葡萄糖糖醛酸测定标准操作规程

葡萄糖检验方法化学葡萄糖检验方法是一种常见的临床化验方法，用于检测人体内血糖水平，是评估糖尿病、高血糖和低血糖等疾病的重要手段。

化学方法是其中一种常见的检验方法，本文将介绍葡萄糖的化学检验方法，包括其原理、步骤、常用试剂和设备等内容。

一、葡萄糖检验方法的原理葡萄糖在化学检验中通常采用的方法是酶法测定。

其原理是利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，同时还原辅酶将还原成辅酶。

还原辅酶与二甲基氨基苯磺酸钠在碱性条件下生成紫色化合物，用分光光度计在546nm波长下测定其吸光值，从而得到葡萄糖的含量。

二、葡萄糖检验方法的步骤1.标准曲线的制备：分别取不同浓度的葡萄糖标样，用蒸馏水稀释成一系列标样液，按步骤加入试管中，然后加入相应的试剂。

2.血浆或尿样的处理：将待测样品离心去蛋白，获得上清液进行检测。

3.反应过程：将标样液与试管中的试剂充分混合后，放入37摄氏度水浴中进行恒温反应。

4.测定吸光值：用分光光度计在546nm波长下测定样品的吸光值，根据标准曲线计算出样品中的葡萄糖含量。

三、葡萄糖检验方法的常用试剂和设备1.试剂：包括葡萄糖标样、葡萄糖氧化酶、辅酶、二甲基氨基苯磺酸钠等。

2.设备：分光光度计、水浴仪、离心机等。

葡萄糖检验方法化学的实验操作中需要严格掌握试剂用量、反应温度和时间等关键因素，以确保测定结果的准确性和可靠性。

实验人员还需要注意操作过程中的安全，避免与试剂接触，确保个人安全。

在临床应用中，葡萄糖检验方法的化学测定为医生提供了重要的实验数据，有助于评估病人的血糖水平和疾病状况，为疾病的诊断和治疗提供参考依据。

对葡萄糖检验方法化学的研究和掌握具有重要意义。

通过本文对葡萄糖检验方法化学的介绍，希望能够使读者对该检验方法有一个清晰的了解，从而为临床实验工作提供帮助和指导。

也希望医学工作者们能够不断深入研究，推动葡萄糖检验方法的不断改进和完善，为临床医学实践提供更加准确、可靠的数据支持。

实验四葡萄糖的测定（POD-GOP法）一．实验目的1. 掌握葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法测定血糖；2. 学习使用分光光度计；3. 学习微量移液器的使用二．实验原理葡萄糖氧化酶(GOD)葡萄糖+O2 葡萄糖酸+ H2O2过氧化物酶(POD)H2O2 + 酚+ 4-氨基安替比林醌+ H2O+O2红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比，在505nm有吸收峰三．试剂1. 试剂1：磷酸盐缓冲液70mmol/L酚10.6mmol/L pH 7.02. 试剂2：磷酸盐缓冲液70mmol/L4-氨基安替比林0.8mmol/L葡萄糖氧化酶>10U/ml过氧化物酶> 1U/ml pH 7.03. 标准葡萄糖溶液 5.55mmol/L4. 兔子血清四．操作步骤1.配制工作液：取等量试剂1和试剂2混合均匀2.按下表加入有关试剂3. 充分混匀，置于37℃水浴15分钟，显色后，在波长505nm处，以空白调零，读取标准管和样品管的吸光值A4. 实验结果计算：葡萄糖（mmol/L）=[样品管吸光度（A样）/标准管的吸光度（A标）]×标准液浓度五．实验数据及结果1.数据记录2.计算结果葡萄糖=0.489/0.237*5.55mmol/L=11.45mmol/L=206.35mg/dl思考题哪些方法可增加血糖测定的准确性？答：1.增加测定的重复次数2.加样的准确，如在使用微量移液器量取液体时要称量准确，向试管中加液的顺序要正确3.可根据所得数据绘制标准曲线，并通过标准曲线求出浓度4.在使用分光光度计时注意操作准确以上的这些方法都可以增加血糖测量的准确性。

检验科血液葡萄糖测定技术操作规程1.检测目的：检测血清或血浆中葡萄糖的含量，为临床对相关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果，以及对健康人群正常生理指标的监测提供重要的参考价值。

