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1.3 中药的薄层色谱鉴定内容提要本实验采用薄层色谱法，对大黄、人参、丹参、大青叶、马钱子、熊胆、万氏牛黄清心丸等常用中药进行品种鉴定或质量控制。
通过实验掌握含有不同类别化学成分中药薄测色谱鉴别的条件关键技术。
掌握熊胆等中药薄层色谱鉴定的特征和方法。
原理薄层色谱鉴定法是选用适当粒度的吸附剂，并将其均匀涂铺在玻璃板上(或其他支持物上，如铝制薄板)成一薄层，然后用毛细管或适当的点样器将供试品和对照品溶液分别滴加在薄层的启始线上，待样点上的溶剂挥散后，置于密闭的层析缸中，用一定的溶剂展开，当溶剂前沿到达距离另一端2～3cm处，取出，干燥，显色或直接观察（有色成分），并与专属性的化学对照品或对照药材相比较，以鉴定品种或质量。
薄层色谱鉴定法是中药鉴定应用范围最广的方法之一。
仪器、材料与试剂(1)仪器与材料1)仪器电吹风，硅胶G薄层板，硅胶H-CMC-Na薄层板，容量瓶，三角瓶，烧杯，水浴锅，索氏提取器，紫外分析灯，层析缸。
2)材料粉末：大黄，人参，丹参，大青叶，马钱子，熊胆，万氏牛黄清心丸。
（2）试剂 10%磷钼酸乙醇溶液，10%硫酸乙醇溶液，2%三氯化铁乙醇溶液，20%氢氧化钠溶液，30%硫酸乙醇溶液，pH试纸，氨水，苯，冰醋酸，丙酮，醋酸，醋酸乙酯，碘化铋钾试液，丁酮，硅藻土，甲苯，甲醇，甲酸，甲酸，甲酸乙酯，氯仿，石油醚（30～60℃），盐酸，乙醇，乙醚，异丙醇，异辛烷，蒸馏水，正丁醇，正己烷。
（3）对照品 大黄对照药材，大黄酸，丹参对照药材，丹参酮ⅡA，胆酸，靛蓝，靛玉红，鹅去氧胆酸，士的宁，黄连对照药材，黄芩苷，马钱子碱，去氧胆酸，人参皂苷R g1、R e、R b1，熊去氧胆酸，盐酸小檗碱，栀子苷。
操作步骤（1）大黄的鉴定1）供试品溶液的制备取大黄粉末 0.1 g，加甲醇20 mL浸渍 1h，滤过，取滤液 5 mL，蒸干, 加水10 mL，使溶解，再加盐酸 l mL，置水浴上加热 30 min，立即冷却，用乙醚分2次提取，每次20 mL，合并乙醚液，蒸干, 残渣加氯仿 l mL使溶解。
薄层色谱鉴别介绍薄层色谱（TLC）是一种常用的分离技术，可用于鉴别化合物的混合物。
它是一种简单易用、经济实惠、快速高效的分析方法，常用于药物分析、天然产物分析、农药残留分析等领域。
下面我将对TLC的原理、操作步骤和应用进行介绍。
一、TLC的原理TLC的原理基于色谱分离原理，利用物质在不同固定相上的亲疏性差异，通过毛细作用和扩散作用，使化合物被分离。
TLC的分析基质是通过固定相涂覆在玻璃、铝或塑料基质上，样品通过毛细作用在固定相上上升，而不同成分在固定相上停留的时间也不同，从而实现分离。
TLC工作原理示意图如下：[示意图]二、TLC的操作步骤1.准备试剂和设备：准备TLC板、玻璃容器、色谱溶剂和样品溶液。
2.准备试样：将待测试物溶解在合适的溶剂中，得到试样溶液。
3.均匀涂布试样：将试样溶液均匀地涂布在TLC板上的出发线上。
4.选择合适的溶剂系统：根据待测试物的性质和分离要求，选择合适的色谱溶剂系统，如正己烷/乙醇（9:1）。
5. 开始分析：将TLC板放入玻璃容器中，添加色谱溶剂至约2cm高度，但不能触及TLC板。
盖上容器盖，让试剂与固定相接触，溶液会开始上升。
6. 结束分析：当溶剂上升到离TLC板顶端1-2cm时，将TLC板取出，迅速标记出相应的上升高度。
然后将TLC板晾干并进行显色。
最后使用UV灯或显色剂对TLC板进行观察和分析。
7.数据分析：根据显色结果，通过测量上升的高度和各样品的Rf值（Rf值=色谱前移距/色谱跑液的前行距离），得到鉴别结果。
三、TLC的应用1.鉴别混合物的成分：通过TLC的分离作用，可以鉴别混合物中的各个成分，可以用于检测药物中的杂质和控制药物的质量。
2.分析天然产品：可以用于从天然草药、植物中提取的混合物中分离和鉴定活性物质。
3.农药残留分析：TLC可以用于农产品中农药残留的快速筛查和定量分析，具有操作简单、快速、灵敏等优点。
4.食品和环境监测：可用于鉴别食品和环境样品中的各种组分，如食品中的添加剂和环境中的有机物。
0502 薄层色谱法薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比，亦可用薄层色谱扫描仪进行扫描，用于鉴别、检查或含量测定。
