糖类
1.自然界中最重要的单糖是：戊糖和己糖。
2.最简单的单糖含3个碳原子，有两个:甘油醛和二羟丙酮。（P2）
3.寡糖的命名（17）、常见糖的写法（P19）
4.自然界存在的重要二糖有三种：蔗糖、麦芽糖、乳糖。
5.多糖：同聚多糖：淀粉、糖原、纤维素、几丁质。
杂多糖：果胶。
6.糖的还原性：无还原性：蔗糖
有还原性：麦芽糖、乳糖
单糖都有还原性，二糖部分有还原性。
脂类
1.按化学结构，脂类可以分为两大类：
单脂：脂肪、油、蜡
复合脂：磷脂、糖脂、硫脂、脂蛋白
衍生脂类：萜类、固醇等
2.自然界常见的脂肪酸：软脂酸和硬脂酸。
自然界常见的脂肪酸是顺势构型。
3.乳化作用：脂肪虽不溶于水，但在乳化剂作用下，可变成很细小的颗粒，均匀地分散在水里面而形成稳定的乳状液，这个过程叫乳化作用。
4.磷脂具有双亲性，既亲水又亲油。（别的脂类是否有此性质？）
5.维生素D2原：麦角固醇在阳光或紫外线照射下，可转变为维生素D2，故麦角固醇又称为维生素D2原。
蛋白质化学
1.参与组成蛋白质的有20种基本氨基酸，都是L构型。
2.常见氨基酸的三字母缩写：
Gly甘氨酸Ala丙氨酸Val缬氨酸Leu亮氨酸Ile异亮氨酸Phe苯丙氨酸Glu谷氨酸Met甲硫氨酸
3.等电点：当溶液在某一pH 值时，蛋白质所带正、负电荷相等，即总净电荷为零，此时溶液的pH 称该
蛋白质的等电点(pI)。
4.氨基酸的解离和两性性质（57）
5.蛋白质的结构：
一级结构指的是以肽键连接而成的肽链中氨基酸的排列顺序。
二级结构指肽链主链骨架原子的相对空间位置，而不涉及残基侧链。
三级结构指在二级结构或超二级结构基础上肽链发生的再折叠、卷曲。
四级结构指由两条或两条以上多肽链构成的蛋白质分子，结构就更为复杂，其结构的最小共价单位称为亚基或亚单位。亚基和亚基的结合方式称为四级结构。
6.二级结构有哪几种：
α-螺旋β-折叠β-转角
7.蛋白质的胶体性质：因为蛋白质分子的直径一般在2nm~20nm的范围内，所以蛋白质溶液是胶体。
8.蛋白质的变性：某些物理或化学因素，能够破坏蛋白质的结构状态，引起蛋白质理化性质改变并导致其生理活性丧失。这种现象称为蛋白质的变性。
蛋白质变性的特点：次级键被破坏
天然结构解体
一级结构没有变化
9.分离纯化蛋白质的方法：
（1）根据分子大小不同的分离方法
①透析和超过滤
透析：将待提纯的蛋白质溶液装在半透膜的透析袋里放在蒸馏水或流水中，蛋白质溶液中的无机盐等小分子通过透析袋扩散入纯水中以此除去。
超过滤：利用外加压力或离心力使水和其他小分子通过半透膜，而蛋白质留在膜上。
②密度梯度离心
③凝胶过滤
（2）利用溶解度差别的分离方法
①等电点沉淀法
②盐溶与盐析
盐溶：低浓度的中性盐可以增加蛋白质的溶解度，称为盐溶。
盐析：高浓度的中性盐则可降低蛋白质的溶解度，使蛋白质发生沉淀，这种由于在蛋白质溶液中加入大量中性盐，使蛋白质沉淀析出的作用称为盐析。
盐溶与盐析的区别：对于难溶于水的蛋白质（如植物球蛋白），由于盐离子的加入增加了水溶液的极性，减弱了蛋白质分子间的作用力，从而促进其溶解；但当
加入的盐浓度达到一定程度后，再继续加盐，蛋白质的溶解度反而降低，自溶液中析出。
③有机溶剂沉淀法
10.测定蛋白质含量的最常用方法：
①凯氏定氮法②双缩脲法③福林-酚试剂法
④紫外吸收法⑤考马斯亮蓝G-250法
核酸化学
1.核酸的组成：
核苷酸之间都是通过3’-5’磷酸二酯键连接起来的。
2.常见核苷酸的写法及代表的意思。（P118~P119）ADP二磷酸腺苷ATP三磷酸腺苷
FAD 黄素腺嘌呤二核苷酸
FMN黄素单核苷酸
核苷酸的种类:
RNA 中含有:腺苷酸 AMP,鸟苷酸 GMP，
胞苷酸 CMP,尿苷酸 UMP。
DNA 中含有: 脱氧腺苷酸 dAMP ,脱氧鸟苷酸 dGMP ，
脱氧胞苷酸 dCMP ,脱氧胸苷酸 dTMP 。
3.DNA的结构：
DNA的一级结构是组成DNA分子的脱氧核苷酸的连接方式和排列顺序。
作用力：3’，5’-磷酸二酯键
DNA的二级结构包括双螺旋结构、三链螺旋和四链结构。
4.核酸与核苷酸的性质：两性解离和等电点（P139~P141）
核酸的一般物理性质：①溶解性②粘性③两性解离
核酸的磷酸基具有酸性，碱基具有弱碱性，因此，核酸具有两性电离的性质。
5.核酸的变性与复性：
（1）核酸的变性：是指因某些理化因素的影响使维持核酸空间结构的氢键和碱基堆积力被破坏，双螺旋结构解体，形成单链无规线团状态的过程。
由于核酸的变性（或降解）而引起对紫外线吸收增加的现象称为增色效应或高色效应。
（2）核酸的复性：变性DNA在适当的条件下(除去变性因素)，可使两条分开的单链按照碱基配对规律重新缔合成双螺旋结构，这一过程称为复性。
复性时紫外光吸收减少，称为减色效应或低色效应。
6.核酸含量测定的基本方法：
A.紫外吸收法
B.定磷法
C.定糖法
D.琼脂糖凝胶电泳法
7.核酸的分子杂交：
将不同来源的DNA经热变性后缓慢冷却时，两种不同来源的DNA互补区形成双链，或DNA单链和RNA链的互补区形成DNA－RNA杂合双链的过程就是核酸分子杂交。
酶学
1.酶为什么能催化化学反应：因为酶能降低反应能。
2.米氏方程：
V=Km+[S]
Vmax [S].
V ：某一底物浓度时的反应速度 Vmax ：最大反应速度
[S]：底物浓度
Km ：米氏常数 Km 的意义为反应速度是最大反应速度一半时的底物浓度。
3.酶活力测定的方法：
A. 终点法：酶反应进行到一定时间后终止其反应，再用化学或物理方法测定产物或底物量的变化。
B. 动力学法：不需要终止反应，连续测定反应过程中产物或底物或辅酶的变化量，直接测出酶反应的初速度。
C.