3.标本要求：3.1病人准备：空腹12小时。

3.2标本类型：血清或NaF抗凝的血浆。

采血后及时分离，以避免血清或血浆中葡萄糖被细胞利用而降低。

4.设备和试剂：4.1仪器设备：奥林巴斯AU600生化分析仪4.2试剂材料：四川迈克公司试剂参与反应成份：R1：酚（12.0mmol/L）R2：GOD（≥35KU/L）、POD（≥5KU/L）、4-AAP （1.20mmol/L）4.3试剂的贮存：4.3.12～8℃密闭避光贮存至标签所注失效期。

℃避光稳定30天。

4.4注意：此试剂为体外诊断用，禁止入口，吞下有害。

试剂含有叠氮化钠，误入眼、口中或沾染到皮肤上请立即用清水彻底冲洗，必要时到医院就诊。

叠氮化钠可以和铜、铅等金属反应形成爆炸性化合物，故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管。

4.5试剂准备：即开即用的，无需特殊准备。

5质量控制：5.1质控物：RANDOX多项人基质血清5.2质控措施：6.参考区间及可报区间：6.1参考范围：空腹 3.89～6.11mmol/L餐后1小时7.78～8.89mmol/L餐后2小时 3.89～7.78mmol/L6.2可报范围：0.00～22.30mmol/L。

样品GLU含量超过线性范围应用生理盐水稀释重做，结果乘以稀释倍数。

7.危急值及处理方法：<2.5mmol/L或>10mmol/L。

及时与临床联络。

实用标准目的PURPOSE本操作规程目的在于建立规范的无水葡萄糖质量检测方法，为操作人员提供规范的操作依据，保证无水葡萄糖质量的检验准确，数据可靠。

范围SCOPE本标准操作规程适用于凯惠睿智生物科技（上海）有限公司GMP工厂QC 部。

职责RESPONSIBILITYQC负责检验仪器及器具INSTRUMENT AND APPLIANCE分析天平、旋光度测定仪、红外分光光度计、恒温干燥箱、恒温水浴箱、三角瓶、比色管、试管、酒精灯、吸管、移液管、容量瓶、蒸发皿、坩埚、酸式滴定管、马弗炉、称量瓶等。

试剂及其配制方法REAGENT AND PREPARATION试剂：乙醇、硝酸、比色用氯化钴液、比色用重铬酸钾液、比色用硫酸铜液、硫酸试剂配制方法：氨试液：取浓氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得。

碱性酒石酸铜试液（甲液）：取硫酸铜结晶 6.93g，加水使溶解成100ml。

碱性酒石酸铜试液（乙液）：取酒石酸钾钠结晶34.6 g与氢氧化钠10g，加水使溶解成100ml。

碱性酒石酸铜试液：临用时，将碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，即得。

酚酞指示液：取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，即得。

氢氧化钠饱和水溶液：取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。

氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）：取澄清的氢氧化钠饱和溶液 5.6ml，加新沸过的冷水使成1000ml，摇匀。

氢氧化钠滴定液（0.02mol/L)：取氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）加新沸过的冷水稀释制成。

稀硝酸：取硝酸105ml，加水稀释至1000ml，即得。

本液含HNO3应为9.5％～10.5％。

标准氯化钠溶液（贮备液）：称取氯化钠0.165g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液，（每1ml相当于100μg的氯）。

标准氯化钠溶液（使用液）：临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10μg的氯）。

目的PURPOSE本操作规程目的在于建立规范的无水葡萄糖质量检测方法，为操作人员提供规范的操作依据，保证无水葡萄糖质量的检验准确，数据可靠。

范围SCOPE本标准操作规程适用于凯惠睿智生物科技（上海）有限公司GMP工厂QC 部。

职责RESPONSIBILITYQC负责检验仪器及器具INSTRUMENT AND APPLIANCE分析天平、旋光度测定仪、红外分光光度计、恒温干燥箱、恒温水浴箱、三角瓶、比色管、试管、酒精灯、吸管、移液管、容量瓶、蒸发皿、坩埚、酸式滴定管、马弗炉、称量瓶等。

试剂及其配制方法REAGENT AND PREPARATION试剂：乙醇、硝酸、比色用氯化钴液、比色用重铬酸钾液、比色用硫酸铜液、硫酸试剂配制方法：氨试液：取浓氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得。

