于第14天下降99.0%，至28天时无增长，判断为防腐效果良好。
对于能够保证化妆品产品微生物质量合格，且在使用过程中不存在二次污染的化妆品可以不进行微生物挑战性实验。
化妆品防腐效能评价方法1.定义微生物挑战性实验：将一定量的微生物加入到化妆品中，每隔一定时间检测微生物增减的数量，以此来判断防腐剂的防腐效能的实验方法。
2仪器设备2.1 生物安全柜2.2 高压蒸汽灭菌器2.3 冰箱2.4 恒温培养箱2.5 均质器2.6 旋涡振荡器2.7天平2.8 灭菌培养皿2.9 灭菌试管2.10灭菌刻度吸管2.11 灭菌试剂瓶2.12 玻璃珠3.试剂和培养基3.1 生理盐水3.2 含0.05%吐温80的生理盐水3.3 改良的LETHEEN 肉汤3.4水解大豆琼脂培养基（TSA培养基）3.5马铃薯葡萄糖培养基（PDA）3.6萨布罗右旋糖琼脂培养基(SDA)4.实验菌株4.1细菌：金黄色葡萄球菌A TCC6538，大肠杆菌A TCC8739，铜绿色假单胞菌ATCC9027。
抗菌的效力测试抗菌防腐剂是实际被添加到有菌的剂量配方里的物质，使他们不受微生物滋长或是被无意中引进到生产过程中的微生物侵害。
在无菌包装多剂量配方的容器里，抗菌防腐剂被添加用来抑制由重复添加单剂量所引进的微生物的滋长。
抗菌防腐剂不应被作为在良好生产操作中的替代方式使用，或仅是用来减少一个有菌产品的微生物群数量，或是在生产时控制多剂量的微生物量。
在剂量表里抗菌防腐剂与添加的要求必需符合规定。
所有有用的抗菌药剂都是有毒物质。
为了最大的保护使用者，防腐剂的含量应被有效地显示在产品的最终包装上，并应会处在一个可能对人体有毒的水平线下。
添加的抗菌防腐剂含量能够被保持在一个最小的浓度，如果配方的活性成分具有一个固定的抗菌力。
抗菌的效力，不管是产品里固有的或者是生产中添加的抗菌防腐剂，都必须在所有注入包装的多剂量容器里或其它包含抗菌防腐剂的产品上显示。
抗菌防腐剂必须被显示在多剂量和口头剂量型和给其它剂量型，如眼药，耳药，鼻药，冲洗的和透析液。
(看Pharmaceutical Dosage Forms(a1151).本章提供的测试用来显示抗菌保护的效力。
添加的抗菌防腐剂必须显示在标签上。
测试的效力和标准适用于一个产品在原有的、未打开过的经由制造商销售的容器里。
产品分类为了测试的目的，配制产品分开为四个分类（看表1）。
抗菌效力的标准对于这些产品是一个管理的作用。
Table pendial Product Categories 表1: 配制药品分类测试生物体使用以下微生物的培养基：白念珠菌（ATCC NO.10231）,黑曲霉菌（ATCC NO.16404）,大肠杆菌（ATCC NO.8739）,绿脓杆菌(ATCC no.9027),和金黄色葡萄球菌( ATCC NO.6538). 在测试中使用活的微生物从原始的培养基移转次数不得超过五次。
为了测试的目的，「移转」的定义是从一个已确定的培养基移到一个新鲜的媒介里。
所有的移转均应被计算在内的。
1121 抑菌效力检查法抑菌剂是指抑制微生物生长的化学物质，有时也称防腐剂。
抑菌效力检查法系用于测定无菌及非无菌制剂的抑菌活性，用于指导生产企业在研发阶段制剂中抑菌剂种类和浓度的确定。
如果药物本身不具有充分的抗菌效力，那么应根据制剂特性（如水溶性制剂）添加适宜的抑菌剂，以防止制剂在正常贮藏或使用过程中由于微生物污染和繁殖，使药物变质而对使用者造成危害，尤其是多剂量包装的制剂。
在药品生产过程中，抑菌剂不能用于替代药品生产的GMP管理，不能作为非无菌制剂降低微生物污染的唯一途径，也不能作为控制多剂量包装制剂灭菌前的生物负载的手段。
所有抑菌剂都具有一定的毒性，制剂中抑菌剂的量应为最低有效量。
同时，为保证用药安全，成品制剂中的抑菌剂有效浓度应低于对人体有害的浓度。
抑菌剂的抑菌效力在贮存过程中有可能因药物的成分或包装容器等因素影响而变化，因此，应验证成品制剂的抑菌效力在效期内不因贮藏条件而降低。
