液体菌种实施方案
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液体菌种制作规程工艺流程:斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备:马铃薯200克(去皮切块煮沸过滤取滤液),蔗糖20克,麸皮30克(煮汁过滤取滤液)二氢钾2克,硫酸镁1克,琼脂20克,VB1 10毫克,水1000毫升。
25度培养7天备用。
2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。
(配方2:玉米粉4%,蔗糖3%,麸皮2%,酵母膏0.5%,2氢钾0.25%,硫酸镁0.1%,VB1 0.01%,豆油0.05%)。
②制作:土豆去皮切成薄块,煮沸后保持20分钟,四层纱布过滤后取滤液,补足1000毫升水,称取其他成份,与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。
初级摇瓶采用500ml三角瓶,装入200ml,放入玻璃球5粒(0.5cm 直径)用二层纱布包裹制作棉塞,塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩,扎紧瓶胫,防止摇动时棉塞活动。
③灭菌:把三角瓶放入立式高压锅,加足水紧好盖,开启放气阀,接通电源,有蒸汽冒出时关闭放气阀,待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0,再关闭放气阀,接通电源,当压力表显示0.11 MPa,温度达到121℃后开时计时,保持45min。
断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0,趁热微开盖,使剩余蒸汽烘干棉塞,然后出锅降温至25℃即可接种。
④接种:首先,封闭接种室,用开启紫外线灯30分钟,再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟,进行接种环境灭菌。
把灭菌后的三角瓶放入超净台(或接种箱),把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入,母种用灭过菌的报纸遮盖,打开紫外线灯和无菌风开关,保持15min后,关闭紫外线灯进行接种。
操作人员应着干净的隔离衣,带好卫生帽、口罩,手洗净,用75%酒精擦拭手、母种试管、工具,点燃酒精灯,灼烧工具及试管口20秒,在严格无菌操作程序下,把斜面菌种切割成0.5厘米小块(不带培养基),移入三角瓶中,使其浮在液面,一般接入5-6块,塞好棉塞,接完后重新封好棉塞罩,放到25℃恒温环境净置培养72小时。
食用菌液体菌种生产方法(发酵罐法)传统菌种生产工艺,一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种,生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。
液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点,接种到培养料内有流动性好、萌发点多,发菌迅速等特种点。
应用于生产与固体菌种相比有以下优点:1.菌种生产周期短。
固体种一般需25—40天,而液体种仅需3—7天。
2.接种后,萌发点多萌发点多、发菌快、出菇周期短。
接种24小时菌丝布满料面,3—15天长满菌袋,一般品种10天左右可出菇。
3.接种方便、成本低。
用液体菌种接种一般每袋成本是1—3分,每人每小时可接800袋以上,提高效益4—5倍。
4.适宜工厂化生产。
可直接用于栽培料进行出菇,大批量生产菌袋。
为食用菌集约化、标准化生产创造了条件。
因此,适宜我国国情的液体菌种设备的出现,必将在食用菌生产领域引发一场新的革命。
液体菌种具有固体(颗粒)菌种无可比拟的优势,但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的,因此很多人对此很陌生。
