植物生理学实验报告
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植物生长调节物质对植物生长的影响多效唑(PP333)浸种对小麦幼苗生长发育的影响摘要:本实验在于研究多效唑对小麦种子萌发过程中呼吸速率的变化以及培养成幼苗过后,对其形态指标和生理指标的影响。
实验表明:多效唑的浓度越高,小麦幼苗的株高也逐渐受到抑制。
而小麦在萌发的过程中,多效唑抑制小麦种子的呼吸速率;随着多效唑浓度的逐渐提高。
小麦根冠比,根系活力先增加后减小,叶绿素增多,说明多效唑浸种有助于提高小麦抗倒伏和抗逆性的能力。
关键词:小麦多效唑幼苗根系生理指标正文:多效唑是80年代研制成功的三唑类植物生长调节剂【1】,是内源赤霉素合成的抑制剂。
也可提高水稻吲哚乙酸氧化酶的活性,降低稻苗内源IAA的水平。
明显减弱稻苗顶端生长优势,促进侧芽(分蘖)滋生【2】。
秧苗外观表现矮壮多蘖,叶色浓绿。
根系发达。
多效唑的农业应用价值在于它对作物生长的控制效应。
具有延缓植物生长,抑制茎杆伸长,缩短节间、促进植物分蘖、增加植物抗逆性能,提高产量等效果【3】。
本文探讨被不同浓度多效唑作用后的小麦幼苗形态指标和生理指标的测定,以此了解多效唑对小麦生长发育的影响,为以后实践中利用多效唑提供理论依据。
1.材料与方法1.1材料与试剂小麦种子(川农26) 15%多效唑1.2方法1.2.1种子消毒【4】精选饱满充实、胚完整的小麦种子若干,用0.1%的HgCl2消毒10min,用自来水和蒸馏水冲洗3次,用滤纸吸干种子上的水分。
1.2.2浸种与催芽用200mg/L的PP333母液配制成浓度为50、100、200mg/L等三种浓度PP333溶液,以蒸馏水作为对照,将已消毒的种子分别用4种溶液浸种24小时后,摆种子摆放在培养皿中,置于28℃恒温箱中催芽48h。
观察种子萌发情况并补充水。
1.2.3幼苗培养与管理将发芽后的小麦种子移栽到以琼脂为基质的培养钵上,每钵种植30株,每种浓度种三钵。
栽植方法:以镊子在琼脂面上戳一小孔,将发芽小麦种子的根全部埋入琼脂中,芽留在琼脂面上,栽好后在琼脂面上浇少量水。
温室下培养一周后的幼苗即可测定。
管理期间适量浇水,防止琼脂干燥。
2 测定项目2.1 小麦幼苗呼吸强度的测定(广口瓶法)【4】(1)空白测定在广口瓶中准确加入Ba(OH)2(0.05mol/L)溶液20ml,立即用塑料膜和橡筋将瓶口盖上扎紧,充分摇动2min。
从塑料膜中央小孔滴加2滴酚酞。
用1/44mol/L草酸滴定至红色刚刚消失为止记下草酸用量V1(ml)(2)样品测定倒出废液,将瓶洗净。
称取发芽种子5~10g装入小框中。
向瓶中准确加入20mlBa(OH)2溶液,立即盖紧橡胶塞,记录时间,放置30min(其间轻摇数次,使溶液表面的BaCO3膜破坏,便于CO2的充分吸收。
准确作用30min后,开塞,立即用塑料膜和橡皮筋将瓶口盖紧,从塑料膜小孔滴加2滴酚酞指示剂,用草酸滴定方法同上,记录草酸用量V2(ml) (3)在不同温度条件下测定,比较温度对材料呼吸的影响。
2.2 小麦幼苗根系活力的测定(1)标准曲线的制作(2)样品处理选取各浓度幼苗10苗,剪切共跟尖约长1cm长,其根尖总数达50根,吸干表面水分,迅速投入盛有反应混合液的12瓶中,放入37℃水溶1h后,研磨,取根尖上清液比色测定。
2.3 幼苗形态指标的测定(1)任选10株幼苗,对株高、根长、根数的测定(2)根冠比(R/T)的测定将“1”测定后的10苗材料按地上部分和地下部分分开装入两个铅盒中,先置105℃烘箱中杀青10min后,降温至80℃恒温烘干至恒重(约5h)称重记录。