碱性酒石酸铜试液（甲液）：取硫酸铜结晶6.93g，加水使溶解成100ml。

碱性酒石酸铜试液（乙液）：取酒石酸钾钠结晶34.6 g与氢氧化钠10g，加水使溶解成100ml。

碱性酒石酸铜试液：临用时，将碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，即得。

酚酞指示液：取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，即得。

氢氧化钠饱和水溶液：取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。

氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）：取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6ml，加新沸过的冷水使成1000ml，摇匀。

氢氧化钠滴定液（0.02mol/L)：取氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）加新沸过的冷水稀释制成。

稀硝酸：取硝酸105ml，加水稀释至1000ml，即得。

本液含HNO3应为9.5％～10.5％。

标准氯化钠溶液（贮备液）：称取氯化钠0.165g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液，（每1ml相当于100μg的氯）。

标准氯化钠溶液（使用液）：临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10μg的氯）。

葡萄糖OF试验标准操作规程
1.目的
规范O∕F试验标准操作规程。

2.原理
又称氧化∕发酵（O∕F）试验，观察细菌对葡萄糖分解过程中是利用分子氧（氧化型），还是无氧酵解（发酵型），或不分解葡萄糖（产碱型）。

3.试剂
3.1 O∕F基础培养基成分
葡萄糖10g 溴甲酚紫（1.6%水溶液）1.0ml
蛋白胨20g 琼脂3g
磷酸氢二钾0.2g 氯化钠5g
蒸馏水1000ml
3.2 制备上述成分除指示剂外加热溶解后校正pH 至7.1，加入指示剂并分装13×100mm的试管，每管2～3ml，置高压灭菌器内，经115℃15分钟的灭菌，即为O∕F基础培养基。

最终糖浓度为1%。

4.质控
铜绿假单胞菌ATCC27853开放管为黄色，封闭管为紫色；大肠埃希菌ATCC25922开放管、封闭管均为黄色。

5.操作步骤
从平板上或斜面培养基上挑取少量细菌，同时穿刺接种于2支O∕F试验管，其中1支用滴加溶化的无菌凡士林（或液体石蜡）覆盖培养基液面0.3～0.5cm高度。

经37℃培养48小时后，观察结果。

6.结果判断
仅开放管产酸为氧化反应，两管都产酸为发酵反应，两管均不变为产碱型。

7.注意事项
有些细菌不能在O∕F培养基上生长，若出现此类情况，应在培养基中加入2%血清或0.1%酵母浸膏，重做O∕F试验。

8.临床意义
葡萄糖O∕F试验可用于葡萄球菌与微球菌的鉴别，前者为发酵型细菌，后者为氧化型细菌。

更重要的是用于革兰阴性杆菌的鉴别，肠杆菌科的所有细菌为发酵型细菌，而绝大多数的非发酵菌则为氧化型或产碱型细菌。

葡萄糖测定葡萄糖测定标准化操作程序（SOP）文件测定单位：故城县计划生育技术服务站编写者：宿金涛日期：2012年5月28日一、方法学原理在葡萄糖氧化酶的作用下，β-D-葡萄糖氧化生成过氧化氢和葡萄糖酸。

过氧化氢在过氧化物酶的存在下与苯酚、4-氨基安替比林氧化缩合成红色醌式染料。

此染料在500nm处有最大吸收峰，其吸光度值与葡萄糖含量成正比。

GODβ-D-葡萄糖+ H2O + O2 ----------- H2O2 + D-葡萄糖酸PODH2O2 + 4-氨基安替比林+ 苯酚---------- 醌亚胺（红色）+ H2O二、试剂深圳迈瑞规格：R1：4*40mL，R2：2*20mL，S：1*1.5mL试剂文号：粤食药监械（准）字2011第2400475号主要组成成分：试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液100mmol/L抗坏血酸氧化酶4700U/L葡萄糖氧化酶4000U/L试剂2（R2）：磷酸盐缓冲液100mmol/L过氧化物酶6700U/L4--氨基安替比林0.7mmol/L对羟基笨甲酸钠 1.3mmol/L 校准品：葡萄糖溶液。

校准品最终可溯源至参考方法GC-MS。

不同批号试剂盒各组分请勿混用。

三、仪器迈瑞BS-390生化分析仪四．标本采集与处理1 、受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。

