几种不同动物骨骼肌肌球蛋白重链(MHC)亚型及成肌调节因子(MRFs)基因表达的比较
- 格式:pdf
- 大小:1.68 MB
- 文档页数:3
小尾寒羊和杜泊羊臂二头肌转录组及肌球蛋白轻链基因家族结构特征分析绵羊是羊肉的重要来源,随着羊肉价格的逐渐盘升,如何提高羊只的产肉量、改善羊肉品质成为亟待解决的问题。
研究不同生长性能绵羊骨骼肌间的全转录组和差异表达将有助于揭示肌肉生长和发育的分子机制。
近年来,基于第二代高通量测序平台的转录组测序(RNA-Seq)可以实现快速、全面地获得特定组织于某个状态下几乎所有的转录本。
本试验以生长性能显著不同的两只小尾寒羊和杜泊羊的臂二头肌为试验材料,分别构建了它们的转录组文库,并采用Illumina HiSeq2000高通量测序平台进行测序;获得的测序序列与绵羊参考基因组和参考基因比对后全面揭示两个转录组文库的特征,包括基因表达、基因注释、差异基因、可变剪接、新转录本、cSNP和SSR等;以qRT-PCR 法对从中随机选取的12基因进行了相对定量分析对高通量测序数据的可靠性进行验证;采用RACE等方法克隆了小尾寒羊和杜泊羊MYL1、MYL2、MYL3和MYL4基因的全长cDNA序列,利用GENSCAN等生物软件对cDNA序列以及编码蛋白的结构特征等方面加以分析,并对这几个基因在绵羊的不同组织间mRNA表达谱进行分析。
主要研究结果如下:(1)经RNA-Seq分析,分别在小尾寒羊和杜泊羊的两个转录组文库中得到50264608和52794216条长为90bp高质量的测序序列。
这些序列中各有约三分之二以上的序列可以比对到绵羊的参考基因组中,而有42.77%和33.10%的序列被可被比对到绵羊的20236个参考基因上。
在绵羊臂二头肌中,只有约1%的参考基因属于高表达基因(RPKM≥1000),而93%以上的基因为低表达基因(RPKM≤1000)。
(2)两个转录组文库间发现有1300个差异表达基因(FDR≤0.001且│log2Ratio│≥1),其中有554个基因在小尾寒羊中表达上调而746个表达下调。
对它们进行GO功能注释时发现分别有1066、1137和1067个基因可被注释到GO的生物学过程、细胞组分和分子功能条目中。
兔下颌角截骨后咬肌肌球蛋白重链mRNA表达的变化(一)〔摘要〕目的: 通过对兔下颌角弧形截骨后咬肌肌球蛋白重链(MHC)mRNA测定,研究咬肌在骨架缩短后的适应性变化规律。
方法: 3月龄雌性新西兰大白兔25只,行左侧下颌角弧形截骨,右侧不手术作自身对照。
2、4、8、12和24周分别处死5只动物,提取咬肌MHCⅠ、MHCⅡ型和内参GAPDH的mRNA 进行RT.PCR。
结果: 手术侧较对侧MHCⅠ型的mRNA转录降低,12周后正常。
MHCⅡmRNA2周时先降低,4周后恢复正常。
2、4、8周MHCⅡ.MHCⅠ手术侧较对侧增加。
结论: 下颌骨架缩短后咬肌发生适应性的改建,咬肌组分的这种变化有利于建立口颌系统新的平衡和咀嚼功能的恢复。
〔关键词〕下颌角截骨;咬肌;肌球蛋白重链;兔面部形态是软组织及骨组织相互作用和影响的最终产物,这种互动作用在面部轮廓形态中具有重要意义。
最富有变化且体现个性特征的是面中、下1.3,下颌骨和咬肌对于面下部形态起着重要作用。
按照东方人的审美观,以椭圆形或“瓜子脸”为美,因此,下颌角截骨治疗方腮畸形的措施是目前颅颌面外科常行的美容手术之一。
我们用兔模拟临床下颌角截骨,通过对咬肌肌球蛋白重链的两个亚型,即肌球蛋白重链(myo-sin heavy chain,MHC)Ⅰ、Ⅱ型mRNA表达量的测定,研究咬肌的改建能力及功能的恢复特点,为临床下颌骨架改变手术提供一定的理论依据。
1 材料和方法1.1 材料雌性3月龄新西兰大白兔25只(东南大学医学院实验动物中心提供),体重220~270g。
左侧下颌角截骨,为手术侧,右侧为非手术侧,设为对照。
以0.6%戊巴比妥钠静脉注射麻醉。
于左侧下颌角处作一长2~3cm切口,沿骨面分离咬肌和翼内肌附着部至下颌角前后切迹连线,以前后切迹沟连线作垂线与下颌角形成交点,该交点沿垂线上0.5cm取一定点,以前后切迹点和定点作一条弧线,用磨钻沿弧线打孔定位后截骨。
肌肉放置原位,缝合切口。
MyHC基因在C2C12成肌细胞分化过程中的时序表达林亚秋;张明;邬杨楠;李瑞文;郑玉才【摘要】以体外培养的C2C12成肌细胞为研究对象,然后利用荧光定量PCR检测肌球蛋白重链(myosin heavy chains,MyHC)的3种亚型MyHCl、MyHC2x和MyHC2b在成肌诱导分化中(0-8 d)中的时序表达规律.结果表明,MyHC1基因在诱导分化的0-4 d表达呈上升趋势,4-8 d又呈下降趋势,在第4d和第6d的表达水平显著高于其他天数(p<0.05).MyHC2x基因在诱导分化的0-6 d表达呈上升趋势,但在第8d又开始下降.MyHC2b在诱导分化的0-8 d中表达一直呈上升趋势,第6d和第8d表达水平显著高于其他天数(p<0.05).【期刊名称】《西南民族大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2014(040)003【总页数】4页(P350-353)【关键词】肌球蛋白重链基因;C2C12成肌细胞;时序表达【作者】林亚秋;张明;邬杨楠;李瑞文;郑玉才【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;成都市妇女儿童中心医院生殖与不孕研究所,成都610051;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041【正文语种】中文【中图分类】Q593+.3骨骼肌是机体的重要组成部分, 肌纤维是组成骨骼肌的基本单位, 由成肌细胞分化而来, 其特性直接决定肉的品质, 是动物养殖的重要经济性状. 