在这里我们对此进行简单介绍一、液体菌种设备基本原理任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要,同时必须避免杂菌感染。
在深层发酵技术上称之为选择性发酵技术,如啤酒生产技术当属此例,而白酒生产则是生物菌群发酵技术。
液体菌种发酵设备(包括四大系统,温控系统由控制器、电热管等组成;供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成;冷却系统由热交换器、进出水管道组成;搅拌系统由射流器、提升管等组成。
二、液体菌种生产的关键技术1、溶氧量液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量,因为在菌丝生长过程中,必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢,氧气在液体(水)中的溶解量与压力、温度有关,同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。
因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题,如安装射流器使气泡细碎度增加等。
2、空气过滤技术的关键就是保证进入的空气无菌度高,因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。
北虫草液体菌种制作方法北虫草的菌种怎样制作培育?北虫草是一种富含虫草素、氧基酸等营养物质的虫、菌结合的食用菌类,因为营养物质种类多、含量高,是人们生活中的上等滋补佳品,在市场上销售情况一直较佳,人工种植前景看好。
而今天给大家介绍一下关于北虫草液体菌种制作方法,如下:一、培养基配方配方:玉米粉1%、葡萄糖2%、蛋白胨1%、酵母粉0.5%、磷酸二氢钾0.1%、水95.35%、硫酸镁0.05%、维生素B110mg、PH值调至6.5左右。
二、制作培养方法1.制作一级摇瓶种:将这些原料溶于水后装在500毫升三角瓶中,每个三角瓶装量200毫升,放入玻璃珠3粒左右,塞紧棉塞,然后用4层纱布罩住棉塞、瓶口扎紧,放在高压灭菌锅内进行消毒,待压力表上升至0.5kg/cm2压力时,即放净冷气待指针降至0后,再关掉放气阀门,待温度表指针逐渐上升至1.1kg/cm2后就开始保温30分钟后,慢慢下降指针至0,然后开盖冷却至常温,再移入接种箱或超净工作台等待接种。
2.接种方法:先把灭菌后的北虫草液体菌种培养基移放在超净工作台上,并把北虫草母种和接种勾、酒精灯、酒精棉球等接种物品也放在超净工作台上,工作服挂在接种室消毒。
然后在接种室点燃烟雾剂(用臭氧消毒器更好),立即关闭所有门窗密闭消毒同时打开紫外线灯。
待40min后,将烟雾放净,关闭紫外线灯,接种人员就可进行接种。
接种的方法是穿好工作服,打开超净工作台风机,点燃酒精灯,左手拿着母种试管对准火焰口,右手拿着铁勾在酒精灯火焰消毒3-5秒种后立即伸进母种试管内把菌种分成5-7段,再用左手迅速将纱布瓶盖打开,右手立即把一段菌块勾入瓶内(每瓶接入5-6片0.5平方厘米大小菌种)速将瓶盖按原样盖紧。
当北虫草菌种接好后,移入22-24℃恒温培养室,摇床震荡发菌培养。
摇床转速140r/min,经过4-6天的发菌培养,经检查北虫草菌液的颜色开始清亮、菌球密集,瓶口闻有很浓的北虫草气味,可判断为菌种优良。
液体菌种的检验和使用方法液体菌种的检验和使用方法1.感官检查?可采用“看、旋、嗅”的步骤进行检查。
看:将样品静置桌上观察。
一看菌液颜色和透明度,正常发酵醪液呈黄色或黄褐色,清澈透明,菌丝颜色因菌种而异,老化后颜色变深;染杂菌的醪液则混浊不透明。
二看菌丝形态和大小,正常的菌丝大小一致,呈球状、片状、絮状或棒状,菌丝粗壮,线条分明;而染杂菌后,菌丝纤细,轮廓不清。
