过氧化氢H2O2测定试剂盒

（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®过氧化氢（H2O2）比色法测试盒Hydrogen Peroxide (H2O2) Colorimetric Assay Kit产品货号：E-BC-K102-M产品规格：48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器：酶标仪(402-407 nm)使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

用途本试剂盒适用于检测血清、血浆、尿液、动植物组织及细胞样本中的H2O2含量。

检测原理H2O2与钼酸铵反应生成稳定的黄色络合物且在405 nm处有最大吸收，黄色络合物的颜色深浅与H2O2的浓度在一定范围内具有线性关系。

故可以通过比色计算出H2O2的含量。

本试剂盒检测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用考马斯亮蓝法（货号：E-BC-K168-M）。

提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。

对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。

所需自备物品仪器：酶标仪（402-407 nm，最适检测波长405 nm）、涡旋混匀仪、37℃恒温箱、微量移液器（1000 μL，200 μL，100 μL，10 μL）、离心机。

耗材：枪头（1000 μL，200 μL，10 μL）、EP管（2 mL、10 mL）。

试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl）或PBS（0.01 M，pH 7.4）。

试剂准备①实验开始前将所有试剂平衡至室温。

②不同浓度标准品的稀释样本准备①样本处理血清血浆等液体样本：可直接测定。

组织样本：常规匀浆处理(生理盐水(0.9% NaCl溶液)或PBS(0.01 M，pH 7.4)。

过氧化氢试剂盒荧光法概述过氧化氢试剂盒是一种常用的实验室试剂盒，通过荧光法测定过氧化氢的浓度。

在医疗、环保、食品安全等领域都有广泛的应用。

本文将从以下几个方面详细介绍过氧化氢试剂盒的原理、用途、操作方法以及存在的问题和改进措施。

原理过氧化氢试剂盒使用荧光法测定过氧化氢的浓度。

荧光法是一种基于物质的荧光特性进行分析的方法。

过氧化氢试剂盒中含有一种荧光染料，当过氧化氢与染料反应时，荧光染料被激发，发出荧光。

荧光的强度与过氧化氢浓度成正比，通过测量荧光强度可以间接确定过氧化氢的浓度。

用途过氧化氢试剂盒广泛应用于医疗、环保、食品安全等领域。

以下列举几个常见的应用场景：1.医疗领域：过氧化氢在医疗中被广泛用作消毒剂，测定过氧化氢浓度可以用于监测消毒效果。

2.环保领域：过氧化氢试剂盒可以测定水中过氧化氢浓度，用于监测水质安全。

3.食品安全：过氧化氢常被用作食品加工中的漂白剂，测定过氧化氢浓度可以用于食品安全监测。

操作方法以下是使用过氧化氢试剂盒的操作步骤：1.准备样品：根据实验需要，准备待测物样品。

2.取适量试剂：打开过氧化氢试剂盒，取出适量的试剂。

3.加入样品：将待测样品加入试剂中，充分混合。

4.静置反应：根据试剂盒规定的反应时间，让样品和试剂充分反应。

5.测量荧光强度：使用荧光测量仪器测量样品中的荧光强度。

6.计算浓度：根据荧光强度和标准曲线，计算出样品中过氧化氢的浓度。

存在的问题和改进措施过氧化氢试剂盒在实际应用过程中可能会遇到一些问题，例如： 1. 试剂存放时间过长，会导致试剂的稳定性下降，影响测量结果。

为了解决这个问题，可以优化试剂的包装和存储条件，延长试剂的有效期。

2.操作过程中的误差可能会影响测量结果的准确性。

为了提高测量的精确性，可以对操作人员进行培训，加强操作规范性。

3.过氧化氢试剂盒在某些特定条件下可能对其他物质有干扰，影响浓度测量的准确性。

为了减少干扰，可以优化试剂盒的配方，提高试剂的选择性。

植物过氧化氢（H2O2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞上清及相关液体样本中过氧化氢（H2O2）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物过氧化氢（H2O2）水平。

用纯化的植物过氧化氢（H2O2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢（H2O2）,再与HRP标记的过氧化氢（H2O2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的过氧化氢（H2O2）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物过氧化氢（H2O2）浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-1683301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号过氧化氢酶检测试剂盒产品编号 产品名称包装 S0051过氧化氢酶检测试剂盒100次产品简介：过氧化氢酶检测试剂盒(Catalase Assay Kit)是一种简单易行的通过显色反应来检测细胞、组织或其它样品中过氧化氢酶(Catalase)活性的试剂盒。