2.4 小麦幼苗叶片叶绿素含量测定(分光光度法)【4】(1)色素提取,选取10株小麦幼苗的倒二叶片,剪成碎片混匀,称取0.2g,放入研钵,加少许80%乙醇和CaCO3,石英砂,充分研磨,过滤,定容25ml容量瓶。
(2)比色测定将上述提取液以80%乙醇,做参比,在645nm、663nm处比色测定其OD值。
2.5 小麦幼苗丙二醛(MDA)的测定(分光度法)【4】(1)处理称取剪成0.5cm的叶片,称取0.5g两份,一份放入研钵中,加入10%三氯醋酸(TCA)2ml,研磨成匀浆后再加入8mlTCA入研钵混匀,将其倒入离心管3000转/分离心10min 后取上清液。
另一份先在40℃条件下处理1h,再做和常温下相同的处理。
(2)比色测定3.结果分析3.1形态指标【7】3.1.1 株高、根长和发根数小麦株高、发根数、根长的测定多效唑浓度(mg/L) 0 50 100 200株高平均值(cm) 3 2.39 1.85 1.53根数平均值7 6 6 5根长平均值(cm)14.4 19.35 20.3 22.53(1)从上表数据分析可知,用PP333处理小麦种子,在0—200mg/L的浓度范围内,小麦幼苗的地上部分生长受到抑制,使得株高逐渐降低,且随着PP333的浓度逐渐增加,抑制作用越强。
(2)随PP333浓度的升高,小麦幼苗的根长逐渐增加,根系的伸长生长受到促进。
(3)PP333对小麦幼苗的发根数有一定的抑制作用,在0—200mg/L的浓度范围内,呈现出不规则的PP333浓度越高,抑制作用越强的规律。
3.2生理指标3.2.1 根/冠的测定根/冠比的测定多效唑浓度(mg/L) 0 50 100 200根重(g)0.084 0.092 0.077 0.09冠重(g)0.171 0.132 0.125 0.176根/冠0.4912 0.697 0.616 0.5114分析上表数据可知,施用PP333后,小麦幼苗的根/冠的值均显著增加,用50、100、200mg/L的PP333处理后,根/冠的值分别比对照组增加了41.9%、25.4%、4.11%。
随着PP333浓度的增加,根/冠的值增加幅度逐渐减小。
3.2.2 根系活力的测定根系活力多效唑浓度(mg/L) 0 50 100 200吸光度0.068 0.103 0.028 0.022浓度(μg/mL) 3.1776 4.8131 1.3084 1.028根系活力(μgTPF/根·h)0.6355 0.9626 0.2617 0.2056从数据可知:用50、100、200mg/L的PP333处理过的幼苗根系活力分别为对照组的1.5倍,0.41倍,0.32倍,说明较低浓度的PP对小麦幼苗的根系活力有促进作用,而较高浓度的pp对小麦幼苗的根系活力有抑制作用,在一定PP333浓度范围内,随着PP333浓度增加,根系活力呈现先增后减规律。
3.2.3 呼吸强度的测定小麦幼芽呼吸强度的测定多效唑浓度(mg/L) 0 50 100 200空白值(mL) 19.55 19.6 20.65 19.55滴定值(mL) 19.5 18.5 19.3 17.7呼吸强度(mgCO2/株·h)0.00187 0.0275 0.0337 0.0462从实验数据分析,用PP333溶液处理后,小麦幼苗的呼吸强度都有增强,用50、100、200mg/L的PP333处理后的小麦幼苗的呼吸强度分别为1366%,1700%,2460%,增加效果显著,且在0-200mg/L的浓度范围内,随PP333浓度增加,对小麦呼吸强度增加效果越明显。
