检测方法比较
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两种不同方法检测甲胎蛋白的比较摘要】目的探讨研究酶联免疫吸附法(ELISA)和电化学发光分析法(ECLIA)对甲胎蛋白(AFP)检测的效果。
方法对65例血清标本同时采用ELISA 和ECLIA方法进行AFP检测,并对同一标本连续测定20次进行批内变异的比较,同时对标本每天测定1次,连续测定20天进行批间变异比较。
评价两种方法的稳定性、敏感性及重复性。
结果ECLIA其检出限为0.50μg /ml,线性范围为0.50μg /ml~ 3000μg /ml;当AFP<400μg/ ml时,ELISA和CL对AFP检测敏感性差别无统计学意义;当AFP>400μg/ ml时,ECLIA检测敏感性高于ELISA,P <0.05,有统计学差异;ECLIA低、中、高值批内和批间CV均小于5,较ELISA重复性好、稳定性高。
结论ECLIA敏感性高、稳定性、重复性好。
【关键词】甲胎蛋白电化学发光分析法酶联免疫吸附法【中图分类号】R446.6 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752(2012)13-0280-02Two different methods for the detection of alpha-fetoprotein comparison. Hu xiao-qing, The People's Hospital Laboratory of Nanxiong, Nanxiong Guangdong,512400 China.【Abstract】 Objectives Study of ELISA and ECLIA on alpha-fetoprotein( AFP ) detection effect.Methods On65 serum specimens from patients with ELISA and ECLIA methods for AFP detection, and determination of the same specimen consecutive20times within a batch variability compared to specimens were measured every day,1 times,20 days of continuous determination of interassay variation comparison. Evaluation of two methods of stability, sensitivity and reproducibility.Results ECLIA the detection limit is0.50μg / ml, linear in the range of 0.50μg / ml ~3000μg / ml; when AFP <400μg / ml, ELISA and CL on AFP detection sensitivity difference was not statistically significant; when AFP >400μg / ml, ECLIA detection sensitivity is higherthan that of ELISA, P < 0.05, with statistical difference; low, high value of ECLIA, intra and inter CV were less than 5, is ELISA good repeatability, high stability.Conclusions ECLIA high sensitivity, stability, good repeatability.【Key Words】 AFP ECLIA ELISA甲胎蛋白(Alpha fetal protein, AFP)是1956年Bergstrandh和Czar在人胎儿血清中发现的一种单一多聚体肽链的糖蛋白,其分子量平均为68000[1],系肝细胞内粗面内网核糖颗粒所合成,在胎儿血清中正常存在的一种特殊蛋白,正常成人肝细胞失去合成AFP的能力。
分析检测食品中菌落总数检测方法的比较研究谢范英(宁德市产品质量检验所,福建宁德 352100)摘 要:本文比较了大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌3种标准菌株分别在平板计数琼脂、3M菌落总数测试片和MicroFast®AC菌落总数测试片3种培养基中的菌落形态,并采用这3种方法对6类共60批次食品样品进行菌落总数测定。
结果表明,3M菌落总数测试片在菌落辨识度上有明显优势,更适用于复杂基质样品的检测;3M菌落总数测试片和MicroFast®AC菌落总数测试片测得的结果与平板计数法测得的结果无显著差异,菌落总数测试片法操作简单,节省空间,但成本较高,食品检测机构和相关企业可根据实际工作情况选择检测方法。
