HLA-B27高分辨基因分型的临床解析
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hla高分辨基因分型6位点
一般情况下,HLA高分辨基因分型通常包含多个位点,不仅
限于6位点。
HLA基因是一组高度多态性的基因,具有多个
位点,每个位点可以有多个等位基因。
在研究或临床实践中,通常会选择一系列位点进行HLA基因
的高分辨基因分型。
常见的HLA基因位点包括HLA-A、
HLA-B、HLA-C、HLA-DPB1、HLA-DRB1等。
高分辨基因
分型通常会采用各种分子生物学技术或测序技术来确定具体的等位基因。
例如,常见的技术包括聚合酶链反应(PCR)、序列特定引物扩增(SSP)、序列特定探针扩增(SSO)、序列
分析等。
需要注意的是,具体选择哪些位点和技术进行高分辨基因分型,可能因研究目的、实验条件和经济因素等而有所不同。
因此,HLA的高分辨基因分型通常是一个复杂且个性化的过程。
HLA-B27 PCR-SSP基因分型结果分析
佚名
【期刊名称】《中国输血杂志》
【年(卷),期】2001(0)S1
【总页数】1页(P100-100)
【关键词】基因分型;结果分析;PCR;SSP
【正文语种】中文
【中图分类】R446.9
【相关文献】
1.CDMA和PCR-SSP方法对HLA-B27分型的探讨 [J], 王连友;李丹慧;曹红荣;孟现军;潘亚军
2.HLA-Ⅰ、Ⅱ类PCR-SSP基因分型与血清学抗原分型在移植配型中的比较应用[J], 吴晓冬;杨绍娟;崔亚南;卜丽莎
3.HLA-I类PCR-SSP基因分型在异基因造血干细胞移植中的应用 [J], 孙玉英;孔繁华;奚永志;刘楠;屠敏;金荔;陈兴国
4.HLA-B27 PCR-SSP基因分型及血清学结果比较 [J], 张祖文;兰炯采;郑世荣;孙启俊;柯苑;袁红
5.PCR-SSP基因分型技术检出HLA-B新等位基因B*5516一例 [J], 陈强;王憬惺;孙水仙;邹海;徐晓红;陈宪辉;米新玉;陈雪黎;曾洁;赵桐茂
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流式细胞仪检测HLA-B27及其临床意义目的通过流式细胞术对人体外周血HLA-B27的检测,来评价HLA-B27辅助临床诊断强直性脊柱炎(AS)的应用价值。
方法56例强直性脊柱炎患者和51例健康体检者,用荧光标记的抗HLA-B27/CD3单克隆抗体与其外周血(以EDTA-K2抗凝)特异性结合,用流式细胞仪检测其荧光强度来反映细胞表面HLA-B27抗原的表达。
结果从流式细胞术检测显示,56例AS患者中,HLA-B27阳性51例,阳性率为91.1%;51例健康体检者中,HLA-B27阳性3例,阳性率为5.9%。
两者存在显著性差异,P<0.01。
结论AS患者HLA-B27阳性率明显高于正常人,所以检测HLA-B27对强直性脊柱炎的诊断与鉴别诊断有着重要的意义。
标签:流式细胞仪;强直性脊柱炎;HLA-B27B27是HLA-B27位点上的一个重要的等位基因,其与许多疾病具有相关性,尤其是强直性脊柱炎;而且这种相关是迄今为止已知的HLA与疾病的关联中最强和最典型的。
目前,检测HLA-B27的主要方法有补体依赖性微量淋巴细胞毒试验、玫瑰花法、ELISA法、流式细胞术、PCR法等。
其中以标准的NIH微量细胞毒法最为常用,这种方法操作简便且准确性尚可,但是受细胞纯度、补体差异、单抗效价及HLA高度多态性的影响,易出现漏诊或假阳性(错判、误判)[1]。
现在我们用荧光标记的单克隆抗体与人类白细胞表面抗原HLA-B27结合,用流式细胞仪来检测其细胞表面的HLA-B27表达,现报告如下:1资料与方法1.1 一般资料1.1.1标本来源107例该院骨科门诊及住院确诊为AS的患者和健康体检者。
其中经临床检查和影像学检查符合AS的患者56例,男38例,女18例,年龄18~77岁。
健康体检者51例,男27例,女24例,年龄23~82岁。
取上述人员静脉血2ml,EDTA-K2抗凝。
1.1.2 试剂美国Becton Dickinson公司HLA-B27 kit: HLA-B27-FITC (Clone GS145.2,IgG1 kappa);CD3-PE(CloneSK7,IgG1 kappa);HLA-B27 Calibration Bead;溶血剂(Lysing solution.1ys S) 批号为340183,洗涤液及鞘液用Coulter Isoton II血细胞稀释液批号为8546733。
HLA的分子生物学检测的临床分析个体HLA遗传学差异的本质在于编码其抗原产物的基因上,所以分析个体HLA的基因型无疑是对HLA型别分析的最准确的方法,其准确性远高于血清学与细胞学分型。