3.2.4 叶绿素含量的测定处理浓度(mg/L) 645nm 663nm Chla含量 Chlb含量 Ch总0(CK) 0.211 0.551 0.3215 0.5796 0.901150 0.307 0.795 0.4635 0.8384 1.302100 0.373 0.809 0.4635 0.839 1.303200 0.387 0.926 0.536 0.97 1.506数据分析:从上表可以看出,用多效唑处理小麦的幼苗后,小麦幼苗的叶绿素含量在一定程度上都有所提高.浓度50、100、200mg/L多效唑处理后的小麦幼苗叶绿素a的含量分别为对照组的1.44、1.44、1.67倍,叶绿素b的含量在50、100、200mg/L的多效唑的浓度时,叶绿素b的含量分别为对照组的1.45、1.45、1.67倍,在经过多效唑浓度处理过后的小麦幼苗,叶绿素的总含量都是呈增长状态,分别是对照组的1.45、1.45、1.67倍,其中200mg/L时小麦幼苗叶绿素含量最多。
3.2.5 幼苗丙二醛(MDA)的测定常温处理下的丙二醛(MDA)含量处理浓度(mg/L) 450nm 532nm 600nm 浓度C MDA含量/单位0(CK) 0.8 0.538 0.42 0.313 0.0062650 0.776 0.387 0.264 0.359 0.00718100 0.514 0.255 0.126 0.544 0.01088200 0.403 0.183 0.048 0.645 0.0129 40℃处理下的丙二醛(MDA)含量处理浓度(mg/L) 450nm 532nm 600nm 浓度C MDA含量/单位0(CK) 0.810 0.254 0.124 0.385 0.007750 0.794 0.237 0.096 0.465 0.0093100 0.738 0.209 0.064 0.522 0.0144200 0.594 0.189 0.08 0.37 0.0074数据分析从上图可以看出,在常温处理下,随着多效唑浓度的增加,丙二醛的含量逐渐增加,在50、100、200mg/L的浓度处理下,丙二醛的含量分别为对照组的1.15、1.74、2.06倍。
在40℃处理下,随着多效唑浓度发增加,丙二醛的含量呈现先增后减的趋势,在50、100、200mg/L 的浓度处理下,丙二醛的含量分别为对照组的1.21、1.87、0.96倍,在100mg/L的浓度下,丙二醛的含量增加最多。
且在0、50、100mg/L多效唑浓度下,40℃均比常温处理下的丙二醛的含量高,而在200mg/L的多效唑浓度下,40℃比常温处理下的丙二醛的含量低。
4.实验结果该实验结果表明,不同浓度的多效唑浸种处理均可不同程度的提高小麦幼苗的根系活力、叶绿素含量及根冠比,使根重增加,抑制茎的生长。
而且通过广口瓶法,可以分析得到,多效唑的浓度越高,对植物的呼吸的抑制作用就越强。
而且不同浓度的多效唑多小麦幼苗的抗逆性也不同。
这个根据丙二醛(MDA)的测定中可以得出结论,在多效唑浓度逐渐增高的过程中,小麦幼苗的抗逆性也在逐渐提升【5】。
而且该实验也表明多效唑在抑制呼吸作用的同时,还增加了叶绿素的含量,因此在农业生产中可能对作物增长有一定的帮助【9】。
参考文献【1】廖联安,郭奇珍.新型植物生长延缓剂和杀菌剂——氯丁唑[J].植物生理学通讯.1985(6).56-58。
【2】黄卫东,PP333——一种新的植物生长延缓剂[J].园艺学报,1988,15(1)【3】张盒渝,汤日圣,梅传生等编著多效唑使用技术[M].南京:江苏科技技术出版社,1992【4】熊庆娥,植物生理学实验教程[M].成都:四川科学技术出版社.2003。