基于PC12细胞模型分析大豆蛋白水解物对神经元氧化损伤的保护作用
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肌肽对过氧化氢诱导PC12细胞损伤后NF -κB P65表达的影响董晓丽明海霞金戈(甘肃中医学院生理学教研室,兰州甘肃730000)〔摘要〕目的探讨L-肌肽对H 2O 2诱导PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)凋亡的保护机制。
方法在H 2O 2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上,加入肌肽作用于细胞,采用MTT 比色法检测肌肽对PC12细胞的增殖抑制作用;RT-PCR 法检测凋亡相关基因NF-κB P65mRNA 的表达变化;免疫组化SABC 法检测凋亡相关蛋白Caspase-3和NF-κB P65的表达,流式细胞仪(FCM )检测细胞凋亡。
结果不同浓度的肌肽对H 2O 2损伤的PC12细胞的存活率有显著的提高作用,20mmol /L 浓度时达最大值(P <0.05)。
20mmol /L 的肌肽作用于PC12细胞可降低NF-κB P65的mR-NA 表达,降低NF-κB P65蛋白的表达,流式细胞仪检测显示肌肽可抑制细胞的早期和晚期凋亡率。
结论肌肽对H 2O 2损伤的PC12细胞有保护作用,机制可能是通过抑制NF-κB P65的表达来抑制PC12细胞的凋亡而实现的。
〔关键词〕肌肽;H 2O 2;PC12细胞;NF-κB P65;凋亡〔中图分类号〕R383〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202(2012)11-2332-02;doi :10.3969/j.issn.1005-9202.2012.11.055第一作者:董晓丽(1975-),女,硕士,讲师,主要从事神经系统疾病中西医结合治疗的研究。
肌肽是继超氧化物歧化酶(SOD )和维生素E 后又一被发现的天然非酶促自由基清除剂和抗氧化剂〔1〕。
本研究用H 2O 2处理PC12细胞,制备氧化应激损伤致凋亡的模型,采用MTT 法检测肌肽对PC12细胞增殖的影响,观察肌肽是否具有抗氧化应激的神经保护作用;检测肌肽对凋亡相关基因NF-κB P65mRNA 和蛋白表达的影响。
黑骨藤对PC12细胞氧化损伤的保护研究张贵源;龚莉莉;余跃生;王恒;陆玉炯;杨再昌【摘要】[Objective] The aim was to study the protective effects of Periploca forrestii Schltr.root extract against cytotoxicity induced by hydrogen peroxide in PC12 cells.[Method] The model of PC12 cells toxicity induced by hydrogen peroxide was established and the protective effects of Periploca forrestii Schltr.root extract on PC12 cells were detected.[Result] Compared to negative control,Periploca forrestii Schltr.root extract could protect PC12 cells at concentration ranges of 16-128 ug/mL at a dose-response manner.[Conclusion] Periploca forrestii Schltr.root extract showed anti-oxidative effect on PC12 cells.%[目的]研究黑骨藤提取物对H2O2诱导的PC12氧化损伤的保护作用。
[方法]使用H2O2氧化压力诱导PC12出现氧化损伤,检测黑骨藤乙醇提取物对PC12细胞的保护作用。
[结果]与模型对照组相比,黑骨藤乙醇提取物浓度在16~128μg/mL时,能显著提高PC12细胞的存活率,呈典型的量效关系。
[结论]黑骨藤乙醇提取物具有抗氧化损伤作用。
川芎嗪中间体的合成及其对CoCl2致分化PC12细胞损伤的保护作用该研究通过氧化、取代、酯化、酰胺化等方法改变川芎嗪侧链结构,合成川芎嗪中间体6个,并采用CoCl2致PC12细胞损伤模型,评价中间体的神经保护作用。
研究显示,在川芎嗪侧链引入功能基团的中间体2,5,12和13对CoCl2损伤的PC12细胞具有较好的保护作用,其保护作用均明显强于原料药川芎嗪。
经构效关系分析,川芎嗪侧链引入羧基、氨基和适当增加川芎嗪单元比重可能有助于增强此类结构的神经保护活性,该研究为设计合成具有神经保护活性的川芎嗪系列衍生物提供参考。
标签:川芎嗪中间体;PC12细胞;神经保护;构效关系从天然产物中寻找先导化合物是新药研发的基本方法之一[1-2]。
川芎嗪(TMP)是中药川芎的主要药效成分,具有保护心脑血管、保护神经、抗肿瘤等多种生物活性[3-6]。
以药物设计的拼合原理或电子等排原理为指导,合成川芎嗪系列衍生物,以期获得先导化合物,是国内外学者研究的热点[7-12]。
在众多川芎嗪系列衍生物合成过程中,主要涉及TMP-COOH,TMP-OH,TMP-NH2,HO-TMP-OH等川芎嗪中间体[7,13],但目前尚未有关这些中间体相关活性研究报道。
