人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)ELISA试剂盒使用说明书

人细胞间粘附分子1(ICAM-1)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中细胞间粘附分子1(ICAM-1)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人细胞间粘附分子1(ICAM-1)水平。

用纯化的人细胞间粘附分子1(ICAM-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入细胞间粘附分子1(ICAM-1)，再与HRP标记的细胞间粘附分子1(ICAM-1)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的细胞间粘附分子1(ICAM-1)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人细胞间粘附分子1(ICAM-1)浓度。

试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

2022年修订第一版（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!）产品货号：E-EL-H0149c产品规格：96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话技术部电话************电子邮箱（销售）********************电子邮箱（技术）**************************网址：具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中IL-1β浓度。

人试剂盒说明书,人血清一氧化氮（NO）ELISA检测试剂盒樊克生物专业供应：使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本血清一氧化氮（NO）含量。

试验原理：NO试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知NO浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将NO和生物素标记的抗体同时温育。

洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中NO的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗NO抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。

2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3．振荡器及磁力搅拌器等。

安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

人单核细胞THP-1说明书目录号：SCSP-567细胞名称：THP-1细胞描述：人单核细胞，急性髓细胞白血病。

该细胞来源于一岁男孩的外周血，对乳胶微粒和致敏红细胞有吞噬作用，可在佛波酯（TPA，也称为PMA，全名12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate）诱导下分化成为巨噬细胞。

物种：人，男性，1岁组织：外周血细胞来源：2014年引进生物安全等级：BSL-1完全培养液配方：见下方备注批次/冻存日期：详见冻存管/培养瓶标识参考传代比例：传代时控制细胞密度在2-4⨯105cell/mL，并在细胞生长至8-10⨯105cell/mL时进行传代参考传代周期：传代时控制细胞密度在2-4⨯105cell/mL，并在细胞生长至8-10⨯105cell/mL时进行传代参考换液频率：传代时换液冻存液配方：完全培养液95%，DMSO5%细胞形态：悬浮生长支原体检测结果：阴性STR鉴定结果：D5S818:11,12D13S317:13,13D7S820:10,10D16S539:11,12vWA:16,16THO1:8,9.3Amelogenin:X,YTPOX:8,11CSF1PO:11,13THP-1细胞照片参考文献：备注：1.人单核细胞THP-1完全培养液配方（100ml）：RPMI Medium1640(Invitrogen,11875-093)90mlFBS10mlβ-Mer(Invitrogen21985)0.05mM2.注意事项：a)该细胞为悬浮细胞，根据培养经验以及客户的反馈，传代时使用【半换液法】对细胞状态较为有利，因此我库建议您使用【半换液法】进行传代。

同时，您在收到细胞后，请不要通过离心的方式收集细胞，可以直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液，然后将细胞吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中继续培养即可。

b)细胞对血清质量较为敏感，我库建议您使用进口大品牌优质血清进行培养。

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

人P21蛋白（P21）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书【试剂盒名称】人P21蛋白（P21）定量检测试剂盒（ELISA）【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中P21蛋白（P21）的含量。

【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。

将标准品、待测样本加入到预先包被人P21蛋白（P21）单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。

依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中人P21蛋白（P21）浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中人P21蛋白（P21）含量。

【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.3mL×6管8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5特殊稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注：标准品（1号→6号）浓度依次为：48、24、12、6、3、1.5ng/L【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清MCP -1、5-HT 水平变化及意义周尚清，邢忠诚，张震，贾晨曦，孟秋，邹起瑞淮北市人民医院耳鼻咽喉头颈外科，安徽淮北235000摘要：目的　探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS ）患者血清单核细胞趋化蛋白-1（MCP -1）、5-羟色胺（5-HT ）水平变化及意义。

方法　选取107例OSAHS 患者（OSAHS 组），根据是否发生轻度认知障碍（MCI ）分为MCI 组（43例）和NMCI 组（64例），另选取同期48名体检健康志愿者（对照组）。

采用酶联免疫吸附法检测血清MCP -1、5-HT 。

通过多因素Logistic 回归分析影响OSAHS 患者MCI 发生的因素，受试者工作特征（ROC ）曲线分析血清MCP -1、5-HT 水平对OSAHS 患者MCI 发生的预测价值。