本试验方法和抑菌剂抑菌效力判断标准用于包装未启开的成品制剂。
培养基培养基的制备胰酪大豆胨液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基照无菌检查法（通则1101）制备。
培养基的适用性检查抑菌效力测定用培养基包括成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基的适用性检查检查。
菌种试验所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。
培养基适用性检查的菌种及新鲜培养物的制备见表1。
表1 培养基适用性检查、方法适用性检查、抑菌效力测定用的试验菌及新鲜培养物制备试验菌株试验培养基 培养温度 培养时间 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B) 26003 〕胰酪大豆胨琼脂培养基或 胰酪大豆胨液体培养基 30～35℃ 18～24小时 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)胰酪大豆胨琼脂培养基或 胰酪大豆胨液体培养基 30～35℃ 18～24小时 适用性检查 分别接种不大于100cfu 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌的菌液至胰酪胨大豆琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平板，混匀，凝固，置30～35℃培养不超过3天，计数；分别接种不大于100cfu 的白色念珠菌、黑曲霉的菌液至沙氏葡萄糖琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平板，混匀，凝固，置20～25℃培养不超过 5 天，计数；同时，用对应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。
两种方法测定化妆品防腐剂抑菌效果及评价符晓梅;封幼玲;诸元生;陆跃良;张建新【期刊名称】《环境与健康杂志》【年(卷),期】2000(17)3【摘要】[目的 ]检测化妆品防腐剂抑菌效果 ,并对方法进行评价。
[方法 ]选择两种凯松 (凯松 1、凯松 2 )和一种布罗波尔化妆品防腐剂 ,分别以纸片法和防腐剂效力测试法观察了不同浓度 (0 .0 4%、 0 .0 6 %、 0 .0 8%、 0 .1%和 0 .2 % )和不同时间 (6 h、 2 4h、 48h、 7d和 14d)防腐剂对大肠杆菌 ATCC 80 99、金黄色葡萄球菌 ATCC 6 5 38、白色念珠菌 ATCC 10 2 31和黑曲霉 ATCC 16 40 4的抑菌效果。
[结果 ]凯松 1、凯松 2和布罗波尔抑菌有效浓度纸片法测定分别为0 .1%、 0 .0 6 %和 0 .2 % ,在所试浓度内只有布罗波尔对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和黑曲霉无抑菌效果 ,防腐剂效力测试法测得 3种防腐剂对大肠杆菌的抑菌有效浓度为 0 .0 4% ,0 .0 4%和 0 .2 %。
[结论 ]与纸片法比较 ,防腐剂效力测试法考虑了化妆品化学成分对防腐剂抑菌效果的影响。
【总页数】4页(P167-170)【关键词】化妆品;防腐剂;抑菌;测试方法【作者】符晓梅;封幼玲;诸元生;陆跃良;张建新【作者单位】江苏省卫生防疫站;昆山市卫生防疫站【正文语种】中文【中图分类】R168;TQ658【相关文献】1.复合防腐剂在儿童化妆品中抑菌效果的研究 [J], 陈宇宇;许湘曼;陈来成;彭俊瑛;温文忠;胡建强2.尼泊金甲酯化妆品防腐剂抑菌效果的研究 [J], 王军锋;李子荣3.化妆品防腐剂的短期抑菌效能评价 [J], 蔡颖;唐波;陈冠武;林宁静;周广彪;陈双鹏;郑子乔4.四种中药挥发油与化妆品防腐剂苯氧乙醇联用的抑菌效果研究 [J], 闻婧;梁卉;万紫燕;查雅菲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一、概述抗菌和抑菌效果评价方法是指对产品或物质在抗菌和抑菌方面的性能进行评定和检测的方法。