PC12细胞经NGF诱导分化后具神经内分泌细胞的一般特征,广泛应用于神经生理和神经药理学研究[14-15]。
本课题组前期研究发现川芎嗪及其衍生物对PC12细胞具有较好的神经保护作用[4]。
基于此,本研究制备了川芎嗪衍生物合成中常用的6个川芎嗪中间体(TMP-COOH,TMP-OH,TMP-NH2,HO-TMP-OH,TMP-COO-TMP,TMP-CON-TMP),并运用CoCl2致PC12细胞损伤模型评价川芎嗪中间体的神经保护活性,为川芎嗪系列衍生物的设计合成及活性筛选提供参考。
1材料双线恒温加热磁力搅拌器SH-3A(北京金紫光科技发展有限公司);分析天平(德国赛多利斯公司);96孔板(美国Costar公司);倒置显微镜IX71型(OLYMPUS公司)、CJT型超净工作台(北京长城空气净化工程公司);X-5显微熔点测定仪(北京泰克仪器有限公司);1H-NMR由AM-500 和AM-400核磁共振仪(瑞士Bruker公司)测定,CDCl3为溶剂,TMS为内标;微量振荡器(江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司),酶标仪Biotek Elx800(美国伯腾仪器有限公司)等。
PC12细胞诱导分化成神经元样细胞的培养机制研究傅松文;农梦妮;李柯柯;曾高峰【摘要】目的:研究适宜PC12细胞的培养方法及其在神经生长因子(NGF)作用下的分化效果.方法:PC12细胞培养于F12K培养基中,传代时直接将细胞吹打下来,并用注射器吹散成单细胞悬液;PC12细胞接种于6孔培养板中,并用含NGF 50μg/L 的无血清培养基进行诱导分化5d,倒置显微镜下观察细胞的形态特征,Image J软件进行图像分析.结果:PC12细胞生长状态良好,且经NGF作用5d后,细胞体积显著增大,突起增多增长,细胞分化率达(72.60±3.61)%.结论:本实验中对PC12细胞培养的方法简单易行,适用于PC12细胞的培养;NGF能够诱导PC12细胞分化成神经元样细胞,可为神经退行性疾病的研究奠定基础.【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2014(031)006【总页数】2页(P919-920)【关键词】PC12细胞;细胞培养;NGF;神经元样细胞【作者】傅松文;农梦妮;李柯柯;曾高峰【作者单位】广西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室南宁 530021;广西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室南宁 530021;广西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室南宁 530021;广西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室南宁 530021【正文语种】中文【中图分类】R322.85PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞,其在形态、生理和生化等方面具有神经元细胞的特性[1];因其具可传代特点,故可作为体外研究神经退行性疾病的模型。
然而,PC12细胞存在贴壁能力差,容易聚集成团生长,难以吹散成单细胞悬液等缺点。
而常规培养中,吹散细胞时往往直接采用巴氏吸管进行吹打,难以有效地将PC12细胞吹散成单细胞悬液,以致细胞接种后即可出现较为严重的成团现象,不利于细胞的生长;且PC12细胞接种于普通培养板进行后续实验时,细胞也易聚集成团,并容易脱落,影响实验的顺利进行。
nmn胶囊正确服用方法,nmn最新服用指南nmn胶囊正确服用方法,nmn新服用指南!NMN被科学证明可以逆转衰老,在激发长寿蛋白Sirtuins家族、提升能力代谢等方面带来一系列的身体改观,相较于市面上大多数的功效型膳食补充剂,“1瓶顶一堆”并不夸张。
但是整个NMN市场的时间并不长,市场教育还处于初期,但是对NMN应该怎样服用很多人还处于一知半解状态。
为了让NMN发挥大的作用,本文将对NMN服用方法进行讲解,请认真记录!日本W+NMN端立塔25000新服用指南,从几个要点来说nmn胶囊正确服用方法1:nmn胶囊正确服用方法,日本W+NMN端立塔25000建议口服涉及NMN的服用方式有:口服、静脉注射、舌下含服三种!The way of taking NMN involves: oral, intravenous, sublingual containing take 3 kinds!口服:大多数药口服后经胃壁或小肠吸收,依次进入小肠绒毛细胞和周围毛细血管,汇总后经门静脉入肝(这是肝解毒的原因之一),然后进入血液循环,流经各个靶器官发挥功能。
静脉注射: 直接进入血液循环。
舌下含服: 原理类似静脉注射,但给药剂量更小,吸收量有限,所以需要少量多次。
但无论何种补充方式,能提升NAD+的就是好方式。
事实上,诸多实验表明日本W+NMN端立塔25000黑金版是目前能让nmn进入体内的口服肠溶技术。