在过氧化氢相对比较充足的情况下，过氧化氢酶可以催化过氧化氢产生水和氧气。

残余的过氧化氢在过氧化物酶(Peroxidase)的催化下可以氧化生色底物，产生红色的产物(N-(4-antipyryl)-3-chloro-5-sulfonate-p- benzoquinonemonoimine)，最大吸收波长为520nm 。

用过氧化氢标准品，制作标准曲线，这样就可以计算出样品中的过氧化氢酶在单位时间单位体积内催化了多少量的过氧化氢转变为水和氧气，从而可以计算出样品中过氧化氢酶的酶活力。

过氧化氢酶分布非常广泛。

在肝脏、肾脏和红细胞中，过氧化氢酶的水平非常高，是清除能导致氧化损伤的过氧化氢的主要场所。

过氧化氢酶的活性也可以用紫外分光光度计测定A 240，但蛋白质或其它组份在A 240附近都有比较强的吸收，会对测定产生严重干扰。

因此，用紫外法测定过氧化氢酶的活性，比较适合纯化的过氧化氢酶。

本试剂盒通过检测A 520来测定过氧化物酶催化下由过氧化氢氧化生色底物产生的红色产物，受干扰的因素小，检测灵敏度高，可以检测出低达1U/ml 的过氧化氢酶。

本试剂盒可以检测全血、红细胞裂解产物、血清、组织匀浆产物、细胞裂解产物等生物样品中的过氧化氢酶的活性。

一个试剂盒共可以进行100次检测。

包装清单：产品编号 产品名称包装 S0051-1 过氧化氢酶检测缓冲液 60ml S0051-2 过氧化氢 (约1M) 5ml S0051-3 过氧化氢酶反应终止液50ml S0051-4 显色底物 20ml S0051-5 过氧化物酶 20µl —说明书1份保存条件：-20ºC 保存，一年有效。

过氧化氢（H2O2）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC3590规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体100 mL×1瓶（自备）4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三液体12 mL×1瓶4℃保存试剂四液体60 mL×1瓶4℃保存标准品液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂一：丙酮自备。

2、试剂二：临用前加入6 mL浓盐酸充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存。

3、标准品：1mmol/mL H2O2标准液。

产品说明：H2O2是生物体内最常见的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化产生，由CAT和POD等催化降解。

H2O2不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。

一方面，H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面H2O2也是许多氧化应激反应中的关键调节因子。

H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在415nm有特征吸收。

技术指标：最低检出限：0.002 μmol/mL线性范围：0.0097-1.5 μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、丙酮、浓盐酸、研钵/匀浆器和冰。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率20%，超声3秒，间隔10秒，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织样本的制备：称取约0.1g组织，加入1mL试剂一进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取全部上清液（注意吸取干净），置冰上待测。

本文由上海哈灵生物科技有限公司提供上海哈灵试剂供应商感谢您阅读本文植物过氧化氢(H2O2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞及相关液体样本中过氧化氢(H2O2)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物过氧化氢(H2O2)水平。

用纯化的植物过氧化氢(H2O2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢(H2O2)，再与HRP标记的过氧化氢(H2O2)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的过氧化氢(H2O2)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物过氧化氢(H2O2)浓度。

试剂盒组成：样本处理及要求：1. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

分装后一份待检测，其余冷冻备用。

2. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.3. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断植物（Plant）过氧化氢（H2O2）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被过氧化氢（H2O2）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的过氧化氢（H2O2）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。

3.植物萃取液或其它相关样本：请1000x g离心20分钟，取上清即可检测。

4.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、5、10、20、40、80μmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

过氧化氢酶(CAT)试剂盒说明书一、测定原理：过氧化氢酶(CAT)分解H2O2的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止，剩余的H2O2与钼酸铵作用产生一种淡黄色的络合物，在405nm处测定其变化量，可计算出CAT的活力。