酶偶联法
D .电化学法
用离子选择性电极跟踪测定反应过程所生成的离子或气体分子的浓度，从而得到反应的初速度。如O 2电极、H +电极等。
最常用的是：测定一定时间内产物的生产量。
变构酶：别构酶又称变构酶，它除了活性中心外，还有1个或几个部位可与特异性分子非共价地结合而改变酶的构象，导致活性的改变，具有这种变构调节作用的酶称变构酶。
同工酶：是指催化相同的化学反应，但其酶蛋白的分子结构组成不同的一组酶。
多功能酶：是指结构上仅为一条肽链，却具有两种或两种以上功能的酶蛋白。
维生素和辅酶
1.常见病缺什么维生素：
缺维生素B1:脚气病
缺维生素B2：口腔发炎、舌炎、眼皮红肿、角膜发炎、
皮炎等。
缺维生素PP：癞皮病
缺维生素B6：导致皮肤、中枢神经系统和造血机构的
损害。
缺维生素B11：造成巨红细胞性贫血症。
缺维生素B12：①儿童及幼龄动物发育不良。
②消化道上皮组织细胞失常。
③造血器官功能失常，不能正常产生
红血细胞，导致恶性贫血。
缺维生素C：造血机能障碍、贫血，血管通透性、脆性增强，血管易破裂出血，严重时肌肉、内脏出血导致死亡，称为坏血病。
缺维生素A：夜盲症、干眼病、皮肤干燥
缺维生素D：佝偻病、骨质疏松、易骨折、牙齿易脱落
缺维生素E：动物缺乏维生素E时生殖器官受损而不育；肌肉萎缩、形态改变、代谢反常；红细胞破坏，发生贫血
缺维生素K：动物缺乏维生素K，血凝时间延长，受伤
后血流不凝。因此维生素K又称为凝血
维生素或抗出血维生素。
成人一般不易缺乏维生素K。新生婴儿
肠内无菌，不能合成维生素K，故易因
维生素K的缺乏而暂时性出血。
2.常见辅酶含哪种维生素：
脱羧辅酶（及焦磷酸硫胺素，TPP）含：维生素B
黄素辅酶含：维生素B2
辅酶A含：维生素B3（及泛酸）
脱氢辅酶含：维生素PP
转氨辅酶含：维生素B6
叶酸辅酶含：维生素B11
羧化辅酶含：生物素
辅酶B12含：维生素B12
符号题:
C18:2 亚油酸 C16：0 软脂酸
GSH 还原型谷胱苷肽 GSSG 氧化型谷胱甘肽
NADH 还原型辅酶Ⅰ NADPH 还原型辅酶Ⅱ
NAD 辅酶Ⅰ NADP辅酶Ⅱ
TPP 焦磷酸硫胺素 C0A辅酶A
FMN 黄素单核苷酸 FAD黄素腺嘌呤二核苷酸THFA 四氢叶酸 Km米氏常数
Man 甘露糖 m6A甲基腺苷
Met 甲硫氨酸 hnRNA 不均一核RNA
CTP 胞嘧啶核苷三磷酸 GlcNAC N-乙酰氨基葡萄糖
生物氧化
1、什么是氧化磷酸化作用、底物磷酸化，两者的区别？氧化磷酸化：代谢物的氧化（脱氢）作用与ADP的磷酸化作用相偶联而生成ATP的过程称为“氧化磷酸化作用”或“偶联磷酸化作用”。
底物磷酸化：没有氧气参加，只需要代谢物脱氢（氧化）及其分子内部所含能量从新分布，即可生成高能磷酸键，这种作用称为“底物磷酸化”或“代谢物水
平的无氧磷酸化”。
区别：是否有O2参与
2、氧化磷酸化作用的机理？（化学渗透假说）
化学渗透假说要点：
①电子传递和ATP的形成之间起偶联作用的是H+电化学梯度
②呼吸链的电子传递过程是把质子从线粒体内膜向外运输，从而造成线粒体内膜两侧的浓度差和电位差，从而促使ADP与无机磷酸形成ATP。（P254) 3、呼吸链概念、组分，电子传递顺序，抑制剂的部位，解偶联剂的定义、作用？
呼吸链的概念:线粒体基质中底物被氧化，脱下来的氢形成FADH2和NADH，然后通过多种酶及辅酶组成的传递体的传递，最后电子传给O2用于生成水。这种由载体组成的电子传递系统称为电子传递链，也称为呼吸链。
呼吸链的组分：
1)以NAD或NADP为辅酶的脱氢酶
2)黄素蛋白酶类
3)铁-硫蛋白类
4)辅酶Ｑ（CoQ）或泛醌（UQ）
5)细胞色素类
电子传递顺序： NADH 复合物Ⅰ CoQ 复合物Ⅲ Cytc 复合物Ⅳ O 2 鱼藤酮、安密妥 抗霉素 氰化物、CO 、N 3-
复合物Ⅱ
琥珀酸
解偶联剂的定义：引起解偶联作用的物质称为解偶联剂。
解偶联剂的作用机理：
糖代谢
1、糖代谢的几种途径，发生部位，生理意义？ 糖酵解途径(EMP ）：发生在细胞质
生理意义：①为机体提供能量
②为某些厌氧生物及组织细胞生活所需 三羧酸循环途径（TCA):发生在线粒体基质
生理意义:①TCA 代谢是机体获取能量的主要途径 ②TCA 是物质代谢的总枢纽
③三羧酸循环的中间产物也可作为合成细胞组织成分碳骨架的前身物质
磷酸戊糖途径（PPP):发生在细胞质
生理意义：①NADPH 为许多物质的合成提供还原力 FAD
Fe-s
②维护红细胞及硫基蛋白的正常
③HMS是联系戊糖代谢的途径
④HMS也可为细胞提供能量
2、糖原生作用、糖异生作用
糖原生作用定义：以葡萄糖或其他单糖（如果糖、半乳糖等）为原料合成糖原，此过程称为糖原生成作用糖异生作用定义：由非糖物质(如乳酸、甘油、丙酮酸以及某些氨基酸）为原料合成葡萄糖或糖原，此过程称为糖异生成作用
3、糖原代谢的调节（见自己画的图P262)
脂质代谢
1、脂肪酸降解的途径？(P322)
β-氧化
β-氧化在线粒体中，氧化后形成乙酰CoA
过程：①脂肪酸的活化（脂肪酸转变为脂酰辅酶A）
②脂酰CoA转运入线粒体
③β-氧化过程
（脂酰CoA在线粒体基质中进行β-氧化）
4步反应：脱氢、水化、再脱氢和硫解
反应产物：1分子乙酰CoA
比原脂酰CoA少2个碳脂酰CoA）
其他氧化途径：α-氧化，ω-氧化
2、脂肪酸的合成代谢（P330)
过程：①饱和脂肪酸的从头合成（细胞质中）
②脂肪酸碳链的延长（线粒体或内质网系统中可合成18个C以上的高级脂肪酸
③不饱和键的形成
特点：
起酰基载体作用的是酰基载体蛋白(ACP)
蛋白质和氨基酸的代谢
1、蛋白质的降解途径？
2、氨基酸的代谢？
脱氨：氧化脱氨作用
转氨作用
联合脱氨作用
非氧化脱氨作用
脱酰胺基作用
转氨基作用特点：①只有氨基的转移，没有氨的生成
②催化的反应可逆
③其辅酶都是磷酸吡哆醛
联合脱氨基作用：
L-氨基酸在体内不是直接氧化脱氨，而是先与α-
α-酮酸和谷氨酸，谷氨酸可通过2种方式氧化脱氨
①转氨偶联氧化脱氨
②转氨偶联嘌呤核苷酸循环脱氨
脱羧：直接脱羧作用
羟化脱羧基作用
3、糖、脂质、蛋白质相互之间的转化关系？
（1）糖可以变成脂肪，其途径为：糖经酵解可变成磷酸二羟丙酮，再经甘油磷酸脱氢酶催化变成a-磷酸甘油；糖酵解产生的丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA，再经脂肪酸合成途径变成脂肪酸；a-磷酸甘油和活化的脂肪酸可生成脂肪。
(2）脂肪也可转变成糖，其途径是脂肪分解产生的甘油经糖原异生作用变成糖原；脂肪酸分解产生的乙酰CoA也可通过三羧酸循环变成草酰乙酸，少量变成糖。（3）糖代谢产生的丙酮酸、α-酮戊二酸和草酰乙酸可通过氨基化作用或转氨作用分别变成丙氨酸、谷氨酸和天冬氨酸，糖还可以转变成其它非必须氨基酸，但不能合成必须氨基酸。
（4）蛋白质由氨基酸组成，故可在体内转变成糖，其途径是氨基酸脱氨成α-酮酸，再经草酰乙酸沿酵解逆
途径成糖原
（5）脂肪合成蛋白质的可能性是有限的。脂肪酸变成氨基酸，实际上仅限于谷氨酸。
（6）蛋白质可在体内间接地转变为脂肪，生糖或生酮氨基酸在代谢过程中可生成乙酰CoA，再合成脂肪酸；生糖氨基酸可直接或间接变成丙酮酸，再转变成甘油。三羧酸循环是糖、脂、蛋白质三大类物质彻底氧化的共同途径。
核酸代谢
1、嘌呤、嘧啶的降解？
嘌呤：腺嘌呤和鸟嘌呤经脱氨氧化转变为黄嘌呤再进行降解，不同种类的生物分解嘌呤碱的酶系不同。
灵长类、鸟类、爬虫类以及大多数昆虫中嘌呤的最终产物为尿酸；除灵长类以外的哺乳动物、腹足类则为尿囊素；某些硬骨鱼中则尿囊素再继续分解为尿囊酸；大多数鱼类、两栖类中尿囊酸再分解为尿素和乙醛酸；海洋无脊椎动物星虫类、甲壳类则将尿素分解为氨和CO2。
发生部位：体内嘌呤核苷酸的分解代谢主要发生在肝、小肠及肾中。
嘌呤代谢失调：尿酸过多导致关节红肿疼痛（痛风病）、
尿路结石、肾结石