1.仪器与材料（1）薄层板按支持物的材质分为玻璃板、塑料板或铝板等；按固定相种类分为硅胶薄层板、键合硅胶板、微晶纤维素薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。
固定相中可加入黏合剂、荧光剂。
硅胶薄层板常用的有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254、G、H表示含或不含石膏黏合剂。
F254为在紫外光254nm波长下显绿色背景的荧光剂。
按固定相粒径大小分为普通薄层板（10～40μm）和高效薄层板（5～10μm）。
在保证色谱质量的前提下，可对薄层板进行特别处理和化学改性以适应分离的要求，可用实验室自制的薄层板。
固定相颗粒大小一般要求粒径为10～40μm。
玻板应光滑、平整，洗净后不附水珠。
（2）点样器一般采用微升毛细管或手动、半自动、全自动点样器材。
、（3）展开容器上行展开一般可用适合薄层板大小的专用平底或双槽展开缸，展开时须能密闭。
水平展开用专用的水平展开槽。
（4）显色装置喷雾显色应使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器，要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出；浸渍显色可用专用玻璃器械或用适宜的展开缸代用；蒸气熏蒸显色可用双槽展开缸或适宜大小的干燥器代替。
（5）检视装置为装有可见光、254nm及365nm紫外光光源及相应的滤光片的暗箱，可附加摄像设备供拍摄图像用。
暗箱内光源应有足够的光照度。
（6）薄层色谱扫描仪系指用一定波长的光对薄层板上有吸收的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点，进行扫描，将扫描得到的谱图和积分数据用于物质定性或定量的分析仪器。
2.操作方法（1）薄层板制备市售薄层板临用前一般应在110℃活化30分钟。
聚酰胺薄膜不需活化。
铝基片薄层板、塑料薄层板可根据需要剪裁，但须注意剪裁后的薄层板底边的固定相层不得有破损。
依据：《GMP》与药品生产质量检验的要求目的：建立一个薄层色谱鉴别的标准操作规程范围：各种检验中薄层鉴别的操作1．定义：薄层色谱法，系将细粉状的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料板或铝基片上，成一均匀薄层，经点样、展开与显示以后，再与适宜的对照物质按同法所得的色谱图作对比,用于进行药品的鉴别，杂质检查或含量测定的方法。
2．仪器与材料2.1 展开室：可选用适合薄层板大小的玻璃缸,并有严密的盖子、底部平整。
必要时在展开槽盖处可涂抹少量凡士林增加密闭性，但需注意勿沾污薄层板或溶入展开剂。
2.2 玻璃板：除另有规定外,用5cm×20cm、10cm×20cm或20cm×20cm的规格。
也可用载玻片进行预试验。
各种薄层板要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。
玻璃板的质量有一定要求，厚度为2mm或3~4mm，预制板一般使用1mm的玻璃板。
应有良好的平面性，可用镜面玻璃或浮法玻璃，还应有一定的耐热性，以使在烘烤时不致破裂。
2.3 涂布器：有手工涂布器和自动涂布器(用于定量分析),均应能使吸附剂或载体在玻璃板上涂开层符合厚度要求的均匀薄层.2.4 点样器：玻璃毛细管2.5 吸附剂或载体首选为硅胶G、硅胶GF254.硅胶H、硅胶HF254，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F254等。
其颗粒大小，一般要求为直径10~40μm。
其比表面积可达约600m2/g。
由于硅胶的质量、颗粒大小、分布均匀程度直接影响分离度及检出限度。
而且不同厂家生产的硅胶，其质量也有差别，甚至同一厂家生产的不同批号也会有分离效果不同的差别。
因此要使薄层分离的结果比较稳定，应严格控制硅胶质量。
3．薄层板的制备薄层板分为无粘合剂(软板)和有粘合剂(硬板)两种.前者系将吸附剂直接放在洗净干燥的玻璃板一端,置涂布器上并调节好一定的涂布厚度,一般为0.25～0.5mm(供分析用).由于使用中易被分散,现多采用含有粘合剂的薄层板。
