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山西金鼎生物种业股份有限公司国家农作物育种创新基地建设项目研究课题报告
一、项目名称及建设单位
项目名称：西甜瓜育种创新基地建设项目
建设单位：山西金鼎生物种业股份有限公司
协作单位：中国农业大学、山西省农科院园艺研究所
研究课题：西甜瓜育种新材料的创新和利用
二、主要研究内容：
1 、转基因抗病毒西甜瓜育种材料的创新和利用
1.1 收集整理国内外西甜瓜优良种质资源。
1.2 分离克隆西瓜花叶病毒2号（WMV2）外壳蛋白基因、西葫芦黄化花叶病毒（ZYMV）复制酶基因和黄瓜花叶病毒（CMV）复制酶基因，利用分子生物学研究成果，完成序列分析和基因改造。
1.3 通过基因工程技术构建含有三种基因的三价植物表达载体，不同外源基因可在独立表达单元控制下分别表达。
1.4 采用农杆菌介导法，建立西甜瓜高效遗传转化和再生体系，解决转化子不易生根问题，满足大规模西瓜遗传转化及品种选育的需要。
1.5 对获得的再生植株进行多代自交，逐代进行检测，以获得遗传稳定、抗性较好的转基因株系。
1.6对遗传稳定、抗性较好的转基因株系进行中试工作或环境释放及食品安全检测。
1.7 运用血清学（ELISA）、RT-PCR、SOUTHERN-BLOT等检测技术，建立田间与温室、自然感染与人工接种、多种病毒混合侵染与单一种类病毒侵染等不同条件下，转基因西甜瓜品系抗病性表现的检测和鉴定体系。
1.8 对一些表现较好的转基因株系进行测交和组合选配工作，获得抗性和农艺性状较好的杂交组合。
1.9 基础栽培技术探索研究与产业化开发。
2 、野生西甜瓜种质资源收集转育和应用
2.1 国内外野生西甜瓜种质资源的收集整理。
2.2 利用优良品系与野生西甜瓜种质资源杂交，经多代回交分离纯化，获得抗逆性强、配合力好、商品性佳、遗传性稳定的西瓜种质新材料。
2.3 建立西瓜三种主要病害（病毒病、枯萎病、炭疽病）的接种方法和田间抗性评价标准。
2.4 研究探索西瓜在干旱、寒冻、盐碱等极端条件下的评价体系。
2.5 利用稳定的种质材料与优良自交系进行广泛测配和
筛选，选育抗病、抗逆、适应性广的优良杂交组合。
2.6 新组合在不同生态区品比试验工作，进一步研究探讨新组合的适应性和农艺性及适宜的栽培模式。