嘧啶：嘧啶分解时有氨基的首先水解脱氨基。胞嘧啶首先水解脱氨基，转化为尿嘧啶，尿嘧啶和胸腺嘧啶经还原打破环内双键后，水解开环成链状化合物，再水解成CO2、NH3、β-丙氨酸、β-氨基异丁酸，后者脱氨基后进入有机酸代谢或直接排出体外。
2、什么事半保留复制？
DNA复制时亲代DNA的两条链解开，每条链作为新链的模板，从而形成两个子代DNA分子，每一个子代DNA 分子包含一条亲链和一条新合成的链。
DNA复制的特点：半保留复制、形成两条链（前导链，后续链），一段一段合成，最后由DNA连接酶连接而成3、什么是转录、逆转录、翻译？
转录：是指以DNA的一条链为模板合成互补的RNA的过程
逆转录：在逆转录酶的作用下，以RNA为模板合成DNA 的过程。
（病毒里既有转录，也有逆转录）
翻译：是依照mRNA的信息合成蛋白质的过程。
需要：mRNA、核糖体
4、DNA形成时的引物？
5、转座、转座子？
转座：有一种异常的重组类型，是一段DNA 序列插入到另一段DNA 序列中，而不依赖于序列同源性，这种使某些元件从一个位置向其他位置的移动方式是转座转座的方式：①非复制性转座
②复制性转座
③保守性转座
转座子：一种可以由染色体的一个位置转移到另一位置的遗传因子，也就是一段可以发生转座的DNA，称为转座子。
特点：①转座子是不必借助同源序列就可以移动的片断,即转座作用与供体和受体的序列无关;
②原核生物和真核生物都有转座子;
③转座序列可沿染色体移动,甚至在不同染色体间跳跃(跳跃基因)
6、DNA、RNA合成时所需的酶？
DNA聚合酶、引物合成酶、DNA连接酶、解链酶、DNA拓扑异构酶
RNA聚合酶
一单元绪论 1. 1965年我国在世界上首先人工合成了有生物活性的（ C ） A.尿素D.猪姨岛素 B.生长激素 C.结晶牛胰岛素E. tRNA 2.研究构成生物体的基本物质的化学组成、结构、性质、功能属于（C ） A.静态生物化学 B.动态生物化学c.信息生物化学D. 机能生物化学E.生物技术 3.下列物质不属于生物大分子的是（B ) A.蛋白质 B.维生素D. 脂类E.糖类 4.下列打破了醸的化学本质都是蛋白质的传统概念的事件是（ D ） A. DNA双螺旋结构模型的创立 B.遗传中心法则的确立 C. 体外重组DNA方法的建立 D.核酶的发现 E.聚合醸链反应（PCR) 的发明 5.下列不是生物药物药理学特性的是（E ） A.治疗的针对性强 B.药理活性高 C.毒副作用小E.稳定性差 二、简答题 1. 生物化学的研究内容包括哪些？（P1-2） 生物化学的研究对象是活细胞和生物体，研究内容十分广泛，其研究的主要目的是从分子水平上探讨生命现象的本质并把这些基础理论、基本原理和技术应用于相关学科领域、生产实践及临床用药指导中。从而控制生物并改造生物，征服自然并改造自然，保障人类健康和提高人类生存质量。现代生物化学的研究主要集中于构成生物体的物质基础，物质代谢及其调节控制，遗传信息的储存、传递、表达和调控。 2.请解释一下生物药物的概念并说明它的特点。 生物药物是指利用生物体、生物组织或其成分，综合运用生物学、生物化学、物理化学、生物技术和药学等学科的原理和方法制造的一大类用于预防、诊断和治疗的制品。 生物药物的特点：治疗的针对性强、药理活性强、毒副作用小、营养价值高、生理不良反应时有发生。 二单元蛋白质的化学 一、单项选择题 1.蛋白质的基本结构单位是（D）。 A.肽键平面 B.核苷酸 C.肽 D. 氨基酸 E.葡萄糖 2.蛋白质变性（C ）。 A. 由肽键断裂而引起 B.都是不可逆的 C.可使其生物活性丧失 D.紫外吸收能力增强 E. pl降低 3.分子病主要是哪种结构异常（A ） A. 一级结构 B. 二级结构c.三级结构D. 四级结构E.空间构象 4.下列关于蛋白质结构叙述中不正确的是( A) 。 A.所有蛋白质都有四级结构 B.a-螺旋为二级结构的一种形式 C. 一级结构决定空间结构 D.亚基单独存在，仍具活性 E. 三级结构是指一条多肤链内所有原子的空间排列 5.从组织提取液中沉淀活性蛋白质而又不使其变性的方法是加入（ A ） A.硫酸按 B.强酸 C.氯化汞 D.三氯醋酸 E.尿素 6.在以下混合蛋白质溶液中，各种蛋白质的pl分别为4.3、5.0, 5.4, 6-5, 7.4，电泳时欲使其都泳向正极，缓冲溶液的PH应该是( A )。 A- PH 8.1 B. pH 5.2 C. pH 6.0 D- pH 7.4 E. pH 7.0 7.最易受非蛋白氣影响的蛋白质含量测定方法是（B ）。
糖类 1.自然界中最重要的单糖是：戊糖和己糖。 2.最简单的单糖含3个碳原子，有两个:甘油醛和二羟丙酮。（P2） 3.寡糖的命名（17）、常见糖的写法（P19） 4.自然界存在的重要二糖有三种：蔗糖、麦芽糖、乳糖。 5.多糖：同聚多糖：淀粉、糖原、纤维素、几丁质。 杂多糖：果胶。 6.糖的还原性：无还原性：蔗糖 有还原性：麦芽糖、乳糖 单糖都有还原性，二糖部分有还原性。 脂类 1.按化学结构，脂类可以分为两大类： 单脂：脂肪、油、蜡 复合脂：磷脂、糖脂、硫脂、脂蛋白
衍生脂类：萜类、固醇等 2.自然界常见的脂肪酸：软脂酸和硬脂酸。 自然界常见的脂肪酸是顺势构型。 3.乳化作用：脂肪虽不溶于水，但在乳化剂作用下，可变成很细小的颗粒，均匀地分散在水里面而形成稳定的乳状液，这个过程叫乳化作用。 4.磷脂具有双亲性，既亲水又亲油。（别的脂类是否有此性质？） 5.维生素D2原：麦角固醇在阳光或紫外线照射下，可转变为维生素D2，故麦角固醇又称为维生素D2原。 蛋白质化学 1.参与组成蛋白质的有20种基本氨基酸，都是L构型。 2.常见氨基酸的三字母缩写： Gly甘氨酸Ala丙氨酸Val缬氨酸Leu亮氨酸Ile异亮氨酸Phe苯丙氨酸Glu谷氨酸Met甲硫氨酸 3.等电点：当溶液在某一pH 值时，蛋白质所带正、负电荷相等，即总净电荷为零，此时溶液的pH 称该
蛋白质的等电点(pI)。 4.氨基酸的解离和两性性质（57） 5.蛋白质的结构： 一级结构指的是以肽键连接而成的肽链中氨基酸的排列顺序。 二级结构指肽链主链骨架原子的相对空间位置，而不涉及残基侧链。 三级结构指在二级结构或超二级结构基础上肽链发生的再折叠、卷曲。 四级结构指由两条或两条以上多肽链构成的蛋白质分子，结构就更为复杂，其结构的最小共价单位称为亚基或亚单位。亚基和亚基的结合方式称为四级结构。 6.二级结构有哪几种： α-螺旋β-折叠β-转角 7.蛋白质的胶体性质：因为蛋白质分子的直径一般在2nm~20nm的范围内，所以蛋白质溶液是胶体。 8.蛋白质的变性：某些物理或化学因素，能够破坏蛋白质的结构状态，引起蛋白质理化性质改变并导致其生理活性丧失。这种现象称为蛋白质的变性。 蛋白质变性的特点：次级键被破坏 天然结构解体
,. 实验报告 课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称： 蔗糖酶蛋白含量的测定、蔗糖酶活力测定及其分离纯化效果的评价 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛、袁平、朱耀仁、蔡玉林 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、蔗糖酶蛋白含量的测定——Folin-酚法 ①学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法； ②掌握分光光度法制作标准曲线，准确测定未知样品的蛋白质含量； ③掌握分光光度计的使用方法。 2、蔗糖酶活力测定——3.5－二硝基水杨酸法 ①掌握酶活力测定的基本原理和方法； ②学习酶的比活力的计算。 二、实验内容和原理 1、Folin-酚测定法 Folin-酚试剂是由甲、乙两种试剂组成的。