关键词:菌落总数;平板计数法;3M菌落总数测试片;MicroFast®AC菌落总数测试片Comparative Study on Detection Methods of Total BacterialColonies in FoodsXIE Fanying(Ningde Product Quality Inspection Institute, Ningde 352100, China)Abstract: In this paper, the colony morphology of three standard strains of Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Bacillus cereus were compared in three kinds of medium: plate counting AGAR, 3M colony count test tablet and MicroFast®AC colony count test tablet, and the total number of colonies of 60 batches of food samples of 6 types were detected by these three methods. The results showed that 3M colony count test tablet had obvious advantages in the identification of colonies, and was more suitable for the detection of complex matrix samples. There is no significant difference between the results of 3M and MicroFast®AC total colony count test tablets and those of plate count method. Moreover, the total colony count test tablet method is simple to operate, saves space, but also has high cost. Food testing institutions and related enterprises can choose testing methods according to actual work conditions.Keywords: total number of colonies; standard plate count; 3M colony count test tablet; MicroFast®AC colony count test tablet菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g (mL)检样中形成的微生物菌落总数[1]。
蛋白质的测定方法比较一、分光光度法1、测定原理:食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,分解产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,在pH 4.8 的乙酸钠-乙酸缓冲溶液中与乙酰丙酮和甲醛反应生成黄色的3,5-二乙酰-2,6-二甲基-1,4-二氢化吡啶化合物。
在波长400 nm 下测定吸光度值,与标准系列比较定量,结果乘以换算系数,即为蛋白质含量。
2、测定步骤:①试样消解:称取经粉碎混匀过40目筛的固体试样0.1g~0.5g(精确0.001g)、半固体试样0.2g~1g(精确至0.001g)或液体试样1g~5g(精确0.001g),移入干燥的100 mL 或250 mL 定氮瓶中,加入0.1 g硫酸铜、1 g 硫酸钾及5 mL 硫酸,摇匀后于瓶口放一小漏斗,将定氮瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。
缓慢加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热半小时。
取下放冷,慢慢加入20 mL 水,放冷后移入50 mL 或100 mL容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。
按同一方法做试剂空白试验。
②试样溶液的制备:吸取2.00 mL~5.00 mL 试样或试剂空白消化液于50 mL 或100 mL 容量瓶内,加1 滴~2 滴对硝基苯酚指示剂溶液,摇匀后滴加氢氧化钠溶液中和至黄色,再滴加乙酸溶液至溶液无色,用水稀释至刻度,混匀。
③标准曲线的绘制:吸取0.00 mL、0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL 和1.00 mL 氨氮标准使用溶液(相当于0.00μg、5.00μg、10.0μg 、20.0μg、40.0μg、60.0μg、80.0μg 和100.0μg 氮),分别置于10 mL 比色管中。
加4.0 mL 乙酸钠-乙酸缓冲溶液及4.0 mL 显色剂,加水稀释至刻度,混匀。
测定维生素A含量的两种方法比较目的通过比较测定维生素A含量的两种不同方法,为维生素A及其制剂的含量测定提供参考,从而建立一种快速、准确、简单的检测方法。
方法均采用高效液相色谱法测定,沸水浴回流皂化法采用甲醇-水(94∶6)为流动相,检测波长为300nm,色谱柱温度为40℃;加热超声法采用甲醇-水(98∶2)为流动相,检测波长为325nm,色谱柱温度为40℃。
结果通过检测,两种方法所得出的含量相差较小,相对误差均在 1.0%之内。
结论两种测定方法均科学有效,能对汤臣倍健维生素A维生素D软胶囊(儿童型)中维生素A的含量起到质量控制的目的。
方法2更为快捷简单,溶剂使用量少,能够节省检验成本,提高人员利用率。