结果　与对照组比较，OSAHS 组血清MCP -1水平升高，5-HT 水平降低（P 均<0.05）。

107例OSAHS 患者MCI 发生率为40.19%（43/107）。

与NMCI 组比较，MCI 组血清MCP -1水平升高，5-HT 水平降低（P 均<0.05）。

年龄增加、病情程度重度和MCP -1升高为OSAHS 患者MCI 发生的独立危险因素，5-HT 升高为独立保护因素（P 均<0.05）。

血清MCP -1、5-HT 联合预测OSAHS 患者MCI 的曲线下面积为0.906，大于血清MCP -1、5-HT 单独预测的0.805、0.828（P 均<0.05）。

结论　OSAHS 患者血清MCP -1水平升高，5-HT 水平降低，与MCI 发生密切相关，血清MCP -1联合5-HT 检测对预测OSAHS 患者MCI 发生有较高价值。

关键词：阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征；单核细胞趋化蛋白-1；5-羟色胺；轻度认知障碍doi ：10.3969/j.issn.1002-266X.2024.10.006中图分类号：R714.253 文献标志码：A 文章编号：1002-266X （2024）10-0026-05Changes in levels of serum MCP -1 and 5-HT in patients with obstructive sleep apnea hypopnea syndromeZHOU Shangqing ， XING Zhongcheng ， ZHANG Zhen ， JIA Chenxi ， MENG Qiu ， ZOU Qirui Otolaryngology Head and Neck Surgery ， Huaibei People's Hospital ， Huaibei 235000， ChinaAbstract ： Objective To investigate the changes in levels of serum monocyte chemotactic protein -1 （MCP -1） and 5-hydroxytryptamine （5-HT ） in patients with obstructive sleep apnea hypopnea syndrome （OSAHS ） and their clinical sig‑nificance. Methods Totally 107 OSAHS patients （OSAHS group ） were selected and divided into the MCI group （43 cases ） and NMCI group （64 cases ） according to whether mild cognitive impairment （MCI ） occurred or not ， and 48 healthy volunteers with medical checkups in the same period （control group ） were selected. Serum MCP -1 and 5-HT levels were measured by ELISA. Factors affecting the occurrence of MCI in OSAHS patients were analyzed by multifactorial Logistic regression ， and the predictive value of serum MCP -1 and 5-HT levels for MCI in OSAHS patients was analyzed by receiveroperating characteristic （ROC ） curve. Results Compared with the control group ， the serum MCP -1 level increased and 5-HT level decreased in the OSAHS group （both P<0.05）. The incidence of MCI in 107 OSAHS patients was 40.19%（43/107）. Compared with the NMCI group ， the serum MCP -1 level increased and 5-HT level decreased in the MCI group （both P<0.05）. Increasing age ， severity of disease and elevated MCP -1 were independent risk factors for the developmentof MCI in patients with OSAHS ， and elevated 5-HT was an independent protective factor （all P<0.05）. The area under the curve of serum MCP -1 and 5-HT in predicting MCI in patients with OSAHS was 0.906， which was greater than that（0.805， 0.828） of serum MCP -1 and 5-HT alone （both P<0.05）. Conclusion The elevated serum MCP -1 level and re‑duced 5-HT level in OSAHS patients are closely associated with MCI ， and the combination detection of serum MCP -1 and5-HT has a high predictive value for the occurrence of MCI in OSAHS patients.Key words ： obstructive sleep apnea hypopnea syndrome ； monocyte chemotactic protein -1； 5-hydroxytryptamine ；基金项目：安徽省卫生健康委科研项目（AHWJ2019b112）。

第３６卷第５期　２０１５年９月　中山大学学报（医学科学版）　

ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＳＵＮ　ＹＡＴ—ＳＥＮ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＭＥＤＩＣＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥＳ）　Ｖｏ１．３６　Ｎｏ．５　

