红细胞渗透脆性实验
- 格式:docx
- 大小:16.42 KB
- 文档页数:1
实验九红细胞的渗透脆性1、实验目的(1)学会测定红细胞脆性的方法和配制不同浓度的NaCl溶液,观察比较红细胞在等渗NaCl溶液和等渗尿素溶液中发生的不同情况。
(2)正确判断和记录实验结果,根据结果分析血浆晶体渗透压的生理意义,理解细胞外液渗透张力的相对恒定对维持细胞正常形态与功能的重要性。
2、实验原理将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中,可检查红细胞膜对于低渗盐溶液抵抗力的大小。
开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力(正常约为0.40%~0.45%NaCl溶液);出现完全溶血时的低渗盐溶液浓度,则为该血液红细胞的最大抵抗力(正常为0.30%~0.35%NaCl溶液)。
对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大,反之表示脆性小。
3、实验用品抗凝血液、小试管、试管架、滴管、1ml吸管、1%NaCl溶液、蒸馏水。
4、方法与步骤(1)取小试管12支,编号排列在试管架上。
(2)按表要求配制10种浓度的低渗盐溶液外加一支蒸馏水、一支1.9%尿素溶液。
(3)将兔心脏取的血液经抗凝处理后,给各式管内各加1滴,混匀后,静置30分钟后观察。
不同浓度的低渗盐溶液的配制1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1%氯化钠0.9 0.65 0.6 0.55 0.5 0.45 0.4 0.35 0.3 0.25蒸馏水0.1 0.35 0.4 0.45 0.5 0.55 0.6 0.65 0.7 0.75溶液浓度0.9 0.65 0.6 0.55 0.5 0.45 0.4 0.35 0.3 0.254、观察实验结果根据各管混合液的颜色和混浊度的不同,判断最大脆性和最小脆性。
(1)未发生溶血的试管:液体下层为混浊红色,上层为无色,表明无红细胞破裂。
(2)部分溶血的试管:液体下层为混浊红色,而上层出现透明红色,表明部分红细胞已破裂,称为不完全溶血。
出现不完全溶血的最大低渗盐溶液,是该血液红细胞的最小抵抗力,表示红细胞的最大脆性。
红细胞渗透脆性实验报告
实验目的,通过实验,观察红细胞在不同渗透压下的脆性变化,了解红细胞的渗透脆性特点。
实验原理,红细胞在不同渗透压下会发生渗透作用,当渗透压较高时,红细胞会失去水分而收缩,导致脆性增加;而渗透压较低时,红细胞会吸收水分而膨胀,脆性减小。
实验材料与方法:
1. 材料,新鲜血液、生理盐水、离心管、显微镜、玻璃片、封片、渗透压计。
2. 方法:
a. 取新鲜血液离心,得到红细胞悬液。
b. 分别用生理盐水制备不同浓度的溶液,得到不同渗透压的溶液。
c. 取一定量的红细胞悬液,分别加入不同渗透压的溶液中,放置一段时间后制作干片。
d. 在显微镜下观察红细胞的形态变化,并记录观察结果。
实验结果:经过观察,我们得出以下实验结果:
1. 在高渗透压溶液中,红细胞明显收缩,形态不规则,脆性增加。
2. 在低渗透压溶液中,红细胞膨胀,形态圆润,脆性减小。
实验分析:根据实验结果,我们可以得出以下结论:
1. 红细胞在高渗透压下会失去水分而收缩,导致脆性增加。
2. 红细胞在低渗透压下会吸收水分而膨胀,脆性减小。
实验结论,红细胞的渗透脆性与渗透压密切相关,渗透压较高时,红细胞的脆性增加,渗透压较低时,红细胞的脆性减小。
实验意义,通过本实验,我们深入了解了红细胞的渗透脆性特点,为进一步研究红细胞的生理功能提供了重要的实验数据和理论基础。
结语,本实验通过观察红细胞在不同渗透压下的脆性变化,深入探讨了红细胞的渗透脆性特点,对于加深我们对红细胞生理特性的理解具有重要的意义。
希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考价值。
红细胞渗透脆性试验一、原理红细胞渗透脆性试验(erythrocyte osmotic fragility test)是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液抵抗力的一种半定量试验。
在低渗盐溶液中,由于水分渗入细胞内,红细胞会膨胀甚至破裂、溶血。
因此将红细胞加到不同浓度的低渗盐溶液中,观察发生溶血的情况,可判断红细胞对低渗盐溶液的抵抗能力。
红细胞开始出现溶血的低渗盐溶液浓度为开始溶血浓度,红细胞完全溶血的盐溶液浓度为完全溶血浓度。
当某些原因导致红细胞对低渗盐溶液抵抗能力降低时,红细胞容易破碎,发生溶血,称为红细胞渗透脆性增加;反之,称为红细胞渗透脆性降低。
二、检测方法(一)试剂与器材1、器材:分析天平、注射器、针头、无菌小试管等。
2、试剂:1% NaCl溶液:用分析天平称取分析纯 NaCl 1.000g,加少量蒸馏水溶解,于100ml容量瓶中用蒸馏水定容,置于玻璃瓶中灭菌后使用。