[Abstract] Objective Through the comparison of two different methods for the determination of vitamin A content,provides the reference for the content determination of vitamin A and its preparation,and to establish a rapid,accurate,simple detection method. Methods All by HPLC,using methanol water boiling water bath reflux saponification method (94:6)as mobile phase,the detection wavelength was 300nm,column temperature was 40℃;using methanol water heating and ultrasonic method (98:2)as mobile phase,the detection wavelength was 325nm,column temperature was 40℃. Results By detecting the content of two kinds of methods,the less difference,relative error is within 1%. Conclusion Two analysis methods are scientific and effective,vitamin A vitamin D soft capsules(for children)content of vitamin A to the purpose of quality control. Methods 2 is more simple,less solvent consumption,can save the test cost,improve the utilization rate.[Key words] HPLC;Vitamin A;Comparison of methods维生素A(图1)可促进视觉细胞内感光色素的形成,调试眼睛适应外界光线强弱的能力,以降低夜盲症和视力减退的发生,维持正常的视觉反应。
几种大肠菌群检测方法的比较大肠菌群的定义:大肠菌群(coliform group)是指一大群需氧或兼性厌氧、在37℃培养24h能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
大肠菌群不是细菌学上的分类命名,而是根据卫生学方面的要求,提出的与粪便污染有关的细菌,即作为食品、水体等是否受过人畜粪便污染的指示菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。
根据进一步的生化试验,可将这群细菌再分为大肠艾希氏菌(俗称大肠杆菌)、弗氏柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群的检验基于它能分解乳糖能产酸产气、革兰氏染色阴性的重要特点。
标签:大肠菌群;发酵法;平板法;产酸产气大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广,在温血动物粪便和自然界广泛存在。
调查研究表明,大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。
粪便中多以典型大肠杆菌为主,而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物,其中有健康人粪便,也有肠道患者或带菌者的粪便,所以粪便内除一般正常细菌外,同时也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等),因而食品中有粪便污染,则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性,潜伏着食物中毒和流行病的威胁,必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
1 大肠菌群检验方法由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,即:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果.为了解国内VC含量测定方法及其应用方面的现状及发展态势.方法以"维生素C 或抗坏血酸和测定"为检索词对1994~2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A、B和医药卫生专辑进行篇名检索,对所得有关维生素C含量测定的文献数据分别以年代、作者区域、载刊等级、样品类型、测定方法等进行计量分析.结果核心期刊载刊文献占文献总量的45.06%,其中光度法占65.69%,电化法占18.63%,色谱法占12.75%;复杂被测样品文献占文献总量的45.06%,其中光度法占60.92%,色谱法占19.54%,电化法占10.34%.结论目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流,但近年来色谱法,特别是HPLC法上升趋势尤为明显.一.荧光法1.原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后,与邻苯二胺(OPDA)反应生成具有荧光的喹喔啉(quinoxaline),其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比,以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应,以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为0.022 g/ml。