甲试剂由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜和酒石酸钾钠组成，在碱性条件下蛋白质中的肽键与酒石酸钾钠铜盐起作用，生成紫红色络合物；乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成，在碱性条件下，铜-蛋白质络合物以及蛋白质中的酪氨酸残基（酚基）和色氨酸还原磷钼酸-磷钨酸试剂（乙试剂）产生深蓝色（钼蓝和钨蓝的混合物），其色泽深浅与蛋白质含量成正比。可用500nm 波长比色测定，适于测定蛋白质含量0.05～0.5g/L 。 优点： 简单、迅速、灵敏度高；反应较稳定。 缺点： 该反应受多种因素的干扰。 2、蔗糖酶活力测定 蔗糖酶（β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26），是一种水解酶。它能催化非还原性双糖（蔗糖）的1,2－糖苷键裂解，将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖（还原糖）。因此，每水解1mol 蔗糖，就能生成2mol 还原糖。还原糖的测定有多种方法，例如：纳尔逊－索模吉试剂比色法，斐林试剂法等。 专业： 农业资源与环境 姓名： 李佳怡 学号： 3130100246 日期： 2015.5. 26 地点： 生物实验中心310 装 订 线
《生物化学》期末考试题 A 一、判断题（15个小题，每题1分，共15分）( ) 2、糖类化合物都具有还原性( ) 3、动物脂肪的熔点高在室温时为固体，是因为它含有的不饱和脂肪酸比植物油多。( ) 4、维持蛋白质二级结构的主要副键是二硫键。( ) 5、ATP含有3个高能磷酸键。( ) 6、非竞争性抑制作用时，抑制剂与酶结合则影响底物与酶的结合。( ) 7、儿童经常晒太阳可促进维生素D的吸收，预防佝偻病。( ) 8、氰化物对人体的毒害作用是由于它具有解偶联作用。( ) 9、血糖基本来源靠食物提供。( ) 10、脂肪酸氧化称β-氧化。( ) 11、肝细胞中合成尿素的部位是线粒体。( ) 12、构成RNＡ的碱基有Ａ、Ｕ、Ｇ、T。( ) 13、胆红素经肝脏与葡萄糖醛酸结合后水溶性增强。( ) 14、胆汁酸过多可反馈抑制7α-羟化酶。( ) 15、脂溶性较强的一类激素是通过与胞液或胞核中受体的结合将激素信号传递发挥其生物() 二、单选题（每小题1分，共20分） 1、下列哪个化合物是糖单位间以α-1，4糖苷键相连：( ) A、麦芽糖 B、蔗糖 C、乳糖 D、纤维素 E、香菇多糖 2、下列何物是体内贮能的主要形式( ) A、硬酯酸 B、胆固醇 C、胆酸 D、醛固酮 E、脂酰甘油 3、蛋白质的基本结构单位是下列哪个：( ) A、多肽 B、二肽 C、L-α氨基酸 D、L-β-氨基酸 E、以上都不是 4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是( ) A、能加速化学反应速度 B、能缩短反应达到平衡所需的时间 C、具有高度的专一性 D、反应前后质和量无改 E、对正、逆反应都有催化作用 5、通过翻译过程生成的产物是：( ) Ａ、ｔRNA Ｂ、ｍRNA Ｃ、ｒRNA D、多肽链Ｅ、DNA 6、物质脱下的氢经NADH呼吸链氧化为水时，每消耗1/2分子氧可生产ATP分子数量( ) Ａ、１Ｂ、２C、3 Ｄ、４．E、5 7、糖原分子中由一个葡萄糖经糖酵解氧化分解可净生成多少分子ATP？( ) A、1 B、2 C、3 D、4 E、5 8、下列哪个过程主要在线粒体进行( ) A、脂肪酸合成 B、胆固醇合成 C、磷脂合成 D、甘油分解 E、脂肪酸β-氧化 9、酮体生成的限速酶是( )
《生物化学》期末考试题 A 1、蛋白质溶液稳定的主要因素是蛋白质分子表面形成水化膜,并在偏离等电点时带有相同电荷 2、糖类化合物都具有还原性 ( ) 3、动物脂肪的熔点高在室温时为固体，是因为它含有的不饱和脂肪酸比植物油多。( ) 4、维持蛋白质二级结构的主要副键是二硫键。 ( ) 5、ATP含有3个高能磷酸键。 ( ) 6、非竞争性抑制作用时，抑制剂与酶结合则影响底物与酶的结合。 ( ) 7、儿童经常晒太阳可促进维生素D的吸收，预防佝偻病。 ( ) 8、氰化物对人体的毒害作用是由于它具有解偶联作用。 ( ) 9、血糖基本来源靠食物提供。 ( ) 10、脂肪酸氧化称β-氧化。 ( ) 11、肝细胞中合成尿素的部位是线粒体。 ( ) 12、构成RNＡ的碱基有Ａ、Ｕ、Ｇ、T。 ( ) 13、胆红素经肝脏与葡萄糖醛酸结合后水溶性增强。 ( ) 14、胆汁酸过多可反馈抑制7α-羟化酶。 ( ) 15、脂溶性较强的一类激素是通过与胞液或胞核中受体的结合将激素信号传递发挥其生物() 1、下列哪个化合物是糖单位间以α-1，4糖苷键相连： ( ) A、麦芽 B、蔗糖 C、乳糖 D、纤维素 E、香菇多糖 2、下列何物是体内贮能的主要形式 ( ) A、硬酯酸 B、胆固醇 C、胆酸 D、醛固酮 E、脂酰甘油
3、蛋白质的基本结构单位是下列哪个： ( ) A、多肽 B、二肽 C、L-α氨基酸 D、L-β-氨基酸 E、以上都不是 4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是 ( ) A、能加速化学反应速度 B、能缩短反应达到平衡所需的时间 C、具有高度的专一性 D、反应前后质和量无改 E、对正、逆反应都有催化作用 5、通过翻译过程生成的产物是： ( ) Ａ、ｔRNA Ｂ、ｍRNA Ｃ、ｒRNA D、多肽链Ｅ、DNA 6、物质脱下的氢经NADH呼吸链氧化为水时，每消耗1/2分子氧可生产ATP分子数量( ) Ａ、１Ｂ、２ C、3 Ｄ、４． E、5 7、糖原分子中由一个葡萄糖经糖酵解氧化分解可净生成多少分子ATP？ ( ) A、1 B、2 C、3 D、4 E、5 8、下列哪个过程主要在线粒体进行 ( ) A、脂肪酸合成 B、胆固醇合成 C、磷脂合成 D、甘油分解 E、脂肪酸β-氧化 9、酮体生成的限速酶是 ( ) A、HMG-CoA还原酶 B、HMG-CoA裂解酶 C、HMG-CoA合成酶 D、磷解酶 E、β-羟丁酸脱氢酶 10、有关G-蛋白的概念错误的是 ( ) A、能结合GDP和GTP B、由α、β、γ三亚基组成 C、亚基聚合时具有活性 D、可被激素受体复合物激活 E、有潜在的GTP活性 11、鸟氨酸循环中，合成尿素的第二个氮原子来自 ( ) A、氨基甲酰磷酸 B、NH3 C、天冬氨酸 D、天冬酰胺 E、谷氨酰胺 12、下列哪步反应障碍可致苯丙酮酸尿症 ( )
您的本次作业分数为：100分单选题2.生成酮体和胆固醇都需要的酶是（）。 A HMG-CoA 合成酶 B HMG-CoA还原酶 C HMG-CoA裂解酶 D 乙酰乙酰硫激酶 E 转硫酶正确答案:A 单选题 3.乳糖操纵子的调节水平在（）。 A 复制 B 转录 C 转录后 D 翻译 E 翻译后正确答案:B 单选题 4.变构效应物对酶结合的部位是（）。 A 活性中心与底物结合的部位 B 活性中心的催化基团 C 酶的-SH基 D 活性中心以外的特殊部位 E 活性中心以外的任何部位正确答案:D 单选题 5.1分子葡萄糖经糖酵解分解为2分子乳酸时，其底物水平磷酸化次数为（）。 A 1 B 2 C 3 D 4 E 5 正确答案:D 单选题 6.酶的辅基具有下述性质（）。 A 是一种结合蛋白 B 与酶蛋白结合比较疏松 C 由活性中心的若干氨基酸残基组成 D 决定酶的专一性 E 与酶蛋白亲和力较大，一般不能用透析等物理方法彼此分开正确答案:E 单选题 7.体内转运一碳单位的载体是（）。 A 生物素 B 磷酸吡哆醛