这些方法对于商品质量的评估和监管具有重要意义，同时也是保障人类健康和安全的重要手段。
本文将探讨抗菌和抑菌效果评价方法的相关内容，以期为相关领域的研究和实践提供参考和指导。
二、常见的抗菌和抑菌效果评价方法1. 环境条件下的抗菌效果评价方法在室内环境中，抗菌效果的评价方法通常包括接触抑菌试验、空气抑菌试验等。
其中，接触抑菌试验是将被测产品表面暴露在含菌液或含菌悬浮液的环境中，通过判断其对细菌的杀灭能力来评价其抗菌效果；空气抑菌试验则是通过将被测产品暴露在充满细菌的空气中，评定其对空气中细菌的杀菌作用。
这些方法能够客观地评价产品在真实环境中的抗菌效果，具有较高的实用性和准确性。
2. 细菌培养和筛选技术通过培养和筛选细菌，评价被测产品对特定菌种的抑菌效果。
这种方法多用于生物试验室中，通过在含有细菌的培养基中加入被测产品，观察并比较细菌数量的变化或生长的抑制情况，以评价被测产品的抗菌效果。
这些方法对于研究产品对特定细菌的抑制作用提供了极大的便利，也为产品的研发和改进提供了重要的数据支持。
3. 饮用水和食品中的抗菌效果评价方法饮用水和食品中的抗菌效果评价方法是评价被测产品对水和食品中细菌的抑制或灭活效果的一种方法。
通常采用菌液接种法、均匀分布法和菌片法等技术，通过在含菌水和食品中加入被测产品，观察并比较细菌数量的变化或抗菌效果的强弱，来评价被测产品对饮用水和食品中的细菌的抑制效果。
这些方法在食品和饮用水中的卫生安全领域具有重要意义。
三、抗菌效果评价方法的研究进展近年来，随着科技的不断发展和创新，抗菌效果评价方法也得到了很大的进展，主要表现在以下几个方面：1. 新技术的应用随着生物技术和纳米技术的发展，一些新的高效抗菌和抑菌技术得到了广泛应用，例如纳米银材料、超声波杀菌技术等，这些新技术的应用极大地提高了抗菌效果评价的效率和精度，为产品的研发和质量控制提供了有力支持。
５９２ · 中国药事２００５年第１９卷第１０期 药品中防腐剂的抗菌效力测定与评价 熊家娟（阿斯利康制药有限公司，江苏无锡２１４０２９） 中图分类号：Ｒ９７９．７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２—７７７７（２００５）１０—０５９２—０３ 为了保证药品的安全性和有效性，药品必须符 合相应的卫生学要求。但有些药品的有效组分没有 足够的抗菌防腐能力，在这些成品制剂中则往往需 要加入适当的防腐剂以有效控制微生物的生长。然 而，防腐剂的抑菌效果往往会受到多个因素的干 扰，如防腐剂的化学结构及其浓度、药品有效组分 的物理和化学特性、制剂形式、包装材料（容器及 其密封件）以及存贮条件等；并且所有的防腐剂都 是有毒物质，因此就临床用药的安全性而言，在药 品制剂的质量标准中制订防腐剂的含量测定和效力 测定是非常重要的。Ｉ】 本文结合美国和欧洲药典 最新版，详细介绍了药品抗菌防腐效力试验的试验 方法，包括检测对象的细致分类和试验用菌悬液的 制备，并分析了两部药典中对防腐剂抗菌防腐效力 的合格标准的异同点。 １进行抗菌防腐效力测试的药品分类 药品的微生物学质量控制要求主要是依据给药 途径而确定的。同样，药品的防腐效力要求也取决 于其给药途径。表１综合了美国药典和欧洲药典对 抗菌防腐效力试验的药品分类。
表１ 抗茵防腐效力测试的药品分类 － 药品类别 品种概述 Ｉ 注射剂，其它以水溶液为介质或载体的肠外用药品 （乳化剂、耳科用药、无菌鼻科用药和眼科用药等） Ⅱ 局部用水性制剂、非无菌鼻科药品．非无菌乳剂类
产品，还包括黏膜用药品。 Ⅲ 水性口服制剂（抗酸剂除外）