2.适用范围本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定3. 注意事项3.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶,因此,抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生C。
3.2 某些果胶含量高的样品不易过滤,可采用抽滤的方法,也可先离心,再取上清液过滤。
3.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸,但它也有吸附抗坏血酸的作用,故活性炭用量应适当与准确,所以,应用天平称量。
O A B是指尿急[1,5],伴有或不伴有急迫型尿失禁,常伴有尿频和夜尿增多,尿动力学上可表现为逼尿肌过度活动,也可为其他形式的尿道-膀胱功能障碍,存在病理或代谢因素可以解释这些症状㊂因为这些症状会给患者造成极大的困扰,有证据显示,O A B 症状对患者的Q O L造成严重的负面影响㊂目前O A B尽管能用尿急感觉评分或尿急严重程度评分(O A B S S),这些都是基于患者的主观报告㊂尿急-尿频症状源于心理因素,排尿次数增加㊁不能节制的排尿冲动源于中枢神经系统的损害,以及逼尿肌的过度活动㊂因而,临床诊断O A B存在很多的差异,需要找到一种更为客观的诊断与评价治疗O A B的结果的方法,尤其对于没有经历泌尿外科培训的保健医疗提供者㊂有研究表明,尿液中某些蛋白分子,如神经生长因子(N G F)㊁P G E2等在O A B㊁膀胱出口梗阻(B O O)㊁逼尿肌过度活动以及间质性膀胱炎等疾病中表达明显增高;而病理状态下,O A B患者在其小的膀胱容量和感觉尿急时,尿N G F也会增加㊂B D N F是另一种在下尿路功能中无处不在的神经生长因子,无论是在正常状态还是病理状态下㊂本研究表明尿液中B D N F表达的检测,可以作为治疗O A B诊断和评价的判断指标[2-5]㊂参考文献[1]D MO C H OW S K I R R,N E WMA N D K.I m p a c t o f o v e r a c t i v e b l a d-d e r o n w o m e n i n t h e U n i t e d S t a t e s:r e s u l t s o f a n a t i o n a l s u r v e y[J].C u r r M e d R e s O p i n,2007,23(1):65-76.[2]T Y A G I P,K I L L I N G E R K,T Y A G I V,e t a l.U r i n a r y c h e m o k i n e sa s n o n i n v a s i v e p r e d i c t o r s o f u l c e r a t i v e i n t e r s t i t i a l c y s t i t i s[J].JU r o l.2012,187(6):2243-2248.[3]H A N N-C HO R N G K U O.P o t e n t i a l u r i n e a n d s e r u m b i o m a r k e r sf o r p a t i e n t s w i t h b l a d d e r p a i n s y n d r o m e/i n t e r s t i t i a l c y s t i t i s[J].I n t J U r o l,2014,21(1):34-41.[4]L I U H T,L I N H,K U O H C.I n c r e a s e d s e r u m n e r v e g r o w t h f a c-t o r l e v e l s i n p a t i e n t s w i t h o v e r a c t i v e b l a d d e r s y n d r o m e r e f r a c t o r y t o a n t i m u s c a r i n i c t h e r a p y[J].N e u r o u r o l U r o d y n,2011,30(8): 1525-1529.[5]T Y A G I P,K I L L I N G E R K,T Y A G I V,e t a l.U r i n a r y c h e m o k i n e sa s n o n i n v a s i v e p r e d i c t o r s o f u l c e r a t i v e i n t e r s t i t i a l c y s t i t i s[J].JU r o l,2012,187(6):2243-2248.㊃短篇论著㊃两种方法检测群体反应性抗体的比较分析*王琳1,赵云平2,胡伟3,贾蔚4,黄范怡1,白敏凤1,尹利民2ә(1.昆明医科大学,云南昆明650500;2.昆明市第一人民医院检验科,云南昆明650011;3.