实验三 栽培种制作与栽培管理
1、实验的目的和要求
学会平菇栽培袋的的制作方法，掌握其出菇管理技术。
2、实验内容或原理
（1）平菇栽培袋制作
工艺流程：栽培原料配制
装袋 灭菌 冷却 搬入接种室
接种室消毒 接种 适温培养菌丝
（2）出菇管理
控温、调温、通风、采收、补水
3、仪器或试剂等
仪器与设备：接种箱、高压灭菌锅或常压灭菌灶、接种铲、酒精灯、栽培袋、纤维绳、台秤、铁铲、水桶。
试剂：75%酒精、气雾消毒剂、棉籽壳、米糠或麸皮、麸皮、石膏粉或过磷酸钙、蔗糖等。
4、实验步骤
a.配方：本实验以棉籽壳为主料培养基为例。
配方一：稻草粉78％、米糠或麸皮20％、石膏粉1％、糖1％；
配方二：玉米芯78%，麦麸或米糠20%，过磷酸钙1%，蔗糖1%。
b.拌料 先根据要做原种的数量，算出各种原料的用量，然后称量、混合，加水拌料。混给予时，先将稻草粉或玉米芯与玫麸混合在一起，过磷酸钙和糖混溶在拌料用的水中。拌料时，边加水边搅拌，边测试含水量。
c.含水量的测定 拌好料后，用手抓一把培养料，捏在手中紧握，手指缝中有水印但以水不往下滴为适，此时含水量为62%-64%。
d.装袋 将拌好的培养料装入塑料袋中央，边装边压实（但不得过紧），一直装到2/3长为宜。
e.套环 用双套环或纤维绳扎实袋口，准备灭菌。 f.灭菌 灭菌方法同原种栽培种的灭菌方法。
g.接种 挑取栽培种培养基一小块，置于栽培袋中，随即按原样封口。
h.菌丝培养 接种后的栽培袋，置于培养室培养。3-5天后菌丝即可恢复生长。5-7天菌丝开始伸入培养基内。当菌丝长满袋后，移入菇房。
i.出菇管理 控温、调温、通风、采收、补水
j. 观察记载
5．考核要求
掌握平菇栽培袋的制作技术，要求制袋成功率在95%以上。根据提交的实验报告、实验过程与结果，评分方式为优、良、中、及格、不及格。
- 1 - 秀珍菇液体菌种制备技术
一、工艺流程
母种→原种（液体摇瓶）→生产种（罐体发酵）→料棒接种
二、母种的制备
1、母种培养基配方
马铃薯（去皮）20％，葡萄糖2％，琼脂2％，水1000毫升，pH值5.5～6。
2、母种的制备及注意事项
按配方准确称取原料，加热煮沸最后定容，分装试管，装入量约为试管长度的1／4～1／5，塞好棉塞。使用高压灭菌锅灭菌，在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌半小时，注意一定要放净高压灭菌锅内的冷空气。灭菌后，待培养基温度下降至60℃时，将成把的试管摆成斜面。注意，不要让培养基粘湿棉塞。
要严格按照无菌操作规程进行接种，然后置于恒温箱中25℃左右恒温培养10～15天。
三、原种的制备
1、原种培养基配方
马铃薯（去皮）２０％、麦麸３％、葡萄糖２％、蛋白胨３‰、磷酸二氢钾２‰、硫酸镁１‰。
2、原种的制备及注意事项
马铃薯去皮切片后与麦麸一起煮沸20分钟，过滤定容，加入其它原料，全部溶解后装入三角瓶。三角瓶在使用前除 - 2 - 清洗之外，还要进行空灭，灭菌方法与常规灭菌试管培养基相同。每个瓶中放入5～10粒玻璃球（直径0.5cm），用棉塞塞紧瓶口，再用牛皮纸包裹后扎紧。使用高压灭菌锅灭菌，在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌45分钟。
冷却后进行无菌接种，然后置于25℃恒温培养箱中静置培养72小时。摇床培养时，温度25℃，转速140转/分钟，培养时间72～96小时。
四、生产种的制备
1、生产种培养基配方
马铃薯（去皮）２０％、麦麸２％、蛋白胨３‰、葡萄糖２％、磷酸二氢钾１‰、硫酸镁0.5‰、石膏0.5‰、琼脂２～３ｇ、酵母膏0.5‰、消泡剂１‰。
2、生产种的制备
（1）清洗罐体
发酵罐在每次使用后都必须进行彻底的清洗，去除罐内残存的菌球、菌块料液等杂物，保证罐内洁净。
（2）配制原料
按照生产种培养基配方准确称取各种原料。马铃薯去皮切片后与麦麸一起煮沸20分钟，过滤定容，再加入其它原料及消泡剂。
香菇菌种制作方法视频
在香菇整个生产过程中,，主要包括两个阶段，其中第一阶段是培养菌种。下面Sara小编给大家分享了香菇菌种制作方法视频，一起来了解一下吧!
