GB生化需氧量(BOD5)的测定

实验（一）生化需氧量(BOD5)的测定一．实验原理在水样中加入硫酸锰和碱性碘化钾溶液，水中的溶解氧将二价锰氧化成四价锰的氢氧化物棕色沉淀。

加酸后，沉淀溶解，四价锰又可氧化碘离子而释放出与溶解氧量相当的游离碘。

以淀粉为指示剂，用硫代硫酸钠标准溶液滴定释放出的碘，可计算出溶解氧含量。

反应式如下：MnSO4+2NaOH=Na2SO4+Mn(OH)2↓2Mn(OH)2 +O2=2 MnO(OH)2↓（棕色沉淀）MnO(OH)2+2H2SO4=Mn(SO4)2+3H2OMn(SO4)2+2KI= MnSO4+K2SO4+I22Na2S2O3+I2=Na2S4O6+2NaI二．实验仪器、设备1．250mL溶解氧瓶。

2．250mL锥形瓶。

3．25mL酸式滴定管。

4．1mL、2mL吸管。

5．50mL移液管。

三．实验试剂1．硫酸锰溶液：称取36.4g硫酸锰(MnSO4·H2O )或48g（MnSO4·4H2O）溶于水中，稀释至100mL。

此溶液加至酸化过的碘化钾溶液中，遇淀粉不得产生蓝色。

2．碱性碘化钾溶液：称取50g氢氧化钠，溶解于30～40mL水中，另称取15g 碘化钾溶于20mL水中，待氢氧化钠溶液冷却后，将两溶液混合，加水稀释至100mL。

如有沉淀则放置过夜，倾出上清液，贮于棕色瓶中，用橡胶塞塞紧，避光保存。

此溶液酸化后，遇淀粉应不呈蓝色。

3．（1+5）硫酸溶液（标定硫代硫酸钠溶液用）。

4．1%（m/V）淀粉溶液：称取1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，再用刚煮沸的水稀释至100mL。

冷却后，加入0.1g水杨酸或0.4g氯化锌防腐。

5．重铬酸钾标准溶液（c 1/6 K2Cr2O7=0.025mol/L）：称取在105～110℃烘干2h，并冷却的优级纯重铬酸钾1.2258g溶于水中，移入1000mL容量瓶内，稀释至标线，摇匀。

6．硫代硫酸钠溶液[c Na2S2O3·5H2O≈0.0125 mol/L]：称取3.1g硫代硫酸钠溶于煮沸放冷的水中，加入0.2g碳酸钠，用水稀释至1000mL，贮于棕色瓶中。

使用前，用0.025mol/L重铬酸钾标准溶液标定。

标定方法：于250mL碘量瓶中，加入10.00 mL0.025mol/L重铬酸钾标准溶液，加入过量的酸性碱化钾，密塞，摇匀。

于暗处静置5min后，用待标定的硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为止，记录用量。

式中：C——硫代硫酸钠溶液的浓度，mol/L；V——滴定时消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL。

7．浓硫酸：ρ=1.84。

四．实验步骤1．溶解氧的固定：用吸管插入溶解氧瓶的液面下加入1mL硫酸锰溶液、2mL 碱性碘化钾溶液，盖好瓶塞，颠倒混合数次，静置。

待棕色沉淀物降至瓶内一半时，再颠倒混合一次，待沉淀物下降到瓶底（一般在取样现场固定）。

2．溶解：打开瓶塞，立即用吸管插入液面下加入2.0mL浓硫酸。

小心盖好瓶塞，颠倒混合摇匀，至沉淀物全部溶解，放于暗处静置5min。

3．滴定：吸取100.00 mL上述溶液于250mL锥形瓶中，用硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去，记录硫代硫酸钠溶液用量。

用下式计算水样中溶解氧浓度：=溶解氧（O2，mg/L）式中：C——硫代硫酸钠溶液的浓度，mol/L；V——滴定时消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL。