昆明市第一人民医院泌尿外科,云南昆明650011;4.昆明市第一人民医院健康体检中心,云南昆明650011)摘要:目的对流式荧光法和酶联免疫吸附实验(E L I S A)法在群体反应性抗体(P R A)的检测中进行比较和评价㊂方法选取昆明市第一人民医院2016年9月至2019年4月门诊及住院患者2907例,采用流式荧光法或E L I S A法检测患者血清P R A,比较两种方法的阳性率,同时抽取40例患者采用两种方法同时进行检测㊂结果 E L I S A法P R AⅠ类㊁Ⅱ类及总阳性率分别为9.0%(103/1142)㊁8.1%(92/1142)㊁13.7%(156/1142),流式荧光法分别为22.9%(404/1765)㊁21.9%(387/1765)㊁34.3%(606/1765)㊂采用两种不同方法同时对40例患者P R A进行检测,两种方法的一致性极低㊂结论流式荧光法检测P R A阳性率明显高于E L I S A法,实验室宜采用灵敏度较高的流式荧光法进行P R A检测㊂关键词:群体反应性抗体;流式荧光法;酶联反应吸附法器官移植已成为许多实质器官终末期疾病唯一有效的治疗方法,但同时也面临着移植排斥等诸多问题[1-2]㊂群体反应性抗体(P R A)是一种由人类白细胞抗原(H L A)错配产生的抗体㊂P R A与移植物存活和排斥反应的发生密切相关[3-6]㊂准确检测P R A对于科学评估移植患者的免疫状态至关重要[7]㊂传统P R A的检测采用酶联免疫吸附实验(E L I S A)的方法,近年来出现了流式荧光法的检测方法,但关于两种不同方法的阳性率及一致性的研究报道相对较少㊂本研究拟将两种不同P R A检测方法的阳性率及一致性进行比较,为P R A检测的方法选择及临床应用提供参考依据㊂1资料与方法1.1一般资料选取本院2016年9月至2019年4月门诊及住院患者2907例㊂其中1142例采用E L I S A法进行检测,1765例采用流式荧光法进行检测㊂同期抽取40例患者同时采用两种不同方法进行检测㊂*基金项目:昆明市卫健委医药卫生科技计划项目(2017-11-01-021)㊂ә通信作者,E-m a i l:y l m b j@163.c o m㊂1.2 仪器与试剂 两种不同方法的P R A 检测试剂均购于美国O N E L AM B D A 公司,分别为L A T 1240和L A B S c r e e n P R A 试剂㊂仪器主要有L u m i n e x 200流式点阵分析仪(L u m i n e x 公司)㊁E L X 800酶标仪(B i o T e k 公司)㊂1.3 方法 两种方法均严格按照试剂说明书进行,结果判定依据试剂盒规定的标准进行判定㊂1.4 统计学处理 采用S P S S V 22.0统计学软件对数据资料进行统计分析㊂计数资料率的组间比较采用χ2检验㊂配对计数资料采用M c N e m a r 检验与K a p pa 检验,以P <0.05为差异有统计学意义㊂2 结 果2.1 两种不同方法的P R A 阳性率比较 E L I S A 法P R AⅠ类㊁Ⅱ类及总阳性率分别为9.0%(103/1142)㊁8.1%(92/1142)㊁13.7%(156/1142),流式荧光法分别为22.9%(404/1765)㊁21.9%(387/1765)㊁34.3%(606/1765);两种不同方法P R AⅠ类㊁Ⅱ类及总阳性率差异具统计学意义(P <0.01),见表1㊂表1 两种不同方法的P R A 阳性率比较[n (%)]项目nP R A Ⅰ类阳性P R A Ⅱ类阳性P R A Ⅰ类+Ⅱ类阳性E L I S A 法1142103(9.0)92(8.1)156(13.7)流式荧光法1765404(22.9)387(21.9)606(34.3)χ292.6496.93153.22P<0.01<0.01<0.012.2 两种不同检测方法P R A 结果一致性比较 采用两种不同方法同时对40例患者P R A 进行检测,见表2,从结果可见,两种方法的一致性极低,差异有统计学意义(P <0.01;K a p pa =0.01~0.06)㊂表2 两种不同方法P R A 结果一致性比较(n )项目P R A Ⅰ类E L I S A 法+-P R AⅡ类E L I S A 法+-P R AⅠ类+Ⅱ类E L I S A 法+-流式荧光法 +223223434 -15152P<0.01<0.01<0.01K a p pa 0.060.060.013 讨 论20世纪60年代,P R A 开始应用于临床,在肾移植患者的筛选以及减少移植后排斥反应的发生方面都起到了很好的指导作用[8-9]㊂近年来,随着体液免疫理论的不断完善及P R A 实验技术的进步,P R A 在体液免疫的作用越来越受到重视㊂最初,P R A 的检测是采用微量淋巴细胞毒(C D C )试验方法㊂但该方法试剂贮藏㊁运输不便,容易出现假阳性和假阴性反应,而且无法区分Ⅰ类和Ⅱ类抗体㊂随着技术的发展,出现了比C D C 方法更方便㊁灵敏的E L I S A 法,并在临床广泛应用㊂近年来,随着技术的进步,出现了流式荧光的检测方法㊂但关于流式荧光法与E L I S A 法的阳性率及一致性的研究报道相对较少㊂本研究通过对两种不同P R A 检测方法的阳性率及一致性进行比较,结果显示,流式荧光法检测P R A 灵敏度明显高于E L I S A 法,两种不同方法的一致性极低㊂E L I S A 法是将H L A 抗原包被在泰萨奇板上,通过碱性磷酸酶标记,在酶标仪上进行检测㊂流式荧光法是将提纯后的抗原包被在微颗粒免疫磁珠上,通过荧光物质标记抗体,在流式荧光仪进行检测㊂流式荧光法标记的抗原种类㊁数量多于E