试剂一(ml)二、试剂组成与配制：试剂一：液体100 ml×1瓶，4℃保存6个月。

试剂二：底物液体10 ml×1瓶，4℃保存6个月。

试剂三：显色粉剂×1瓶，4℃保存6个月。

加双蒸水至100 ml溶解，4℃保存1个月。

（如果底部有不溶粉末沉淀，直接取上清使用，不影响测定结果）试剂四：液体10 ml×1瓶，4℃保存6个月。

天冷时会凝固，临用前37℃水浴至透明方可使用。

三、组织样本的检测1、组织匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量(g)：体积(ml)=1：9的比例加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下，制备成10%的组织匀浆，2500转/分离心10分钟，取上清，再用生理盐水稀释成最佳取样浓度，待测(最佳取样浓度摸索减附录)。

2、操作表：混匀，波长405nm ，光径0.5cm ，双蒸水调零，测定各管吸光度值。

注：一般样本没有高脂等导致显著差异情况，对照管的样本更换成双蒸水，做1-2管对照即可。

如需做样本自身对照，则试剂盒所测定样本数量减至48样。

3.组织中CAT 活力的计算：（1）定义：每毫克组织蛋白每秒种分解1umol 的H2O2的量为一个活力单位。

（2）计算公式： )ml /mgprot (601271)OD -OD ()mgprot /U (CAT *待测样本蛋白浓度取样量值测定值对照活力组织匀浆中÷⨯⨯⨯=注：*271为斜率的倒数 （3）计算举例：取10%水稻叶片匀浆0.05ml 做CAT 检测，测得对照管吸光度为0.605，测定管吸光度为0.332，同时测得10%水稻叶片匀浆蛋白浓度为3.1303 mgprot/ml 。

则计算结果为：()/mgprotU 7351.101303.305.0601271332.0704.0)mgprot /U (CAT =÷⨯⨯⨯-=活力组织匀浆中注：1.测定血清和血浆时，如果样本不溶血，每批样本只需要随机挑2个样本做对照或者用双蒸水代替额样本做对照；如果样本溶血的话，必须每个样本都要做对照。

过氧化氢酶活性检测试剂盒解决方案过氧化氢酶（CAT）活性检测是研究生物体抗氧化能力的一种常用方法。

传统的CAT活性检测方法包括草酸染色法、荧光素法和光度法等。

这些方法虽然简单易行，但也存在一些问题，如操作步骤繁琐、检测结果不稳定等。

为了解决这些问题，可以使用过氧化氢酶活性检测试剂盒。

下面将介绍一种过氧化氢酶活性检测试剂盒的解决方案。

1.实验准备首先，准备所需试剂和设备，包括酶试剂盒、样品、加样枪、显微镜和分光光度计等。

保证试剂的使用期限未过期，并按照说明书的要求进行保存。

2.样品处理将待测样品进行处理，如细胞裂解或组织匀浆等。

处理后的样品可以直接用于测定，也可以冻存备用。

3.试剂准备按照试剂盒的说明书，将所有试剂按照要求进行准备。

包括稀释液、过氧化氢酶标准品和底物溶液等。

确保所有试剂的浓度和体积准确无误。

4.反应体系设置将试剂按照要求加入试管或酶标板孔中，组成完整的反应体系。

包括样品、底物溶液、酶标准品和稀释液等。

确保每个反应体系的组成均匀和准确。

5.反应时间控制根据试剂盒的说明书，控制反应时间。

一般来说，反应时间较短，一般为几分钟到十几分钟不等。

不同的试剂盒和样品对反应时间的要求可能有所不同，需要根据实际情况进行调整。

6.吸光度测定使用分光光度计测定反应体系中的吸光度值。

根据试剂盒的要求，选择适当的波长进行测定。

比较各组吸光度值的大小，并与标准曲线进行对照。

根据吸光度值的变化情况，可以推断出过氧化氢酶的活性。

7.数据分析将吸光度测定的结果导入相关的数据分析软件，进行数据处理和分析。

根据标准曲线和样品的吸光度值，计算出过氧化氢酶的活性。

根据实验的目的，可以对不同样品进行比较分析，研究其抗氧化能力的差异性。

8.实验结果解释根据数据分析的结果，解释实验结果。

比较不同样品的过氧化氢酶活性，讨论样品之间的差异，以及可能的影响因素。

结合其他实验数据和文献资料，对实验结果进行深入分析和解释，为后续的研究工作提供有力的依据。