But whatever the supplement, the one that improves NAD+ is a good one. In fact, many experiments have shown that the Japanese W+NMN25000 black gold version is the current oral enteric technology that can introduce nmn into the body.肠道内存在NMN的转运蛋白Slc12a8,Slc12a8蛋白会在钠离子的帮助下将NMN直接运输到细胞中,并迅速发挥作用,用于NAD+的生产;日本W+NMN25000在体内可快速提高体内NAD+水平,主要表现在以下几个方面:通过消化系统完好无损地吸收;2~3分钟进入血液;15分钟内提升组织中的NMN含量;迅速提升血液、肝脏等器官中的NAD+水平,它转化NAD+的效率远远高于其它血液中浓度高的底物。
weremainlyinvolvedincytokine cytokinereceptorin teractionandcomplementandcoagulationsignalingpathways.Moleculardockingshowedthatpaeoniflorig enoneandtriptolidehadgoodbindingactivitywithC8BandPLAU.Conclusion ComplementandcoagulationcascadesmaybecomeanewtherapeutictargetofNA.ThetwoscreenedcompoundspaeoniflorigenoneandtriptolidemaybepotentialtherapeuticdrugsforthetreatmentofNA.Keywords:bioinformatics;neutrophilicasthma;dif ferentialexpressiongenes;complement;paeoniflorig enone;triptolide网络出版时间:2021-5-2810:07 网络出版地址:https://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20210527.1459.040.html氟西汀对PC12细胞缺氧损伤的保护作用曹琪璐1,2,刘 菁2,赵 彤2,陈克明1,2,马慧萍1,2,贾正平1,2(1.兰州大学药学院,甘肃兰州 730000;2.中国人民解放军联勤保障部队第九四 医院,甘肃兰州 730050)doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2021.06.022文献标志码:A文章编号:1001-1978(2021)06-0866-05中国图书分类号:R329 24;R329 25;R339 54;R349 1;R442 9;R845 22摘要:目的 以PC12细胞为研究对象,探讨氟西汀对体外培养细胞缺氧损伤的保护作用。
nmn需要空腹吃吗,nmn怎么服用效果好,大公开nmn需要空腹吃吗,nmn怎么服用效果好,大公开! NMN被科学证明可以逆转衰老,在激生长寿蛋白Sirtuins家族、提升能力代谢等方面带来一系列的身体改观,相较于市面上大多数的功效型膳食补充剂,“1瓶顶一堆”并不夸张。
那么,在吸收利用层面,怎么服用NMN效果好,也成为很多人关心的问题。
nmn怎么服用好,日本W+NMN(端立塔)25000从几个要点来说nmn的服用方法一、nmn怎么服用效果好,nmn需要空腹吃吗?如果产品单纯只有NMN一种成分,饭前或者饭后服用都是可以的,但如果是复合配方,除了NMN还有其他成分,有的成分可能对肠胃有刺激,遵从产品说明,以日本W+NMN端立塔25000为例,空腹吃或者饭后吃都是可以的。
If there is only one component of NMN in the product, it is OK to take it before or after meals. However, if it is a compound formula, there are other ingredients besides NMN, some of which may irritate the stomach and intestines. Follow the product instructions, take Japan W+NMN Duanli 25000 as an example, it is OK to eat it on an empty stomach or after meals.服用方式是温水送服吸收效果更好,可帮助nmn顺利通过咽喉和食道到胃内,以利于在胃内崩解、溶化、稀释、吸收。
如果是热水除对口腔食管黏膜造成损伤外,还会影响效果。
而服用后喝水过多不行,因为这样会稀释胃酸,不利于溶解吸收。
一般来说送服固体药1小杯温水就足够了,所以温水是服用nmn的较好选择。
nmn年轻人能吃吗,nmn什么年龄开始服用最好nmn年轻人能吃吗,nmn什么年龄开始服用好!近几年来, NMN作为一种延缓细胞老化的物质风靡全球。
很多人提到NMN,就知道是抗衰老的产品,以为是老年人的产品,其实这是一个“误解”,无论处于哪个年龄段,只要是体内缺乏NAD+,都可以通过服用NMN来改善。
nmn年轻人能吃吗,什么年龄可以开始吃NMN?来看日本W+NMN端立塔25000的研究数据只要是衰老开始,就可以吃NMN。
