肝细胞生长因子预处理对过氧化氢诱导大鼠神经干细胞凋亡的保护作用

桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的：研究桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的保护作用。方法：SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液（生药1.75

g·mL-1），每天2次，按10 mL·kg-1连续给药3 d后，制备桃红四物汤含药血清。MTT法考察桃红四物汤含药血清（终浓度为5%，10%，15%）预处理对H2O2诱导细胞活力减少的作用；显微镜观察细胞形态学变化；以丙二醛（MDA）和乳酸脱氢酶（LDH）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及AO/EB染色考察桃红四物汤含药血清对HUVECs凋亡及抗氧化能力的影响；Western blot法检测细胞Caspase3的表达。结果：与空白血清对照组比较，经400 μmol·L-1H2O2刺激后细胞活性显著降低，含药血清组可显著提高SOD活力、降低MDA和LDH含量，并抑制Caspase3表达。AO/EB染色及相差倒置显微镜也观察到桃红四物汤含药血清能降低H2O2诱导的细胞凋亡。结论：桃红四物汤含药血清对H2O2诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用。

标签： 桃红四物汤；含药血清；人脐静脉内皮细胞；过氧化氢

心血管疾病同血管内皮细胞损伤有着密切的关系。心血管疾病引起的血瘀证导致了炎症反应、血管内皮细胞改变、血脂改变、血栓形成，进而导致了动脉粥样硬化形成，进一步损伤血管。血管内皮具有防止血细胞黏附，阻止血小板聚集，合成释放促凝血与抗凝血因子从而协调凝血与抗凝血平衡，合成释放血管舒张因子和收缩因子[1]。导致内皮细胞损伤的主要物质是氧自由基，机体氧自由基的大量产生，清除能力降低，打破了机体氧化、抗氧化能力的平衡，产生氧化应激。氧化应激诱导内皮细胞损伤的机制主要为氧自由基引起细胞膜脂质过氧化、蛋白质变性和核酸变性，导致不可逆损伤[2]。

桃红四物汤由四物汤加桃仁、红花组成，为血瘀证尤其是产后血瘀诸症治疗常用方、祛瘀生新的代表方[3]。前期研究表明桃红四物汤具有抗血栓、抑制血小板活化等作用。为了进一步探讨桃红四物汤对血瘀证作用的分子机制，本课题采用体外培养人脐静脉内皮细胞H2O2损伤模型，观察桃红四物汤含药血清对血管内皮细胞的保护作用。

石杉碱甲的抗炎作用及其对大鼠神经干细胞的保护作用

朱宁;林继宗;陈庆状;韦美丹;王勇

【摘 要】AIM:To explore the anti-inflammatory effect of huperzine A

(HupA) and its neuroprotective effect on rat neural stem cells

(NSCs).METHODS:The microglia and NSCs were isolated from neonatal rat

hippocampal tissues and co-cultured in a Transwell system.The cells were

divided into 3 groups:control group,amyloid beta-peptide (Aβ) group and

HupA group.The microglia layer in Aβ group was treated with Aβ1-42(10

pmol/L),while that in HupA group was pretreated with HupA (1 μmol/L)