(二)操作1、取12支无菌小试管编号,配制不同浓度的 NaCI 溶液。
2、用肝素湿润的注射器抽取待检者血液1ml,向各管中加入1滴(中度以上贫血的标本加2滴)全血,轻轻摇,室温静置2小时后观察结果。
3、结果判断从1号管开始观察溶血情况。
不溶血:上清液透明无红色;开始溶血:上清液刚呈浅红色,管底有较多未溶的红细胞;完全溶血:溶液呈透明红色,管底无红细胞。
三、参考区间开始溶血 NaCl浓度:3.8~4.6g/L;完全溶血 NaCl浓度:2.8~3.2g/L四、注意事项1、NaCl必须干燥,可将分析纯氯化钠于100℃下烘干,置于干燥器中完全冷却后再准确称量使用。
2、所用器具应干燥清洁,避免出现人为溶血。
向试管内滴加血液时须将血液直接注入试剂中,不可沿管壁注入,混匀时动作须轻柔。
3、观察溶血情况时以白色背景为宜。
4、结果不易判断时,可低速短时离心后观察5、每次试验应以相同实验条件做正常对照。
被检者与正常对照开始溶血管的 NaCI浓度相差0.4g/L即有诊断价值。
[优质文档]红细胞渗透渗出脆性试验红细胞渗透脆性试验来源于:江西检验医学网红细胞渗透脆性试验red cellosmotic fragility test参考范围:开始溶血 O.40,一0.44, (NaCl液)完全溶血 O.32,一O.36, (NaCl液)临床评价:1(红细胞膜,有人称为鬼影(ghost),是一种由磷脂、非酰化的胆固醇和糖蛋白等组成膜脂质和主体、膜蛋白质(转运蛋白和表面抗原)与周围膜蛋白质(膜骨架中的收缩蛋白和肌动蛋白以及膜骨架依靠的锚蛋白)所组成。
这些成分要保证红细胞在120天寿命内50,000次通过“急流旋涡”仍能生存;要控制Na+和K+在细胞内的浓度,任何导致K+漏出增高超过Na+的漏入,均会导致细胞内单价阳离子和水分的丢失。
这些生理功能的完善与否,可用简单且明白的膜渗透脆性试验来了解。
2(正常红细胞为双凹盘形,在低渗盐水中吸水膨胀的适应性大(可增加70,的体积而不破裂),遗传性球形红细胞增多症(HS)等红细胞的S,V比率小,对低渗盐水的适应性小(脆性大),所以红细胞渗透跪性试验是检测HS最有用的方法,当红细胞混悬于不同浓度的NaCl低渗溶液时,正常红细胞于O(4,一0(44,NaCl浓度时开始溶血,于o(32,一O(36,NaCl浓度时完全溶血。
HS病人的红细胞大多于0(50,一0(75,NaCl时开始溶血,于0(4,NaCl浓度时完全溶血,患者红细胞渗透脆性试验与正常对照组相比提高0.04,(NaCl液)以上即为阳性,还可见于遗传性椭圆形红细胞增多症,某些伴有球形红细胞增多的自身免疫性溶血性贫血。
3(红细胞渗透脆性试验显示,低于参考溶血的NaCl浓度可见于地中海贫血,血红蛋白C、D、E病,缺铁性贫血和肝脏疾病。
4(在试验过程中要严格控制加血量的准确性和防止血标本在体外溶血,否则易影响试验的准确性。
1(原理:悬浮于低张溶液中的红细胞,由于溶液张力差异,可使红细胞外的水渐渐进入红细胞中。
红细胞渗透脆性试验[实验目的]:学习测定红细胞渗透脆性的方法[实验原理]:将红细胞放置于等渗溶液中,红细胞的形态不发生改变。
放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变,置于高渗液中,红细胞出现皱缩;置于低渗液中则发生膨胀,最后破裂,细胞内容物溢入血浆或溶液,这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中,可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。
开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力(约0.40%~0.45%NaCl 溶液),而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力(约0.30%~-0.45%NaCl溶液)。
对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大,反之表示脆性小,最大抵抗力到最小抵抗力的范围,称脆性范围。
[实验对象]家兔[实验器材]试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。
[实验步骤](一)低渗盐溶液的配制取试管十支,洗净烤干,用玻璃铅笔编号,排在试管架上,参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液,然后再加入蒸馏水,每管溶液均2 ml。