自1996年第12届国际组织相容性研讨会后,以DNA为基础的HLA基因分型技术日趋成熟,并逐渐取代血清学方法。
DNA分型方法需要的血样少,样本可长期保存,相应的分型试剂可大量制备,来源不受限制。
特别重要的是DNA分型精确可靠,重复性好,其分型错误率远低于血清学方法。
DNA分型技术已在实际工作中得到了广泛的应用。
HLA基因分型中,一般将检测到“*”后第2位称为低分辨分型或抗原分解物水平分型。
检测到“*”后第4到第8位,叫高分辨分型或等位基因水平分型。
介于高低之间的为中间分辨分型。
HLA的DNA分型方法目前有多种,基本上可分为两种类型:一类是以鉴别HLA基因序列不同为基础的HLA分型技术,另一类基于不同HLA等位基因在聚丙烯酰胺凝胶电泳中具有不同的构象而设计的[1]。
2. HLA的分子生物学检测方法2.1 PCR指纹技术1991年召开的国际组织相容性专题研讨会上,PCR指纹技术被正式列为HLA基因型别鉴定方法之一。
这一技术是基于在特异性扩增DNA最后一个循环阶段的退火期,其单链DNA 除形成同一个体的完全互补的同质双链外,某些单链DNA还可以与不同个体的单链DNA形成不完全的互补异质双链,不同个体有不同分子构象,在非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈现特异的电泳图谱,这些电泳图谱称为PCR指纹。
PCR指纹技术可以像混合淋巴细胞培养方法一样,无需知道供受体确切型别或等位基因特异性,即可通过PCR扩增后,在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中直接判断供受体相应基因相容性。
耗时较短,也无需使用探针、限制性核酸内切酶、同位素等,具有快速、简便、经济、直接等优点。
本方法无法确切指定HLA的等位基因型别,目前仅作为器官移植配型的补充技术[2]。
2.2 PCR单链构象多态性该方法是指在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,单链DNA形成一定的空间结构,具有一定的构象。
第36卷第4期广州医学院学报Vol.36No.4 2008年8月ACADEMIC JOURNAL OF GUANGZHOU MEDICAL COLLEGE Aug.2008基金项目:国家自然科学基金资助项目(30278367)。
作者简介:肖露露(1954.4-),女,教授,本科。
研究方向:移植免疫和输血免疫。
*通讯作者:Tel:020⁃61641721,E⁃mail:dadijin@ ·论著·HLA⁃B*27高分辨等位基因在1606例疑似强直性脊柱炎患者中的表达肖露露1罗敏1郭伟1张泓1阴继霞1张彦1张志梅1张忠民2金大地2*(1南方医科大学南方医院组织配型实验中心,广东广州510515;2南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州510515)摘要目的:探讨HLA⁃B*27高分辨等位基因分析对强直性脊柱炎(AS)诊断和鉴别诊断的临床应用价值。
方法:采用PCR⁃SSP和PCR⁃SBT技术对2004年1月⁃2008年3月本院收治的广东地区1606例骨和关节疾病(OAP)患者(其中确诊AS患者1022例)进行了HLA⁃B*27低分辨和HLA⁃B*27高分辨的基因频率调查和分析。
结果:OAP患者中B*27高分辨基因频率(70.50%,141/200)高于B*27低分辨基因频率(41.82%,588/1406)(P<0.001);1022例AS患者中高分辨的B*27基因频率(84.21%,121/133)也高于B*27低分辨基因频率(44.77%,398/889)(P<0.001)。
HLA⁃B*27阳性患者表达出的HLA⁃B*27等位基因为B*2704占88.44%(459/519),B*2705占9.83%(51/519),B*2702占1.73%(9/519)。
结论:高分辨技术能够准确检测HLA⁃B*27阳性患者,AS患者在不同地区或人群所表现出的HLA⁃B*27易感基因不同;应用高分辨技术进行HLA⁃B*27等位基因分型,将有益于提高AS早期诊断和鉴别诊断,发挥对AS预后预测和治疗选择的临床应用价值。
・论 著・3基金项目:福建省卫生厅青年科研课题(编号:200421229);△通讯作者:裴斌,E 2mail :Peibinxm @HL A 2B 327基因亚型与强直性脊柱炎的相关性研究3陈长荣1 张忠英2 倪宏英1 裴斌13△ 周娟娟1 洪素云1 谢金镇1(1.厦门市中心血站,福建厦门361004;2.厦门市临床检验中心) 摘要:目的 比较强直性脊柱炎患者与中华骨髓库福建人群中HL A 2B327基因携带者HL A 2B327基因亚型的分布差异;探讨HL A 2B 327基因亚型与强直性脊柱炎的相关性。