Ｓｅｐ．２０１５　

交互作用与非酒精性脂肪性肝病的关系　张超贤　，郭李柯　，秦咏梅　，李光艳　（新乡医学院第一附属医院１．消化内科，２．口腔科，河南卫辉４５３１０）　

摘要：【目的】探讨单核细胞趋化蛋白一１（ＭＣＰ一１）基因一２５１８Ａ／Ｇ与谷胱甘肽过氧化物酶一１（ＧＰｘ一１）基因Ｐｒｏ１９８Ｌｅｕ　多态性的交互作用及其与非酒精性脂肪性肝病（ＮＡＦＬＤ）的关系。【方法】采用病例一对照研究的方法，以ＮＡＦＬ、ＮＡＳＨ、　ＮＡＦＨＣ患者及健康对照者各６００例的外周血白细胞为样本，利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术分析了ＭＣＰ－１基因一２５１８Ａ／Ｇ和　ＧＰｘ—ｌ基因Ｐｒｏ１９８Ｌｅｕ多态性。【结果】一２５１８Ａ／Ｇ（ＧＧ）基因型和Ｐｒｏ１９８Ｌｅｕ（ＬＬ）基因型频率分布分别为４９．６７％和４９．８３％　（ＮＡＦＬ组）、６３．５０％和６３．５０％（ＮＡＳＨ组）、７５．１７％和７５．５０％（ＮＡＦＨＣ组）及２３．５０％和２３．３３％（对照组），上述基因型频率　在各病例组与对照组之间有显著差异（Ｐ＜０．０１）。一２５１８Ａ／Ｇ（ＧＧ）基因型患ＮＡＦＬＤ的风险显著增加（０Ｒ　＝３．２１；０Ｒ　＝　５．６６；０ＲＮ　＝９．８５）。Ｐｒｏ１９８Ｌｅｕ（ＬＬ）基因型者患ＮＡＦＬＤ的风险也显著增加（ＯＲＭｎ＝３．２６；ＯＲ　＝５．７２；ＯＲＮＡｎ￣Ｃ：１０．１３）。基　因突变的协同分析发现一２５１８Ａ／Ｇ（ＧＧ）／Ｐｒｏ１９８Ｌｅｕ（ＬＬ）基因型者在ＮＡＦＬ、ＮＡＳＨ、ＮＡＦＨＣ组和对照组中的分布频率分别　为３９．１７％、５３．１７％、６５．３３％和１２．１７％，经ｘ　检验有统计学差异（Ｐ＜０．０１）。一２５１８Ａ／Ｇ（ＧＧ）／Ｐｒｏ１９８Ｌｅｕ（ＬＬ）基因型者患　ＮＡＦＬＤ的风险显著增加（０Ｒ￣ｒ：５．３０；０Ｒ　：１０．９１；０ＲＮＡＦＨｃ＝２３．９２）。一２５１８Ａ／Ｇ（ＧＧ）和Ｐｒｏ１９８Ｌｅｕ（ＬＬ）基因型有交互作　用（ｙＩ　ＮＡＦＬ＝３．５０，　２　ＮＡｉＬ＝３．３７；　ｌ　Ｎ删＝４．７９，　２ＮＡｓＨ：４．７２；　ｌ　ＮＡＦＨｃ＝６．１９，　２　ＮＡＦＨｃ＝５．９０）。【结论】－２５１８Ａ／Ｇ（ＧＧ和）Ｐｒｏ１９８Ｌｅｕ　（ＬＬ）基因型均是ＮＡＦＬＤ的易患因素，基因多态性的交互作用增加了ＮＡＦＬＤ的发病风险。　关键词：非酒精性脂肪性肝病；单核细胞趋化蛋白一ｌ基因一２５１８Ａ／Ｇ；谷胱甘肽过氧化物酶一１（ＧＰｘ一１）基因Ｐｒｏ１９８Ｌｅｕ；　多态现象　中图分类号：Ｒ５７　文献标志码：Ａ　文章编号：１６７２—３５５４（２０１５）０５—０７３９—０６　

人趋化因子(FK)elisa试剂盒使用说明书Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）【人趋化因子(FK)elisa试剂盒elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人趋化因子(FK)elisa试剂盒水平。

用纯化的人趋化因子(FK)elisa试剂盒抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入趋化因子(FK)elisa试剂盒，再与HRP标记的趋化因子(FK)elisa试剂盒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的趋化因子(FK)elisa试剂盒呈正相关。