肌纤维特性主要包括肌纤维的类型、直径、密度及肌纤维生长发育规律等. 其中肌纤维类型的多样性以及复杂的时空分布模式是肌肉功能差异的分子基础, 不同类型的肌纤维在收缩功能、线粒体成分和代谢特性等方面有很大差异[1], 进而导致肌肉之间品质的差别[2]. 研究表明, 肌肉中红肌纤维所占的比例越大, 白肌纤维所占比例越小, 肌肉的品质就越好[3-5]. 1994年, Scohiaffin和Reggiani确定了哺乳动物中与肌纤维类型相对应的肌球蛋白重链MyHC的类型, 即肌球蛋白重链的亚型MyHCI(MyHCslow)、MyHCIIa、MyHCIIx和MyHCIIb分别对应I型、IIa型、IIx型和IIb型肌纤维[6]. 目前肌球蛋白重链(myosin heavy chain, MyHC)同功型被认为是决定肌纤维快、慢类型的主要决定因素[7], 是区分肌纤维类型和研究肌肉适应性的分子标志. 因此阐明MyHC1、MyHC2x和MyHC2b在C2C12成肌细胞分化过程中的时序表达规律具有重要的意义. 本实验以C2C12成肌细胞为研究对象, 利用荧光定量PCR检测MyHC1、MyHC2x和MyHC2b基因在诱导分化的0-8 d成肌细胞中的表达规律, 研究结果为阐明动物肌肉生长及肉品质形成的分子机制提供重要的基本资料.1.1 实验材料和主要试剂实验所用C2C12成肌细胞系由本实验室保存.细胞培养基DMEM/F12、马血清购自Gibco公司; 胰蛋白酶(购自sigma公司), Trizol试剂、SYBR® Premix Ex Taq TM (2×)和pMD-19T载体购自大连TaKaRa公司; 反转录试剂盒和Taq DNA聚合酶购自Fermentas公司;其他均为国产分析纯.1.2 方法1.2.1 C2C12成肌细胞的培养从液氮罐中快速取出装有冻存细胞的冻存管, 快速放于37 ℃水浴中, 轻摇1 min使其溶解, 然后加入10倍冻存液体积的培养基, 1050 rpm离心4 min, 弃上清, 将细胞接种于含10 %FBS的高糖DMEM培养基中, 在37 ℃, 5 %CO2的培养箱中静臵培养. 待细胞将长至90 %以上的时候进行传代, 在37 ℃、5 %的CO2培养箱中培养24 h, 第2天换为含2 %马血清高糖DMEM培养基诱导分化, 继续培养用于后续研究.1.2.2 细胞总RNA提取与反转录分别收集诱导0、2、4、6、8 d的C2C12成肌细胞, 吸出培养皿中的培养液. 按照Trizol试剂盒说明书提供的方法提取细胞总RNA, 紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳鉴定总RNA的质量, 然后-80 ℃保存备用.取1 μg总RNA按照反转录试剂盒说明书以Oligo (dT) 为引物合成cDNA第一链.1.2.3 荧光定量PCR根据小鼠MyHC1、2b、2x的mRNA基因序列(登录号分别为BC158018、AJ278733、DQ021871), 应用Primer Premier5.0软件, 设计MyHC1、MyHC2x和MyHC2b基因特异引物(表1), 送交上海生物工程股份有限公司合成. 利用荧光定量PCR检测MyHC1、MyHC2x和MyHC2b在不同分化时期的C2C12细胞中的表达规律. 反应体系为20 μL: SYBR® Premix Ex Taq TM(2×)PCR 10 μL , 10 μmol/L的上下游引物各0.5 μL, cDNA 1μL, 灭菌水8 μL. 反应条件为95 °C预变性1 min, 95 °C 30 s, 61 ℃/58 ℃ 30 s, 45个循环, 72 °C 延伸30 s. 荧光定量结果采用2-ΔΔCt方法进行分析[8].1.3 数据分析数据采用SPSS 13.0 软件进行分析, 所得数据用平均值±标准误( mean ± SE) 表示, 采用ANOVA进行显著性检验分析, 当P<0.05 时, 认为差异显著, 当P<0.01 时, 认为差异极显著.2.1 细胞总RNA的鉴定提取的细胞总RNA样品经紫外分光光度计测定, 其OD260/OD280值均在1.8-2.0之间, 表明细胞RNA无蛋白及酚污染. 且总RNA经1 %琼脂糖凝胶电泳显示RNA有28 S, 18 S, 5 S 3条主要区带, 说明样品中的RNA基本没有降解, 可用于后续分析.2.2 MyHC1、MyHC2x和MyHC2b在C2C12细胞分化过程中的表达变化荧光定量PCR结果显示: MyHC1基因在0-4 d表达呈上升趋势, 在4-8 d又呈下降趋势, 但在第4 d和第6 d的表达水平显著高于其他天数(p<0.05)(图1).MyHC2x基因在诱导分化的0-6 d表达是呈上升趋势, 但在第8 d又开始下降(图2).MyHC2b在诱导分化的0-8 d中表达一直呈上升趋势, 第6 d和第8 d表达水平显著高于其他天数(p<0.05)(图3).肌纤维类型及其组成是肌肉生长和肉品质形成的生物学基础, 可直接影响肌肉色泽、嫩度和肌内脂肪含量, 因此备受动物育种工作者的广泛关注. 