三看上清液与沉淀的比例,菌丝体占比例越大越好,较好的液体菌种,在瓶中所占比例可达80%左右。
四看pH值指标是否变色,在培养液中加入甲基红或复合指标剂,经3~5天颜色改变,说明培养液pH值到达4.0左右,为发酵点;如果在24小时内即变色,说明因杂菌快速生长而使培养液酸度剧变。
五看有无酵母线,如果在培养液与空气交界处的瓶壁上有灰色条状附着物,说明为酵母菌污染所致,此称为酵母线。
旋:手提样品瓶轻轻旋转一下,观其菌丝体的特点。
醪液的粘稠度高,说明菌种性能好;稀薄者表明菌球少,不宜使用。
菌丝的悬浮力好,放置5分钟不沉淀,表明菌种生长力强;反之,如果菌丝极易沉淀,说明菌丝已老化或死亡。
再次观其菌丝状态,大小不一,毛刺明显,表明是供氧不足;如果菌球缩小且光滑,或菌丝纤细并有自溶现象,说明污染了杂菌。
嗅:在旋转样品后,打开瓶盖嗅气味。
培养好的优质液体菌种,均具有芳香气味;而染杂菌的培养液则散发出酸、甜、霉、臭等各种异味。
2.取样测验?可取液体菌种进行称重检查和粘度检查;生长力测定和出菇试验;化学检查,包括测pH值、糖含量和氧含量等;显微检查,包括细胞分裂状态观察、普通染色和特殊染色等。
三、液体菌种的使用方法液体菌种可作原种使用,也可作栽培使用。
1.作原种?取一支100ml。
兽用注射器,去掉针尖,换一根内径1mm~2mm,长100mm~120mm的不锈钢钢管,制成一个菌种接种器。
使用前,洗净接种器并用纱布包好,经高压蒸汽灭菌,冷却后抽取液体菌种即可进行接种。
食用菌液体菌种培养与应用技术要点作者:来源:《世界热带农业信息》2024年第05期1食用菌产业发展演变食用菌栽培起始于800多年前浙江省庆元县“剁花法”原生态栽培,当时菌种靠食用菌成熟后的孢子随空气流动进行传播,其“林-菇共育系统”2022年11月4日正式入选全球重要农业文化遗产(GIAHS)保护名录。
到后来发展到“段木栽培”、“代料栽培”,就开始应用培养基培养固体菌种接种到段木上或栽培料上进行栽培,进一步提升了食用菌栽培效益和效率。
随着食用菌需求量的增加,食用菌栽培从小规模种植发展到工业化、规模化生产,食用菌菌种也随之从最早的孢子自然传播方式上升到固体菌种接种,进而发展到工厂化液体菌种生产,节省了菌种培养时间和空间,提高了食用菌栽培效率和效益。
本文主要介绍食用菌液体菌种培养与应用技术要点,以供参考。
2液体菌种与固体菌种的对比优势液体菌种是在液体培养基中利用生物发酵培育出来的食用菌菌种。
与固体菌种相比,液体菌种具有三大优势:2.1液体菌种培养原材料成本低2.1.1原材料成本低液体菌种培养基主要原料为淀粉、蛋白质、维生素等物质,相对固体菌种原料,价格较低且容易采购,如玉米淀粉,生产范围广,随处都可以就地取材,不单价格廉价而且质量稳定,既可降低生产成本又能提高培养基营养质量,培养优质菌种,降低接种时菌种的营养风险。
2.1.2贮藏空间小以杏鲍菇为例,液体菌种一般0.1 L就可以接种1个菌包,菌种贮存用空间较小,与固体菌种相比,可以节省菌种贮存空间,降低生产成本。
2.1.3生长快、培养时间短液体菌种从试管种(母种)到栽培种的培养时间一般只需要7~10 d,既缩短了菌种的培养时间,为食用菌栽培生产留足更多时间;另一方面可以减少菌种培养人工成本。
2.2液体菌种培养期间生长快液体菌种从试管种取出到三角瓶中培养最多只需要7 h就可以转入发酵罐中进行大规模培养,在发酵罐中正常情况一般只需要8~9 d,最多10 d就完全可以接入栽培料;与固体菌种相比,可以节省20 d左右的培养时间[1]。
菌液实验方案菌液实验是一种常用于微生物学和生化学等领域的实验方法,它通常用于研究不同种类的细菌、酵母和真菌等微生物在不同生长条件下的生长状况、代谢能力和生理特性等,从而帮助科学家们更好地理解和掌握微生物的生命活动。
菌种的选取在进行菌液实验之前,首先要准备好适当的菌种。
通常情况下,我们可以从标准菌种库中选取并购买到我们需要的菌种,也可以自己进行分离和培养。
为了获得准确的实验结果,选取菌种时应该注意以下几点:•细菌种类:在选择菌种时,应根据实验目的和研究对象的特点来选取适当的细菌种类。