C 四氢叶酸 D 二氢叶酸 E CoA 正确答案:C 单选题 8.原核生物转录的终止因子是（）。 A α B ρ C β D σ E Γ 正确答案:B 单选题 10.下列哪一物质含有高能键？（） A 6-磷酸葡萄糖 B 1,6-二磷酸果糖 C 1,3-二磷酸甘油酸 D 烯醇式丙酮酸 E 乳酸正确答案:C 单选题 12.肝脏不能氧化利用酮体是由于缺乏（）。 A HMGCoA合成酶 B HMGCoA裂解酶 C HMGCoA还原酶 D 琥珀酰CoA转硫酶 E 乙酰乙酰CoA硫解酶正确答案:D 单选题 14.下列关于遗传密码的基本特点，哪一点是错误的？（） A 密码无标点 B 一种氨基酸只有一种遗传密码 C 有终止密码和起始密码 D 密码专一性主要由头两个碱基决定 E 病毒、原核细胞或真核细胞都利用同一套遗传密码正确答案:B 单选题 16.三羧酸循环的第一个产物是（）。 A 乙酰CoA B 草酰乙酸 C 柠檬酸 D 苹果酸
生物化学复习资料 Amino acid（氨基酸）: All proteins are made up from the same set of 20 standard amino acids. A typical amino acid has a primary amino group, a carboxyl group, a hydrogen atom and a side-chain(R group) attached to a central α-group atom(Cα). Proline（脯氨酸）is the exception to the rule in that it has a secondary amino group. Primary structure（一级结构）: The linear（线状的）sequence of amino acids joined together by peptide bonds is termed（被称为）the primary structure of the protein. The position of covalent disulfide bonds between cysteine（半胱氨酸）residues is also included in the primary structure. Secondary structure（二级结构）: Secondary structure is a protein refers to the regular folding of regions of the polypeptide chain. The two most common types of secondary structure are the αhelix and βpleated sheet（β折叠）. Tertiary structure（三级结构）: Tertiary structure in a protein refers to the three-dimensional（三维的）arrangement of all the amino acids in the polypeptide chain. This biologically active, native conformation（构造；形态）is maintained by multiple（多重的；多样的）noncovalent （非共价的）bonds. Quaternary structure（四级结构）: if a protein is made up of more than one polypeptide chain it is said to have quaternary structure. This refers to the spatial（空间的）arrangement of the polypeptide subunits（亚基；亚单位）and the nature of the interactions between them. Protein stability（蛋白质稳定性）: In addition to the peptide bonds between individual amino acid residues, the three-dimensional structure of a protein is maintained by a combination of noncovalent interactions(electrostatic forces（静电力）, van derWaals forces（范德华力）,hydrogen bonds（氢键）, hydrophobic forces（疏水作用力）) and covalent interactions(disulfide bonds（二硫键）). The Bohr effect(波尔效应): H+, CO2and 2,3-bisphosphoglycerate（2,3-二磷酸甘油酸）are allosteric effectors（变构效应剂）, promoting the release of O2 from hemoglobin（血红蛋白）. H+ and CO2 bind to different parts of the polypeptide chains, while 2,3-bisphosphoglycerate binds in the central cavity（凹穴）between the four subunits. Dialysis（透析）: Proteins can be separated from small molecules by dialysis through a semi-permeable membrane（半透膜）which has pores that allow small molecules to pass through but not proteins. Function and diversity of collagen（胶原蛋白）: Collagen is the name given to a family of structurally related proteins that form strong insoluble（不可溶的）fibers. Collagens consist of three polypeptide chains, the identity and distribution of which vary between collagen types. Gel filtration chromatography(凝胶过滤层析) Ion exchange chromatography(离子交换层析)
生物化学（丙）期中试卷 一．判断题 1.1分子的NADH+H+经呼吸链氧化可产生 2.5分子ATP。 2.蛋白质变性的本质是蛋白质分子的高级结构被破坏，一级结构则保持完整。 3.琥珀酸脱氢酶和NADH脱氢酶的辅助因子都是FAD。 4.磺胺药可使乙酰胆碱酯酶的Km上升，Vmax不变。 5.ATP的主要功能是为机体提供能量和提供活性磷酸基团。 6.糖异生是指由丙酮酸、琥珀酸CoA、6-磷酸果糖、苹果酸等物质转变为葡萄糖的过程。 7.蛋白质三级结构的稳定力包括氢键、盐键、疏水相互作用、范德华力、二硫键、配位键 等次级键。 8.同源蛋白质的种属差异性说明一级结构的局部改变并不会影响蛋白质的功能。 9.同工酶是指功能相同，但结构和性质不同的一类酶。 10.限制性内切酶是指在一特殊序列处将DNA的两条链同时切断的一类酶。 11.ATP是磷酸果糖激酶I的底物，因此对该酶的活性起别构激活作用。 12.反馈抑制作用是指反应的产物对催化反应的酶的抑制作用。 13.硫辛酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和辅酶A都可以作为酰基的载体起传递作用。 14.酶催化高效性的机理是通过酸碱催化、温度效应、共价催化等因素降低了反应的活化能。 15.蛋白质的基本化学键是肽键、核酸的基本化学键是3’,5’-磷酸二酯键。 二．单选题 1.