0502薄层色谱法薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比，亦可用薄层色谱扫描仪进行扫描，用于鉴别、检査或含量测定。
1.仪器与材料(11薄层板按支持物的材质分为玻璃板、塑料板或铝板等；按固定相种类分为硅胶薄层板、键合硅胶板、微晶纤维素薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。
固定相中可加入黏合剂、荧光剂。
硅胶薄层板常用的有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254、G、H表示含或不含石膏黏合剂。
F254为在紫外光254nm波长下显绿色背景的荧光剂。
按固定相粒径大小分为普通薄层板（10〜4(^m)和髙g薄层板(5〜10pm)0^保证色谱质量的前提下，可对薄层板进行特别处理和化学改性以适应分离的要求，可用实验室自制的薄层板。
固定相颗粒大小一般要求粒径为10〜40pm。
玻板应光滑、平整，洗净后不附水珠。
(2)点样器一般采用微升毛细管或手动、半自动、全自动点样器材。
、(3>展开容器上行展开一般可用适合薄层板大小的专用平底或双槽展开缸，展开时须能密闭。
水平展开用专用的水平展开槽。
(釣显色装置喷雾显色应使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器，要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出；浸溃显色可用专用玻璃器械或用适宜的展开缸代用；蒸气熏蒸显色可用双槽展开缸或适宜大小的干燥器代替。
(5)检视装置为装有可见光、254nm及365nm紫外光光源及相应的滤光片的暗箱，可附加摄像设备供拍摄图像用。
暗箱光源应有足够的光照度《(6)薄层色谱扫描仪系指用一定波长的光对薄层板上有吸收的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点，进行扫描，将扫描得到的谱图和积分数据用于物质定性或定量的分析仪器。
2.操作方法(1)薄层板制备市售薄层提临用前一般应在110°C活化30分钟。
聚■■■■_IM_I-—*酰胺薄膜不需活化。
铝基片薄层板、塑料薄层板可根据需要剪裁，但须注意剪裁后的薄层板底边的固定相层不得有破损。
中药材薄层色谱鉴别的优点
中药材薄层色谱鉴别是一种常用的中药鉴别方法，具有以下优点：
1. 快速、简便：薄层色谱鉴别操作简单，无需复杂的仪器设备，实验步骤相对简单，可快速得到鉴别结果。
2. 高分离效能：薄层色谱具有高分离效能，能够将样品中的各
个组分进行有效分离，适用于多种物质的分离鉴定。
3. 灵敏度高：薄层色谱鉴别具有较高的灵敏度，可以检测到微
量的化合物，适用于对中药材中有效成分的检测和定量分析。
4. 重复性好：薄层色谱鉴别的实验条件相对稳定，重复性好，
所得结果具有很好的重现性和可靠性。
5. 适用范围广：薄层色谱鉴别适用于多种中药材的鉴别，不仅
可用于有效成分的检测，还可用于混合物的分离和鉴定。
6. 无损检测：薄层色谱鉴别是一种无损检测方法，不会对样品
造成损伤，可以用于对珍贵的中药材进行非破坏性分析。
7. 无需特殊设备：薄层色谱鉴别实验所需的设备简单易得，不
需要特殊的仪器设备，降低了实验成本。
8. 绿色环保：薄层色谱实验中使用的有机溶剂等有害物质较少，对环境友好，符合绿色环保的要求。
总之，中药材薄层色谱鉴别具有操作简便、分离效能高、灵敏度高、重复性好、适用范围广、无损检测、无需特殊设备和绿色环保等优点，是一种实用的中药材鉴别方法。
薄层色谱鉴别薄层色谱鉴别是一种广泛应用于化学实验室的分析技术，它适用于许多领域，如有机化学、药物分析等。
薄层色谱鉴别是一种分析技术，它通过样品与色谱介质之间的相互作用来分离和鉴别各种化合物。
薄层色谱鉴别的原理是利用样品与色谱介质的相互作用力的差异来实现分离。
色谱介质一般是一种吸附剂，常用的有硅胶、活性炭、氧化铝等。
样品溶液通过毛细管往薄层色谱板上流动，称为展开。
在展开过程中，样品中的各种化合物会根据它们与色谱介质的相互作用力的不同而在色谱板上分离开来。
最后，通过使用染色剂或化学试剂，可以使各种化合物形成可见的斑点，从而实现鉴别。
薄层色谱鉴别的步骤如下：1.准备色谱板：选择适当的色谱介质，并将色谱介质涂覆在色谱板上。