骨骼肌根据肌纤维的形态、功能和生理生化特性分为两类, 即Ⅰ型(红肌, 慢肌)和Ⅱ型(白肌, 快肌)肌纤维. Ⅰ型含有更多的线粒体和细胞色素, Ⅱ型细胞色素和肌红蛋白含量较少. 后来学者指出MyHC的亚型可决定肌纤维的类型, 是分子水平上的主要检测指标[9]. 本实验以2 %的马血清诱导C2C12细胞分化, 分别收集诱导0-8 d的细胞, 利用荧光定量PCR检测MyHC1、MyHC2x和MyHC2b的表达规律, 结果指出这些基因在分化过程中具有一定的表达规律, MyHC1基因在分化的前期表达呈上升趋势, 在分化后期表达水平开始下降, 在第4 d表达最高(p<0.05); MyHC2x基因在诱导分化的0-6 d表达是呈上升趋势, 但在第8 d又开始下降,在第6 d表达水平最高. MyHC2b在诱导分化的0-8 d中表达一直呈上升趋势, 在分化后期表达水平高. 这一实验结果与肌肉本身的生长发育特性、生理变化规律是基本相符的[10,11]. 这与杨晓静等[12]的研究结果相似, 3日龄猪MyHC1和MyHC2x的表达水平显著高于20日龄及以后猪的表达水平,MyHC2b在20日龄猪的表达水平显著高于3日龄猪的表达水平. 总之肌纤维类型的组成在动物生长发育的整个时期受各种外界因素的影响会发生肌纤维类型转化的现象[13-15], 对动物肉品质的形成具有很大的影响, 因此研究肌纤维类型的转化及其调控机制将是一个十分有价值的课题.【相关文献】[1] BERCHTOLD M W, BRINKMEIER H, MUNTENER M. Calcium ion in skeletal muscle: its crucial role for muscle function, plasticity, and disease[J].Physiol Rev, 2000, 80:1215-1265.[2] PICARD B, JURIE C, DURIS M P, et al. Consequences of selection for higher growth rate on muscle fibre development in cattle[J]. Livest Sci, 2006, 102: 107-120.[3] LEFAUCHEUR L, MILAN D, ECOLAN P, et al. Myosin heavy chain composition of different skeletal muscles in Large White and Meishan pigs[J]. J Anim Sci, 2004, 82(7): 1931-1941.[4] MALTIN C A,SINCLAIR K D,WARRISS P D,et al. The effects of age at slaughter,genotype and finishing system on the biochemical properties,muscle fibre type characterist-ics and eating quality of bull beef from suckled calves[J]. Anim Sci,1998,66:341-348.[5] LARZUL C,LEFAUCHEUR L,ECOLAN P,et al.Phenotypic and genetic parameters for longiss im usmuscle fiber characteristics in relation to growth,carcass,and meatquality traits in Large White pigs[J]. Journal of Animal Science,1997,75:3126-3137.[6] SCHIAFFINO S, REGGIANI C. Myosin isoforms in mammalian skeletal muscle[J]. J Appl Physiol, 1994, 77(2):493-501.[7] TONIOLO L, MACCATROZZO L, PATRUNO M, et al. Fiber types in canine muscles: myosin isoform expression and functional characterization[J]. Am J Physiol Cell Physiol, 2007, 292(5):C1915-26[8] LIVAK K J, SCHMITTGEN T D. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR an d the 2−△△Ctmethod[J]. Methods, 2001, 25: 402-408.[9] ZHAO R Q, YANG X J, XU Q F, et al.Expression of GHR and PGC-alpha in association with changes of MyHC isoform types in longissimus muscle of Erhualian and Large White pigs (SUS scrofa) during posmatal growth [J].Animal Science,2004, 79: 203-211.