香菇菌种制作方法视频
香菇菌种的制备
在香菇整个生产过程中，主要包括两个阶段，第一阶段是培养菌种，第二阶段是用培养好的菌种进行栽培。菌种制作可分为三个步骤：第一是培养母种(亦称一级种或试管种)用孢子分离。组织分离或基质内菌丝分离等方法都可获得母种。第二是培养原种(亦称二级种)，利用母种的菌丝体接入木屑或谷粒等培养基中，扩大繁殖培养成原种。第三是培养栽培种(亦称三级种或生产种)，利用原种的菌丝体，再扩大繁殖1次，即制成栽培种，它可以直接投入生产。这样经过母种→原种→栽培种的不断扩大繁殖后，食用菌菌丝体的数量得到大量的增加。与此同时，菌丝也越来越粗壮，分解有机质的能力也越来越强，利用这种菌丝体投入生产，则能生长出健壮的子实体而取得高产。
优质的香菇菌种是获得高产、高经济效益的有力保证。菌种制备可经过纯种分离、试验→母种制备→原种制备→栽培种制备→菌种保存等流程。
一、纯种分离及出菇试验
选择出菇早、出菇均匀、成丛的、朵形好、粗壮肥大、柄短、色泽好、八成成熟的菇体为种菇。用孢子分离法或组织分离法或菇木分离法，用马铃薯葡萄糖琼脂或玉米粉琼脂培养基进行纯种分离，在摄氏22—26度环境中培养，经10—20天长成菌落，挑取色白、健壮、无病虫害菌丝转入斜面培养。经2—3次纯培养后，并经出菇试验，选取优良菌株用作制母种。
经过组培或孢子培养制成原始母种(保藏种)由原始母种转扩，即为生产母种。
二、母种制备 取经出菇试验的纯种，用马铃薯葡萄糖琼脂在摄氏24—26度培养。母种可转3—4代扩大培养。
1、培养基配方
生产母种通常用PDA培养基，选用180×18毫米试管，制成斜面试管接种而成。PDA培养基配方：
土豆(去皮、去芽) 200克(也可用淀粉，用量为6克/1000毫升)
羊肚菌菌种生产技术规程
1范围
本标准规定了羊肚菌菌种生产的一般要求和母种、原种、栽培种生产管理与档案记录等要求。
本标准适用于XX省羊肚菌制种生产。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T4789.28食品卫生微生物学检验
GB5749生活饮用水卫生标准
GB/T12728食用菌术语
NY/T528食用菌菌种生产技术规程
NY/T1742食用菌菌种通用技术要求
NY/T1846食用菌菌种检验规程
NY/T1935食用菌栽培基质质量安全要求
SN/T1538.1培养基制备指南
SN/T2632微生物菌种常规保藏技术规程
3术语与定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
羔羊早期断奶
羔羊30日龄停止母乳，使用羔羊代乳料代替母乳饲喂羔羊到90日龄。
3.2
菌种Bacterialspecies
生长在适宜基质上具有产生子实体的菌丝培养物，包括母种、原种和栽培种。
3.3
母种Stockculture
经各种方法选育得到的具有产生子实体的菌丝体纯培养物及其继代培养物,也称一级种、试管种。原种Motherspawn
由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物，也称二级种。
3.5
栽培种Plantingspawn
由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物，也称三级种，栽培种只能用于栽培、不可再次扩大繁殖菌种。
4一般要求
4.1 从业人员要求
4.1.1 应有与菌种生产级别相适应的2名以上（含2名）生产技术人员和1名以上（含1名）检验人员。
4.1.2 生产技术人员和检验人员经省级人民政府农业行政主管部门考核合格。检验人员应具有相关专业大专以上文化水平或者具有中级以上专业技术职称。
4.2 生产经营单位要求
4.2.1从事菌种生产经营主体，应当取得《食用菌菌种生产经营许可证》。