L I S A 法,而且所用的标记技术的灵敏度也高于E L I S A 法㊂因此,本研究结果与理论预期相符㊂灵敏度更高的P R A 检测方法意味着能够提高阳性检出率,更加及时发现抗H L A 抗体阳性患者,指导临床及时制定脱敏方案,降低移植排斥反应的发生,延长移植器官长期有功能存活时间㊂此外,流式荧光法的检测时间及精密度均优于E L I S A 法㊂因此,流式荧光法在临床上的应用将会越来越普遍,逐步替代E L I S A 法㊂流式荧光法检测P R A 具有诸多优点,然而也存在着一些的不足之处,例如,实验仪器对环境温度要求较高;试剂成本相对于E L I S A 法偏高;实验操作对人员的要求高,操作过程不当会使微珠丢失过多,影响实验结果等㊂由于存在这些问题,实验室需要做好全面的质量控制工作,保证检测结果的质量㊂综上所述,流式荧光法检测P R A 阳性率明显高于E L I S A 法,实验室宜采用灵敏度较高的流式荧光法进行P R A 检测,更好地指导临床的实践,不断降低排斥反应的发生率,延长移植物的存活时间㊂参考文献[1]张磊.群体反应性抗体对再次肾移植患者的影响研究[J ].现代生物医学进展,2014,33(14):6496-6498.[2]A L T H A F M M,E L K O S S I M,J I N J K,e t a l.H u m a n l e u k o c y t ea n t i g e n t y p i n g a n d c r o s s m a t c h:A c o m p r e h e n s i v e r e v i e w[J].W o r l d J T r a n s p l a n t,2017,7(6):339-348.[3]S A P I R-P I C HH A D Z E R,T I N C K AM K J,L A U P A C I S A,e t a l.I mm u n e S e n s i t i z a t i o n a n d M o r t a l i t y i n W a i t-L i s t e d K i d n e y T r a n s-p l a n t C a n d i d a t e s[J].J A m S o c N e p h r o l,2016,27(2):570-578.[4]S A Y I N B,O Z D E M I R A,A Y V A Z O G L U S O Y E H,e t a l.O v e r5Y e a r s o f E x c e l l e n t G r a f t K i d n e y F u n c t i o n D e t e r m i n a n t s:B a s k e n t U n i v e r s i t y E x p e r i e n c e[J].E x p C l i n T r a n s p l a n t,2019,17(S u p p l 1):75-77.[5]F U Q,Z H A N G H,N I E W,e t a l.R i s k F a c t o r s f o r A c u t e R e j e c t i o nA f t e r D e c e a s e d D o n o r K i d n e y T r a n s p l a n t a t i o n i n C h i n a[J].T r a n s p l a n t P r o c,2018,50(8):2465-2468.[6]N A K AMU R A Y,Y O S H I O K A D,M I Y A G AWA S,e t a l.S u c c e s s-f u l H e a r t T r a n s p l a n t a t i o n A f t e r D e s e n s i t i z a t i o n i n a P a t i e n t W i t hE x t r e m e l y H i g h P a n e l-R e a c t i v e A n t i b o d y L e v e l s a n d P r e t r a n s-p l a n t D o n o r-S p e c i f i c A n t i b o d y:A C a s e R e p o r t[J].T r a n s p l a n t P r o c,2018,50(10):4067-4070.[7]T A I T B D.D e t e c t i o n o f H L A A n t i b o d i e s i n O r g a n T r a n s p l a n tR e c i p i e n t s-T r i u m p h s a n d C h a l l e n g e s o f t h e S o l i d P h a s e B e a d A s-s a y[J].F r o n t I mm u n o l,2016,7(5):710-719.[8]朱兰.预致敏受者行死亡捐献供肾肾移植的处理策略及临床效果[J].中华医学杂志,2019,12(99):1011-1016.