[10] ANDERS H K, RONALD E K, XAVIER F.Skeletal muscle fibres as factors forpork quality [J].Livestock Production Science, 1999, 60(l): 255-269.[11] IMMONEN K, RUUSUNEN M, HISSA K, et al. Bovine muscle glycogen concentration in relation to finishing diet, slaughter and ultimate pH [J]. Meat Sci, 2000, 55: 25-31. [12] 杨晓静, 赵茹茜, 陈杰, 等. 猪背最长肌肌纤维类型的发育性变化及其品种和性别特点[J].中国兽医学报, 2005, 25(1): 89-94.[13] MALTIN C A, WARKUP C C, MATTEWA等 K: R川, 西et 獐al牙. P菜ig 多m糖usc的le提 fi取bre及 c含ha量rac测ter定istics as source of variation in eating quality[J]. Meat Sci,1997,47:237-248.[14] YUAN Y, SHI X E, LIU Y G, et al. FoxO1 regulates muscle fiber-type specification and inhibits calcineurin signaling during C2C12[15] VENHOFF N, LEBRECHT D, PFEIFER D, et al. Muscle-fiber transdifferentiation in an experimental model of respiratory chain myopathy[J]. Arthritis Res Ther, 2012, 29, 14(5): R233. myoblast differentiation[J]. Mol Cell Biochem, 2011, 34 8(1-2) :77-87.。
MyHC与心肌肥厚心肌肥厚包括原发性心肌肥厚(即肥厚型心肌病)和继发性心肌肥厚(主要指左心室肥厚)。
肥厚型心肌病(HCM)是导致年轻人猝死的主要病因,在中国,HCM的发病率约为8/万,估计中国目前有HCM患者约100万人。
继发性左心室肥厚(LVH)是心血管疾病患病率和死亡率增加的独立危险因素。
LVH患者AMI和HF的患病率明显增加,复杂性室性心律失常的患病率也明显高于正常人群,由此导致的猝死发生率也升高。
LVH是中风尤其是缺血性中风的独立危险因素。
LVH的发病率约为20-60%,我们在中国社区高血压人群中的调查发现,LVH在高血压人群中的发病率为30-40%。
尽管目前已公认HCM是编码肌小节基因突变所导致的疾病,但HCM的临床表型受修饰基因和环境的共同作用。
不同基因的突变可以表现为相同的表型;而同一基因突变的患者的临床表现和预后也有很大的差异,即使携带同一突变的同一家系成员之间,发病的年龄和临床症状也有很大的不同。
我们由此可以认为,修饰基因在HCM的发病及预后中有重要意义。
目前认为,HCM和LVH存在许多共同的信号传导通路,如ACE基因同时是HCM修饰基因和LVH的易感基因,对LVH而言,遗传因素能够解释左室重量指数变异的60%。
心脏收缩-舒张是一个非常复杂的生理过程,受诸多生理性和/或病理性因素影响而发生变化,因此而影响心功能。
尤其临床上许多疾病都伴有心功能改变,严重时出现心功能障,心肌收缩力下降,心输出量减少。
随着分子生物学等相关学科的迅猛发展,人们从细胞水平、分子水平对心肌收缩-舒张过程及其调节的诸多参与成分各自的作用及相互间作用有了更进一步的了解和认识。
近十几年来,人们针对糖尿病、甲状腺功能异常(包括功能亢进和低下)、心肌肥厚、心肌病、缺氧等病理条件下引起的心功能改变,特别是收缩蛋白、调节蛋白与心功能的关系做了大量深入细致的工作。
组成心脏的主要蛋白分子按照功能分类包括收缩蛋白和调节蛋白。
c-mic roRNAs 在运动性骨骼肌显型变化中的作用王平;李春光;漆正堂;丁树哲【摘要】microRNAs是一类非蛋白质编码性小RNA分子,参与调控目的基因的转录后水平,影响骨骼肌细胞的增殖、分化、肥大、凋亡等生物学过程。
c-microRNAs 是从细胞分泌进入血液循环的microRNAs。
最近研究表明,c-microRNAs 调控骨骼肌的生理、病理功能,包括急、慢性运动后适应性显型变化过程。
因此,关于运动与 microRNAs 的关系,尤其是 c-mi-croRNAs在运动中的变化引起学者们的普遍关注。
介绍了骨骼肌 microRNAs、c-microRNAs及其在运动性骨骼肌显型变化中的调控作用,深入探讨 c-microRNAs对骨骼肌显型变化的影响。
阐明以c-microRNAs作为生化标志物,与肌肉相关的生理和病理变化的关系,更全面揭示运动性骨骼肌显型变化的分子机理,进一步丰富运动适应的细胞信号调控理论及与肌肉相关疾病的病理分子机制,同时为运动性疲劳、运动风险发生率和运动性疾病的发生、发展防治策略提出新的观点。