以女性身体的衰老周期为例:20岁:皮肤、大脑、肺开始衰老30岁:头发、肌肉开始衰老35岁:乳房、骨骼、牙齿、生殖能力开始退化40岁:眼睛、心脏老化50岁:肾、听力老化55岁:肠道功能退化60岁:味觉、嗅觉失敏65岁:膀胱老化70岁:肝老化也就是说,从20岁开始,人体已经开启了逐渐衰老的进程,到50岁、60岁的时候,衰老已经踩下“油门”,不仅仅是外表不知不觉中老了许多,而且身体很可能还查出了超过一种的中老年慢病。
因此,抗衰老要从现在就开始,不管是30岁还是50岁,每个年龄段都有不同的抗衰需求,无论哪个年龄段,都应该享受高质量的“抗衰老”服务,而NMN产品抗衰老效果显著,也是可以运用至全年龄段的消费群体之中的!蕞迟的话也要从40岁开始,40岁是一个分水岭,这时候体内的NAD+水平降低,导致各项脏器已经开始老化退化、细胞功能下降、新城代谢变慢等等,此时开始服用NMN(W+NMN端立塔25000)来稳住体内NAD+的水平,修复受损老化的线粒体和DNA,启动长寿基因蛋白,可以很好地达到延缓衰老、预防改善中老年疾病、延缓疾病进展的目的。
nmn年轻人能吃吗,nmn什么年龄开始服用好!只不过,对于不同年龄的人来说,对于nmn的需求就是缺哪补哪,在实际应用中,服用日本W+NMN(端立塔)25000的适龄人群基本清晰:1)年龄50以上的中老年人是需要补充NMN的群体,在衰老引发的疾病(尿糖病、睡眠、白发、心脑血管)等方面都有症状明显改善的案例The middle and old people above 50 are the first groups that need NMN supplementation, and the symptoms of aging-induced diseases (uretic disease, sleep, gray hair, cardiovascular and cerebrovascular diseases) are obviously improved cases升级后的日本黑金版W+NMN端立塔注重于神经元修护、脑萎缩、脑抗衰、脑神经修复:突破了常年以来的医学瓶颈,一直以来脑细胞不可再生,而神经元修复一直是医学难题,黑金版W+NMN通过NMN的基础功能,打通基因链条,结合四大脑神经恢复原素:神经修复学(W+NMN法则)神经再生、神经修补或替代、神经重塑、神经调控、神经康复,可作为神经修复学干预方法的(W+NMN法则)。
中药复方更年春对β-淀粉样蛋白致PC12细胞损伤的保护作用妇女进入围绝经期以后,卵巢功能减退,出现了血管舒缩症状、神经精神症状,以及骨质疏松、学习记忆力减退,甚至发生阿尔茨海默病(Alzheimer\'s disease,AD)。
对于AD的治疗尚处于对症阶段,雌激素和中医药在AD防治中的作用正在引起重视。
雌激素替代治疗同时增加了子宫内膜癌、乳腺癌、心脏疾患和中风等的发病风险,故受到限制。
中医中药对由雌激素下降引起的围绝经期综合征有较好的疗效,因此中医中药对于雌激素下降有关的学习记忆能力减退甚至AD可能有良性调节作用。
我院根据中医理论及多年临床实践,以滋肾柔肝清心泻火为治则制成以补肾为主更年春方(GNC),对更年期综合征疗效良好,尤其可以改善大脑功能、增强记忆能力。
既往研究发现,GNC可通过提高雌激素受体(ER)含量对神经内分泌免疫网络起良性调节作用;GNC可以提高大鼠切除卵巢后Morris水迷宫成绩;GNC可提高海马中ERβmRNA和蛋白的表达、调节海马胆碱能指标并可能由此改善学习和记忆能力;而且GNC不导致子宫内膜增生,提示中药GNC对改善学习和记忆能力有潜在的应用前景。
本研究拟通过体外实验研究,解析GNC复方及主要单体成分对神经细胞损伤的保护作用及其分子机制。
第一部分中药GNC对PC12细胞的保护作用目的探讨、分析中药GNC含药血清和主要单体及其复合物对PC12细胞作用的有效浓度及时间。
方法3月龄SD雌性大鼠去势后随机分组,分别以中药复方GNC颗粒制剂或生理盐水灌服,制备GNC含药血清及正常大鼠血清。
以GNC含药血清、正常大鼠血清、F-12培养基(含5%FBS+15%HS,作为空白对照)、GNC复方中主要单体成分芍药苷(Pae)、黄连素(Ber)、知母皂苷A-Ⅲ(Tim)、淫羊霍苷(Ica)及其复合物处理PC12细胞。
MTT法检测细胞增殖活力。
摸索中药含药血清作用的有效浓度及时间;摸索四种中药单体及复合物(Ica+Tim+Pae+Ber)作用的有效浓度及时间。
葡萄内脂对PC12神经细胞损伤的保护作用研究廖诚红;张洁云;罗满芳;林晓莲;周国莉【摘要】目的探讨葡萄内脂对过氧化氢(H2O2)诱导的肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)神经细胞损伤的保护作用.方法体外培养PC12细胞,建立PC12细胞过氧化氢损伤模型.将处于对数生长期的PC12细胞分为正常对照组、模型组、阳性对照组、5μmol/L葡萄内脂组、25 μmol/L葡萄内脂组、50 μmol/L葡萄内脂组.采用不同浓度(5 μm/L,25 μm/L和50 μm/L)葡萄内脂对PC12细胞进行干预,通过测定细胞存活率、细胞上清液中乳酸脱氢酶水平和细胞内氧化活性物质(ROS)水平评价干预效果.结果模型组PC12细胞存活率显著低于正常对照组及阳性对照组;25 μmoL/L、和50 μmol/L葡萄内脂组PC12细胞存活率(与阳性对照组相当)显著高于模型组,随着葡萄内脂浓度的增加,H2O2诱导损伤的PC12细胞的存活率呈升高趋势,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).