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HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法1.引言1.1 目的旨在规定水质中五日生化需氧量(BOD5)的测定方法，采用稀释与接种法进行测定。
1.2 术语定义1.2.1 五日生化需氧量(BOD5)指在规定的条件下，细菌生物对有机物所需的氧量。
1.2.2 稀释与接种法一种测定水质中BOD5的方法，通过将待测水样稀释后与BOD5基准溶液接种，测定不同时间间隔下的溶液中溶解氧的消耗量。
2.范围2.1 适用范围本方法适用于表征水质中有机物的生化需氧量。
2.2 不适用范围本方法不适用于含有高浓度或难以接种的水样。
3.装备与试剂3.1 装备所需装备，包括但不限于：溶氧仪、稀释器、恒温培养箱等。
3.2 试剂所需试剂，包括但不限于：BOD5基准溶液、氨氮缓冲溶液等。
4.操作步骤4.1 样品采集与处理详细描述样品采集的步骤，包括样品的选择、采集容器的准备等。
4.2 稀释与接种详细描述稀释与接种法的步骤，包括待测水样的稀释比例、接种基准溶液的准备等。
4.3 培养与测定详细描述培养与测定的步骤，包括培养温度、培养时间、测定溶解氧的方法等。
5.结果计算与报告详细描述结果计算与报告的方法，包括BOD5值的计算公式、结果的单位表示等。
6.质量控制详细描述质量控制的方法，包括质控样的使用、质控结果的判定等。
7.附件所涉及的附件如下：- 附件1：某水样BOD5测定数据记录表- 附件2：BOD5基准溶液配制方法8.法律名词及注释所涉及的法律名词及注释如下：- 法律名词1：注释1- 法律名词2：注释29.遇到的困难及解决办法在实际执行过程中，可能遇到的困难及解决办法如下：- 困难1：描述困难1的情况，并提供相应的解决办法。
- 困难2：描述困难2的情况，并提供相应的解决办法。
参考文献：[1] 相关文献1的引用[2] 相关文献2的引用附录：- 附录A：常用实验室设备清单- 附录B：常用试剂列表以上为HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法的详细文档模板范本。
实验五水五日生化需氧量（BOD5）的测定1 目的1.1 理解BOD的含义及测定条件；1.2 了解水样预处理的道理与预处理方法。
2 方法原理生物化学需氧量(BOD)定义为：在规定的条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程所消耗的溶解氧量。
该过程进行的时间很长，如在20℃培养条件下，全过程需100天，根据目前国际统一规定，在20±1℃的温度下，培养五天后测出的结果，称为五日生化需氧量，记为BOD5，其单位用质量浓度mg/L表示。
对于一般生活污水和工业废水，虽然含较多有机物，如果样品含有足够的微生物和具有足够氧气，就可以将样品直接进行测定，但为了保证微生物生长的需要，需加入一定量的无机营养盐(磷酸盐、钙、镁和铁盐)。
某些不含或少含微生物的工业废水、酸碱度高的废水、高温或氯化杀菌处理的废水等，测定前应接入可以分解水中有机物的微生物，这种方法称为接种。
对于一些废水中存在着难被一般生活污水中微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，可以将水样适当稀释，并用驯化后含有适应性微生物的接种水进行接种。
一般检测水质的BOD5只包括含碳有机物质氧化的耗氧量和少量无机还原性物质的耗氧量。
由于许多二级生化处理的出水和受污染时间较长的水体中，往往含有大量硝化微生物。
这些微生物达到一定数量就可以产生硝化作用的生化过程。
为了抑制硝化作用的耗氧量，应加入适量的硝化抑制剂。
3 适用范围BOD5为2—1000mg/L水样，超过1000mg/L的水样，应适当稀释。
4 主要仪器及设备使用的玻璃仪器皿在实验前应认真清洗，防止油污、沾尘。
玻璃器皿干燥后方能使用。
常用实验室设备如下：4.1 生化培养箱温度控制在20±l℃，可连续无故障运行。