应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

有些药物长期应用，可使患者糖代谢发生障碍，引起血糖增高，因而应当在使用这些药物期间定期监测血糖，避免引起高血糖。

常用药物中可致血糖增高的有以下几类。

糖皮质激素：糖皮质激素药物如强的松、氢化可的松、抗炎松等，临床应用广泛。

糖皮质激素可通过三条途径影响糖代谢：（1）增强糖元分解；（2）使糖异生途径活动；（3）减少外周组织对葡萄糖的作用，因而血糖升高。

透明质酸检验操作规程透明质酸（hyaluronic acid，简称HA）检验操作规程一、实验目的：通过透明质酸检验，了解样品中透明质酸的含量，判断其质量和纯度。

二、实验原理：透明质酸是一种由N-乙酰-D-葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸通过β-1,3-和β-1,4-糖苷键连接而成的聚糖。

其含量的测定一般采用比色法或溶胀法。

三、实验材料：1. 透明质酸标准溶液2. 待测样品3. 0.1mol/L盐酸溶液4. 稀释剂5. 甲醇6. 氢氧化钠溶液7. 硫酸8. 硫酸铵四、实验步骤：1. 准备工作：（1）将透明质酸标准溶液稀释至一定浓度，制备浓度梯度。

（2）准备待测样品，确保其干燥和无杂质。

2. 比色法测定透明质酸含量：（1）取透明质酸标准溶液的一定体积，加入试管中。

（2）加入足够的稀释剂将溶液稀释至合适浓度。

（3）加入甲醇溶液溶解样品，使其溶解均匀。

（4）加入适量的氢氧化钠溶液，使溶液呈现碱性。

（5）加入硫酸铵溶液，使溶液呈现酸性。

（6）酸性溶液与盐酸溶液反应生成甲胺。

（7）甲胺与硫酸反应生成氮气。

（8）利用氮气生成的浑浊度与透明质酸含量成正比关系，通过比色计测定溶液的浑浊度。

（9）将待测样品按照相同的步骤进行测定。

（10）根据透明质酸标准曲线，计算出待测样品中透明质酸的含量。

3. 溶胀法测定透明质酸含量：（1）取一定量的待测样品，加入容量瓶中。

（2）加入足够的溶胀剂溶解样品，使其溶解均匀。

（3）将容量瓶体积定至一定体积，充分摇匀。

（4）取一定体积的溶液进行取样。

（5）通过比重计或其他方法测定样品的溶液密度。

（6）将样品的溶液密度与标准溶液的溶液密度进行比较，根据比例关系计算出透明质酸的含量。

五、实验注意事项：1. 实验过程应严格按照操作规程进行，避免误差的产生。

2. 透明质酸标准溶液的稀释要根据实验需求进而进行，避免过高或过低的浓度对实验结果的影响。

3. 样品的制备要求干燥和纯净，避免水分和杂质的干扰。

4. 比色法和溶胀法的选择要根据实验要求进行，确保结果的准确性。

葡萄糖含量测定方法(GLU)
简介
本文档介绍了一种葡萄糖含量测定方法(GLU)。

该方法可以快
速准确地测量样品中的葡萄糖含量。

实验步骤
1. 准备样品：将待测样品准备好，并标清楚每个样品的编号。

2. 前处理：根据样品的特性，进行必要的前处理步骤，如提取、稀释等。

3. 校准曲线制备：准备一系列不同浓度的葡萄糖标准溶液，分
别测量它们的吸光度，并绘制标准曲线。

4. 测量样品吸光度：使用分光光度计或其他合适的光学仪器，
测量每个样品的吸光度。

5. 计算葡萄糖含量：将样品的吸光度值代入标准曲线中，利用
线性回归等方法计算出样品中的葡萄糖含量。

注意事项
- 在进行实验前，确保所有仪器设备已经校准，并且采取适当的安全措施。

- 在样品处理和测量过程中，尽量避免污染和氧化，以确保测量结果的准确性。

- 在进行葡萄糖含量测定时，建议重复测量多次，以提高结果的可靠性。

结论
葡萄糖含量测定方法(GLU)是一种准确可靠的方法，可以用于测量样品中的葡萄糖含量。

通过合理的样品处理和测量步骤，可以得到准确的结果，并为相关领域的科研和生产提供支持。

请注意，该方法的具体步骤和实验条件可能会因实际情况和需求的不同而有所调整。

在进行实验前，请根据实际情况进行适当的优化和验证。

以上是关于葡萄糖含量测定方法(GLU)的简要介绍，希望对您有所帮助。

如有需要，请随时联系。

谢谢！。