Ⅳ 水性抗酸剂
注：欧洲药典将ＩＩ１类和ＩＶ类合并为ＩＩｌ类。 ２试验用菌株的种类、保存及制备方法 用于防腐效力测试的菌株应涵盖微生物的各个 类别，如细菌、酵母菌和霉菌等，所选用的菌株应 是常见致病菌的代表。表２列举了美国药典和欧洲 药典推荐用于药品防腐剂抗菌防腐效力测试的菌株 及其主要制备条件。 表２ 抗茵防腐效力测试用菌株及其制备条件 －
注：１．欧洲药典未将大肠埃希氏杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｉｌ）列为防腐剂效力测定的常规试验用菌种，但建议对口服产品的防腐效力检测增加该 菌种；并建议增加Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｒｏｕｘｉｉ（ＩＰ ２０２１．９２）对含糖量高的口服产品的检测。 ２．ＴＳＡ／ＴＳＢ分别指大豆胰蛋白胨琼脂（Ｓｏｙｂｅａｎ－－Ｃａｓｅｉｎ Ｄｉｇｅｓｔ Ａｇａｒ）和大豆胰蛋白胨肉汤（Ｓｏｙｂｅａｎ－－Ｃａｓｅｉｎ Ｄｉｇｅｓｔ Ｂｒｏｔｈ）。基准配方， 升培养基内含消化性胰酪蛋白１７．０克、消化性大豆酪蛋白３．０克、氯化钠５．０克、磷酸氢二钾２．５克、葡萄糖（Ｃ６Ｈ１２０６．Ｈ２Ｏ）２．５克、 纯水加至１０００毫升，用１Ｎ的氢氧化钠调节ｐＨ值，使灭菌后培养基ｐＨ＝７．３士０．２。向ＴＳＢ配方中再加入１５．０克琼脂后，即成ＴＳＡ。 ３．ＳＤＡ／ＳＤＢ分别指萨布罗氏葡萄糖琼脂（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ Ｄｅｘｔｒｏｓｅ Ａｇａｒ）和萨布罗氏葡萄糖肉汤（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ Ｄｅｘｔｒｏｓｅ Ｂｒｏｔｈ）。基准配方，一 升培养基内含葡萄糖４０．０克、动物组织消化水解液和胰蛋白胨等比混合物１０．０克、加纯化水至１０００毫升，用１Ｎ的盐酸调节ｐＨ值，使 灭菌后培养基ｐＨ＝５．６士０．２。向ＳＤＢ配方中再加入１５．０克琼脂后，即成ＳＤＡ。
菌株的生理条件是影响试验结果的关键因素。 所有试验用菌株自菌种中心购买后的转种次数不得 超过五代；菌种应于低温冷冻（宜在一３０℃以下的 冰箱或液氮内）保存。如果该菌种是用液体培养基 培养的，保存前应将菌种的新鲜培养物（１８～２４ 小时培养物）进行离心（离心速度通常约为４０００ 转／分钟），然后用约二十分之一体积的无菌肉汤 （ＴＳＢ）将沉降的细胞悬浮于其中，最后向其中加 入等体积的无菌甘油（浓度为２Ｏ％），混匀后即予 冷冻保藏。如果该菌株是用固体培养基培养，则将
维普资讯 http://www.cqvip.com 中国药事２００５年第１９卷第１ｏ匍 · ５９３ · 生长在琼脂表面的菌落（或菌苔）刮下来并收集于 含１Ｏ 甘油的无菌肉汤培养基（ＴＳＢ）内，然后 分装至若干支无菌小试管（１．５～２．０毫升，带螺 旋盖帽）内，于低温下冷冻保存备用。使用时，取 出一支小试管，并接种于相应的固体或液体培养基 内培养并制备实验菌悬液。 表２列出了制备实验菌悬液时各菌种的要求。 如该菌种系采用固体培养法培养，制备菌液时应用 少量无菌生理盐水（３～５毫升）将琼脂培养基表面 的细菌细胞和白色念珠球菌细胞洗下来并收集于适 当的容器中，再用无菌生理盐水将收集到的微生物 细胞稀释至适当浓度（通常为１ｘ１０ ＣＦＵ·ｍｌ ）； 但黑曲霉菌则需延长培养时间直至产生孢子，用少 量含０．０５％聚山梨酯（吐温）８０的生理盐水溶液（３ ５毫升）将孢子淋洗下来并收集于一无菌容器内， 再用无菌生理盐水将收集的孢子液稀释至适当浓度 （通常为１ｘ１０。ＣＦＵ·ｍｌ ）。用液体培养基培养 的菌种于培养结束后（黑曲霉菌只能采用固体培养 基培养），先用离心法将细胞沉降后，再用适量的 无菌生理盐水溶液将细胞稀释至１ ｘ １０ ＣＦＵ· ｍｌ一。