模型组PC12细胞上清液乳酸脱氢酶水平明显高于正常组及阳性对照组,5μmol/L、25 μmo l/L和50 μmol/L葡萄内脂组细胞上清液乳酸脱氢酶水平(与阳性对照组相当)均显著低于模型组,且随着葡萄内脂浓度的增加,乳酸脱氢酶水平呈降低趋势,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).模型组PC12细胞ROS水平显著高于正常对照组及阳性对照组,5 μmol/L、25 μmol/L和50μmol/L葡萄内脂组PC12细胞ROS水平(与阳性对照组相当)均显著低于模型组,且随着葡萄内脂浓度的增加,ROS水平呈降低趋势,差异有统计学意义(P<0.05).结论葡萄内脂对H2O2诱导损伤的PC12神经细胞具有明显的保护作用,可能与其能维持细胞膜的完整性、发挥抗氧化作用有关.【期刊名称】《内科》【年(卷),期】2019(014)001【总页数】4页(P4-7)【关键词】葡萄内脂;肾上腺嗜铬瘤细胞;神经保护作用;过氧化氢;氧化应激【作者】廖诚红;张洁云;罗满芳;林晓莲;周国莉【作者单位】广东省深圳市罗湖区中医院,深圳市 518001;广东省深圳市第三人民医院肝病研究所,深圳市 518020;广东省深圳市罗湖区中医院,深圳市 518001;广东省深圳市罗湖区妇幼保健院,深圳市 518001;广东省深圳市罗湖区中医院,深圳市518001【正文语种】中文【中图分类】R741阿尔茨海默病(AD)和帕金森病(PD)等神经退行性疾病是老年人的常见疾病,主要致病原因是内源性、外源性因素刺激机体产生过量自由基导致机体氧化应激水平升高,从而引起神经元的损伤和凋亡[1-2]。
丁苯酞对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞线粒体损伤的保护作用崔玉环;张朝东;魏王磊【期刊名称】《中国医科大学学报》【年(卷),期】2010(000)006【摘要】目的探讨丁苯酞(NBP)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)诱导的PC12细胞线粒体损伤的保护作用及其机制。
方法对数生长期的PC12细胞分为6组:正常对照组、模型组、不同浓度(0.1,1.0,10,100μmol/L)NBP组。
将不同浓度的NBP作用到经Aβ25-35诱导的PC12细胞上,MTT法分析细胞存活率,电镜观察线粒体超微结构的变化,分光光度法检测丙二醛(MAD)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,观察细胞氧化应激。
结果 MTT显示NBP组细胞存活率明显高于未经NBP预处理组(P〈0.05),并且中剂量存活率最高;电镜结果显示模型组线粒体数量和形态发生了明显的改变,而NBP组线粒体数量多,结构比较完整;SOD活性NBP组较模型组细胞明显增加,而MDA活性降低。
结论 NBP对Aβ25-35诱导的PC12细胞线粒体损伤有保护作用,其机制可能和NBP抑制MDA活性、降低脂质过氧化、激活SOD清除氧自由基有关。
【总页数】4页(P452-455)【作者】崔玉环;张朝东;魏王磊【作者单位】中国医科大学附属第一医院神经内科,沈阳110001;中国医科大学附属盛京医院胸外科,沈阳110004【正文语种】中文【中图分类】R749.16【相关文献】1.雷帕霉素对β淀粉样蛋白25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用 [J], 林茂;王敏;刘芳;金小小;王吉博;王春梅2.雷公藤甲素对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制研究 [J], 刘帮慧;张瑛3.细叶远志皂苷对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞线粒体损伤的保护作用 [J], 王琳; 金桂芳; 余河汉; 陆晓华; 尤付玲; 杨红4.细叶远志皂苷对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞线粒体损伤的保护作用 [J], 王琳; 金桂芳; 余河汉; 陆晓华; 尤付玲; 杨红5.柚皮苷对Aβ25-35诱导PC12细胞保护作用的代谢组学研究 [J], 张悦;徐占玲;孙慧峰;雷霞;刘国良;姚远;张宁;刘斌因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
清心开窍方含药脑脊液对谷氨酸致PC12细胞损伤的保护机制目的:从细胞水平研究清心开窍方含药脑脊液对谷氨酸(glutamate,Glu)损伤的PC12细胞的保护作用,为该方剂的临床应用提供依据。
方法:SD大鼠灌胃给予清心开窍方水煎液(7.9 g·kg-1),每天分2次灌服,连续3.5 d,以制备清心开窍方含药脑脊液。
PC细胞分为正常组、模型组、尼莫地平组、10%正常脑脊液组、10%含药脑脊液组、20%正常脑脊液组、20%含药脑脊液组,除正常组外,其余各组采用PC12细胞和终浓度20 mmol·L-1的Glu 共培养,造成神经细胞损伤模型。
除模型组和正常组外,其余各组分别采用尼莫地平、正常脑脊液、10%和20%含药脑脊液进行干预,以RT-PCR方法检测各组Bax,Bcl-2,Caspase-3 mRNA表达水平,MTT法检测PC12细胞活性。