方法 中华骨髓库中HL A 2B 327基因携带者(阳性对照组)采用PCR 2SSO 方法检出,强直性脊柱炎患者(AS 组)HL A 2B 327基因采用低分辨PCR 2SSP 方法检出;2组HL A 2B 327基因亚型均采用高分辨PCR 2SSP 方法检测。
结果 阳性对照组130名HL A 2B 327基因携带者中,共检出B 32703、B 32704、B 32705、B 32706、B 32707、B 32711、B 327207种基因亚型;在强直性脊柱炎患者中共检出B 32704、B 32705、B 32707、B 32711、B 327155种基因亚型。
两组HL A 2B 327基因亚型的频率的差异无显著性意义(P >0.05)。
结论 HL A 2B 327基因健康携带者与强直性脊柱炎患者HL A 2B 327基因亚型的总体分布未见显著性差异。
关键词:HL A 2B 327基因;基因亚型;强直性脊柱炎;相关性中图分类号:R 45711+1 R 593123 文献标识码:A 文章编号:10042549X (2007)0120013202A study of HL A 2B 327subtypes and their association with ankylosing spondylitisC H EN Chang rong ,Z HA N G Zhong ying ,N I Hong y ing ,et al.X iamen B lood Center ,X iamen 361004ChinaAbstract :Objective To compare the frequencies of HL A 2B 327genetic subtypes in AS patients with those of un 2related Fujian donors f rom Chinese Marrow Donor Program.The association of AS with HL A 2B 327genetic subtypes was also investigated.Methods HL A 2B 327gene and genetic subtypes were determined by PCR 2SSO and PCR 2SSP methods.R esults In unrelated donors group we found 7subtypes of HL A 2B 327gene ,that were B 32703、B 32704、B 32705、B 32706、B 32707、B 32711、B 32720.And alleles of B 32704、B 32705、B 32707、B 32711、B 32715werefound in AS patients.The HL A 2B 327genetic subtype frequencies of the two group s were not found statistical difference (P >0.05).Conclusion The polymorphism distribution of HL A 2B 327genetic subtypes between unrelat 2ed donors and AS patients might have no significant difference.K ey Words :HL A 2B 327subtype ankylosing spondylitis association 强直性脊柱炎(ankylosing spo ndylitis ,AS )是一种慢性、进行性的自身免疫性疾病,主要累及骶髂关节、脊柱和四肢关节。
流式细胞术检测HLA-B27及其临床意义(附112例分析)张臣青;陈志哲
【期刊名称】《福建医药杂志》
【年(卷),期】2005(27)4
【摘要】目的通过流式细胞术检测外周血白细胞HLA-B27的表达,并探讨其对强直性脊柱炎(AS)的诊断价值.方法利用流式细胞仪(FCM)检测33例AS患者、34例背痛及腰腿痛患者及45例健康体检者的外周血HLA-B27表达.结果33例AS患者中,HLA-B27阳性30例(90.9%);34例背痛腰腿痛患者中,HLA-B27阳性4例(11.76%);45例健康人群中,HLA-B27阳性4例(8.9%).结论AS患者HLA-B27阳性率明显增高,HLA-B27检测可视为临床支持AS诊断的重要依据.