细菌、酵母细胞和霉菌孢子的浓度通常都 可采用比浊法来进行估测，但同时还采用平皿菌落 计数法进行对照检查以确认比浊法的可靠性。制备 好的细菌和酵母细胞悬液宜在低温（２－－８℃）下保 存并于２４小时内使用，但霉菌孢子悬液可于一周 内使用。超过保存时间，则需重新制备ｏｔ４３ ３ 测定方法 测定时，可直接将制备好的新鲜（２４小时之 内）实验菌悬液无菌操作加入样品，如：采用无菌 注射器刺入弹性胶塞内；如果直接接种不方便或是 原容器内的样品量不足，也可无菌操作将足够量的 样品加入一适当的无菌带帽小试管内，然后再向小 试管中接入菌种。每个样品容器内只接一种试验菌 悬液，并且菌悬液的加入量不得超过样品体积的 １．０ ，即如果容器内的样品量为１００毫升，则加 入的菌悬液体积不得超过１．０毫升。菌悬液与样品 溶液经充分混匀后，实验菌株的细胞或孢子浓度应 控制在１ ｘ １０ ＣＦＵ·ｍｌ 至１ ｘ １０ ＣＦＵ·ｍｌ 之 间。实验菌悬液与样品溶液一经混匀后，将其置于 ２ｏ～２５℃下培养，在起始和指定的时间间隔内分 别对每个容器取样（每次取１．０毫升或１克）并参 照表２中的培养条件对菌液浓度进行计数检查，也 可参照药典的微生物限度检查法进行计数检查。计 数时，既可采用平皿菌落计数法，也可采用薄膜过 滤法。微生物细胞或孢子的浓度单位均以ＣＦＵ· ｍｌ 表示，然后将每个浓度数据换算为标准对数 值，最后计算各时间间隔下的对数下降值。 在微生物计数过程中，采取适当措施消除或中 和样品中防腐剂的抑菌性是计数成功和准确的关 键。防腐剂的中和方法通常有以下三种：加入化学 中和剂、稀释样品和薄膜过滤。根据样品特性，可 将这三种方法组合使用。表３列举了部分药品用防 腐剂及其对应的有效中和剂（亦称为钝化剂）。中 和剂使用要得当，过量使用也会产生抑菌作用；稀 释时所用的稀释倍数应保证菌落计数结果的有效性 和可靠性（如每个平皿中的有效菌落数应在３ｏ～ ３００个之间，直径为４７毫米的薄膜上的有效菌落 数宜在１００个以下）。因此，效力测试实验前应先 对防腐剂的中和方法进行验证，以保证检测结果有 效、可靠。
表３药品用防腐剂及其对应的中和剂（钝化剂） ｓ］ 防腐剂的类别 中和剂 戊二醛、汞制剂 酚类、酒精、乙醛、山梨酸酯 乙醛 季铵盐类化合物、对羟基苯甲酸酯类、 双缩胍类 ＥＤＴＡ 季铵盐类化合物、碘、对羟基苯甲酸酯 类 汞制剂 汞制剂、卤化物、乙醛 硫酸氢盐 常规稀释液 甘氨酸 卵磷脂
Ｍｇ 或Ｃａ 离子 聚山梨酯
硫基醋酸盐 硫代硫酸盐
４ 防腐效力测定方法的验证【４ ］ 防腐效力测定方法的验证试验是为了证明样品 预处理方法能将样品的抑菌性有效中和或消除，同 时也证明所采取预处理方式及整个检测过程及检测 条件等均不会影响样品中残存的试验菌的生长。 验证时，试验菌株的制备方法须与上述防腐剂 防腐效力测定用试验菌株的制备方法和接种量均相 同；同时，对每个试验用菌株准备以下三组样品： 样品组、蛋白胨对照组和和阳性对照组。 样品组：按既定方法中和或稀释或过滤样品 （或采用组合方法），再向其中接入试验用菌株，接种 后菌液浓度与上述防腐试验相同，按照常规检测程 序和培养条件检查试验用微生物的恢复生长情况； 蛋白胨对照组：除了用Ａ溶液（０．１ 蛋白胨 溶液）替代实际样品外，中和方式、检测程序和培 养条件等均与样品组相同； 阳性对照组：不经中和处理，将试验菌株稀释
维普资讯 http://www.cqvip.com ５９４· 中国药事２００５年第１９卷第１Ｏ期 并直接接种于固体琼脂培养基培养（稀释倍数与前 两组试验相同）。 如果样品组与蛋白胨对照组的微生物生长数量 相似（无论采用平皿菌落计数法还是采用薄膜过滤 法，二者检测结果之间不超过３Ｏ ），则表明中和剂 具有足够的中和效力，即该中和方式有效消除了样 品的抑菌性；如果蛋白胨对照组与阳性对照组的微 生物生长数量相似（二者检测结果之间不超过 ３Ｏ ），则表明样品预处理用中和剂的毒性、检测程 序和培养条件等均未对试验用微生物的生长有不良 影响。需对试验用每个菌株均进行上述验证试验。 为考察检验方法的稳定性和重现性，验证时， 至少需考查三个不同批号的同类产品，分别进行三 次验证试验。 ５ 合格标准［４ 美国药典和欧洲药典对防腐剂的防腐效力标准 有一些差异。但总的说来，欧洲药典对防腐剂的防 腐效力标准比美国药典的相关要求更加严格。为了 充分理解和把握美国药典和欧洲药典对防腐效力标 准制定的特点及标准间的差异性，特将这两国药典 的防腐效力标准列于表４和表５。 表４美国药典对防腐剂防腐效力的合格标准 ‘