结果:清心开窍方含药脑脊液组PC12细胞活性明显高于模型组,Bax,Caspase-3 mRNA表达水平降低,Bcl-2 mRNA表达增高,与模型组比较差异显著(P<0.01),20%含药脑脊液组疗效优于10%含药脑脊液组(P<0.01)。
结论:清心开窍方对Glu 损伤的PC12细胞有明显的保护作用。
标签:清心开窍方;PC12细胞;谷氨酸(Glu);保护作用清心开窍方源自明代著名医学家张景岳《景岳全书》中的“蛮煎”,具有清心凉血开窍功效。
是用于治疗阿尔茨海默病(AD)的有效方剂,已广泛运用于临床多年,且疗效显著,尤其对早期出现症状者效果更佳,临床治疗AD能明显改善患者的认知功能障碍、行为和精神症状等[1]。
前期的实验研究证实该方水煎剂能明显改善AD小鼠和大鼠的学习记忆能力,降低AD大鼠Aβ及βAPP的大脑的表达,降低AD小鼠脑组织中NO,NOS含量,抑制AchE活性,降低氧自由基对机体的损伤,对海马神经细胞具有保护作用。
细胞学实验表明,清心开窍方含药脑脊液对Aβ25-35所致PC12 细胞损伤有保护作用[2-6]。
每天摄入多少nmn才有效果,nmn的服用量每天摄入多少nmn才有效果,nmn的服用量,新手速get!NMN(烟酰胺单核苷酸)是一种近年来备受关注的保健品,它能够帮助人体提高NAD+水平,从而减缓衰老过程、提高身体健康。
但是,很多人对于NMN的摄入量仍然存疑,那么NMN每天摄入量是多少呢?接下来,我们来一起了解一下。
每天摄入多少nmn才有效果,日本W+NMN端立塔25000给出nmn建议服用量来自日本的一个研究小组进行了一项人体临床研究,测试了口服剂量高达500毫克的NMN 的安全性,发现心率或血压等生理测量没有变化。
这项研究的结果支持,一个高达500毫克的NMN剂量是安全的,耐受性良好。
圣路易斯华盛顿大学医学院科学家的一项研究表明,每天口服250毫克剂量的NMN,持续10周,可以改善老年妇女的肌肉胰岛素敏感性和结构。
这些发现表明,更实惠的NMN剂量为每天250毫克,可以安全有效地改善肌肉胰岛素敏感性。
A study by scientists at Washington University School of Medicine in St. Louis showed that a daily oral dose of 250 mg of NMN for 10 weeks improved muscle insulin sensitivity and structure in older women. These findings suggest that a more affordable NMN dose of 250 mg per day is safe and effective in improving muscle insulin sensitivity.东京大学的另一项研究表明,每天口服250毫克NMN,持续12周,可改善65岁以上男性的肌肉功能。
补充NMN可提高老年男性的步行速度,从椅子上站起来的能力和抓握力。
亚硒酸钠对H2O2氧化损伤PC12细胞的保护性作用王敏娟;李亚军【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2010(0)22【摘要】目的研究亚硒酸钠对H2O2损伤PC12细胞的保护性作用.方法培养PC12细胞,加入亚硒酸钠,使其终浓度为0、0.5、1、5、8、10、20、50和150μg/mL,测定PC12细胞活力,选择不影响PC12细胞生长活性的亚硒酸钠浓度作为干预浓度,然后将细胞分为:正常对照组、损伤(+H2O2)组和亚硒酸钠保护组(+Na2SeO3+H2O2)组,采用甲基四唑蓝比色法(MTT)和流式细胞仪检测研究亚硒酸钠对H2O2氧化损伤PC12细胞的影响.结果①0.5μg/mL的亚硒酸钠对PC12细胞无抑制(P>0.05),随着浓度增大对PC12细胞的抑制率也增加(P<0.05).②0.5μg/mL亚硒酸钠可以增强PC12细胞的抗H2O2氧化损伤的能力,提高细胞的生存率(P<0.05).③经H2O2处理后,加入亚硒酸钠保护的细胞早期和晚期凋亡率较损伤组细胞有明显下降(P<0.05).结论0.5μg/mL的亚硒酸钠对PC12细胞具有抗H2O2氧化损伤的保护性作用.【总页数】4页(P3376-3379)【作者】王敏娟;李亚军【作者单位】西安医学院附属医院,神经内科,陕西,西安,710077;西安医学院附属医院,神经内科,陕西,西安,710077【正文语种】中文【中图分类】R-33;R74【相关文献】1.亚硒酸钠预处理对Aβ损伤PC12细胞的保护性作用 [J], 王敏娟;李亚军;张蓓;石少亭;郭长江;折潇;张世俊;左星2.脑蛋白水解物对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的修复作用及其胃漂浮片处方的优化 [J], 杨昕祺;王广红;糜心雅;安丽萍;杜培革;王曼力3.桔梗多糖对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用及机制研究 [J], 顾程远;陈秋利;李海涛4.川牛膝多糖对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤保护作用的研究 [J], 吴丽红;怀雪;马智超;孟永海5.北沙参多糖提取工艺优化、抗氧化活性及对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用 [J], 张瑞娟;景永帅;张丹参因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