【总页数】2页(P1-2)
【作者】张臣青;陈志哲
【作者单位】福建医科大学附属协和医院,福建省血液病研究所,350001;福建医科大学附属协和医院,福建省血液病研究所,350001
【正文语种】中文
【中图分类】R446.62
【相关文献】
1.流式细胞术检测HLA-B27抗原的表达及临床意义 [J], 陆春伟;佟海侠
2.流式细胞术检测HLA-B27抗原的表达及临床意义 [J], 廖德权; 成捷; 许蓝月
3.流式细胞术检测HLA-B27抗原的表达及临床意义 [J], 廖德权; 成捷; 许蓝月
4.流式细胞术检测98例献血者外周血HLA-B27的临床意义 [J], 李维;府伟灵;王芳;王蓉感
5.应用流式细胞术检测HLA-B27抗原的临床意义 [J], 李威
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聊聊对HLA-B27的那些误解科里的一个青年男性患者,因为腰痛来门诊就诊,查了一个HLA-B27是阳性结果,就以“强直性脊柱炎?”收住入院,进一步检查看能否确诊此病,诡异的是,入院后复查B27竟然是阴性的,再加上患者骶髂关节CT等影像学检查都是正常的,那就不能诊断强直性脊柱炎了。
那为什么会出现这种情况,就是相隔半个月的两次抽血结果会有如此的差别呢?在门诊的时候,很多腰痛的患者在脊柱外科、关节外科等相关科室就诊,一旦出现B27的阳性,医生都直接建议风湿免疫科就诊,看来不仅仅是患者不懂,很多非专科医生也不懂B27的具体含义。
科里的住院患者有三分之一到一半都是强直性脊柱炎患者,很多人感慨为何发病人数如此之多,其实不排除有的患者是过度诊断的结果,我们要定期对一些疾病进行反思,为什么特异性比较强的强直性脊柱炎,会有这么明显的个体差异。
HLA是3个英语单词的大写字头,H代表人(Human),L代表白细胞(Leuc ocyte),A代表抗原(Antigen),即人类白细胞抗原,HLA-B27属于HLA-B位点之一。
HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex, MHC)的表达产物,在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应,调节免疫应答的功能。
不管是采用荧光法还是流式细胞检测法,两者的阳性率差异没有统计学差异。
但是,我们要知道的是HLA-B27的检测是一个预测指标,阳性人群中有20-30%会发展成为强直性脊柱炎,而阴性人群中则很少会出现强直性脊柱炎。
如果采用流式细胞技术,B27抗体除了能和B27抗原结合外,还能与B7有一定的交叉反应,也因此会出现假阳性结果,HLA-B位点有42个,有的医院风湿免疫科有自己的免疫检测实验室,往往会把几个相似的基因位点都做检测,比如B27、B7等,所以拿到的检测结果看起来复杂一些。
针对前面提到的患者,可能是检测过程中出现的假阳性,检验科给出的解释是上传结果的人员不同,这显然让患者和医生都不能接受。
人类白细胞抗原b27基因检测方法
人类白细胞抗原B27(HLA-B27)基因检测是一种用于确定一个
人是否携带HLA-B27基因的检测方法。
HLA-B27基因与脊柱关节炎
等自身免疫性疾病的发病风险密切相关。
以下是关于HLA-B27基因
检测方法的详细解释:
1. PCR法,PCR(聚合酶链式反应)是一种常用的HLA-B27基
因检测方法。
通过PCR,可以扩增DNA样本中的HLA-B27基因片段,然后利用特定的试剂进行检测。
2. 血清学检测,血清学检测是另一种常见的HLA-B27基因检测
方法。
该方法通过检测血清中的HLA-B27抗体来判断是否患有相关
疾病。
3. 分子生物学方法,分子生物学方法包括Southern blotting、序列特异性引物扩增(SSP)和序列特异性杂交(SSO)等技术,这
些方法可以对HLA-B27基因进行精确的检测和分析。
4. 流式细胞术,流式细胞术结合特定的HLA-B27抗体,可以用
于检测HLA-B27基因的表达水平。
5. 高通量测序,近年来,随着高通量测序技术的发展,可以利用这些技术对HLA-B27基因进行全面的测序和分析。
需要指出的是,HLA-B27基因检测方法的选择取决于实验室的设备和技术水平,以及医生的建议。
在进行HLA-B27基因检测前,应该咨询医生,了解不同检测方法的优缺点,以便选择最适合的方法。
同时,需要注意的是,HLA-B27基因检测结果需要由专业的医生进行解读和分析,以确定相关疾病的风险。
HLA-B_(27)基因检测对强直性脊柱炎诊断的评价何进才;傅新文;侯智辉;杨小红;原建武;陈桂冰【期刊名称】《江西医学检验》【年(卷),期】2003(21)4【摘要】目的评价聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法检测HLA-B27基因对强直性脊柱炎(AS)的临床诊断价值。