注：“无增加 是指微生物浓度对数值与前次检测结果的对数值之差 不得超过０．５个对数单位
表５欧洲药典对防腐剂防腐效力的建议性合格标准 ］ 微生物 — 号
注：１．ＩＩＩ类药品包含表１中的ＩＩＩ类和ＩＶ类药品； ２．Ａ标准为推荐性指标。但是，在某些因素条件下，例如会增 加毒副反应的风险等，则可采用Ｂ标准
最后，要强调指出的是，防腐剂的使用不能替 代ＧＭＰ的执行，在生产过程中，严格执行ＧＭＰ 依然是制药企业的首要任务。
参考文献： ［１３ Ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ ａｇｅｎｃｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｒｏｄｕｃｔ ＣＰＭＰ／ＱＷＰ／１１５／９５．Ｎｏｔｅ ｆｏｒ ｇｕｉｄａｎｃｅ ｏｎ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ ａｎｄ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ ｉｎ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｓ］．１９９７：１ １－２３ Ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ ａｇｅｎｃｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｒｏｄｕｃｔ ＣＰＭＰ／ＱＷＰ／４１９／０３．Ｎｏｔｅ ｆｏｒ ｇｕｉｄａｎｃｅ ｏｎ ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ， ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ ａｎｄ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｏｓｓｉｅｒ ｆｏｒ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｍａｒｋｅｔｉｎｇ ａｕｔｈｏｒｉｓａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｒｏｃｕｃｔ Ｉｓ］．１９９８：１ ［３］Ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ ａｇｅｎｃｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｒｏｄｕｃｔ ＣＰＭＰ／ＱＷＰ／１５５．／９６．Ｎｏｔｅ ｆｏｒ ｇｕｉｄａｎｃｅ ｏｎ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ＩＳ］，１ ９９８：１ ［４］ ＵＳＰ［Ｓ］．ｅｄ ２６（ＩＩ） ２００３：２００２ ［５］ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ—ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ ２０００．Ｉｓ］．２００２： ４０７ ［６］ ＵＳＰ ＩＳ］．ｅｄ ２６（ＩＩ）２００３：２４４２