before Aβ142 stimulation.The culture supernatant levels of inflammatory

mediator,including interleukin 6 (IL-6),tumor necrosis factor α (TNF-α) and

macrophage inflammatory protein 1 α (MIP-1 α),were detected by

LiquiChip technique.The apoptosis of NSCs was determined by flow

cytometry and Western blotting.RESULTS:The microglia secreted a large

实用医学杂志２００９年第２５卷第１期　

・实验研究・　

神经生长因子和碱性成纤维细胞生长因子对缺氧缺血　

脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞的影响　

龙琦尹晓娟封志纯　

摘要　目的：探讨外源性碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）和神经生长因子（ＮＧＦ）联合用药对大鼠缺氧缺　血脑损伤（ＨＩＢＤ）的治疗作用．为探索治疗早产儿脑损伤的有效方法提供科学的实验依据和新的思路。方法：将５Ｏ　只新生７　ｄ龄ＳＤ大鼠随机分成假手术组（　＝ｌＯ）和ＨＩＢＤ模型组（ＨＩ组）（ｎ：４０）。ＨＩ组又根据Ａ药（ＮＧＦ）、Ｂ药　（ｂＦＧＦ）两因素，用药、不用药两个水平，交叉分成４组，分别为生理盐水对照组（ｎ＝１０）、ＮＧＦ治疗组ｎ：１０）、　ｂＦＧＦ治疗组（ｎ＝１０）和ＮＧＦ＋ｂＦＧＦ联合治疗组（ｎ＝１０）　分别观察各组大鼠脑组织大体改变及免疫组化改变，分　析两药对于ＨＩＢＤ神经元数目的影响。结果：各组均存在不同程度的脑萎缩，生理盐水对照组最严重，与其他各组　相比．差异有显著性．．免疫组化结果显示，假手术组和生理盐水对照组海马ＣＡ１区的ｎｅｓｔｉｎ阳性细胞数多于其他　各组，其差异有显著性。结论：（１）ＮＧＦ、ｂＦＧＦ均可提高ＨＩＢＤ后海马区神经元的数量；（２）ＮＧＦ、ｂＦＧＦ的联合应用　可提高对ＨＩＢＤ后海马区神经元的保护作用　关键词缺氧缺血，脑；　神经元：　成纤维细胞生长因子２；　神经生长因子；　大鼠，Ｓｐｒａｇｕｅ—Ｄａｗｌｅｙ　

Ｔｈｅ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ　ｎｅｒｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ａｎｄ　ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｏｎ　ｈｙｐｏｘｉｃ－ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ　ｉｎ　ｎｅｏｎａｔａｌ　ｒａｔｓ　ＬＯＮＧ　Ｑｉ　，ｙ，ⅣＸｉａｏ－ｊｕａｎ，ＦＥＮＧ　Ｚｈｉ—ｃｈｕｎ．　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，Ｚｈｕｊｉａｎｇ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｍｅｄｉｃ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　５１０２８２，Ｃｈｉｎａ　

石杉碱甲的抗炎作用及其对大鼠神经干细胞的保护作用

朱宁;林继宗;陈庆状;韦美丹;王勇

【期刊名称】《中国病理生理杂志》

【年(卷),期】2013(029)007

【摘 要】目的:探讨石杉碱甲(HupA)的抗炎作用及其对大鼠神经干细胞的保护作用.方法:取新生SD大鼠海马组织,分离并培养神经干细胞和小胶质细胞,建立Transwell共培养体系.将细胞分成3组:空白对照组、淀粉样β肽(Aβ)组和HupA组.Aβ组小胶质细胞层中加入终浓度为10 μmol/L的Aβ11,HupA组于加入Aβ142前4h用1μmol/L HupA预处理小胶质细胞.液相芯片技术检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)的表达,流式细胞术和Western blotting检测神经干细胞的凋亡.结果:小胶质细胞与神经干细胞共培养72 h后,与空白对照组相比,Aβ组IL-6、TNF-α和MIP-1α水平以及神经干细胞凋亡率(25.46％)均显著升高(P ＜0.01)；HupA预处理小胶质细胞后,Aβ诱导的小胶质细胞炎症因子分泌显著减少,IL-6、TNF-α和MIP-1α的水平降低(P＜0.01),同时神经干细胞凋亡率降低至8.05％ (P ＜0.01).Western blotting检测结果显示,HupA组Bcl-2/Bax值显著高于Aβ组(P＜0.05).结论:石杉碱甲可以抑制小胶质细胞分泌细胞因子和趋化因子,减弱Aβ诱导的炎症反应,降低神经干细胞凋亡率,从而发挥抗炎和神经保护作用.

【总页数】5页(P1160-1164)

【作 者】朱宁;林继宗;陈庆状;韦美丹;王勇 【作者单位】南方医科大学珠江医院药剂科,广东广州510282;中山大学第三附属医院肝胆外科,广东广州510630;南方医科大学珠江医院药剂科,广东广州510282;南方医科大学附属第三医院药剂科,广东广州510630;南方医科大学珠江医院药剂科,广东广州510282