4.2 充氧设备充氧动力常采用无油空气压缩机(或隔膜泵、或氧气瓶、或真空泵)。
充氧流程可分为正压、负压充氧两种流程。
4.3 BOD培养瓶：容积550±1mL。
实验五水五日生化需氧量（BOD5）的测定1 目的1.1 理解BOD的含义及测定条件；1.2 了解水样预处理的道理与预处理方法。
2 方法原理生物化学需氧量(BOD)定义为：在规定的条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程所消耗的溶解氧量。
该过程进行的时间很长，如在20℃培养条件下，全过程需100天，根据目前国际统一规定，在20±1℃的温度下，培养五天后测出的结果，称为五日生化需氧量，记为BOD5，其单位用质量浓度mg/L表示。
对于一般生活污水和工业废水，虽然含较多有机物，如果样品含有足够的微生物和具有足够氧气，就可以将样品直接进行测定，但为了保证微生物生长的需要，需加入一定量的无机营养盐(磷酸盐、钙、镁和铁盐)。
某些不含或少含微生物的工业废水、酸碱度高的废水、高温或氯化杀菌处理的废水等，测定前应接入可以分解水中有机物的微生物，这种方法称为接种。
对于一些废水中存在着难被一般生活污水中微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，可以将水样适当稀释，并用驯化后含有适应性微生物的接种水进行接种。
一般检测水质的BOD5只包括含碳有机物质氧化的耗氧量和少量无机还原性物质的耗氧量。
由于许多二级生化处理的出水和受污染时间较长的水体中，往往含有大量硝化微生物。
这些微生物达到一定数量就可以产生硝化作用的生化过程。
为了抑制硝化作用的耗氧量，应加入适量的硝化抑制剂。
3 适用范围BOD5为2—1000mg/L水样，超过1000mg/L的水样，应适当稀释。
4 主要仪器及设备使用的玻璃仪器皿在实验前应认真清洗，防止油污、沾尘。
玻璃器皿干燥后方能使用。
常用实验室设备如下：4.1 生化培养箱温度控制在20±l℃，可连续无故障运行。
4.2 充氧设备充氧动力常采用无油空气压缩机(或隔膜泵、或氧气瓶、或真空泵)。
充氧流程可分为正压、负压充氧两种流程。
4.3 BOD培养瓶：容积550±1mL。
中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD）的测定。
方法的检出限为L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微1生物引入水样中进行接种。
水中生化需氧量(BOD5)的测定水中生化需氧量（BOD5）的测定实验目的：1.研究测定BOD5的方法；2.掌握实验数据处理方法。
实验要求：1.了解实验目的；2.研究实验方法和数据处理；3.实验后，理解相关理论知识。
实验原理：生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物进行的生物化学过程中所消耗溶解氧的量。
此生物氧化全过程目前国内外普遍规定于20±1℃培养5天，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的质量浓度（mg/L）表示。
生活污水与工业废水中含有大量各类有机物，这些有机物在水体中分解时需要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。
水体因缺氧造成鱼类及其他水声生物的死亡。
水中所含的有机物成分复杂，难以一一测定其成分，人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。
生化需氧量的经典测定方法是稀释接种法。
采集化学测定生化需氧量的水样时应充满并密封于瓶中，在0~4℃下进行保存，一般应在6小时内进行分析。
若需要远距离转运，贮存时间不应超过24小时。
对于某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。
稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧为2mg/L，而剩余溶解氧在1mg/L以上。