滴定前硫代硫酸钠滴定后硫代硫酸钠消耗量当日水样0 7.7ml 7.7ml22ml 24.5ml 2.5ml三日后水样（1:1）Na2S2O3被滴定后的浓度：C=0.026mol/L Na2S2O3消耗体积7.7ml=溶解氧（O2mg/L）=（0.026x7.7x8x100）/100=16mg/L三日后生化学氧量：Na2S2O3被滴定后的浓度：C=0.026mol/L Na2S2O3消耗体积2.5ml)=溶解氧（O2mg/L）=（0.026x2.5x8x1000）/100=5.2mg/L由于水样为1:1的水样，所以溶解氧（O2，mg/L）= (16-5.2)/2=5.4mg/L六、思考与讨论1、怎样取水样进行培养？答：用虹吸法将水样吸入两个溶解氧瓶，移入过程中注意不要产生气泡，以同样的操作使两个溶解氧平充满水样并溢出少许，加塞水封（瓶内不得有气泡）测定一瓶中的溶解氧，将另一瓶放入培养箱中，在20摄氏度左右在培养箱中培养三天，测定其溶解氧。

2、什么是生化需氧量？有哪些测定方法？答：生化需氧量是指在规定条件，微生物分解说中某些课氧化的物质（主要是有机物）的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可悲微生物降解的有机物质的含量，是反映有机污染的重要类别指标之一。

测定的方法有稀释接种法，为生物传感器发，活性污泥曝气降解法，库伦滴定法。

（实验二）化学需氧量的测定一、实验目的和要求（一）、掌握容量法、库伦滴定法测定化学需氧量的原理和技术，熟悉库伦测定仪的原理和操作方法。

（二）、复习第二章有机物污染物综合指标的含义及测定方法。

二、重铬酸钾法（COD)（一）原理再强酸性溶液中，准确加入过量的重铬酸钾标准溶液，加热回流江水扬中的还原性物质氧化，过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液回滴，根据所需要的重铬酸钾标准溶液量计算水样化学需氧量。

（二）仪器（！）250ml的全回流玻璃装置。

（2）加热装置（3）25ml或50ml酸式滴定管、锥形瓶、移液管、容量瓶。

（三）实验步骤（1）取20.00ml混合均匀的水样置于250ml磨口的回流锥形瓶中，准确加入10.00急数粒小玻璃珠，连接磨口回流冷凝管，从冷凝管上口慢慢加入30m硫酸—硫酸银溶液，轻轻摇动锥形瓶使溶液混匀，加热回流2h。

（2）冷却后，用90ml的谁冲洗冷凝管壁，取锥形瓶。

溶液总体积不得少于14oml，否则因酸度太大滴定终点不明显。

（3）溶液在度却后，加3滴试铁灵指示剂，用硫酸亚提前按标准溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点，记录硫酸亚铁铵标准溶液的用量三、计算公式COD(O,mg/L)=｛（v。

—v1）c×8×1000 ｝/vC—硫酸亚铁铵标准溶液的浓度，mol/lV0空白滴定消耗硫酸亚铁铵的用量V1水样滴定消耗硫酸亚铁铵的用量四、实验数据处理硫酸亚铁铵的浓度C=0.1mol/L空白滴定消耗梨酸亚铁铵的用量；24ml水样滴定消耗硫酸亚铁铵的用量；22.5mlCOD(O,mg/L)=｛（v。

—v1）c×8×1000 ｝/v=｛(24-22.5)x0.1x8x1000｝/20=60mg/L五、思考与讨论1、COD为什么可以作为有机物相对含量综合指标之一？答化学需氧量是旨在一定条件下，氧化1L水样中还原性物质所需的氧化剂的含量，以氧的质量浓度（mg/L）表示，说中还原性物质有有机化合物和亚硝酸盐和硫化物亚铁盐等有机化合物，化学需氧量反映了水中还原性物质污染的程度。