牛毛水解物对PC12细胞氧化损伤的抑制曾维才;于志龙;张文华;石碧【摘要】通过考察H2O2浓度和作用时间对细胞活力的影响,确定PC12细胞氧化损伤模型的建立条件;通过细胞活力及形态分析,测定牛毛水解物对H2O2致PC12细胞氧化损伤的抑制作用.结果表明,H2O2浓度0.15 mmol/L、作用时间2h为建立PC12细胞氧化损伤模型的理想条件;不同质量浓度的牛毛水解物(10、20、40、60、80 mg/L)可有效抑制H2O2对PC12细胞的氧化损伤,使细胞活力达到58.79%、67.53%、76.89%、85.96%、87.58%,也能在一定程度上修复氧化损伤的细胞,使其活力恢复至53.69%、57.18%、62.56%、65.68%、67.23%,还能有效地维持细胞原有的形态特征.【期刊名称】《生物质化学工程》【年(卷),期】2015(049)001【总页数】6页(P43-48)【关键词】牛毛;水解物;PC12细胞;氧化损伤;抑制作用【作者】曾维才;于志龙;张文华;石碧【作者单位】四川大学皮革化学与工程教育部重点实验室,四川成都610065;四川大学皮革化学与工程教育部重点实验室,四川成都610065;四川大学皮革化学与工程教育部重点实验室,四川成都610065;四川大学皮革化学与工程教育部重点实验室,四川成都610065【正文语种】中文【中图分类】TQ35;TQ931牛毛是畜牧养殖业和皮革加工业的一种副产物,其蛋白质含量高达85%以上,是一种潜在的可再生动物生物质资源[1]。
牛毛主要由α-螺旋角蛋白构成,结构中富含半胱氨酸和双硫键等特殊的氨基酸及官能团[2]。
因具有特别的化学组成及空间结构,角蛋白展现出特殊的物理、化学及生物学性质[3],已在皮革工业、农牧饲料工业、材料工业及日化工业得到了一定的应用[4-7]。
中枢神经系统是指挥人体进行正常生命活动的重要生理系统,由神经细胞形成的神经节、神经索、脑和脊髓以及它们之间的连接成分组成[8]。
齐墩果酸和熊果酸保护神经的药理作用综述齐墩果酸(oleanolic acid)和熊果酸(ursolicacid)同属五环三萜酸类化合物,它们又是同分异构体,因此药理作用几乎相同。
现已证实齐墩果酸和熊果酸都具有抗炎、降糖、调脂、抗肥胖、抗动脉粥样硬化药理作用[1-4],有望成为抗代谢综合征新药。
代谢综合征可诱发神经系统方面的并发症,如脑中风、疼痛、糖尿病脑病、痴呆等。
我国正在步入老龄社会,尤其是很多大城市已经进入老龄社会,老年性神经精神疾病如老年痴呆、帕金森病等发病率快速增长,而目前又缺乏安全有效、毒副作用低的防治老年性神经精神疾病药物。
齐墩果酸和熊果酸除了通过抗代谢综合征阻滞神经系统并发症外,已有大量实验研究发现齐墩果酸和熊果酸具有神经保护作用。
本文综述齐墩果酸和熊果酸保护神经细胞、镇痛、抗精神失常、改善学习记忆等神经精神药理方面的研究进展,为齐墩果酸和熊果酸防治老年痴呆、帕金森病和抑郁症的研发提供依据。
1 对离体神经细胞的保护β 淀粉样肽、过氧化氢、谷氨酸、6-羟基多巴胺等都具有神经毒性作用,能直接损伤神经细胞引起的神经元凋亡和神经功能障碍。
齐墩果酸和熊果酸对这些神经毒素引起的离体神经细胞损伤都有保护作用。
1.1 对抗β 淀粉样肽的神经毒性PC12 细胞源自大鼠髓质嗜铬细胞瘤,为神经源性细胞,具有多巴胺能神经特性,被广泛用作神经细胞体外模型,常被用来筛选神经保护药物。
齐墩果酸(20、40、80 mg/L)预处理PC12 细胞,可浓度相关地对抗β 淀粉样肽诱导乳酸脱氢酶渗漏,提高PC12 细胞存活率,降低细胞凋亡率。
这种神经保护作用可能与齐墩果酸促进抗凋亡基因bcl-2 表达,抑制促凋亡基因bax 表达有关[5].Hong 等[6]报道熊果酸0.5~125 μmol/L浓度相关的抑制β淀粉样肽诱导PC12 细胞产生活性氧,从而减少DNA 断裂和细胞凋亡。
也可通过抑制上游激酶ERK1/2、p38和JNK 磷酸化,阻滞核因子-κB(NF-κB)的p65亚单位核易位,抑制β 淀粉样肽诱导PC12 细胞表达诱生型一氧化氮合酶和环氧化酶-2,阻止神经炎症反应发生[7].Wilkinson 等[8]报道熊果酸阻滞β 淀粉样肽与小神经胶质细胞结合并抑制活性氧生成。
基于PC12细胞模型分析大豆蛋白水解物对神经元氧化损伤的保护作用刘静波,刘文超,徐梦蕾,刘吉云,李良煜(吉林大学营养与功能食品研究室,吉林长春 130062)摘要:本文基于PC12细胞模型研究大豆蛋白水解物(Soybean protein isolate hydrolysates,SPIHs)对神经元氧化损伤的保护作用。
以大豆蛋白为原料,经过酶解和膜分离得到四种分子量不同的水解物,我们首先检测了S PIHs的抗氧化能力;然后用H2O2刺激P12细胞,建立神经元氧化损伤模型,并以适当浓度的SPIHs处理细胞,通过检测各种生物学指标评价对细胞氧化损伤的保护作用。
结果显示,低分子量的SPIHs表现出最强的抗氧化活性;能够提高损伤细胞的存活率和抗氧化酶活力,减少乳酸脱氢酶(LDH)的释放量和丙二醛(MDA)的生成,抑制细胞活性氧(ROS)的累积(p<0.05或p<0.01),且变化呈现一定的剂量依赖关系。
研究认为,低分子量的SPIHs对神经元氧化损伤具有保护作用,可以作为功能性成分用于保护神经元氧化损伤相关的功能食品和保健品的开发。
