nm23、ki67在恶性淋巴瘤中的表达及意义

山东医药２００９年第４９卷第２期　

ｎｍ２３、ｋｉ６７在恶性淋巴瘤中的表达及意义　

尹相丛　。杨金平　。李贵新　，孙秀梅　，路中　，魏素臻　

（１潍坊医学院，山东潍坊２６１０４２；２潍坊医学院附属医院）　

［摘要］　采用免疫组化ｓＰ法检测６ｏ例淋巴瘤、２０例反应性淋巴结炎和２０例正常淋巴结组织中的ｎｍ２３、　

ｋｉ６７，并分析两者与临床病理参数的关系。结果在正常淋巴组织中ｎｍ２３、ｋｉ６７呈低水平表达。随淋巴瘤恶性程度　

的提高ｎｍ２３和ｋｉ６７的表达均增强（Ｐ＜０．０１）。Ｎｍ２３、ｋｉ６７的高表达与患者年龄大、恶性程度高、临床分期高、结　

外累计部位数多及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）增高有关（Ｐ均＜０．０１）。两者的表达水平呈正相关（ｒ＝０．７５６，Ｐ＜０．０１）。　

认为恶性淋巴瘤组织中ｎｍ２３、ｋｉ６７表达升高，其表达水平可反映淋巴瘤的恶性程度。　

［关键词］淋巴瘤；ｎｍ２３蛋白；ｋｉ６７抗原　

［中图分类号］　Ｒ７３０．４　【文献标识码］　Ｂ　［文章编号】１００２－２６６Ｘ（２００９）０２－００９７－０２　

淋巴瘤分为霍奇金淋巴瘤（ＨＬ）和非霍奇金淋　

巴瘤（ＮＨＬ）两大类。ｎｒｎ２３基因是目前较为公认的　

肿瘤转移抑制基因，在多种实体瘤中能抑制肿瘤细　

胞的远处转移和植入，与预后呈负相关…。Ｋｉ６７是　

一种与细胞周期密切相关的核抗原，是细胞的增殖　

性标志之一。２００４年１月～２００８年３月，我们采用　

免疫组化ｓＰ法检测淋巴瘤组织中ｎｍ２３蛋白和　

ｋｉ６７抗原，探讨其与淋巴瘤的恶性度的关系。　

１材料与方法　

１．１　临床资料经病理证实的淋巴瘤患者６Ｏ例，　

男３３例，女２７例；年龄ｌ５～７８岁，平均４８岁。病　

理分型：ＨＬ　９例，ＮＨＬ　５１例；临床分期按照Ａｎｎ　Ａｒ－　

ｂｏｒ标准，Ｉ～Ⅱ４３例，Ⅲ一Ⅳｌ７例。恶性度分级　

参照１９９３年“国际淋巴瘤预后指标”。Ｉ、Ⅱ、Ⅲ、　

Ⅳ级淋巴瘤分别为２６、ｌ７、ｌＯ和７例，Ｉ、Ⅱ级为低　

度恶性淋巴瘤，Ⅲ、Ⅳ级为高度恶性淋巴瘤。另选取　

２０例反应性增生淋巴组织和２Ｏ例正常淋巴结组织　

做对照。所有患者均留取手术切除标本。　

１．２　ｎｍ２３和ｋｉ６７的检测方法采用免疫组化ＳＰ　

法。用已知阳性切片作阳性对照，以ＰＢＳ代替一抗　

作为阴性对照。随机选择２０个视野，高倍镜（×　

４００）下计数５００～ｌ　００Ｏ个细胞中的阳性细胞，分别　

计算ｎｍ２３一ＨＩ和Ｋｉ６７阳性细胞百分率。阳性细胞　

０～５％为（一），６％～２５％为（＋），２６％～５０％为　

（＋＋），阳性细胞数＞５０％为（＋＋＋）。参照Ｆｒｏ—　

ｍｏｗｉｔｚ方法，（一）、（＋）为低水平表达，（＋＋）、　

（＋＋＋）为高水平表达。　

１．３统计学分析采用ＳＰＳＳ１２．０统计软件。计数　

资料比较用　检验，等级资料比较用Ｍａｎｎ—Ｗｈｉｔｎｅｙ　

检验，等级相关分析采用非参数Ｓｐｅａｒｍａｎ检验。Ｐ　≤０．０５为差异有统计学意义。　

２结果　

２．１不同淋巴组织中Ｎｍ２３、ｋｉ６７在的表达ｎｍ２３　

在反应性增生淋巴组织中呈阴性或弱阳性表达，未　

见强阳性表达，阳性颗粒位于细胞质中。Ｋｉ６７在反　

应性增生淋巴组织中阳性细胞主要集中于生发中　

心，生发中心以外的区域只有少数散在分布的较大　

的转化淋巴细胞见阳性信号。两者在正常淋巴组织　

中均未见表达。ｎｍ２３在淋巴瘤中的阳性表达主要　

定位于细胞质；Ｋｉ６７阳性染色定位于细胞核。不同　

淋巴组织中ｎｍ２３一Ｈ１、ｋｉ６７的表达见表１。　

表ｌ不同淋巴组织中ｎｍ２３一ＨＩ、ｋｉ６７的表达（１１）　

注：与反应增生性淋巴结炎和正常淋巴结组织比较，‘Ｐ＜０．０１　

２．３淋巴瘤组织中ｎｍ２３一Ｈ１、ｋｉ６７表达与临床病理　

参数的关系见表２。　

２．３　Ｎｍ２３一Ｈ１、ｋｉ６７表达的相关性（ｒｉｍ２３阳性的　