常用的色谱板有玻璃板、铝板等。
2.准备样品溶液：将待分析的样品溶解在合适的溶剂中，使得样品溶解度适中，并使样品能够在色谱板上展开。
3.展开样品：将样品溶液使用毛细管均匀地涂覆在色谱板的起点上，待样品溶剂挥发后，在通风处或使用加热器加热。
样品溶液会随着溶剂的挥发，在色谱板上展开，并在展开过程中分离。
4.评估展开效果：等待展开完成后，可以使用紫外灯或其他凸显试剂将分离的化合物可视化。
根据斑点的位置、颜色和强度，可以初步评估展开效果。
5.鉴别化合物：根据实验需要，可以进行更进一步的鉴别。
例如，可以使用标准品和样品进行比对，根据斑点的位置和颜色来确定化合物的身份。
6.记录结果和分析数据：将实验结果记录下来，并进行数据分析和解释。
薄层色谱鉴别的优点是简单易行、操作方便、分析速度快、所需设备和材料价格相对较低。
此外，该方法对于非常小的样品量也可以进行分析。
然而，它也存在着一些局限性，例如无法分离高极性分子和对于无色化合物的分析能力相对较弱。
总而言之，薄层色谱鉴别是一种非常实用的分析技术，可以在化学实验室中应用于许多领域。
它通过样品与色谱介质的相互作用力来实现分离和鉴别各种化合物。
薄层色谱鉴别的优点是简单易行，操作方便，所需设备和材料价格相对较低，但也存在一些局限性。
有关薄层色谱鉴别法主要影响因素的描述简介：薄层色谱（TLC）是一种高效的分离技术，它可以用于鉴别不同的物质。
它的一个优势是它的操作简便、速度快，因此它广泛应用于药物、食品、农药等行业中。
薄层色谱鉴别法尤其重要，它是鉴别各种有机物质的有力工具。
本文将详细阐述薄层色谱鉴别法中主要影响因素。
概述：薄层色谱鉴别法是一种以质谱法和外观检查法为基础的技术，它利用溶剂正常溶解物质后，在一定条件下在两种不同的溶剂中扩散，使它们在薄层材料上形成分布的方法。
通过以上的步骤，我们可以提取出不同的组分，然后通过大量实验来确定不同物质的质量比。
影响因素：1）溶剂条件：TLC鉴别法中最关键的因素是溶剂条件，溶剂类型和组成比例影响分离效果。
要想获得较好的分离效果，需要选择合适的溶剂以及恰当的比例，以在溶剂中交叉溶解的有机物质。
2）溶剂渗透：溶剂渗透速率也是影响TLC分离效果的重要因素。
薄层色谱中不同的组分的渗透速率不一定相同，在溶剂渗透的过程中，有些组分可能会被不完全溶解，从而影响薄层色谱分离的效果。
3）溶剂活性：溶剂活性也是影响TLC分离效果的重要因素。
根据溶剂活性的不同，会使得不同组分在薄层色谱材料上的分布率不同，从而影响薄层色谱的效果。
4）固体表面：固体表面的性质也是影响薄层色谱鉴别效果的重要因素。
如果固体表面不同，则会影响薄层色谱材料上分离物质的吸附效率。
5）色谱发射：色谱发射是一种测量薄层色谱材料上分离物质的浓度的技术，它也是影响薄层色谱鉴别效果的重要因素。
6）发射峰比较：发射峰比较是一种测量不同物质在薄层色谱材料上的分布率的技术，它也是影响薄层色谱鉴别效果的重要因素。
结论：总的来说，以上叙述的因素是影响TLC鉴别效果的重要因素，在使用TLC进行鉴别分离时，需要正确地选择溶剂，正确控制溶剂活性和渗透速率，同时正确使用色谱发射峰比较技术，以保证TLC 鉴别分离的准确性和大量的测试数据。
以上就是有关薄层色谱鉴别法中主要影响因素的描述，希望对读者有所帮助。
薄层色谱鉴别对照物选择方法
薄层色谱鉴别对照物的选择方法可以根据以下几点考虑：
1. 化合物特性：选择具有与待检化合物相似的化学结构或功能基团的对照物。
例如，如果待检化合物是一种酮类化合物，对照物可以是一种具有酮基的已知化合物。
2. 外观特征：对照物应当具有与待检化合物相似的外观特征，如色泽、结晶形态等。
这对于直观地比较待检物和对照物的相似性非常重要。
3. 保证纯度：对照物应当是已知纯度的化合物，以确保对比结果的准确性。
可以使用已知纯度的标准品作为对照物，或者通过合成方法获得纯度较高的化合物作为对照物。
4. 实验条件：对照物应当可以与待检样品在相同的实验条件下进行比较。
这包括溶剂选择、色谱载体选择、展开剂的使用等。
5. 相似性检验：对照物应当在薄层色谱上显示出明显的差异。
待检物和对照物之间的色谱图谱比较应当能够快速、明确地判断它们之间的相似性或区别。
需要注意的是，根据具体的实验要求和待检物的特性，对照物的选择方法可能有所不同。
在实际选择中应当综合考虑上述因素，并根据实验目的和需求做出适当
的选择。