试管号1 2 3 4 5 6 7 8 9 10试管蒸馏水(ml)0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度(%)0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25(二)枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖,剥离颈总动脉,插管,将血放入烧杯内,烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液,血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1,轻摇烧杯使之混匀。
[观察项目]用注射器向每个试管内加入兔血一滴,用拇指堵住试管口,将试管颠倒2~3次(不要用力振荡以免溶血),在室温下静置1小时,然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。
1、试管内下层为混浊红色,上层为无色或淡黄色液体,说明红细胞尚未破坏。
2、试管内下层为混浊红色,上层为透明淡红色,则表明红细胞部分溶解,才出现溶血的低渗盐溶液的浓度,为红细胞的最小抵力(最大脆性)。
红细胞渗透脆性试验[实验目的]:学习测定红细胞渗透脆性的方法[实验原理]:将红细胞放置于等渗溶液中,红细胞的形态不发生改变。
放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变,置于高渗液中,红细胞出现皱缩;置于低渗液中则发生膨胀,最后破裂,细胞内容物溢入血浆或溶液,这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中,可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。
开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力(约0.40%~0.45%NaCl 溶液),而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力(约0.30%~-0.45%NaCl溶液)。
对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大,反之表示脆性小,最大抵抗力到最小抵抗力的范围,称脆性范围。
[实验对象]家兔[实验器材]试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。
[实验步骤](一)低渗盐溶液的配制取试管十支,洗净烤干,用玻璃铅笔编号,排在试管架上,参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液,然后再加入蒸馏水,每管溶液均2 ml。
蒸馏水(ml)0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度(%)0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25(二)枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖,剥离颈总动脉,插管,将血放入烧杯内,烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液,血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1,轻摇烧杯使之混匀。
[观察项目]用注射器向每个试管内加入兔血一滴,用拇指堵住试管口,将试管颠倒2~3次(不要用力振荡以免溶血),在室温下静置1小时,然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。
1、试管内下层为混浊红色,上层为无色或淡黄色液体,说明红细胞尚未破坏。
2、试管内下层为混浊红色,上层为透明淡红色,则表明红细胞部分溶解,才出现溶血的低渗盐溶液的浓度,为红细胞的最小抵力(最大脆性)。
一、实验目的1. 掌握红细胞渗透脆性试验的原理和操作方法。
2. 通过实验了解红细胞对不同浓度低渗溶液的渗透抵抗力。
3. 分析实验结果,了解红细胞渗透脆性与临床疾病的关系。
二、实验原理红细胞渗透脆性试验是一种检测红细胞膜稳定性的方法。
正常红细胞在低渗溶液中具有一定的抵抗力,当溶液浓度逐渐降低时,红细胞开始膨胀、破裂,直至完全溶血。
红细胞对低渗溶液的抵抗力称为渗透脆性。
渗透脆性高表示红细胞膜稳定性差,易发生溶血;渗透脆性低表示红细胞膜稳定性好,不易发生溶血。
三、实验材料与仪器1. 材料:抗凝血液、生理盐水、5%葡萄糖溶液、1.9%尿素溶液、不同浓度的NaCl溶液、试管、移液管、滴管等。
2. 仪器:离心机、显微镜、天平等。
四、实验步骤1. 准备实验溶液:配制不同浓度的NaCl溶液,分别标记为1号、2号、3号、4号、5号溶液。
2. 标准操作:取抗凝血液1ml,加入试管中,用移液管吸取1ml生理盐水,加入试管中,混匀后用滴管滴加1ml 5%葡萄糖溶液,再次混匀。
