叶下珠中鞣质及没食子酸的含量测定

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西北药学杂志2008年2月 第23卷第1期 31 8O时,柚皮苷分离效果良好,出峰时间较短。 参考文献: [1] 中国药典2005年版[s].一部.2005:323—324. [2]张红旭,郭辉.HPI C法测定骨碎补酊中柚皮苷的含量 EJ].西北药学杂志,2006,21(2):63—64. [3]冯瑛,倪晟,徐强.HPLC法测定宫宁颗粒中柚皮苷的含 量I-J].中药新药与临床药理,2003,14(4):265—266. (收稿日期:2007—04—20) 叶下珠中鞣质及没食子酸的含量 测定 胥道宝,张转平(安康市药品检验所,陕西安康725000) 摘要:目的考察叶下珠中没食子酸及鞣质含量。方法 用 HPI C法以对照品外标法测定没食子酸、UV法测定鞣质。 结果 叶下珠药材样品中没食子酸含量为0.57 ~0.67 , 鞣质含量为3.81 ~4.35 。结论 方法简便、可靠,可用于 叶下珠的质量控制。 关键词:叶下珠;没食子酸;HPLC法;UV法;鞣质 中图分类号:R927.2 文献标识码:A 文章编号:1004—2407(2008)01—0031—02 叶下珠为大戟科植物 yllanthus urinarial的 干燥全草,具有清肝明目,渗湿利水等功效,用于黄 疸、肝炎等治疗_1],现代药理研究报道具有抗病毒、抗 肝细胞损伤、抗艾滋病毒逆转酶、抗肿瘤_2]、抗血管紧 张素转化酶(ACE)_3 等作用。主要化学成分有木脂 素类、鞣质类、萜类化合物、黄酮类和生物碱类等,鞣 质类化合物是其主要生理活性成分之一 。文献仅 对黄酮类成分 及没食子酸测定有报道 ,未对鞣质 含量测定进行研究,笔者采用HPLC法测定没食子 酸的含量,并用UV法测定其鞣质的含量。 1仪器与试药 1.1仪器 SP一8810型液相色谱仪;SP-4290型数据 处理机;SP一8450型紫外检测器;KQ一2500型超声波 清洗器;UV一2 100紫外分光光度计。 1.2试药 没食子酸(购自中国药品生物制品检定 所,批号0831—9501);水为去离子重蒸水,四氢呋喃 为色谱纯,其余试剂为分析纯。 叶下珠药材经自己鉴定为大戟科植物phyllanthus urinaria1.的干燥全草,粉碎过4O目筛备用。 2方法与结果 2.1没食子酸的测定 2.1.1 色谱条件流动相甲醇一四氢呋喃一冰醋酸一水 (O.08:0.64:2:97.32) ],色谱柱Kromasoil Cl8 (150 mmX 4.6 mm,5 btm);流速1.0 mL・min一, 柱温为室温,检测波长为273 nm;灵敏度0.02AUFS, 理论板数按没食子酸计算大于2 500,色谱图见图1。 / 0 2 4 6 8 10 1 2 t/IlRlrl A 0 2 4 6 8 10 1 2 t/rain B 图1 HPLC图 A一没食子酸对照品; 叶F珠药材;1-没食子酸 2.1.2标准曲线的绘制 精密称取没食子酸25 mg 加乙醇配制成0.25 g・L 的对照品溶液,精密吸取 对照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,3.0和4.0 mL,分别 置于25 mL量瓶中,加至刻度,摇匀,各进样1O I ,以 质量浓度与峰面积作线性回归,求得回归方程为A-- 125 432 X+245.23,r一0.999 5,在5~4O g・L 质量 浓度范围内呈良好的线性关系。 2.1.3提取条件的选择 2.1.3.1提取溶剂的选择取样品适量,精密称定 4份,分别加体积分数5O%甲醇、7O 甲醇 甲醇和乙 醇2O mL超声提取1 h,测定结果表明,所用不同溶 剂提取效果差异不大。从方便简单的原则考虑,选用 甲醇为提取溶剂。 2.1.3.2提取时间的选择取样品适量,精密称定 5份,分别加入甲醇超声提取1O,2O,3O,45和6O min,进样分析,结果表明,在30 min以后提取样品测 得的含量已趋于稳定,说明超声提取30 min已基本 提取完全,故提取时间选择超声提取30 min。 2.1.4 回收率试验 精密称定已知含量的样品5 份,加入一定量的对照品,再加入甲醇超声提取,进样 1O L,分别计算,回收率为97.5 ,98.6 ,97.7 , 99.2 和97.5 ,平均98.1 ,RSD为0.78 。 2.1.5精密度试验取对照品溶液,进样5次,每次1O ,计算其峰面积为X一1 032 726.4,RSD为1.72 。 2.1.6样品的测定 取叶下珠样品粗粉约0.2 g,精 密称定,精密加甲醇20 mI ,称定质量,超声提取3O min,称定质量,补足损失质量,摇匀,滤过,滤液作为 供试品溶液。另精密称取没食子酸加甲醇配制成每 1 mI 含20 g的溶液,作为对照品溶液。按上述分 析条件,供试品和对照品溶液各进样10 L,测定其 相应峰面积,计算结果见表1。 2.2鞣质含量测定 2.2.I 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对照 品50 mg,置100 mL棕色量瓶中,加水溶解并稀释至 刻度,精密量取5 mL,置5O mL棕色量瓶中,用水稀释 至刻度,摇匀,即得(每1 mL中含没食子酸50 Fg)。 儿 一