㊃短篇论著㊃补肾活血方治疗腰椎间盘突出症的康复护理效果检验*刘逸,陈晓峰,刘奕(广州市番禺区中医院,广东广州511400)摘要:目的观察对腰椎间盘突出症采用补肾活血方治疗时的康复护理结果㊂方法研究选取2018年3月至2018年12月该院收治的76例腰椎间盘突出症患者,入院后两组均接受补肾活血方治疗;随机抽签法分为两组,各38例,在治疗基础上对照组患者采用常规护理,观察组患者采用康复护理干预,对比两组护理后治疗效果㊂结果干预前对照组V A S评分与观察组对比,差异无统计学意义(P>0.05),干预2周后,观察组V A S 评分然低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组椎间盘功能对比,干预前观察组O D I评分与对照组对比,差异无统计学意义(P>0.05),经2周干预后,观察组患者O D I评分低于对照组,差异有统计学意义(P< 0.05)㊂随访3月后,观察组患者直腿抬高试验阳性㊁腰腿疼痛发生率低于对照组,差异有统计学意义(P< 0.05)㊂结论临床对腰椎间盘突出症患者实施补肾活血方治疗基础上,联合康复护理干预,有助于提高患者认知水平,减少腰腿疼痛发生率,巩固临床治疗效果,值得推广㊂关键词:康复护理;腰椎间盘突出症;腰腿疼痛;康复认知水平腰椎间盘突出症是临床脊柱外科常见的多发性疾病,其主要因椎间盘退变压迫神经根㊁脊髓等敏感部位所致,病症以行动困难㊁腰腿疼痛为主要表现,其多发于中老年群体[1]㊂有研究指出,再给予患者手术治疗同时,早期康复护理干预,对改善患者生存质量,降低腰腿疼痛具有积极作用㊂鉴于此,本研究对76例腰椎间盘突出症患者实施补肾活血方同时,予以早期康复护理干预,观察其效果,现报道如下㊂1资料与方法1.1一般资料随机抽取本院2018年3-12月收治的腰椎间盘突出症76例患者,入院经M R I㊁螺旋C T检查,直腿抬高试验㊁体格检查确诊为腰椎间盘突出症,均接受补肾活血方治疗,研究经医院伦理会批准㊂采用随机抽签法将76例分为两组,对照组38例,其中男22例,女16例,年龄35~73岁,平均(47.25ʃ2.33)岁;观察组38例,其中男23例,女15例,年龄34~75岁,平均(47.81ʃ3.02)岁㊂纳入标准:患者均自愿参与研究,并签署知情书;且患者确诊为腰椎间盘突出症,符合手术适应证㊂排除标准:不愿配合研究者,合并精神疾病㊁认知障碍患者㊂1.2方法入院后,两组患者均给予补肾活血方治疗,补肾活血方:取白芍㊁丹参各30g,菟丝子㊁巴戟天㊁山萸肉㊁鹿角胶各15g,乳香㊁牛膝㊁枸杞子㊁杜仲㊁川芎㊁当归各10g,甘草5g;以水煎煮,每日一剂,早晚分服㊂中药熏洗,采用M D-99C型电脑熏蒸治疗床,患者腰背部进行熏蒸,注意盖好毛巾,30m i n/次, 1次/d㊂中药封包制成后,控制70ħ左右温度,对患者腰背部治疗,注意避免烫伤患者,根据其耐受控制温度,30m i n/次,2次/d㊂穴位敷贴选穴分别为阿是穴㊁承山穴㊁腰阳关㊁双侧肾俞等,每隔2d对选穴敷贴1次㊂两组都口服抗炎止痛药塞来昔布胶囊0.2m g/次,1次/d,甲钴胺片口服0.5m g/次,3次/d等㊂在此基础上,对照组予以心理㊁饮食干预㊁用药指导等常规护理干预;观察组接受早期康复护理,具体*基金项目:广东省中医药局中医药科研项目(20191262)㊂。
激光散射速率法:激光散射技术是指用激光作光源,在入射光方向以外,借检测
散射光强度、频移及其角度依赖等而得到粒子重量、尺寸、分布及聚集态结构等信息的方法的统称,有着广阔的用途。
就检测纳米材料而言,主要涉及频移及其角度依赖性的检测,这种散射技术又称动态光散射、准弹性光散射及光子相关光谱,分别以测定参数的性质、能量转移的大小及测定方法的原理而得名。
散射比浊法:散射比浊法是根据待验样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点的。
在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90°直角,当向样品中加入凝血激活剂后,随样品中纤维蛋白凝块的形成过程,样品的散射光强度逐步增加。
当样品完全凝固以后,散射光的强度不再变化,通常是把凝固的起始点作为0%,凝固终点作为100%,把50%作为凝固时间。
光探测器接收这一光学的变化,将其转化为电信号,经过放大再被传送到监测器上进行处理,描出凝固曲线
透射比浊测定法:是测定入射光强度由于溶液中粒子的散射而降低的程度,它并不直接测定散射的光强。
这一点与分光光度测定法极为类似。
用这种方法时,多用聚乙二醇(PEG)作为反应增强剂。
这种非离子型聚合物可以降低抗原抗体复合物的溶解度。
免疫层析法:是近几年来国外兴起的一种快速诊断技术,其原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品(尿液或血清)后,由于毛细管作用,样品将沿着该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合,若用免疫胶体金或免疫酶染色可使该区域显示一定的颜色,从而实现特异性的免疫诊断。
目的: 评估透射免疫比浊法和速率散射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的灵敏度和特异性.方法:
用免疫透射比浊法和速率散射比浊法同时检测了80例各种患者血清中CRP浓度. 结果: 两种方法在8~20 mg/L 、20~40 mg/L、40~80 mg/L、80~160 mg/L、160~300 mg/L范围内测定C 反应蛋白的相关系数是0.990、0.996、0.995、0.992、0.997,说明两种方法的相关性是良好的,而在低值1~8 mg/L的测定中两方法的相关系数为0.928.结论: 速率散射免疫比浊法在低值和高值测定中可以得到较为准确的CRP检测结果.