方法对87例临床疑似AS患者按MNY 标准诊断分为病例组(AS组)和对照组(非AS组),并以PCR-SSP法检测患者血样HLA-B27基因,盲法比较二者结果。
结果病例组和对照组HLA-B27阳性率分别为92.86%和11.11%,差异有统计学意义(P<0.05)。
HLA-B27基因检测对AS诊断的敏感度(Sen)为92.8%、特异度(Spe)为88.9%、准确度(Acc)为90.8%、阳性预测值(+PV)为88.6%、阴性预测值(-PV)为93.0%、阳性似然比(+LR)为8.4、阴性似然比(-LR)为0.08,比值比(OR)为104.0。
结论该法检测HLA-B27基因对AS诊断有较高敏感度和特异度,是一种准确、有效的实验诊断方法。
【总页数】3页(P240-242)【关键词】强直性脊柱炎;诊断;HLA—B27基因;检测;聚合酶链反应;序列特异性引物;临床流行病学【作者】何进才;傅新文;侯智辉;杨小红;原建武;陈桂冰【作者单位】广东省深圳市中医院检验科;江西省人民医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R593.23【相关文献】1.HLA-B27基因及抗原检测在强直性脊柱炎诊断中的意义 [J], 段萃娟;姚鼎铭;郭晓今;刘元明;刘贤华;荣冉;杨晓莉2.HLA-B27基因检测对强直性脊柱炎诊断的评价 [J], 何进才;傅新文;侯智辉;杨小红;原建武;陈桂冰3.人类白细胞抗原-B27基因检测在门诊疑似强直性脊柱炎患者诊断中的应用价值[J], 秦学军4.HLA-B_(27)检测对强直性脊柱炎的诊断价值 [J], 许福亮;李公宝;马传香;纪恩美5.PCR-SSP检测HLA-B_(27)基因分型诊断强直性脊柱炎 [J], 董魁;吴俊柱;沈云青因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
HLA-B_(27)检测应用于强直性脊柱炎的临床意义
高凤云
【期刊名称】《吉林医学》
【年(卷),期】2012(033)006
【摘要】目的:探讨和研究HLA-B27抗原检测对于强直性脊柱炎(AS)早期诊
断的临床意义。
方法:使用ELISA法对274例健康体检者(对照组)、291例AS 疑似患者(疑似组)和69例AS患者(观察组)进行HLA-B27抗原检测。
结果:对照组、疑似组和观察组的阳性率分别为:3.28%、45.01%和95.65%。
结论:HLA-B27抗原在对于疑似AS患者的早期诊断中具有重要意义。
【总页数】1页(P1164-1164)
【作者】高凤云
【作者单位】山西省运城市中心医院,山西运城044000
【正文语种】中文
【中图分类】R593.23
【相关文献】
1.流式细胞术检测强直性脊柱炎患者白细胞HLA-B_(27)抗原的表达及临床意义[J], 李毅;冯强;杨宪勇
2.HLA-B_(27)检测对强直性脊柱炎的诊断价值 [J], 许福亮;李公宝;马传香;纪恩美
3.HLA-B_(27)基因检测对强直性脊柱炎诊断的评价 [J], 何进才;傅新文;侯智辉;杨
小红;原建武;陈桂冰
4.PCR-SSP检测HLA-B_(27)基因分型诊断强直性脊柱炎 [J], 董魁;吴俊柱;沈云青
5.348例强直性脊柱炎患者HLA-B_(27)抗原检测 [J], 谢宝官;石黎明;黄奋生;江浩;刘喜楠
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PCR-SSP检测HLA-B_(27)基因分型诊断强直性脊柱炎
董魁;吴俊柱;沈云青
【期刊名称】《山东医药》
【年(卷),期】2004(44)25
【总页数】1页(P61-61)
【关键词】HLA-B27;基因分型;诊断;PCR-SSP技术;强直性脊柱炎;序列特异性引物;患者;寡核苷酸探针;聚合酶链反应
【作者】董魁;吴俊柱;沈云青
【作者单位】山东省血液中心
【正文语种】中文
【中图分类】R593.23;R446
【相关文献】
1.荧光定量PCR染料法检测强直性脊柱炎患者HLA-B27基因及分型 [J], 罗秀霞;尹志华;张春容;陈杰;叶志中;黄进贤
2.CR-SSP检测HLA-B27基因分型诊断强直性脊柱炎 [J], 董魁;吴俊柱;沈云青
3.HLA-B_(27)检测对强直性脊柱炎的诊断价值 [J], 许福亮;李公宝;马传香;纪恩美
4.HLA-B_(27)基因检测对强直性脊柱炎诊断的评价 [J], 何进才;傅新文;侯智辉;杨小红;原建武;陈桂冰
5.中国人群HLA-B_(27)等位基因亚型与强直性脊柱炎的相关性研究 [J], 林剑浩;吕厚山;陈占昆;蒋东芳;王申五;冯传汉
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