%miRNAs are a group of small non protein-coding RNAs that regulate target gene ex-pression by translational repression and target mRNA degradation and affect proliferation ,dif-ferentiation ,hypertrophy and apoptosis of skeletal muscle .c-microRNAs refer those microR-NAs from cells secreting into blood circulation ,they also regulate skeletal muscle physiology and pathology conditions ,including acute and chronic exercise related phenotype changes .This paper mainly focuses on skeletal muscle- specific microRNAs ,c-microRNAs and their role in regulating exercise induced skeletal muscle phenotype change ,and clarifies the role of c-mi-croRNAs as biomarkers in physiological and pathological conditions .Furtherunderstanding the molecular mechanism of exercise-induced skeletal muscle phenotype changes fully will enrich the cell signal theory and pathological molecular mechanisms related muscle diseases .In addi-tion ,it can put forward new ideas for sports fatigue ,sport incidence and prevention strategies related exercise-induced diseases .【期刊名称】《体育科学》【年(卷),期】2014(000)009【总页数】6页(P66-71)【关键词】c-microRNAs;运动;骨骼肌;显型变化【作者】王平;李春光;漆正堂;丁树哲【作者单位】杭州师范大学体育与健康学院,浙江杭州 311121; National Institute of Complementary Medicine,Uni-versity of Western Sydney,Penrith,New South Wales 2751,Australia;National Institute of Complementary Medicine,Uni-versity of Western Sydney,Penrith,New South Wales 2751,Australia;华东师范大学青少年健康评价与运动干预教育部重点实验室,上海 200241; 华东师范大学体育与健康学院,上海 200241;华东师范大学体育与健康学院,上海 200241【正文语种】中文【中图分类】G804.7运动可引发机体自身功能性基因表达的显型变化[1],从早期(1967)发现,有氧耐力运动导致骨骼肌线粒体数量增加及蛋白组份增加,到近期证实,抗阻运动导致骨骼肌蛋白质合成增加,研究方法主要采用细胞内信号网络组学、代谢组学和基因组学,也有人采用转录组学技术如寡核苷酸阵列、靶基因表达分析等技术证明运动适应过程中骨骼肌显型变化的复杂分子机制[19]。
鱼类肌肉生长概述摘要:在鱼类中,其肌肉体重占总体重的一半以上,因此该器官系统的大小变化被认为对其生长至关重要。
肌肉生长是一系列复杂过程后的最终结果,动物首先从环境中吸收营养,再将这些营养适当分配以增加肌细胞数量和大小。
本文简述了鱼类肌肉生长的理论基础及框架模型,旨在为鱼类增养殖提供一定的理论支持。
1.引言在许多鱼类品种中,生长是一种高度遗传的特性。
通过挑选一些生长速率更快的鱼类可以增加鱼类产量。
在水产养殖中,鱼类的快速生长是最重要的选择特征之一。
然而,使用所有鱼类个体含有相同基因组的同基因家系而带来的弊端,也说明了环境和生活史对于鱼类生长轨迹的影响是很重要的。
应激是影响生长最重要的生理因素之一,以及一些生物类应激源和非生物类应激源,包括一些日常孵化做法如处理和分级、水质较差和拥挤环境都能够抑制鱼类生长。
应激时,由于动物激活了一系列复杂的能量消耗途径以恢复体内稳态并保持其功能完整性,因此而改变了鱼类体内的能量状态。
由于某时刻动物可利用的生长能是一定的,应激的应对会浪费部分用于生长的能量基质,从而导致鱼类产量的减少。
动物面对所暴露的应激源时,能量需求的急剧增加为应激反应相关激素途径的激活所介导,包括下丘脑-垂体-肾间组织轴,导致皮质醇增加。
反过来,为了恢复稳态,该反应又会将能量基质动员和重新分配。
因此,应激和生长之间的联系错综复杂,并且本章突出介绍我们目前对于硬骨鱼中应激介导的生长抑制的研究,重点是皮质醇在肌肉中介导这些效应时所发挥的作用。
我们将本章分为三个主要部分:第一部分强调使用建模方法分析生长的资源分配;第二部分和第三部分描述了应激和/或皮质醇影响能量分配和调节生长促进剂时的潜在分子机制,从而分别影响肌肉生长。