根据酶催化反应的性质，延胡索酸酶属于： (1)水解酶类(2)合成酶类(3)裂合酶类(4)转移酶类 2.当[S]=2Km时，V的值是： (1)2Vmax(2)2/3Vmax(3)1/3Vmax(4)1/2Vmax 3.下列酶催化的反应无CO2参与的是： (1)6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 (2)苹果酸酶 (3)3-磷酸甘油醛脱氢酶 (4)磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 4.1分子的F1，6-2P被彻底氧化分解为CO2和H2O可产生的高能化合物分子数为（通过 α-磷酸甘油穿梭）： (1)32(2)30(3)34(4)28 5.在2,4-二硝基苯存在下一分子FADH2通过呼吸链可产生的ATP分子数是： (1)1(2)0(3)1.5(4)2.5 6.DNA的双螺旋结构中，主要的稳定力是： (1)氢键 (2)疏水相互作用 (3)范德华力 (4)离子键 7.下列代谢途径既不发生在细胞液也不发生在线粒体中的是： (1)EMP途径(2)TCA途径(3)HMP途径(4)乙醛酸循环 8.蛋白质的特征吸收波长是：(1)260nm(2)280nm(3)340nm(4)500nm 9.下列代谢途径中能为机体提供NADPH+H+的代谢途径是： (1)糖酵解途径(2)乙醛酸循环途径(3)磷酸戊糖途径(4)呼吸链 10.在酶的活化和去活化中，磷酸化和去磷酸化常发生在那个氨基酸残基：
生化复习资料 考试： 名：10个（三、四） 选：10个（不含1、6、11、12） 3章重点维生素的载体、作用，嘌呤、嘧啶合成区别，核糖作用，一碳基团载体，ACP，载体蛋白，乙酰辅酶A缩化酶，生物素 填：20空（1、2、8） 简答：3个（1、6、7、8） 简述：3个（9、10、11、12） 血糖来源和去路，葡萄糖6-磷酸的交叉途径 实验与计算：（1、7） 一、名词解释 1、肽键：是一分子氨基酸的羧基与另一分子氨基酸的氨基脱水缩合而成的酰胺键（-CO-NH-），称为肽键。是蛋白质结构中的主要化学键（主键） 2、盐析： 3、酶的活性中心：在一级结构上可能相距甚远，甚至位于不同肽链上的基团，通过肽链的盘绕、折叠而在空间构象上相互靠近，形成的具有一定的构象，直接参与酶促反应的区域。又称酶活性部位 4、米氏常数：是反应最大速度一半时所对应的底物浓度,即当v = 1/2Vm时，Km = S 意义：Ｋm越大，说明E和S之间的亲和力越小，ES复合物越不稳定。米氏常数Km对于酶是特征性的。每一种酶对于它的一种底物只有一个米氏常数。 5、氧化磷酸化：是在电子传递过程中进行偶联磷酸化，又叫做电子传递水平的磷酸化。 6、底物水平磷酸化：是直接由底物分子中的高能键转变成A TP末端高能磷酸键叫做底物水平的磷酸化。 7、呼吸链：线粒体能将代谢物脱下的成对氢原子(2H)通过多种酶和辅酶的链锁反应体系逐步传递,最后与激活的氧结合为水,由于该过程利用氧气与细胞呼吸有关,所以将这一传递体系叫做呼吸链。 8、生物氧化：糖类、脂肪和蛋白质等有机化合物在生物体内经过一系列的氧化分解，生成CO2和水释放能量的总过程叫做生物氧化。 9、葡萄糖异生作用：由非糖前体物质合成葡萄糖的过程。 10、戊糖磷酸通路：指机体某些组织以6-磷酸葡萄糖为起始物在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下形成6-磷酸葡萄糖酸进而代谢生成磷酸戊糖为中间代谢物的过程。 11、激素敏感激酶： 12、酮体：脂肪酸在肝脏中氧化分解所生成的乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮三种中间代谢产物，统称为酮体。 13、饲料蛋白质的互补作用：把原来营养价值较低的不同的蛋白质饲料混合使用，可能提高其营养价值和利用率。 14、氮平衡：是反映动物摄入氮和排除氮之间的关系以衡量机体蛋白质代谢概况的指标。 15、从头合成途径：利用氨基酸等作为原料合成 16、补救合成途径：利用体内游离的碱基或核苷合成
实验报告 课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称： 蔗糖酶的提取 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、学习掌握蔗糖酶的提取、分离纯化的基本原理和方法； 2、巩固理论知识，学会学以致用并发现新问题。 二、实验内容和原理 1、实验内容： 蔗糖酶的提取、分离纯化 2、实验原理： ①酵母细胞破碎 细胞破碎的常用方法 液体剪切法固体剪切法压力和研磨 物理法、化学渗透法、酶溶 本实验采用研磨的方法。通过固体剪切法（研磨）将酵母细胞破碎，把蔗糖酶从酵母细胞中提取出来。 ②蔗糖酶的初步分离纯化 蛋白酶常用的初步分离纯化方法有：盐析、选择性变性、有机溶剂沉淀等。 本实验采用选择性变性（加热）、有机溶剂（乙醇）沉淀等方法对蔗糖酶进行初步的提纯以及收集样品。 由于一般酶蛋白在常温下分离纯化过程中易变性失活，为了能获得尽可能高的产率和纯度，在提纯 操作中要始终保持酶的活性，如在低温下操作等，这样才能得到较好地分离提纯效果。 三、实验材料与试剂
1、实验材料 市售干酵母粉10g/组(3～4人） 2、实验试剂 石英砂，95%乙醇(-20℃），20mmol/L Tris-HCl pH7.3 缓冲液。 四、实验器材与仪器 电子天平（称量干酵母粉）；研砵（每组一套）；50ml高速离心管（4支/组、4孔50ml离心管架一个/组）；托盘天平（离心管平衡用）；高速冷冻离心机；恒温水浴箱（50℃）；量筒（50ml）、微量移液枪（1000ul)及枪头或移液管（1ml)、玻棒、滴管等;1.5ml离心管（留样品Ⅰ、Ⅱ用）及离心管架；制冰机；－20℃冰箱。 五、操作方法和实验步骤 1、酵母细胞破粹（干磨法） ①称量：称取市售干酵母粉10g+约3-5 g石英砂放入研钵 ②研磨(干磨)：至尽可能成细粉末状（约15min） ③加液+研磨：量取总体积40 ml的20mmol/L Tris-HCl pH7.3 缓冲液，分2次加研磨10min， 使呈糊状液体； ④离心：将糊状液体转移到2支50ml离心管中，两支离心管平衡后(托盘天平上)，离心10min （条件：4℃、12000r/min） ⑤收集+测量：收集上清液并量出体积V1（样品I），另留1ml上清液（样品I ）放置－20℃冰箱保存用于蔗糖酶蛋白含量测定、蔗糖酶活力测定和SDS-PAGE分析 2、热处理 ①水浴热处理：将上步抽提液（样品I），迅速放入50℃恒温水浴，保温30min， 并每隔5min用玻璃棒温和搅拌提取液。 ②冰浴冷却：保温后迅速用冰浴冷却5min ③离心：将热处理后的样品I转移至两支50ml离心管中，平衡后，离心10min。 （条件：4℃，12000r/min） ④收集+测量：收集上清液并量出体积V2（样品Ⅱ），另留1ml上清液（样品Ⅱ）放置－20℃冰箱保存（用于蔗糖酶蛋白含量测定、测定蔗糖酶活力和SDS-PAGE分析。 3、有机溶剂（乙醇）沉淀 ①冰浴：将热处理后的上清液加入相同体积的－20℃的95%乙醇，冰浴中温和搅动混匀，