为了保证水样稀释后有足够的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气（或通入氧气）使稀释水中溶解氧接近饱和。
稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐）以保证微生物生长的需要。
本方法适用于测定BOD5大于或等于2mg/L，最大不超过6000mg/L的水样。
当水样BOD5大于6000mg/L时，会因稀释带来一定的误差。
仪器：1.恒温培养箱；2.细口玻璃瓶；3.大量筒；4.玻璃搅拌棒，棒的长度应比所用量筒高度长200mm。
在棒的底端固定一个直径比底小，并带有几个小孔的硬橡胶板；5.溶解氧瓶为250~350mL之间，带有磨口玻璃塞并且有供水封用的钟形（每组8个）；6.虹吸管，供分取水样和添加稀释水用（乳胶管即可）；7.酸式滴定管（50.00mL一个）；8.三角烧瓶（500mL一个）。
1.标准稀释法这种方法是最经典的也是最常用的方法。
简单的说，就是测定在20±1℃温度下培养五天前后溶液中的溶氧量的差值。
求出来的BOD值称为“五日生化需氧量（BOD5）”。
2.生物传感器法其原理是以一定的流量使水样及空气进入流通量池中与微生物传感器接触，水样中溶解性可升华降解的有机物受菌膜的扩散速度达到恒定时，扩散到氧电极表面上的氧质量也达到恒定并且产生一恒定电流，由于该电流与水样中可生化降解的有机物的差值与氧的减少量有定量关系，据此可算出水样的生化需氧量。
通常用BOD5标准样品对比，以换算出水样的BOD5的值。
3.活性污泥曝气降解法控制温度为30℃-35℃，利用活性污泥强制曝气降解样品2小时，经重铬酸钾消解生物降解后的样品，测定生物降解前后的化学计量需氧量，其差值即为BOD。
根据与标准方法的对比实验结果，可换算成为BOD5值。
4.测压法在密闭的培养瓶中，水样中溶解氧被微生物消耗，微生物因呼吸作用产生与耗氧量相当的CO2,当CO2被吸收后使密闭系统的压力降低，根据压力测得的压降可求出水样的BOD值。
适用范围:本方法适用于BOD5或等于2mg/L并且不超过6000mg/L的水样。
BOD5大于6000mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。
本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。
本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。
水中的藻类或硝化微生物也可能造成虚假的偏高结果。
为什么取BOD一般取5天时间的BOD5？因为5天的BOD消耗值基本达到75%，时间再长效果也不显著，而且没有时效性测压法和稀释接种法测定BOD5的比较测压法与稀释接种法测量BOD5的准确度和精密度无显著差异，且都在国家标准质控允许的范围内，测压法克服了稀释接种法操作繁琐、工作量大、所需试剂多、稀释倍数较难确定等缺点，有一定可用性。
HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法一、引言二、仪器与试剂2.1 仪器：常见的实验室分析仪器如培养箱、恒温槽、平衡瓶等。
2.2 试剂材料：主要包括硫酸、盐酸、钠硫代硫酸钠、亚硝酸钠、硝酸钠、硝酸亚铁等。
三、样品处理3.1 样品采集：按照标准要求，在适当的位置采集水样。
3.2 样品保存：采集的水样需进行冷藏保存，并在24小时内进行测定。
四、实验步骤4.1 样品稀释：将样品与适量的稀释水按比例混合，使其BOD5浓度在20～200mg/L之间。
4.2 接种液的制备：根据实际需要，准确称取合适的细菌接种液，通常为2mL左右。
4.3 接种：将接种液加入已稀释的样品中并充分混合。
4.4 容器准备：将接种后的样品倒入装有塔形或柱形瓶的容器中，注意容器的密封性。
4.5 曝气：通过定时连续通入氧气或用专用的密闭曝气系统对样品进行曝气处理，以提供微生物呼吸所需的溶解氧。
4.6 控制条件：将容器置于恒温槽中，在20±1℃条件下进行培养，培养时间为五日。