２１例中，ｋｉ６７阳性１９例，阴性２例；ｎｍ２３阴性的３９　

例中，ｋｉ６７阳性５例，阴性３４例。经Ｓｐｅａｒｍａｎ等级　

相关分析，ｎｍ２３．Ｈ１与ｋｉ６７的表达水平呈正相关（ｒ　

＝０．７５６，Ｐ＜０．０１）　

３讨论　

Ｎｍ２３基因与癌细胞的转移潜能密切相关。在　

实体瘤中ｎｍ２３蛋白的表达可抑制肿瘤细胞的远处　

转移和植人，与患者的预后呈负相关。但在造血系　

统肿瘤研究中Ｈ　发现，ｎｍ２３蛋白在正常淋巴细胞发　

育早期表达明显增多，能抑制鼠和人类白血病细胞　

９７　山东医药２００９年第４９卷第２期　

表２淋巴瘤中ｎｍ２３一Ｈ１、ｋｉ６７的表达与临床病例参数的关系（ｎ）　

临床病理参数　＿ｉ蕊　Ｐ值］蕊　。　低表达　高表达　低表达　高表达　Ｐ值　

年龄（岁）　＜０．Ｏ１　

／＞５０　１９　７　１２　６　

＜５０　４１　３２　９　３０　

病理类型　＞０．０５　

ＨＬ　９　６　３　５　

ＮＨＬ　５１　３３　１８　３１　

临床分期　＜０．０１　

Ｉ～Ｕ　４３　３４　９　３１　

Ⅲ～Ⅳ　１７　５　１２　５　

恶性度　＜０．０１　

低度　２１　１９　２　１８　

高度　３９　２０　１９　１８　Ｂ症状　＜０．０１　

有　２２　９　１３　６　

无　，　３８　３０　８　３０　结外累及部位数（个）　

Ｉ＞２　

＜２　

乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）　

明显升高　

正常水平　２１　

３９　

２８　

３２　７　

３２　

１１　

２８　１４　

７　＜Ｏ．Ｏ１　

（Ｏ．Ｏ１　６　３０　

１７　ｌ１　１７　

４　２５　７　＜Ｏ．Ｏｌ　

＞Ｏ．０５　

＜０．０ｌ　

＜Ｏ．０ｌ　

＜０．０１　

０．０１　

＜０．Ｏ１　

分化，抑制该蛋白的产生可逆转分化耐受细胞对分化　

诱导剂的敏感性。推测ｎｍ２３蛋白在正常和肿瘤造　

血细胞的增殖和分化中起重要作用，ｎｍ２３蛋白的过　

度表达与造血细胞肿瘤的发生、发展和预后有关。　

在本研究中我们采用免疫组化方法检测６０例　

淋巴瘤组织中的ｎｍ２３，发现ｎｍ２３蛋白在恶性淋巴　

瘤组织中表达明显增高，且表达水平与淋巴瘤的恶　

性程度呈正相关。我们还发现在强阳性细胞中阳性　

颗粒不仅表达在细胞质中，在细胞膜和细胞核中也　

能见到表达，提示可能ｎｍ２３蛋白合成增加或ｎｍ２３　

蛋白转移至胞膜或胞核进一步引起细胞某些功能异　

常，从而改变了肿瘤细胞的生物学行为，促使其浸润　

播散。进一步分析表明，ｎｍ２３一Ｈ１高表达与患者年　

龄增大、Ａｎｎ　Ａｒｂｏｒ分期高、结外累及部位数多及　

ＬＤＨ增高有关，且ｎｍ２３一Ｈ１高表达者，其完全缓解　

率低于低表达者。以上结果说明ｎｍ２３表达水平不　

仅能够反映恶性淋巴瘤的恶性程度，而且还能预测　

淋巴瘤患者的近期疗效和远期生存率，可以作为判　

定恶性淋巴瘤的预后因子。　

异常增高的分裂增殖能力是恶性肿瘤细胞的一　

个特异的生物学标志。Ｋｉ６７是一种与细胞分裂增　

殖有关的蛋白。检测Ｋｉ６７的表达水平可作为判断　

细胞增殖状态和肿瘤恶性程度的指标　。　

Ｔｉｅｍｏ　等检测了１３４例套细胞淋巴瘤组织中的　

ｋｉ６７抗原并对患者进行了跟踪随访，阳性率高的患　

者存活时间短于阳性率低者，而且ＣＯＸ回归分析显　

示，ｋｉ６７抗原是套细胞淋巴瘤的独立预后指标。本　

９８　研究发现，随淋巴瘤恶性程度增高，Ｋｉ６７表达水平　

逐渐增高，说明Ｋｉ６７是评估淋巴瘤肿瘤细胞增殖的　

良好指标，与淋巴瘤侵袭有关，对淋巴瘤临床分型、　

组织分级具有一定参考价值。　

综上所述，联合检测ｎｍ２３一Ｈ１、ｋｉ６７抗原有助于　

判定淋巴瘤的恶性程度和预后。　

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（收稿日期：２００８—１２－２９）　ｎ　ｎ　４加　￡ｊ　３　８　

巧９