【摘要】目的:评估透射免疫比浊法和速率散射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的灵敏度和特异性.方法:用免疫透射比浊法和速率散射比浊法同时检测了80例各种患者血清中CRP浓度.结果:两种方法在8—20mg/L、20~40mg/L、40~80mg/L、80~160mg/L、160~300mg/L范围内测定C反应蛋白的相关系数是0.990、0.996、0.995、0.992、0.997.说明两种方法的相关性是良好的,而在低值1~8mg/L的测定中两方法的相关系数为0.928.结论:速率散射免疫比浊法在低值和高值测定中可以得到较为准确的CRP检测结果. 【关键词】透射免疫比浊法散射免疫比浊法C反应蛋白在急性应急性疾病时如大手术、重度创伤、心肌梗死、严重感染、肿瘤等,血浆中某些蛋白浓度可明显增高或降低,这种现象称为急性时相反应,这些蛋白统称
为急性时相反应蛋白.最具有代表性的急性时相蛋白首推C反应蛋白(CRP),CRP是目前临床上最有用的急性
时相反应的一个敏感指标.CRP作为炎症标志物,本身尽管为非特异性的,但对于细菌感染、各种炎症过程及组织坏死与损伤及其恢复期的筛检、监测、病情评估与疗效判断,都具有重要的意义J.CRP的检测方法目前使
用比较多的有胶乳凝集试验、免疫沉淀法、免疫浊度法和标记免疫测定法等,而其中的透射免疫比浊法和速率散射比浊法是目前公认为检测CRP较为精确的两种方法.为了评估两种方法的灵敏度和特异性,我们收集
了80份血清,用免疫透射比浊法和速率散射比浊法分别进行CRP的检测,并作了结果比较. 一、材料与方法1、标本来源样本血清来源于80例本院门诊和住院病人,其中骨折病员21例,确诊的恶性肿瘤病人15例,急性肺炎病员22例,冠心病病人10例,外科手术病员12例.采集空腹血后及时分离血清,并置-20℃保存备用. 2、仪
器日立7170型自动生化分析仪,BeckmanArray 360特定蛋白检测系统. 3、试剂透射免疫比浊法试剂盒及配
套的校准品由上海基恩科技有限公司提供,批号为ISEP03.速率散射免疫比浊法:Beckman公司提供的C反应蛋白试剂及C反应蛋白定标卡,定标液,批号为M2070527. 4、方法(1)免疫透射比浊法将标准品稀释配制
成5个不同浓度的标准品--10mg/L、19mg/L、38mg/L、76mg/L、162mg/L,进行5点定标,形成标准曲线.样本为20 uL,试剂1为180 uL,试剂2为35uL,吸光度为340nm,5分钟后进行透射比浊. (2)速率散射免
疫比浊法将该公司配备的定标卡进行校准,样本量为200l,试剂量为50,0.5分钟完成比浊测定. 5、统计方法检验结果以x±s表示,以SPSS10.0软件包中Studentt检验作统计学处理. 二、结果不同CRP浓度同时以两
种方法检测所得结果如表1所示. 三、讨论人体CRP与相应的抗血清在液相中反应,生成抗原抗体复合物,
并产生浊度,其浊度的高低与标本中的CRP浓度呈正比,根据标准曲线,即可计算出标本中的CRP的浓度,这是透射免疫比浊法的测定原理[4].速率散射免疫比浊法是一种抗原抗体结合反应的动态测定法J,将各单位时间内CRP与抗血清形成复合物的速率及复合物颗粒产生的散射信号连接在一起,即形成动态动力学的速率散射免疫比浊法. 实验结果表明,两种方法在8~20mg/L、20~40mg/L,40~80mg/L,80~160mg/L,160~
300mg/L范围内测定C反应蛋白的相关系数是0.990、0.996、0.995、0.992、0.997,说明两种方法的相关性是良好的.而在低值1~8mg/L的测定中两方法的相关系数为0.928,由于在透射免疫比浊法检测中,如果抗原抗体复合物的数量太少,对光通量的影响不大,如果复合物分子太小则阻挡不了光线的通过,在低
浓度的C反应蛋白血清测定中会有所影响.而速率散射免疫比浊法是以测定单位时间内抗原抗体反应复合物形成的最快时间段的信号值,产生的散射信号最强,形成最大速率散射信号峰值.理论上讲,该测定不受本底散
射信号的干扰,使检测快速,灵敏度高,对检测微量的C反应蛋白比较理想[6].在高浓度的C反应蛋白测定中,
由于抗原过量,透射比浊法测定时,CRP浓度明显超出了检出限上限,发生测定结果显著低于实际含量.而在速
率散射免疫比浊分析中,为保证准确性和精确度,仪器设计有抗原过量检测系统,提示应将待测样本进一步稀释,重新进行检测,以获取全部抗原的真实浓度.由此看来,在比较试验中,速率散射免疫比浊法在低值和高值
测定中可以得到较为准确的结果. 目前已有测定超敏CRP的免疫增强透射比浊法在日立7170A生化分析仪
上的应用的报道,其检测范围在0.125~12.5mg/L,具有更高的灵敏度,可以参考推广应用. [参考文献] [1]
冯仁丰.急性相和C反应蛋白[J].上海医学检验杂志,1999,14(5):258—259.[2]杨振修.C反应蛋白的检
测[J].上海医学检验杂志,1999,14(5):261—262.[3]Young B,GleesonM,Cripps AW.C-reactive protein:a critical review[J].Pathlogy,1991,23:118—224.[4]杨溢.免疫比浊法测定血清C一反应蛋白(CRP)的评价[J].四川省卫生管理干部学院学报,2003,22(3):165—166.[5]陈晓玲.速率散射比浊法与胶乳凝集法检测血清C反应蛋白的评价[J].上海医学检验杂志,2002,17:141—145.[6]陶义训.现代医学检验仪器导论[M].上海:
上海科学技术出版社,2002.85—97.[7]胡敏.免疫增强透射比浊法测定超敏C一反应蛋白的方法学评价[J].湖南医科大学学报,2003,28(4):415—416.。