4.7 氧的测定：在培养结束后，使用溶解氧电极或其他适当的方法测定样品中剩余氧的浓度。
五、结果的记录与计算5.1 记录容器的初始和末端溶解氧浓度，并计算其差值。
5.2 根据实际情况，可以通过一定的修正计算方法，得到BOD5的浓度。
5.3 结果的单位为mg/L。
六、实验注意事项6.1 样品应在24小时内进行测定。
6.2 样品与稀释水的比例应根据实际情况调整，以保证BOD5浓度在标准范围内。
6.3 曝气过程中，需注意氧气的充分供应，并注意容器的密封性。
6.4 实验过程中应注意安全，避免操作失误导致意外事故的发生。
结论通过稀释与接种法可以准确测定水样中的BOD5浓度，从而评价水体有机污染程度。
实验中需严格按照标准要求进行操作，以保证结果的准确性和可比性。
该方法操作简单、操作时间较短，适合用于水质监测工作中。
生化需氧量(BOD5)的测定生化需氧量（Biological Oxygen Demand，BOD5）是指在水体中一定温度下，在一定的时间内，细菌消耗可溶态有机物质的氧气需求量。
其测定可以用来判断水体自身的净化能力和水质的优劣，也是水处理工程中设计和运营的重要参数之一。
BOD5测定的原理是将水样放置在一定的温度下，让水样中的生物在水中消耗容易被生物分解的有机物质，同时减少氧气的含量。
通过测量水样在不同时间点上的氧气需求量，可以推算出水样中的生物需氧量。
通常选择5天为测定时间。
因为5天对于水中细菌的生长和分解有机物质而言，是一个相对恰当的时间。
BOD5的测定方法分为两种：灭菌法和不灭菌法。
灭菌法是指将水样在一定的条件下灭菌，然后添加一定量的有机物质，测定样品在一定时间内的氧气需求量。
随着时间的推移，细菌利用有机物质的速度变慢，直到完全消耗，样品中的氧气浓度将重新升高，最终通过测定样品中氧气需求量的变化来计算BOD5值。
不灭菌法仅仅是不进行灭菌处理的BOD5测定方法。
下面是BOD5的实验步骤：1. 样品采集：水样应选取代表性的、代表整个水体的样品。
样品应该在整个水体的深度和位置中等抽样，以减小结果偏差。
测定之前样品应该在室温下保存。
2. 制备样品：将收集到的样品过滤、纳滤或沉淀，得到干净的无悬浮颗粒的液体。
样品调整pH值可以提高细菌活性，pH值应控制在6.5-7.5之间。
3. 分装样品：将待测样品分装到250ml比色皿中，并严密封闭。
4. 测定初始DO值：将分装好的比色皿洗净后，分别注入DO电极和温度计。
测定样品的溶解氧（DO）值，得到的数值为初始DO值。
5. 培养细菌：选取合适的细菌培养液，按标准稀释后加入样品中，并将样品放置在恒定的温度下（一般为20℃）。
并在样品中搅动以促进氧气的溶解。
6. 5天后测定终点DO值：在培养5天之后，再次测定样品中的DO值，得到的值为终点DO值。
7. 计算BOD5值：通过初始DO值和终点DO值的差值计算出需要细胞呼吸的氧气量，即5天内的BOD5值。
水中五日生化需氧量(BOD5)的测定水中五日生化需氧量（BOD5）的测定一、实验目的1.了解水中有机物污染的重要指标之一——五日生化需氧量的概念和意义。
2.掌握BOD5测定的基本原理和方法，熟悉实验操作流程。
3.学会使用稀释接种法进行BOD5的测定，掌握实验技巧和注意事项。
二、实验原理五日生化需氧量（BOD5）是指在一定条件下，水中有机物在微生物作用下进行生物化学反应所消耗的溶解氧量。
BOD5是反映水体有机物污染的重要指标，也是水环境监测中的重要参数。
BOD5的测定采用稀释接种法。
该方法是将水样进行稀释，然后接种到培养瓶中，在恒温条件下培养5天，然后测定培养前后水样中溶解氧的差值，从而计算出BOD5值。
三、实验步骤1.采样：选择有代表性的水样，用干净的玻璃瓶采集，避免污染。
采集的水样应具有代表性，且应满足实验所需的最低浓度要求。
2.稀释：将采集的水样用去离子水或蒸馏水稀释至适当的浓度，以便接种到培养瓶中。
稀释倍数应根据水样的BOD5值和实验要求确定。
3.接种：将稀释后的水样分别接种到含有适量营养盐的培养瓶中，每个浓度至少接种3个培养瓶。
接种时，应将培养瓶放入恒温器中，在20℃±1℃的条件下培养5天。