本章还确定了主要的知识空白和未来的挑战方向。
2.生长的一种概念框架由于配子的生长已被讨论过,在这里,我们主要关注体细胞生长。
鱼类的生长被认为是长度和重量上的增加,这是一个复杂的过程,会被觅食活动、营养同化、能量基质分配和利用诸多因素所影响。
胚胎发育时期骨骼肌纤维类型的分化原文来源:Te, K.G. and C. Reggiani, Skeletal muscle fibre type specification during embryonic development. J Muscle Res Cell Motil, 2002. 23(1): p. 65-9.摘要:在过去十年里越来越多关于胚胎发育时期肌形成和肌纤维类型分化的信号机制的研究:这篇文章主要回顾最近的相关发现。
脊椎动物中MyoD家族在肌肉分化中发挥着重要作用,该家族是一系列的转录因子,可激活肌肉分化基因的转录。
反过来,MyoD家族会应答体节周边组织尤其是脊索和神经管的诱导信号。
Hedgehog和Wnt是其中的诱导信号之一,在未来的成肌细胞中发现其应答通路包括Ptc, Smu和Gli。
该信号机制已在小鼠、鸡、斑马鱼和果蝇等模式生物中做过分析。
有些转录因子的同源物在不同物种中可完成类似的功能,但其他的转录因子在不同物种中则存在重要的不同之处:例如在果蝇中twist编码一种促进肌形成的转录因子,但是他的同源物在小鼠中则抑制或阻止肌形成。
相反的,nautilus是果蝇中MyoD的同源物,他在小鼠的肌肉分化中没有普遍作用,只是在特定类型的肌纤维的分化中发挥功能。
介绍不同肌纤维类型的生化、结构和功能特征的异质性是近十年来许多人的研究对象。
其中肌形成的预决定和神经支配、激素及调节肌纤维表型机制的作用研究的最为详细。
而关于信号因子、转导途径和调控基因在肌形成和最终在肌纤维分化中的研究近几年才刚刚开始。
在不同模式生物中的相关研究揭示了几种影响肌肉发育的普遍因素,同时也发现了物种发育的种属性特征。
肌形成和MyoD家族理解胚胎发育时期肌纤维类型的分化过程,首先必须了解肌形成的调控机制。
在脊椎动物中,MyoD家族的转录因子是决定肌形成的最上游因子。
bHLH转录因子类型的MyoD家族成员有MyoD,Myf-5, myogenin 和MRF4。
肌肉生长发育的表观调控摘要:肌肉生长发育是一个复杂的过程,涉及到大量基因的表达与调控。
如,HMGCS1、MSTN、MyoD、Myf6等基因都对肌纤维的生长发育有关,除此之外,还有许多其它参与肌肉生长发育调控的基因尚未被发现。
肌肉细胞增殖、分化受一些正向调控因子和负向调控因子的双向调节。
本文将对,现已知与肌肉生长发育相关的部分基因对肌肉生长发育的调控机理进行述。
关键词:肌肉发育; MyoD;Myf6;MSTNMuscle growth and development of apparent regulationAbstract:Muscle growth and development is a complex process that involves a large amount of gene expression and regulation. Such as HMGCS1, MSTN, MyoD, Myf6 genes are all associated with the growth and development of muscle fibers. In addition, there are many other involved in muscle growth and development regulation of the gene has not yet been found. Muscle cell proliferation and differentiation is bidirectional regulated by the some positive factors and negative regulation factors . This article will tell the known genes associated with muscle growth and development on the regulation mechanism of muscle growth and development.Key words:Muscle development ;MyoD;Myf6;MSTN1 前言动物肌肉主要由肌束组成,肌束又由肌纤维和一些相关蛋白及脂肪等组成。