基于水体被有机物污染是很普遍的现象，所以，该指标就作为了有机污染物相对含量的综合指标之一。

（实验三）气象色谱法测量废水中苯系物的含量一、实验的目的和要求1、掌握用气象色谱法测定苯系物的原理和方法2、复习第二章第六节中关于气象色谱法分析的基本知识和色谱仪的组成部分的工作原理二、气象色谱法定的原理：气象色谱法又称层析法，是一种分离测定多组分混合物的极其有效的层析方法。

它基于不同物质在相对运动的两相中具有不同的分配系数，当这两项随流动相移动时，就在两相之间反复多次分配，是原来分配系数只有微小差异的各组分得到更好的分离，一次送入监测器测定，达到分离、分析各组分的目的。

三、实验仪器和试剂仪器：气象色谱仪，具有FID检测器，具有恒温水浴的振荡器100ml全玻璃注射器，10ml全玻璃注射器，10ul微量注射器，试剂：苯系物标准物质四、实验测定步骤1、打开气象色谱仪，调整仪器，使各项条件符合要求后开始测量。

2、用注射器吸取一定量的环己烷、甲苯、苯，依稀加入小药瓶内，并去皮称其质量为m1 m2 m3，三者混合均匀用注射器抽取0.2ul混合液，在相同的条件下测量，记录色谱图上该混合物中各组分的峰面积A1A2A3和保留时间t1t2t33、单独注入环己烷、苯、甲苯，观察色谱图，记录保留时间4、取2ul样品1，注入，观察色谱图们记录保留时间和相对应的峰面积。

五、实验数据记录处理经分析知：A为正己烷B为苯C甲苯WA(%)=(10842.550× 1.54)/（10842.550× 1.5+4393683.188×100+1728692.875×1.30）=0.63WB（%）=(393863.188100)/ (10842.550×1.54+393863.188×100+1728692.875×1.3)=14.82WC（%）=（1768692.8751.30)/ (10842.550×1.50+393863.188×100+1728692.875×1.30)=84.55WA(%)+WB(%)+W(C%)=100六、思考与讨论1、气象色谱仪的组成及其原理？答：其结构依次为：载气系统、进样系统、分离系统、检测系统、显示系统。

原理，它棘突不同物质在相对运动的两相中不同的分配系数，当这些物质随流动相流动时，就在两相之间进行反复多次的分配再分配，原来分配系数只有微小差异的组分得到很好的分离，然后送入监测器测定，达到分析分离组分的目的。

（实验四）萃取分光光度法测定铜离子含量一、实验目的和要求1、掌握乙二胺二硫代价酸钠萃取分光光度法的原理及测定铜的要求2、复习第二章第六节金属测定的相关内容二、实验原理在PH为9~10的氨性溶液中，铜离子于DDTC作用，生成摩尔比为1:2的黄棕色胶体络合物络合物可被三氯甲烷萃取，其最大吸收波长440nm，萃取后用分光光度计测出其吸光度的值A，做出浓度于吸光度的标准曲线，从而测出铜离子的含量。

三、实验仪器和试剂1、实验仪器，分光光度计，比色皿分液漏斗，移液管，容量瓶，烧杯。

2、实验试剂: 铜离子贮备液，称取5g硫酸铜五水溶于烧杯中，移至100ml容量瓶中，定容摇匀，浓度5mg/ml。

铜离子使用液，从同理贮备液中吸取1ml，移至100ml容量瓶中定容，摇匀，浓度为50ug/ml。

DDTC。

氨缓冲溶液；将27g 氯化铵溶于水，加175浓氨水，稀释至500ml。

三氯甲烷四、试验步骤1、取6支50ml的容量瓶，编号1、2、3、4、5、6，其中1~5号依次加入铜离子使用液0、0.5、1.0、1.5、2.0ml，6号瓶中加入8ml的水样，1~6号瓶中分别加入10ml的氨冲溶液，再添加2mlDDTC，定容摇匀。