4.测定溶解氧：在培养前后分别测定每个培养瓶中溶解氧的含量。
可使用溶解氧仪或碘量法进行测定。
5.数据处理：根据培养前后溶解氧的差值和稀释倍数，计算出BOD5值。
可按照以下公式进行计算：BOD5 = (ΔDO/Δt) × (V/V0) × 1000其中，ΔDO/Δt为培养期间溶解氧的变化速率，V为接种的培养瓶体积，V0为原始水样的体积。
四、实验结果与分析1.结果记录：将实验测定的BOD5值记录在表格中，包括稀释倍数、培养前后溶解氧含量、BOD5值等。
2.结果分析：根据实验数据，分析水中有机物污染程度，比较不同稀释倍数下的BOD5值，探讨稀释倍数对BOD5测定的影响。
同时，还可以将实验结果与标准值进行比较，评估实验的准确性。
水质五日生化需氧量（BOD5）的测定中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。
方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5 形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD5 的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD5 时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
水中生化需氧量（BOD5 ）的测定一、实验目的1、学会测定B OD 5 的方法；2、掌握实验数据的处理方法。
二、实验要求1 、了解实验的目的；2 、学会实验方法和会处理实验数据；3 、实验之后，懂得其中所涉及的理论知识三、实验原理生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物进行的生物化学过程中所消耗溶解氧的量。
此生物氧化全过程目前国内外普遍规定于 20 ±1 ℃培养 5 天，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为 B OD5 值，以氧的质量浓度（ m g /L ）表示。
生活污水与工业废水中含有大量各类有机物，这些有机物在水体中分解时需要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。
水体因缺氧造成鱼类及其他水声生物的死亡。
水中所含的有机物成分复杂，难以一一测定其成分，人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。
生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。
化学测定生化需氧量的水样，采集时应充满并密封于瓶中。
在0~4℃下进行保存，一般应在6 小时内进行分析。
若需要远距离转运，贮存时间不应超过24 小时。
对于某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。
稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧为2 m g /L ，而剩余溶解氧在1 m g/L 以上。
为了保证水样稀释后，有足够的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气（或通入氧气）使稀释水中溶解氧接近饱和。
稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐）以保证微生物生长的需要。
本方法适用于测定B OD 5大于或等于2 m g /L ，最大不超过6 00 0 m g /L 的水样。
当水样B OD5 大于60 00 m g /L 时，会因稀释带来一定的误差。
四、仪器1. 恒温培养箱2. 细口玻璃瓶3. 大量筒4. 玻璃搅拌棒，棒的长度应比所用量筒高度长2 00 m m。
在棒的底端固定一个直径比底小，并带有几个小孔的硬橡胶板；5. 溶解氧瓶为 250~350 m L 之间，带有磨口玻璃塞并且有供水封用的钟形（每组 8 个）；6. 虹吸管，供分取水样和添加稀释水用（乳胶管即可）；7. 酸式滴定管（ 50. 00m L 一个）；8. 三角烧瓶（ 500m L 一个）；9. 移液管（ 1 .0 0m L， 2. 00 m L， 100m L 各一个）。
10. 870 型直读B OD 5 测定仪五、试剂1. 磷酸盐缓冲溶液取8 .5 g 磷酸二氢钾、 21. 75 g 磷酸氢二钾、 33 .4 g 七水合磷酸氢二钠和1. 7 g 氯化铵溶于水中，稀释至1 000 m L。
此溶液的 pH=7. 2。
2. 硫 酸 镁 溶 液将 22.5 g 七 水 合 磷 酸 镁 溶 于 水 中 ， 稀 释 至 1 000 m L 。
3. 氯 化 钙 溶 液 将 2 7.5 g 无 水 氯 化 钙 溶 于 水 中 ， 稀 释 至 1 00 0 m L 。
4. 三 氯 化 铁 溶 液 将 0. 2 5 g 六 水 合 氯 化 铁 溶 于 水 中 ， 稀 释 至 1 00 0 m L 。
5. 盐 酸 溶 液 （ 0 .5 m ol/L ） 将 40 m L 盐 酸 溶 于 水 中 ， 稀 释 至 1000 m L 。
6. 氢 氧 化 钠 溶 液 （ 0. 5m ol/L ） 将 2 0 g 氢 氧 化 钠 溶 于 水 中 ， 稀 释 至 100 0 m L 。
7. 亚 硫 酸 钠 溶 液 （ 0. 02 5 mol /L ）将 1. 575 g 亚 硫 酸 钠 溶 于 水 中 ， 稀 释 至 10 00 m L 。
此 溶 液 不 稳 定 ， 需 每 天 配 制 。
8. 稀 释 水 在 5~2 0 升 玻 璃 瓶 内 装 入 一 定 量 的 水 ， 控 制 水 温 在 20 ℃ 左 右 ， 然 后 用 无 油空 气 压 缩 机 或 薄 膜 泵 ， 将 吸 入 的 空 气 经 活 性 炭 吸 附 管 及 水 洗 涤 管 后 ， 导 入 稀 释 水 内 曝 气 2 ～ 8 升 ，使 稀 释 水 中 的 溶 解 氧 接 近 于 饱 和 。
停 止 曝 气 亦 可 导 入 适 量 纯 氧 。
瓶 口 盖 以 两 层 经 洗 涤 晾 干 的 纱 布 ， 置 于 20 ℃ 培 养 箱 中 放 置 数 小 时 ， 使 水 中 溶 解 氧 含 量 达 8 m g/L 左 右 。
临 用 前 每 升 水 中 加 入 氯 化 钙 溶 液 、 氯 化 铁 溶 液 、 硫 酸 镁 溶 液 、 磷 酸 缓 冲 溶 液 各 1 m L 并 混 合 均 匀 （ 稀 释 水 的 pH 值 为 7. 2）， 其 B OD 5 应 小 于 0. 2m g /L 。
9. 硫 酸 锰 溶 液 称 取 480 g 硫 酸 锰 溶 于 水 ，用 水 稀 释 至 1000 m L 。
此 溶 液 加 至 酸 化 过 的碘 化 钾 ， 遇 淀 粉 不 得 产 生 兰 色 。
10. 碱 性 碘 化 钾 溶 液（ KI-Na OH ） 称 取 5 00 g 氢 氧 化 钠 溶 解 于 30 0~400 m L 水 中 ， 另 称取 150 g 碘 化 钾 （ 或 1 35 g NaI ） 溶 于 200 m L 水 中 ， 待 氢 氧 化 钠 溶 液 冷 却 后 ， 将 两 溶 液 合 并 ， 混 匀 ， 用 水 稀 释 与 1000 m L ， 如 有 沉 淀 ， 则 放 置 过 夜 后 ， 倾 出 上 清 液 ， 贮 于 棕 色 瓶 中 ， 用 橡 皮 塞 塞 紧 ， 避 光 保 存 。
此 溶 液 酸 化 后 ， 遇 淀 粉 应 不 呈 兰 色 。
11. （ 1+5） 硫 酸 取 1 份 硫 酸 ， 加 5 份 蒸 馏 水 混 合 。
12. 1%（ m /L ） 淀 粉 溶 液 称 取 1 g 可 溶 性 淀 粉 ， 用 少 量 水 调 成 糊 状 ， 在 加 刚 煮 沸 的 水稀 释 至 1 00 m L ， 冷 却 后 加 入 0. 1 g 水 杨 酸 或 0. 4 m L 氯 化 锌 防 腐 。
13. 0.0 250 m L /L 重 铬 酸 钾 标 准 溶 液称 取 与 105~11 0℃ 烘 干 2 小 时 ，并 冷 却 的 重 铬 酸 钾 1 . 2258 g 溶 于 水 ， 移 入 10 00 m L 容 量 瓶 中 ， 用 水 稀 释 至 标 线 ， 摇 匀 。
14. 硫 代 硫 酸 钠 溶 液 称 取 6 .2 g 硫 代 硫 酸 钠 溶 于 煮 沸 放 冷 的 水 中 ， 加 入 0. 2 g 碳 酸 钠 ，用 水 稀 释 至 10 00 m L 。
贮 于 棕 色 瓶 中 ，使 用 前 用 0. 0250 m L /l 重 铬 酸 钾 标 准 溶 液 标 定 。
标 定 方 法 ： 于 250 m L 碘 量 瓶 ， 加 入 100 m L 水 和 1 g 碘 化 钾 ， 加 入10. 00m L 0. 0250 m L /l 重 铬 酸 钾 标 准 溶 液 ， 加 5m L （ 1+5） 硫 酸 溶 液 ， 密 塞 ， 摇 匀 ， 放 暗 处 静 止 5mi n 后 ，用 待 标 定 的 硫 代 硫 酸 钠 溶 液 滴 定 至 溶 液 呈 淡 黄 色 ，加 入 1 m L 淀 粉 溶 液 ， 继 续 滴 定 于 蓝 色 刚 好 褪 去 为 止 ， 记 录 用 量 ， 公 式 为C = 10.00 ×0.0250 V式 中 C — 硫 代 硫 酸 钠 溶 液 浓 度 （ mol/l ）V — 滴 定 时 消 耗 硫 代 硫 酸 钠 溶 液 的 体 积 （ m L ）。
六 、 操 作 方 法 （ 一 ）（ 滴 定 分 析 方 法 ）1. 水 样 的 pH 值 超 出 6. 5~7 .5 范 围 时 ， 可 用 盐 酸 或 氢 氧 化 钠 溶 液 调 节 近 似 于 7， 但 用 量 不要 超 过 水 样 体 积 的 0. 5% 。
若 水 样 的 酸 度 或 碱 度 很 高 ，可 现 用 浓 度 不 同 的 碱 或 酸 液 进 行 中 和 。
2. 水 样 中 含 有 铜 、 锌 、 镉 、 铬 、 砷 、 氰 等 有 毒 物 时 ， 可 使 用 经 驯 化 的 微 生 物 接 种 液 的 稀释 水 进 行 稀 释 ， 或 提 高 稀 释 倍 数 以 减 少 毒 物 的 浓 度 。
3. 含 有 少 量 游 离 氯 的 水 样 ， 一 般 放 置 1~2 小 时 ， 游 离 氯 即 可 消 失 。
对 于 游 离 氯 在 短 时 间不 能 消 散 的 水 样 ， 可 加 入 亚 硫 酸 钠 溶 液 ， 以 除 去 之 ， 其 加 入 量 由 下 述 方 法 决 定 。
取 已 中 和 好 的 水 样 1 00 m L ，加入 1+1 乙 酸 10 m L 、10 %（ m /V ）碘 化 钾 溶 液 1 m L ，混 匀 ， 以 淀 粉 溶 液 为 指 示 剂 ， 用 亚 硫 酸 钠 溶 液 滴 定 游 离 碘 。
有 亚 硫 酸 钠 溶 液 消 耗 的 体积，计算应加亚硫酸钠溶液的量。
4. 从水温较低的水域或从营养化的湖泊中采集的水样，如遇到含有过饱和溶解氧的水样时，应将水样迅速升温到 2 0 度左右，在不使之满瓶的情况下，充分振摇，并不时开塞放气，放出溢出的过饱和的溶解氧。
5. 不经稀释的水样的测定。
溶解氧含量较高、有机物含量较少的地面水，可不经稀释，而直接以虹吸法将混匀水氧转移入两个溶解氧瓶内，转移过程中应注意不产生气泡。
以同样的操作使两溶解瓶充满水样后益出少许，加塞。
瓶内不留有气泡。
其中一瓶随即测定溶解氧，另一瓶的瓶口进行水封后，放入培养箱中，在20± 1 ℃的条件下培养5 天。
在培养过程中注意添加封口水。
从开始放入培养箱算起，经过5 昼夜后，弃去封口水，测定剩余的溶解氧。
6. 需经稀释水样的测定应根据实践经验，提出下述计算方法，供稀释是参考。
①稀释倍数的确定。
地面水，由测得的高锰酸盐指数乘以一定的系数，即求得稀释倍数。
见下表。
由高锰酸盐指数与一定系数的乘积求得的稀释倍数工业废用稀释时，由C OD 值来分别乘以系数0 .075， 0. 150， 0. 225，即获得三个稀释倍数。
使用接种稀释水时则分别乘以系数 0. 07 5， 0. 150， 0.2 5 三个系数。