一是非题1/30 1 酶反应的专一性取决于其辅助因子的结构 2 肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解 3 E.coli 连接酶摧化两条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键 4 通过柠檬酸途径将乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP+生成NADPH 5 亮氨酸的疏水性比缬氨酸强 6 必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的一些氨基酸 7 脯氨酸是α螺旋破坏者 8 维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键 9 在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先解链 10 真核细胞中DNA只存在于细胞核中 11 DNA双螺旋的两条链方向一定是相反的 12 酶影响其催化反应的平衡 13 酶促反应的米氏常数与催化的底物无关 14 维生素E是一种天然的抗氧化剂 15 维生素B1的辅酶形式是TPP 16 ATP是体内能量的储存形式 17 糖酵解过程无需氧气的参与 18 胆固醇是生物膜的主要成分,可调节生物膜的流动性 19 蛋白质的生理价值主要取决于必需氨基酸的种类,数量和比例 20 磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用 21 DNA复制时,后滞链需多个引物 22 绝缘子和增强子一样都属于顺式作用元件 23 PCR是包括变性,复性和延伸三个步骤的循环反应 24 Sanger曾两获诺贝尔奖 25 核糖体上有三个与tRNA有关的位点:A位点,P位点,E位点 26 生长激素释放抑制因子是一个14肽 27 脂肪酸合成酶催化的反应是脂肪酸-β氧化反应的逆反应 28 镰刀型贫血症患者血红蛋白与正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别 29 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种 30 中国科学家在今年完成了人类基因组1%的测序任务 二写出下列物质的分子结构式1/6 1 Thr 2 D-核糖 3 A 4 GSH 5 尼克酰胺 6 丙酮酸 三名词解释4/24 1 反密码子 2 操纵基因 3 多肽核酸( peptide nucleic acid ) 4 折叠酶 5 共价调节 6 Humen Genome Project 四综合题10/40 1 试表述Glu经脱氨基,有氧氧化等途径彻底分解成NH3 , CO2, 和H2O 时的代谢路线,要求用箭头表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP? 2 以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白与肌红蛋白结构和功能的异同 3 请对中心法则加以阐述 4 凝胶过滤是分离蛋白质混合物最有效的方法之一,请说明其工作原理并简述用该法分离蛋白质的实验操作步骤
生物化学期末复习题 第一章蛋白质化学 一.名词解释： 1.蛋白质的等电点：当蛋白质溶液处在某一pH值时，蛋白质解离成正、负离子的趋势和程度相等，即称为兼性离子或两性离子，净电荷为零，此时溶液的pH 值称为该蛋白质的等电点。、 2.蛋白质的一级结构：是指多肽链中氨基酸（残基）的排列的序列，若蛋白质分子中含有二硫键，一级结构也包括生成二硫键的半胱氨酸残基位置。维持其稳定的化学键是：肽键。 蛋白质二级结构：是指多肽链中相邻氨基酸残基形成的局部肽链空间结构，是其主链原子的局部空间排布。蛋白质二级结构形式：主要是周期性出现的有规则的α-螺旋、β-片层、β-转角和无规则卷曲等。 蛋白质的三级结构是指整条多肽链中所有氨基酸残基，包括相距甚远的氨基酸残基主链和侧链所形成的全部分子结构。因此有些在一级结构上相距甚远的氨基酸残基，经肽链折叠在空间结构上可以非常接近。 蛋白质的四级结构是指各具独立三级结构多肽链再以各自特定形式接触排布后，结集所形成的蛋白质最高层次空间结构。 3..蛋白质的变性：在某些理化因素的作用下，蛋白质的空间结构受到破坏，从而导致其理化性质的改变和生物学活性的丧失，这种现象称为蛋白质的变性作用。蛋白质变性的实质是空间结构的破坏。 4.蛋白质沉淀：蛋白质从溶液中聚集而析出的现象。 二.填空题 1.不同蛋白质种含氮量颇为接近，平均为 16% . 2.组成蛋白质的基本单位是氨基酸。 3. 蛋白质能稳定地分散在水中，主要靠两个因素：水化膜和电荷层 . 4.碱性氨基酸有三种，包括精氨酸、组氨酸和赖氨酸。 5.维系蛋白质一级结构的化学键是肽键，蛋白质变性时一级结构不被破坏。 6.蛋白质最高吸收峰波长是 280nm . 7.维系蛋白质分子中α-螺旋的化学键是氢键。 8.蛋白质的二级结构形式有α-螺旋、β-片层、β-转角和无规则卷曲等 9.在280nm波长处有吸收峰的氨基酸为酪氨酸、色氨酸 第二章核酸化学 一、填空题
生物化学（一）复习思考题 一、名词解释 核酶;全酶;维生素;氨基酸;中心法则;结构域；锌指蛋白;第二信使;α－磷酸甘油穿梭;底物水平磷酸化；呼吸链; G蛋白；波尔效应（Bohr effect）；葡萄糖异生；可立氏循环（Cori cycle） 1.全酶：脱辅酶与辅因子结合后所形成的复合物称为全酶，即全酶=脱辅酶+辅因子。 2.维生素：是维持机体正常生理功能所必需的，但在体内不能合成或合成量不足，必须 由食物提供的一类低分子有机化合物。 3.氨基酸：蛋白质的基本结构单元。 4.中心法则：是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成了遗传 信息的转录和翻译的过程。 5.结构域：又称motif（模块），在二级结构及超二级结构的基础上，多肽链进一步卷 曲折叠，组装成几个相对独立，近似球形的三维实体。 6.锌指蛋白：DNA结合蛋白中2个His,2个Cys结合一个Zn. 7.第二信使：指在第一信使同其膜受体结合最早在新报内侧或胞浆中出现，仅在细胞内 部起作用的信号分子，能启动或调节细胞内稍晚出现的反应信号应答。 8.α-磷酸甘油穿梭：该穿梭机制主要在脑及骨骼肌中，它是借助于α-磷酸甘油与磷酸 二羟丙酮之间的氧化还原转移还原当量，使线粒体外来自NADH的还原当量进入线粒体的呼吸链氧化。 9.底物水平磷酸化：底物转换为产物的同时，伴随着ADP的磷酸化形成ATP. 10.呼吸链：电子从NADH到O2的传递所经历的途径形象地被称为电子链，也称呼吸链。 11.G蛋白：是一个界面蛋白，处于细胞膜内侧，α,β,γ3个亚基组成. 12.波尔效应:增加CO2的浓度，降低PH能显著提高血红蛋白亚基间的协同效应，降低
浙江大学2001年攻读硕士学位研究生入学考试题 考试科目:生物化学,编号555 注意:答题必须写在答题纸上,写在试卷或草稿纸上均无效 一是非题1/30 1 酶反应的专一性取决于其辅助因子的结构 2 肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解 3 E.coli 连接酶摧化两条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键 4 通过柠檬酸途径将乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP 生成NADPH 5 亮氨酸的疏水性比缬氨酸强 6 必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的一些氨基酸 7 脯氨酸是α螺旋破坏者 8 维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键 9 在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先解链 10 真核细胞中DNA只存在于细胞核中 11 DNA双螺旋的两条链方向一定是相反的 12 酶影响其催化反应的平衡 13 酶促反应的米氏常数与催化的底物无关 14 维生素E是一种天然的抗氧化剂 15 维生素B1的辅酶形式是TPP 16 ATP是体内能量的储存形式 17 糖酵解过程无需氧气的参与 18 胆固醇是生物膜的主要成分,可调节生物膜的流动性 19 蛋白质的生理价值主要取决于必需氨基酸的种类,数量和比例 