 维普资讯 http://www.cqvip.com 西北药学杂志2008年2月 第23卷第1期 2.2.2标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.5, 1.0,2.0,3.0,4.0和5.0 mL,分别置25 mL棕色量 瓶中,各加入磷钼钨酸试液1 mL,再分别加水11.5, 11,1O,9,8和7 mL,用290 g・L 碳酸钠溶液稀 释至刻度,摇匀,放置30 min,以相应的试剂作为空 白,照紫外可见分光光度法,在760 nm的波长处测 定吸光度,以吸光度为纵坐标,质量浓度为横坐标,绘 制标准曲线。回归方程为A一40.75X+0.001 2.2.3供试品溶液的制备取叶下珠样品约2 g,精 密称定,置250 mL棕色量瓶中,加水150 mL,放置过 夜,超声处理10 min,放冷,用水稀释至刻度,静置,滤 过,弃去初滤液50 mL,精密量取续滤液2O mL,置100 mL棕色量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即得。 2.2.4测定法总酚精密量取供试品溶液2 mL, 置25 mL棕色量瓶中,照标准曲线制备项下的方法, 自“加入磷钼钨酸试液1 mL”起,加水1O mL,依法测 定吸光度,从标准曲线中读出供试品中没食子酸的量 (mg),计算,即得。 不被吸附的多酚精密量取供试品溶液25 mL, 加至已盛干酪素0.6 g的100 mL具塞锥形瓶中,密 塞,置3O℃水浴中保温1 h,时时振摇,取出放冷,摇 匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液2 mL,置25 mL棕色量瓶中,照标准曲线中读出供试品溶液中没 食子酸的量(mg),计算,即得。 按下式计算鞣质的含量:鞣质含量一总酚量一不 被吸附的多酚量,结果见表1。 表1叶下珠中没食子酸及鞣质的含量测定结果(,l=4) 

3讨论 ①该法测定叶下珠中鞣质及没食子酸的含量快 速、稳定、重现性好,可作为叶下珠质量的控制指标。 ②叶下珠属植物品种较多,分布较广,其鞣质、没 食子酸含量的变化是否受其影响,有待进一步研究。 参考文献: [1]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].上册. 北京:人民卫生出版社,1983:5,263. [2]Pettit GR,Schaufelberger DE,Nieman RA,et a1.Isola— tion and structure of phyllanthostatin[J]. J Nat Prod, l 990:53(6):1406. [3]Ueno H,Shogawa H,Kawasaki M,et a1.Chemical and pharmaceutical studies on medicinal plants in Paraguay. Geraniin,an angiotensin—converting enzyme inhibitor from“paraparai mi,”Phyllanthus niruri[J].J Nat Prod。1988,51(2):357. [4] 牛晓峰,赵锐山,李维凤,等.叶下珠不同生长期及贮存 期总黄酮含量测定l-J].西北药学杂志,2000,15(2):60. [5]王伽伯,陈雷,王王,等,RP—HPLC梯度洗脱法测定叶下 珠中没食子酸的含量[J].中草药,2005,36(1):126. [6] 苗爱东,王本富,高晓黎.反相HPLC法测定妇康栓中 没食子酸的含量[J].西北药学杂志,2000,15(6):247. (收稿日期:2007—03—09) 茄尼醇皂化除杂工艺研究 逢敏洁,李多伟,史江华,肖 策,许 慧,令狐昱慰, 李易非(西北大学生命科学学院,陕西西安710069) 摘要:目的研究烟叶中茄尼醇的最佳皂化工艺。方法 以 茄尼醇得率为指标,采用正交实验法考查氢氧化钾质量浓度、 皂化时问、温度以及正己烷与甲醇的比例等因素对茄尼醇得 率的影响。结果 茄尼醇的最佳皂化工艺为A。 C。I)3。结论 茄尼醇的最佳皂化工艺条件为:正己烷一甲醇5:4,氢氧化 钾质量浓度为30 g・L,6O℃皂化4 h。 关键词:茄尼醇;皂化工艺;正交实验法 中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1004—2407(2008)01—0032—02 茄尼醇是烟叶中存在的萜类化合物之一,占烟叶 干质量的0.5 ~4.0 ,在烟叶中以游离态和化合 态两种形式存在。纯的茄尼醇为白色或淡黄色蜡状 固体,分子式为c H 0,相对分子质量为631.079, mp 31~32℃,易溶于正己烷、乙醚、丙酮、汽油等有 机溶剂,难溶于水。 茄尼醇在生物化学中有着非常重要的作用,不仅 具有抗菌、消炎、治疗心血管疾病及抗溃疡等作用,而 且是一种重要的药用中间体,主要用于合成辅酶 Q 。、维生素K、抗癌增效剂SDB等_1 ]。 茄尼醇在烟草中以类脂成分或树脂成分存在。 树脂可分为软树脂、硬树脂A和硬树脂B 3种。软 树脂易溶于正己烷,硬树脂A易溶于醚,硬树脂B易 溶于醇。茄尼醇是软树脂中的一个组分,因此用正己 烷作为茄尼醇的提取溶剂。但正己烷提取出的茄尼 醇含有较多杂质,为提高茄尼醇的纯度及含量,采用 强碱的皂化反应,并把皂化后溶于水的脂肪酸及其酯 分离除去,茄尼醇在强碱作用下会有少量发生变化。 笔者在皂化过程中加入对苯二酚防止茄尼醇被破坏, 用HPLC检测方法l_3_6_对茄尼醇进行正交实验皂化 除杂研究,为进一步开发利用提供参考数据。 1仪器与试药 1.1仪器1525型高效液相色谱系统(Waters);三 用恒温水浴锅(w2O1B);真空泵(SHZ一95);旋转蒸发 器(R201);热回流装置;电子天平(FA1004)。 

1.2 试药 茄尼醇浸膏由云南弥勒科元生物技术开 维普资讯 http://www.cqvip.com