例如,在研究某一类药物对某一种致病细菌的抑制作用时,我们应该选择与这种细菌相关的菌种进行实验。
•菌种的纯度:在进行菌液实验时,必须确保选用的菌种是纯净的,即只包含与研究对象有关的菌群,不受其他细菌或微生物的影响。
因此,在选取菌种时要注意检查其纯化程度和生长状态。
•菌株来源:菌液实验中需要使用细菌等微生物,并且这些微生物在不同来源下会表现出不同的特性。
因此,在进行实验前要了解选取的菌株的来源和特点,以便得到准确的实验结果。
菌液的制备液体培养基的制备菌液实验中,液体培养基是细菌或其他微生物生长及代谢所必需的基础。
在制备培养基时应注意以下几点:•培养基的配方:在制备培养基时,应根据所选取的菌种及研究对象的不同特性,合理选择培养基的配方。
通常包括碳源、氮源、矿物质盐和其他辅助因子等成分。
•培养基的pH值:不同的微生物对酸碱度有不同的适应能力,因此制备培养基时应根据不同的菌种和研究需求,调节培养基的pH值。
•培养基的消毒:在制备培养基的过程中,必须注意对培养基进行消毒处理,以避免细菌和其他微生物的污染。
菌液的制备步骤制备菌液的基本步骤如下:1.在清洁的实验台上,用燃烧灯将培养瓶口进行消毒处理。
2.向培养瓶中加入一定量的液体培养基,并将其压密后盖上气密盖,以避免细菌的氧化作用。
3.将培养瓶置于摇床或旋转器上,调节温度和湿度,以适应所选菌种的生长条件。
简述发酵罐连续生产液体菌种工艺连续发酵使用的发酵罐一般有电控箱,空气压缩机,煮料罐(带夹层),发酵罐(带夹层),过滤器(两套,四级),降温器,热交换器,接种枪及(空气、蒸汽、过料、出种)管道连接组成,各个管道一般用橡胶管、硅胶管、或不锈钢管连接,发酵罐大小一般为煮料罐的3倍,其使用制种技术过程以杏鲍菇为例介绍如下:1、空消1.1、洗罐新购的发酵罐或者使用过的发酵罐,在生产之前,都必须进行彻底的清洗后方可使用。
用过的发酵罐在罐体的内壁和管内所有接触液体菌种的管件表面都有可能粘附污物,洗罐的目的就是清除罐内的污垢和菌苔及培养料的残余物,疏通进气口,排料口等。
1.2、利用高温高压蒸汽进行发酵系统灭菌1.2.1、清洗干净后将其密闭完成向煮料罐加水至总容积的70%-80%,打开电源开关,将温度设定到121度,在发酵罐内加水至总容积的40%,将温度设定到118-120度。
1.2.2、达到设定温度后,关闭进入二级过滤器的空气总阀门,打开蒸汽总阀门,让蒸汽依次进入2、3、4级过滤器,最后进入发酵罐,对过滤器及无菌空气管道等部位进行灭菌,这时每隔五分钟左右排一次过滤器下面的冷凝水。
1.2.3、30分钟后,将煮料罐出料口阀门打开少许将其灭菌。
然后,打开进入过料管道的蒸汽总阀门,用蒸汽将过料管道灭菌,40分钟后(总时间)关闭进入二级过滤器的蒸汽阀门,打开空气总阀门,并将发酵罐的进气阀门关闭,打开空气压缩机,通入无菌空气吹干滤芯。
1.2.4、然后,打开接种枪开关,将发酵罐出种口阀门打开少许,对其预热,然后打开进入接种枪管道的蒸汽阀门,用蒸汽对出种管道及接种枪进行灭菌,30分钟后关闭接种枪开关,用75%酒精袋密闭备用,后将灌顶接种口及呼吸器打开少许对其灭菌30分钟后关闭灌顶所有阀门,用75%酒精棉球密封接种口。
1.2.5、最后,将罐内高温高压水从排污口,取样口不少于30分钟排出,当罐内压力低于0.05MPa后,打开进气阀门,通入无菌空气待罐体吹凉后保压备用。
液体菌种的制作技术及其应用韩羽翔裴华海南医学院理学院海南医学院热带医学与检验学院在食用菌生产中,成败的关键是菌种;生产中投资成本最大也是菌种。
菌种的纯度、活力、培育时间和抵抗杂菌的能力决定了生产的成败。
要实现高质量、工厂化、标准化、全年候生产,与国际市场接轨,提高栽培效益,就必须解决目前菌种生产的落后方式。
食用菌液体菌种能替代传统菌种进行生产,而且能提高食用菌的产量和质量, 易于实现工业化、标准化生产[4]。
本文就食用菌液体菌种培养技术做一综述。