20 磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用 21 DNA复制时,后滞链需多个引物 22 绝缘子和增强子一样都属于顺式作用元件 23 PCR是包括变性,复性和延伸三个步骤的循环反应 24 Sanger曾两获诺贝尔奖 25 核糖体上有三个与tRNA有关的位点:A位点,P位点,E位点 26 生长激素释放抑制因子是一个14肽 27 脂肪酸合成酶催化的反应是脂肪酸-β氧化反应的逆反应 28 镰刀型贫血症患者血红蛋白与正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别 29 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种 30 中国科学家在今年完成了人类基因组1%的测序任务 二写出下列物质的分子结构式1/6 1 Thr 2 D-核糖 3 A 4 GSH 5 尼克酰胺 6 丙酮酸 三名词解释4/24 1 反密码子 2 操纵基因 3 多肽核酸( peptide nucleic acid ) 4 折叠酶 5 共价调节 6 Humen Genome Project 四综合题10/40 1 试表述Glu经脱氨基,有氧氧化等途径彻底分解成NH3 , CO2, 和H2O 时的代谢路线,要求用箭头表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP? 2 以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白与肌红蛋白结构和功能的异
2016—2017学年度第一学期 食品科学与工程学院《生物化学》期末考试试卷 注意事项:1. 考生务必将自己姓名、学号、专业名称写在指定位置； 2. 密封线和装订线内不准答题。 一、名词解释 (共8小题,每小题2.5分,共20分,答案写在试题第8页) 1. 蛋白质的一级结构 2. 变构效应 3. 透析 4. 增色效应 5.糖酵解 6. 三羧酸循环 7.半保留复制 8. 激素水平代谢调节 二、填空题(共40空,每空0.5分,共20分) 1、蛋白质可受 酸 、 碱 、或 酶 的作用而水解,最后彻底水解为各种 氨基酸 的 混合物。 2、酶活性中心与底物相结合那些基因团称 结合基因 ,而起催化作用的那些基因团称 催化基因 。 3、核酸完全水解的产物是 磷酸 , 含氮碱基 和 戊糖 。 其中 含氮碱基 又可分为 嘌呤 碱和 嘧啶 碱。 4、大多数蛋白质中氮的含量较恒定,平均为__16_%,如测得1克样品含氮量为10mg,则蛋白质含量为 __6.25__%。
5、由于蛋白质分子中的酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸在分子结构中含有__共轭__双键,所以在波长__280nm__处有特征性吸收峰,该特点称为蛋白质的__紫外吸收__性质。 6、当非竞争性抑制剂存在时,酶促反应动力学参数如下Km__不变__,Vmax__降低__。 7、决定蛋白质的空间构象和生物学功能的是蛋白质的__一__级结构,该结构是指多肽链中__氨基酸残疾__的排列顺序。 8、最适温度__不是__酶的特征性常数,它与反应时间有关,当反应时间延长时,最适温度可以__降低__。 9、DNA分子中,两条链通过碱基间的__氢键__相连,碱基间的配对原则是A对__T__、__G__对__C__。 10、三羧酸循环过程中有_____4______次脱氢和_____2____次脱羧反应；该循环的三个限速酶是___柠檬酸合成酶___、____异柠檬酸脱氢酶____和___α—酮戊二酸脱氢酶____ 11、tRNA的三叶草型结构中,其中氨基酸臂的功能是__与氨基酸结合___,反密码环的功能是__识别并结合mRNA__。 12、DNA复制时,连续合成的链称为__前导链__链；不连续合成的链称为__后随链__链。 13、RNA的转录过程分为__起始___、___延长___和__终止__三个阶段。 14、糖异生的主要器官是线粒体。 三、单项选择题(共10小题,每小题1分,共10分) 1.下面好有两个羧基的氨基酸是( D ) A.精氨酸 B.甘氨酸 C.色氨酸 D.谷氨酸 2.下列叙述中不属于蛋白质一级结构内容的是( C ) A.多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序 B.多肽链中氨基酸残基的键链方式 C.多肽链中主肽链的空间走向,如a-螺旋 D.胰岛分子中A链与B链间含有两条二硫键,分别是A7-S-S-B7,A20-S-S-B19 3.下列辅因子中,不包含腺苷酸的辅因子是( C ) A.CoA B.NAD＋ C.FMN D.维生素C
一、名词解释 1、同聚多糖：由一种单糖组成的多糖，水解后生成同种单糖，如淀粉、纤维素等 2、氧化磷酸化；在真核细胞的线粒体或细菌中，物质在体内氧化时释放的能量供给ADP与无机磷合成ATP 的偶联反应。 3、多酶复合体: 几种功能不同的酶彼此嵌合在一起构成复合体，完成一系列酶促反应 4、限制性内切酶；一种在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA 的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解 5、结构域：多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区域，它是相对独立的紧密球形实体，称为结构域 6、脂肪酸ω-氧化：脂肪酸的ω-碳原子先被氧化成羧基，再进一步氧化成ω-羧基，形成α、ω-二羧脂肪酸，以后可以在两端进行α-氧化而分解。 7、戊糖磷酸途径：又称为磷酸已糖支路。是一个葡萄糖-6-磷酸经代谢产生NADPH和核糖-5-磷酸的途径。该途径包括氧化和非氧化两个阶段，在氧化阶段，葡萄糖-6-磷酸转化为核酮糖-5-磷酸和CO2，并生成两分子NADPH；在非氧化阶段，核酮糖-5-磷酸异构化生成核糖-5-磷酸或转化为酵解的两用人才个中间代谢物果糖-6-磷酸和甘油醛-3-磷酸。 ( 是指从6-磷酸葡萄糖开始,经过氧化脱羧、糖磷酸酯间的互变，最后形成6-磷酸果糖和3-磷酸甘油醛的过程) 8、竞争性抑制作用：通过增加底物浓度可以逆转的一种酶抑制类型。竞争性抑制剂通常与正常的底物或配体竞争同一个蛋白质的结合部位。这种抑制剂使Km增大而υmax不变。 9、肉毒碱穿梭作用：活化后的脂酰CoA是在线粒体外需要一个特殊的转运机制才能进入线粒体内膜。在膜内外都含有肉毒碱，脂酰CoA和肉毒碱结合，通过特殊通道进入膜内然后再与肉毒碱分离(脂酰CoA 通过形成脂酰肉毒碱从细胞质转运到线粒体的一个穿梭循环途径。) 10、呼吸链：又称电子传递链，是由一系列电子载体构成的，从NADH或FADH2向氧传递电子的系统 11 增色效应；当双螺旋DNA熔解（解链）时，260nm处紫外吸收增加的现象。 12、半不连续复制；半不连续复制是指DNA复制时，前导链上DNA的合成是连续的，后随链上是不连续的，故称为半不连续复制。 13、尿素循环: 是一个由4步酶促反应组成的，可以将来自氨和天冬氨酸的氮转化为尿素的循环。循环是发生在脊椎动物的肝脏中的一个代谢循环。 14、信号肽: 常指新合成多肽链中用于指导蛋白质夸膜转移（定位）的N-末端氨基酸序列（有时不一定在N端）。 15、核酶：具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂。核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。 16、半保留复制：DNA复制的一种方式。每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA，