过氧化氢的检测方法

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电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
细胞仪检测； ● 背景低，灵敏度高； ● 线性范围宽，使用方便。
产品说明书
试剂盒以外自备试剂和仪器 ● 培养基 ● 移液器及吸头 ● 离心机 ● 激光共聚焦显微镜或荧光分光光度计或酶标仪或流式细胞仪， 激发波长570± 15 nm，发射波长585 ± 20 nm检测。
1、试剂配制： 10mM BBoxiProbeTM A 探针储存液配制：
1.1 取出 BBoxiProbeTM A 探针和探针溶解液置室温条件融解。 1.2 使用前，取 120ul 探针溶解液加入 BBoxiProbeTM A 探针试剂瓶中，充分溶解混匀。
1X 反应 buffer 工作液配制： 1.3 取 2ml 10X 反应 buffer 加入 18ml 纯水中充分混匀，配制 20ml 1X 反应 buffer 工作
使用方法：
使用注意事项： ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液 体洒落。 ● BBoxiProbeTM 探针 A 是空气敏感的，我们的试剂瓶内充惰性气体，请在使用前打开我们的试剂瓶， 试剂瓶打开后请在当天配制使用完毕。 ● BBoxiProbeTM 探针 A 在 DTT 和β-mercaptoethanol 存在的条件下是不稳定的，请确保样品中不含 DTT 和β-mercaptoethanol。 ● BBoxiProbeTM 探针 A 在 pH 值高于 8.5 的条件下是不稳定的，请确保待检测样品的 pH 范围在 7-8， 我们提供的反应 buffer 的 pH 值是 7.4。 ● BBoxiProbeTM 探针 A 须避光保存。 ● 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
产品说明书
BBoxiProbeTM 过氧化氢检测试剂盒
产品组成：
产品编号 规格
试剂 A：BBoxiProbeTM 探针 A（600ug） 试剂 B：探针溶解液 试剂 C：10X 反应 buffer 试剂 D：Horseradish peroxidase 试剂 E：H2O2（3%）
BB-47032-1 200T 1瓶 1ml 5ml 5U 200ul
977ul 1X 反应 buffer 工作液充分混匀，即为 20mM H2O2 工作液。H2O2 工作液不稳定， 需要现配现用。
2、检测步骤：


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BB-4203 BB-4204 BB-4131 BB-4133 BB-4122
产品说明书
Caspase 9 活性检测试剂盒 Caspase 10 活性检测试剂盒 细胞凋亡形态学检测试剂盒 Rhodamine 123 染色试剂盒 AO/EB 双染试剂盒
BB-4108 BB-4112 BB-4123 BB-4137 BB-4132
BB-47032-2 1000T 5瓶 1ml 20ml 10U 1ml
试剂编号
47032A 47032B 47032C 47032D 47032E
储存条件： -20℃避光保存。
有效期： 一年。
注意事项： ● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。 ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管 底，避免开盖时试剂损失。 ● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。 ● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清 洗并彻底清除残留清洁剂。 ● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
2.5 氧化反应。加入 50ul BBoxiProbeTM A 探针检测工作液到含有标准曲线样品、对照孔、 待测定样品的 96 孔板，充分混匀。
2.6 孵育。在室温下避光孵育 30 分钟。由于反应是连续的，可以测定不同时间点的荧光 强度。
2.7 测量荧光强度。用荧光酶标仪或者其他荧光仪器检测，激发波长 570± 15 nm，发射 波长 585 ± 20 nm 检测。以不含 H2O2 的阴性孔调零（减去阴性孔荧光值）。
产品简介：
过氧化氢在细胞代谢、生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程中发
挥重要作用。 贝博 BBoxiProbeTM 过氧化氢检测试剂盒是一种利用荧光探针 BBoxiProbeTM A 进行过氧
化氢检测的试剂盒。 BBoxiProbeTM A 在 HRP 存在的条件下，与 H2O2 反应生成红色荧光物 质，荧光强度与 H2O2 水平成正比，检测荧光强度就可以知道 H2O2 的水平。
产品号 BB-4104 BB-4105 BB-4106 BB-4107


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WST-1 细胞增殖毒性检测试剂盒 MTS 细胞增殖与毒性检测试剂盒 Hoechst33342/PI 双染试剂盒 DAPI 染色试剂盒 细胞存活率检测试剂盒
液待用。
10U/ml HRP 储存液配制 1.4 取 500ul 1X 反应 buffer 工作液溶解 HRP。一次用不完的 HRP 储存液可以分装后
置-20℃保存。
20mM H2O2 工作液配制 1.5 用 1X 反应 buffer 工作液稀释 3% H2O2（0.88M）至 20mM。取 22.7ul 3% H2O2 加入
也可以不做标准曲线，制备一个阳性对照和一个阴性对照即可。阳性对照用 1X 反应 buffer 工作液稀释 20mM H2O2 工作液至 10uM。阴性对照为不含 H2O2 的 1X 反应 buffer 工作液。
2.2 用 1X 反应 buffer 工作液稀释待测 H2O2 样品至 50ul。第一次预实验时，连续稀释样品 至不同浓度，根据实验结果确定样品的最佳稀释比例。 检测时样品浓度并非越高越好，过高的浓度可能会导致荧光强度降低，因为过量的过 氧化氢会氧化反应生成的荧光产物，为非荧光的产物，反而降低荧光强度。 因此待检测样品稀释后上样检测时浓度最好不要超过 20mM。
在激发波长 570 nm，发射波长 585 nm 附近，使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、 荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测荧光，从而测定 H2O2 水平。
本试剂盒可以用于各种真核培养细胞的检测。
产品特点： ● 使用方便：可用激光共聚焦显微镜直接观察、荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式

2.3 上样检测。吸取 50ul 标准曲线样品、对照孔、待测定样品至 96 孔板。
2.4 制备 BBoxiProbeTM A 探针检测工作液。根据待测样品数量，按以下试剂加样混匀： 50ul 10mM BBoxiProbeTM A 探针储存液 100ul 10U/ml HRP 储存液 4.85ml 1X 反应 buffer 工作液 以上 5ml 探针检测工作液按 100 个孔计算，实际使用时以试剂待测样品数为准。
产品说明书
以下实验步骤以 96 孔板荧光酶标仪为例，如果用其他仪器检测，根据比例相应调整最终 检测体积即可。
2.1 制备 H2O2 标准曲线 用 1X 反应 buffer 工作液稀释 20mM H2O2 工作液至 0uM、0.1uM、0.2uM、0.3uM、0.4uM、
1uM、2uM、3uM、5uM、10uM，每个样 50ul 以上，一定要包含无 H2O2 的对照孔。最终 H2O2 的检测浓度将 2 倍稀释为 0-5uM。


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产品号 BB-4101 BB-4102 BB-4201 BB-4202
产品 细胞周期检测试剂盒 JC-1 线粒体膜电位试剂盒 Caspase 3 活性检测试剂盒 Caspase 8 活性检测试剂盒