3. 溶血观察:将上述混合液分别滴加到不同浓度的NaCl溶液中,观察红细胞溶血情况。
4. 记录结果:记录开始出现溶血的NaCl溶液浓度和完全溶血的NaCl溶液浓度。
5. 数据分析:计算红细胞渗透脆性值,并与正常值进行比较。
五、实验结果与分析1. 实验结果:- 开始出现溶血的NaCl溶液浓度:3.0g/L- 完全溶血的NaCl溶液浓度:2.0g/L2. 结果分析:本实验中,开始出现溶血的NaCl溶液浓度为3.0g/L,完全溶血的NaCl溶液浓度为2.0g/L。
与正常红细胞渗透脆性值(开始出现溶血的NaCl溶液浓度约为2.9g/L,完全溶血的NaCl溶液浓度约为2.3g/L)相比,本实验中红细胞渗透脆性值略高,表明实验者红细胞膜稳定性较差。
六、实验结论1. 本实验通过测定红细胞对不同浓度低渗溶液的渗透抵抗力,成功掌握了红细胞渗透脆性试验的原理和操作方法。
1. 了解渗透脆性实验的原理和操作方法;2. 掌握渗透脆性实验在临床医学中的应用;3. 通过实验观察不同浓度低渗溶液对红细胞渗透脆性的影响。
二、实验原理渗透脆性实验是检测红细胞对不同浓度低渗溶液的抵抗力,即红细胞的渗透脆性。
在低渗盐溶液中,水分子通过渗透作用进入红细胞,导致红细胞膨胀、破裂,最终发生溶血。
红细胞的渗透脆性越高,其抵抗力越低,越容易发生溶血。
三、实验材料与仪器1. 材料:新鲜血液、生理盐水、不同浓度的低渗溶液(如0.9%、0.7%、0.6%氯化钠溶液)、试管、试管架、离心机、滴管、移液器等;2. 仪器:显微镜、恒温水浴箱、电子天平、计时器等。
四、实验步骤1. 配制不同浓度的低渗溶液:取生理盐水,分别加入一定量的氯化钠,配制成0.9%、0.7%、0.6%的氯化钠溶液;2. 制备红细胞悬液:取新鲜血液,加入适量的生理盐水,混匀后离心,取上清液即为红细胞悬液;3. 将红细胞悬液分别加入不同浓度的低渗溶液中,每管1ml;4. 将试管置于37℃恒温水浴箱中孵育2小时;5. 取出试管,观察红细胞溶血情况,记录溶血开始和完全溶血时的氯化钠浓度;6. 重复实验,取平均值。
五、实验结果1. 在0.9%氯化钠溶液中,红细胞未发生溶血;2. 在0.7%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血,溶血开始浓度为0.7%;3. 在0.6%氯化钠溶液中,红细胞完全溶血,溶血完全浓度为0.6%。
根据实验结果,可以得出以下结论:1. 红细胞在低渗盐溶液中,随着氯化钠浓度的降低,其渗透脆性逐渐增加;2. 在0.7%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血,说明该溶液为红细胞的最小抵抗力;3. 在0.6%氯化钠溶液中,红细胞完全溶血,说明该溶液为红细胞的最大抵抗力。
七、实验讨论1. 渗透脆性实验在临床医学中具有重要的应用价值,可以用于检测和诊断某些溶血性疾病,如遗传性球形细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血等;2. 本实验结果与理论相符,说明实验方法可靠;3. 实验过程中,应注意操作规范,避免人为误差。
红细胞渗透脆性实验
一. 原理:
本实验是测定红细胞对不同浓度低渗盐水溶液的抵抗力,这种抵抗力与红细胞
表面积和体积的比值有密切关系,表面积大而体积小者对低渗盐水抵抗力较大(脆
性减低);反之,则抵抗力较小(脆性增加) .球形细胞表面积 /体积比值减少 , 脆
性显著增加 .
二.试剂:
171mmol/LNaCl 溶液 (10g/L):
取经 100 度烘干的分析纯氯化钠 1.000g置 100ml 容量瓶中 ,加少量双蒸溜水溶
解后 ,再加双蒸溜水至刻度
三.操作:
1.分别取 10g/LNaCl 液和蒸溜水 ,按表加入小试管中
试管号123456789101112 10g/LNaCl 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.00.90.80.70.6 (ml)
蒸溜水0.80.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 (ml)
NaCl 6.8 6.4 6.0 5.6 5.2 4.8 4.4 4.0 3.6 3.2 2.8 2.4 (g/L)
NaCl116.3109.4102.695.888.982.175.268.461.654.747.941.0 (mmol/L)
2.将试管架带至病人面前 ,用配备 6 号针头的干燥灭菌注射器取静脉血1~1.5ml,
立即滴于各管中 ,每管 1滴(贫血病人可加 2滴),轻轻摇匀 ,室温静置 .
3.每次试验均应同时作正常对照 .
结果判断
静置室温 2 小时 ,观察结果 ,从高浓度管开始观察 ,上层溶液开始出现透明红色
且管底有红细胞者为开始溶血管 ;溶液透明红色 ,管底完全无红细胞者为完全溶血
管.。