1.液体菌种相对传统的固体菌种的优势所在液体菌种相对传统的固体菌种有诸多优势:菌种培养时间短,以平菇为例,1级~3级菌种的培养时间分别为7天、23天和25天,总计需要60天左右,液体菌种仅需10天左右,即使将设备排空后的清洗、检修等包括在内,也不会超过15天;污染易被检出,液体菌种培养期间设备完全处于密封状态,一旦发生污染,其气味,色泽都会发生变化,生产期间易被检出,所以相对固体菌种而言发生污染和隐性污染的概率更低,产出的菌种纯度更高;由于液体菌种培养时间短,菌龄高度一致,播种后菌种萌发一致,不存在“老幼不齐”的现象;液体菌种接于固体料上定植快,液体菌种具有流动性、易分散、菌丝片断多、菌丝活力强等特点,接入固体培养基中后, 分布于整个培养基表面。
因此,菌丝萌发快, 吃料也快,萌发点多, 分散度也较大, 菌丝在培养料中呈立体生长模式。
研究表明,在适宜的温度下, 500ml 的原种瓶装干料150g, 接入液体菌种后5~18天菌丝可长满瓶, 比接固体菌种可提前天5 ~7 天。
另外,在高温制种季节, 用液体菌种接入瓶装料其污染率可控制在1%以下, 接入袋装料其污染率可控制在4%以下;有研究表明使用食用菌液体菌种跟传统的固体菌种相比,用液体菌种栽培的产量及生物转化率是常规栽培的4倍多, 差异极为显著。
综上各个优点液体菌种更适合于大规模生产使用食用菌液体菌种也易于实现食用菌的工业化和标准化生产, 从而从根本上改变过去手工作坊式的生产和从试管→瓶子→小袋→大袋的落后的生产方式,实现一条新型的食用菌菌种生产工艺。
阿魏菇液体菌种培养的设计报告技术路线及实施方案阿魏菇(pleurotus ferulae lanzi)又名阿魏蘑、阿魏侧耳、白灵菇等,是一种食药两用大型真菌,它因寄生或腐生在一种药用植物阿魏上而得名。
以前报道阿魏菇的栽培是固体菌种栽培,未见有液体菌种栽培的报道。
与固体菌种相比,液体菌种具有生产周期短、菌丝发育点多、接种后菌丝蔓延迅速、菌龄整齐等优点。
在一定条件下,用于菌种袋、栽培袋的接种及多糖的提取可以明显缩短生产周期,因此液体菌种的培养具有广阔的发展前景。
本研究拟对阿魏菇液体菌种培养进行试验,具体试验方案如下:一、设计报告:采用不同的液体培养基配方来观察菌丝体的生长情况、菌球出现的时间以及多糖的得率。
其中培养基的配方主要通过提供不同的原料来做碳源,氮源以及不同的ph值。
筛选出最佳培养基并对发酵工艺条件优化,并且将液体菌种应用于栽培实验,观察出菇情况。
二、技术路线:获得菌种(单孢分离,组织分离)→扩大培养成斜面菌种→摇瓶培养(筛选培养基)→发酵罐深层培养(发酵工艺条件优化)→一部分接种于菌袋进行出菇试验,另一部分菌丝体和发酵液分离多糖的提取分离。
三、实施方案:试验时间安排在2009.11——2010.12。
1.斜面菌种:pda培养基,用于保藏菌种。
2.一级种子培养:用摇瓶培养。
确定不同的碳源、氮源和ph等,通过正交实验筛选出最佳培养基3.二级种子培养:在一级种子基础上进一步扩大培养,用发酵罐培养。
确定培养基的配方,以及发酵参数如温度、转速、ph值等及接种量、培养时间等对种子质量的影响,完成发酵工艺条件优化,确定放罐标准。
4.栽培出菇试验:用所得二级液体菌种接种到栽培袋上,与固体菌种相比较进行出菇试验,观察出菇时间、产量等因素。
5.一部分液体菌种用来分离提取多糖。
篇二:液体菌种制备流程及发展现状液体菌种发展现状食用菌菌种液体发酵技术从60年代开始便有人开始探索,至80年代开始用于生产实践,到目前为止,国内主要还是使用的在位灭菌气升式发酵罐,我们称之为第一代食用菌液体菌种发酵设备。
几年前由于食用菌工厂化栽培的发展,一些有实力的厂家从韩国引进食用菌菌种液体发酵技术,这是一种将发酵罐整体放置于大型灭菌器中灭菌,然后再冷却并移出灭菌器在无菌程度很高的环境中接种、培养的方法,我们称之为第二代食用菌液体菌种发酵设备。
第一代食用菌液体菌种发酵设备目前推广的很多,尝试的很多,但几乎没有能成功的应用于连续的工厂化生产中者。
究其原因,主要是可靠性差。