绒山羊不同肌肉组织及肌内脂肪细胞的基因表达分析杜琛;李金泉;陈秀娟【摘要】试验旨在研究脂肪沉积关键基因在内蒙古白绒山羊的表达规律,以期深入分析绒山羊肌内脂肪沉积特征.利用实时荧光定量PCR技术检测PPARγ、FTO、Lipin、LPL、HSL、A-FABP和Perilipin 7个基因在绒山羊10个不同肌肉组织及肌内前体脂肪细胞分化的3个时期(早期(D3)、中期(D7)、末期(D11))、诱导分化关键时间点(24、48、72和96 h)的变化,分别从组织和细胞角度对其进行分析,并研究其与肌内脂肪含量的关系.结果表明,FTO基因的表达水平高于其他基因;Lipin基因的表达量最低;LPL和HSL是脂肪合成和分解的关键酶类,其表达趋势大致相同,仅仅在腰大肌和斜方肌这两个部位的表达模式相反.A-FABP和Perilipin基因表达模式也较为特殊,整体表达量较低,前者仅仅在胸下矩肌中有较高表达,后者在股二头肌中有较高表达.从细胞水平分析发现Lip-in、PPARγ、A-FABP和Perilipin的表达模式相似,随着前体脂肪细胞培养日龄的增加和甘油三酯的积聚,其表达量逐渐升高;Lipin基因在各个时间点的表达丰度极低;HSL基因的表达量随分化程度的升高而逐渐降低;Perilipin基因仅仅在诱导分化的后期有较高表达.相关性统计分析发现,PPARγ基因mRNA与肌内脂肪多呈负相关;而其他成脂基因HSL、LPL、FTO、Lipin、Perilipin、A-FABP mRNA与肌内脂肪含量多呈正相关.因此,脂肪沉积关键基因的表达具有特异性,总体上看基因表达量为FTO>PPARγ> LPL> HSL> A-FABP> Perili pin> Lipin,该结果为进一步研究脂肪沉积机制及优化山羊肉品质奠定基础.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2016(043)002【总页数】11页(P285-295)【关键词】绒山羊;肌内脂肪细胞;肌内脂肪含量;基因【作者】杜琛;李金泉;陈秀娟【作者单位】内蒙古医科大学附属医院,妇产科生殖医学中心,呼和浩特010050;内蒙古农业大学动物科学学院,动物遗传育种与繁殖自治区重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古医科大学附属医院,妇产科生殖医学中心,呼和浩特010050【正文语种】中文【中图分类】Q786内蒙古白绒山羊肉质细嫩、无膻味,脂肪和胆固醇含量低,必需氨基酸含量高。
百科名片中文名称:肌球蛋白英文名称:myosin定义1:一组肌肉和非肌肉细胞收缩装置中的蛋白质,具有ATP酶活性,由两条相同的重链和两对轻链组成。
重链的大部分是α螺旋,其头部具有ATP酶活性,并与肌动蛋白结合,而轻链具有激酶活性。
肌球蛋白(myosin)肌原纤维粗丝的组成单位。
存在于平滑肌中。
在肌肉运动中起重要作用。
其分子形状如豆芽状,由两条重链和多条轻链构成。
两条重链的大部分相互螺旋形地缠绕为杆状,构成豆芽状的杆;重链的剩余部分与轻链一起,构成豆芽的瓣。
被激活后,具有活性的、能分解ATP的ATP酶。
其分子量约为51万。
在粗丝中,都是分子的头朝向粗丝的两端,呈纵向线性缔合排列。
、肌肉的主要组成蛋白质,占肌原纤维总蛋白质的60%。
分子量约48万,是150毫微米长的棒状分子,一端有两个头部。
由两条分子量约20万的H链和四条分子量约1万7千到2万5千的L链组成。
用蛋白分解酶处理可分割为头部(H-酶解肌球蛋白)和尾部(L-酶解肌球蛋白)。
在0.6M KCl溶液中分散成单体,但在0.2M以下的KC l溶液中可形成缔合体,自动聚集成1―2微米长的和A丝相似的结构。
在肌原纤维内形成长1.5微米宽10―15毫微米的A丝。
头部向外侧突出架成桥。
头部的方向表现为钳在丝的中央部而向相反的方向伸展,结果可以在丝的中央部300毫微米处看到没有头部的裸露部分。
头部在A丝上每弯14.3毫微米就移出120°和I丝对应,周期为42.9毫微米。
肌球蛋白具有ATP酶活性,在低离子强度下,和肌动蛋白反应,而引起超沉淀,且肌动蛋白能促进ATP酶活性。
ATP酶活性和肌动蛋白的反应,表现于头部的活性基团,可以认为这一部分一面分解ATP,一面进行振头活动,把I丝拉向A丝的中央部。
肌球蛋白的L链对ATP酶活性具有重要的作用(参见肌球蛋白L链)。
肌球蛋白和肌动蛋白一起被认为与全部细胞运动有关,也可从脑、粘菌、海胆卵等分离出来。
肌球蛋白是由森特・吉奥尔吉(A・Szent-Gyrgyi,1942)分离出来的,但是相当于现在所说的肌动球蛋白物质是库恩(W.Khne,1859)最初从蛙抽提出来的,并被命名为肌球蛋白。
MRFs 家族基因在鲤鱼红肌和白肌中的表达差异张明;吕明;李瑞文;徐梓钧;邬杨楠;左璐璐;林亚秋【摘要】为探索生肌调节因子(myogenic regulator factors,MRFs)家族基因在鲤鱼肌纤维形成中的基本作用,利用荧光定量 PCR 技术分别检测 MRFs 家族各成员在鲤鱼红肌、白肌中的表达差异,并与红肌纤维的标志基因MyHCⅠ及白肌纤维的标志基因MyHCⅡ的表达水平进行关联分析。
结果表明,MyoD 基因在鲤红肌中的表达极显著高于在白肌中的表达,并与MyHCⅠ基因的表达呈显著正相关,Myf6在鲤鱼白肌中的表达极显著高于其在红肌中的表达水平,并与MyHCⅡ基因的表达呈显著正相关,Myf5、MyoG 在鲤鱼红肌、白肌中的表达水平差异不显著。
【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2015(000)011【总页数】3页(P49-50,51)【关键词】MRFs家族基因;红肌;背肌;腹肌;鲤【作者】张明;吕明;李瑞文;徐梓钧;邬杨楠;左璐璐;林亚秋【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都 610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都 610041;四川省成都市妇女儿童中心医院生殖与内分泌实验室,四川成都 610091;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都 610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都 610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都 610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都 610041【正文语种】中文【中图分类】S917肌纤维类型及其组成对动物肉品质具有重要影响,肌纤维类型主要包括两大类:Ⅰ型(红肌、慢肌)、Ⅱ型(白肌、快肌)肌纤维。
不同类型肌纤维特性不同(如收缩功能、线粒体成分、代谢特性等),进而导致肌肉品质存在差别[1 -2]。
研究表明,若肌肉中红肌纤维比例高于白肌纤维,则肌肉的品质较好[3 -4]。
Toniolo 等将肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)基因的同工型作为肌纤维类型的分子标志[5]。
MRFs基因家族对肉品质的影响任霆,郭月英,张静,赵丽华,靳烨*【摘要】肌肉调节因子(MRFs)基因家族编码4种肌肉特异性转录因子,分别是MyoD、MyoG、Myf5和Myf6,它们是控制骨骼肌生成的关键调节因子,共同控制肌肉的生成。
研究表明,这些肌肉特异性转录因子与肌肉生长和肉质有着密切的关系。
本文就生肌调节因子MRFs家族的结构特性、作用机理及各成员对肉质的影响进行了综述,并对其研究进展及应用前景进行了讨论。
【期刊名称】食品工业科技【年(卷),期】2014(035)016【总页数】4【关键词】生肌调节因子MRFs家族,基因多态性,肉质我国是肉类食品生产和消费大国,加之肉类食品又是人们膳食中蛋白质的主要来源,因此,肉的品质受到人们的广泛关注。
肉品质的定义在各个国家有所差异,广为接受的是Hofmann[1]的定义,即肉质应考虑感官属性(性状)、技术因素、营养价值、卫生和毒性或食品的安全性等方面。
影响肉品质的因素存在于肉品生产的每一个环节当中,包括从品种、饲养(牧场)、屠宰、加工到餐桌,这些环节都会对最终肉制品的质量造成不同程度的影响,其中遗传因素对肉品质起决定作用[2]。
遗传因素主要是受到基因的表达调控,因此,认定基因的表达调控对肉品质有重要的影响。
MRFs基因家族是在骨骼肌生成过程中参与分子调控机制的一个重要转录因子家族,它作为调节因子对发生在胚胎发育过程中的骨骼肌形成过程有重要的分子调控作用。
MRFs基因家族也控制着肌肉的发育,包括从前体肌细胞的定型、增殖及肌纤维的形成,直到个体出生后肌肉的成熟和功能的完善整个过程[3]。
因此,认定MRFs基因家族的表达调控对提高肉的品质有重要的作用。
1 MRFs基因家族简介肌肉调节因子(muscle regulatory factors,MRFs)基因家族又叫生肌决定因子(myogenic determ ining factor,MyoD)基因家族,是启动和维持骨骼肌细胞分化发育和生长的一个主要调控基因家族。
长链非编码RNA MSTRG.14200对猪骨骼肌卫星细胞分化及肌纤维转化的影响杨玉铭;赵鑫铭;谭宝华;肖丽窈;芦格言;翟立君;黄奕扬;洪林君;顾婷【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2024(51)2【摘要】[目的]探究长链非编码RNA(lncRNA)MSTRG.14200对猪骨骼肌卫星细胞(PSCs)成肌分化及不同类型肌纤维转化的影响。
[方法]选择3头6月龄杜洛克猪,屠宰后采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、背最长肌、腿肌、比目鱼肌和趾长伸肌组织,利用实时荧光定量PCR检测MSTRG.14200在不同组织中的表达情况。
构建MSTRG.14200过表达载体pcDNA3.1-14200并转染PSCs细胞,诱导分化3 d后收集细胞。
通过实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测肌球蛋白重链(MyHC)、肌细胞生成素(MyoG)和肌分化因子(MyoD)、MyHCⅠ、MyHCⅡa、MyHCⅡb和MyHCⅡx mRNA和蛋白表达情况;利用免疫荧光法检测MyHC、MyHCⅠ和MyHCⅡb阳性细胞比率。
[结果]MSTRG.14200在杜洛克猪不同组织中均有表达,且在背最长肌中表达量最高,极显著高于其他组织(P<0.01),在趾长伸肌和比目鱼肌中的表达量存在显著差异(P<0.05)。
过表达MSTRG.14200后,细胞分化相关基因MyoD和MyHC的mRNA水平极显著升高(P<0.01),MyoD、MyoG和MyHC蛋白水平显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),MyHC阳性细胞比率极显著升高(P<0.01);肌纤维类型转化相关基因MyHCⅠ的mRNA和蛋白表达量及阳性细胞比例率均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),MyHCⅡb基因mRNA和蛋白表达量以及阳性细胞比率均显著升高(P<0.05)。
[结论]MSTRG.14200具有促进猪骨骼肌成肌分化以及促进慢肌纤维向快肌纤维转化的作用。