食用菌工厂化栽培具有连续性,如果菌种出现污染就会使工厂停工,灭菌后的栽培料如果不能及时接种,也会增加污染的风险,而且几乎没有什么可靠的补救措施,唯一的办法就是尽可能提高液体菌种发酵成功的可靠性从而把液体菌种污染率降低到2%以下,并且还得有万一出现菌种污染后的应急措施。
然而目前第一代食用菌液体菌种发酵设备的管道、阀门、安全阀、压力表、过滤器、取样口都易存在灭菌死角,而且操作过程十分复杂,稍有不慎,会灭菌不彻底而前功尽弃,用其进行食用菌菌种液体发酵,其成功率远远达不到工厂化连续生产的要求,甚至很多根本就不能成功发酵出纯菌种来,只能用添加抑菌剂的办法来获得纯度并不高的食用菌液体菌种,而且这种方法也很不稳定。
第二代食用菌菌种液体发酵技术可靠性提高了,完全可以用于食用菌工厂化连续栽培中,但设备比较贵,使用起来也比较麻烦,对无菌条件要求比较高,难以走进中小食用菌企业。
食用菌液体菌种发酵设备及与之相配套的技术,具有可靠性高,操作简单,对环境的无菌条件要求不高,培养周期短,使用成本低,用液体菌种接种栽培瓶/袋时接种方便,比较容易实现自动化,安全性高等特点。
其优势主要表现在一下几个方面:1、可靠性高:我们的设备可使食用菌液体菌种的产出成功率提高到98%以上。
3、无菌条件要求不高:不需要万级无菌,更不需要百级无菌,只需保持场地无明显粉尘即可。
4、使用成本低。
每罐成本(含原料、能耗、工资)不超过100元,可接种10000瓶/袋。
5、培养周期短:多数菌种只需4-5天。
篇三:液体菌种的制作难点大连富森科技有限公司液体菌种培训教材(节选五) 2010年4月10日(五)液体菌种的制作难点1.试管的选择:生产液体菌种时,试管的选择非常重要,有好多的人就是在试管的选择上出问题,总是做不出专用母种。
在生产上,我们要求试管一是自己新生产的,再一个就是存放时间短的。
长期存放的、上面长霉菌的,一定不能用。
2.三角瓶专用母种的制作:三角瓶专用母种其实很好做,就是有些人不求甚解,以为接上种就可以,其实这样是永远都不会生产出三角瓶的。
这里面的操作细节一定要掌握。
3.发酵罐的制作细节:发酵罐其实很好操作,只是做为一个最后的环节,它要求的是细节。
操作规程上说的那些是对的,只是要想做得好,最好是学习一下。
由老师亲自做一次,注意哪个地方应该特别小心,也就是细节要特别小心,可保成功率。
4.接种技术:接种技术对于固体来说应该没什么的,可以在液体菌种上,是有说法的。
特别是一些特别品种,在接种时应该特别注意。
5.栽培料的含水量和接种量的控制:这一项没做好,是好多人做液体菌种失败的一个重要原因。
需要一些计算公式和方法。
液体菌种制作与士兵用枪射击是一个道理,其实一般的人也会射击,可是要想一枪毙命,正中眉心,就不是一般人能做到的了,要经过系统的学习和训练。
理论上说的是一回事,实际上做的又是一回事。
正常情况下,经过系统培训的人,在做液体菌种时,成功率应该在95%以上。
能熟练掌握试管的制作、搅拌器和摇瓶机的液体菌种制作技术,能自己一个人操作液体菌种发酵罐、懂得不同品种的接种技术。
经常做的人,应该在98%以上,甚至更高。
这里面除了技术外,还有设备的问题。
(未完待续)大连富森科技有限公司液体菌种培训教材(节选四) 2010年4月10日三、液体菌种的制作过程及方法(一)试管种的生产:液体菌种对试管的纯度要求很高。
所以要自己会做试管种。
试管种的制作其实很简单,在我们要用种的前三个月,到市场上去看哪个菇符合要求,就买回来(也可以用自己保存的试管种均可)。
在接种箱内进行常规气雾(最好是高锰酸钾和甲醛)消毒,30分钟后,开始分离。
分离时先将用具消毒,然后用手把菇体分开,用镊子夹一小块菇肉(不同的菇取种位置不同),放到试管里。
塞上棉塞就行了。
这样的成功率一般在80%以上。
在菌丝生长阶段,要经常观察菌丝的生长情况。
对菌丝生长不整齐的,有污染的,全部淘汰。
只留下没什么问题的,长满试管后,再取特定部位进行转管(见实操)。
菌丝长到**cm时,从菌丝生长的尖端提取一小块,一般地认为,取****大小就可以了,不过从试验上看,提得**效果越好。
平菇一般提二次就可以了,提到五次,基本上与脱毒菌种效果差不多。
别的品种要多些,最多不超过五次,都可以达到提纯的目的。
(二)三角瓶专用母种生产:专用母种分固体和液体两种。
从生产技术上看,液体专用母种要难一些,是用电磁搅拌器或摇瓶机进行生产。
整个过程要4-7天时间,生产的液体种稍经加工就可以直接使用。
液体菌种专用母种的配方就是用pda加富配方去掉琼脂。
用三角瓶盛装,在高压锅里121℃保持30分钟就行了。
待三角瓶的温度降到30℃以下时,在超净工作台或接种箱内进行接种。
马上就可以进行搅拌或摇瓶了。
固体种生产时间要长些,保存的时间也长,而且方便运输。
固体专用母种一般污染要严重一些,有的人污染率要达到20-30左右。
固体专用母种我们现在一般不用,污染率太高,而且不好发现,最糟糕的是容易堵枪。
配方是把木屑过20-40目的筛,用去掉琼脂的pda配方拌料,在121℃高压下灭菌2小时,待温度下降到30度以下时,在超净工作台或接种箱内进行常规接种。
一般20多天可以长好。
具有运输和贮存方便等特点。
搅拌器是应用磁性材料n、s极的异性吸引,同性相斥的原理制成的。
工作时,机械的磁转子转动时,瓶内的磁转子在瓶内跟着转,带动液体旋转,为液体供氧。
液体菌种培养基本条件是有一定的氧气、菌丝、水份和营养,几个因素溶合才能使菌丝快速繁殖。
由于转子的高速旋转,产生的菌丝被剪切成菌丝片段。
摇瓶机就是通过摇动液体,使空气与水溶合,增加液体中的氧气含量。
通过摇动,液体在瓶内翻滚,使菌丝滚动成菌球。
我们用液体专用母种。
(三)发酵罐生产生产时要先进行培养料的配制。
配料时先将土豆去皮切片,与麸皮混合后用不锈钢锅煮熟并取汁,再将辅料kh2po4、mgso4等溶入,混匀后装入罐中,也可将免煮培养基或公司提供的专用培养基直接加入到罐内加热灭菌,125℃维持40分钟到一小时进行灭菌,灭菌结束后用冷水冷却至30℃以下。
将并瓶后的三角瓶专用种在火焰的保护下接到罐内进行培养,培养时根据不同的菌种,设定适宜的温度。
培养期间应注意观察菌球出现的时间、颜色和排出气体的气味等,压力控制在**mpa。
如遇到停电,关闭排气阀来保持罐中处于正压状态。
来电后重新启动,并打开排气阀继续培养。
培养过程中,可随时采样分析,几天后待菌球密度符合要求时(从视镜或排料观察),即可接种。
(四)接种液体菌种生产结束后,在检测合格的情况下,就要进行接种。
接种前要先将接种枪、连接管道用棉花塞上,放到高压锅里进行灭菌。
121℃20分钟就行了。
与此同时,将接种机打开工作。
在接种时,前几枪不要接到栽培袋里,应该先喷到量筒里,以检查接种量的大小。
全部接种过程都要在接种机下进行。
液体菌种培训教材(节选三)2010年4月10日(三)液体菌种的制作方法液体菌种的生产方式可分为电磁搅拌法、摇瓶机法、简易深层发酵(吹氧)法、发酵罐法。
1.电磁搅拌法比较简单,投资也比较少,200元钱的投资就可进行生产。
从接种到菌丝长好要7天时间。
但也存在生产量小的缺点,所以生产中常用几个搅拌器同时生产来加以解决。
也可以用扩张法来加以解决。
主要生产过程:在无菌条件下将试管种接到三角瓶里,搅拌4-7天后得到大量的菌种。
2.摇瓶机法也是一种比较简单的方法,接种简单,管理方便,生产量根据机器的设定而不同。
投资要1000-3000元钱。
但也存在噪音大等缺点。
生产过程:在无菌条件下将试管种接到瓶内,摇动。
一般7天左右会出现大大量的菌球。
3.简易深层发酵(吹氧)法相对来说比较麻烦一些,主要是器材的联接要在无菌状态下进行,如果哪个环节出现问题,不能保证成功率。
投资也要3000多元。
生产过程:在无菌条件下将试管种接到容器内,通气培养7天,得到大量的菌球。
4.发酵罐法是目前要求最高的一种,涉及到好多方面的知识,很难自学成才,而且投资也高,一般要10000元以上。
如果你的生产量大或是菌种场,建议你还是用发酵罐比较好。
因为生产量大,很快就会把你的投资收回来,而且可以减轻你很多工作量。
发酵罐液体菌种的生产主要过程:专用母种的生产,时间在一周之内。