关键词:大豆蛋白水解物;PC12细胞;氧化应激;细胞毒性文章篇号:1673-9078(2015)4-8-12 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.4.002 Neuroprotective Effects of Soybean Protein Isolate Hydrolysates against Neuronal Oxidative Damage in PC12 Neuronal CellsLIU Jing-bo, LIU W en-chao, XU Meng-lei, LIU Ji-yun, LI Liang-yu(Laboratory of Nutrition and Functional Food, Jilin University, Changchun 130062, China) Abstract:The neuro-protective effects of soybean protein isolate hydrolysates (SPIHs) against neuronal oxidative damage were investigated in a PC12 cell model in this study. Four hydrolysates with different molecular weights were obtained from soybeans (raw material) through enzymatic hydrolysis and membrane separation. The antioxidant properties of the SPIHs were also investigated. Subsequently, a neuronal oxidative damage model was constructed by stimulating PC12 cells with H2O2. SPIHs at appropriate concentrations were used to treat the damaged cells; the effect of SPIHs on cellular oxidative damage was evaluated using various biological indices. The results of these analyses indicated that low molecular weight SPIHs exhibited the most potent antioxidant activities, and caused a dose-dependent improvement in the neuronal cell viability, reduction in lactate dehydrogenase (LDH) release and malondialdehyde (MDA) formation, and suppression of intracellular accumulation of reactive oxygen species (ROS) (p < 0.05 or p < 0.01). Based on the results of this study, low molecular weight SPIHs were believed to protect neuronal cells against neuronal oxidative damage, and could be utilized as a functional component in functional food and health products to protect against neuronal oxidative damage.Key words: soybean protein isolate hydrolysates (SPIHs); PC12 cells; oxidative stress; cytotoxicity阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)和帕金森(Parkinson’s disease,PD)等是严重危害人类健康的一类神经退行性疾病[1],给家庭、社会和医疗界带来了沉重的负担。
大脑是人类重要的生命器官,脑部具有高的代谢率和高浓度的不饱和脂肪酸,而且大量的铁离子和弱的抗氧化酶系统使得脑组织更容易受到活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的损伤[2]。
机体内收稿日期:2014-08-18基金项目:国家科技支撑计划项目(2012BAD33B03);吉林大学研究生创新基金资助项目(2014116)作者简介:刘静波(1962-),女,博士,教授,研究方向:营养与功能食品氧化与抗氧化之间的平衡对细胞的生存和功能起着至关重要的作用,当两者失衡会造成细胞内ROS大量堆积[3]。
过量的ROS会造成脂质过氧化反应,进而损伤细胞膜,诱导细胞内的相关信号通道改变,破坏DNA 和细胞组件等[4]。
从而导致神经元的损伤和凋亡,引起相关的神经退行性疾病。
目前,大量的研究证明内源性和外源性的抗氧化物质都可以保护神经组织免受氧化应激损伤[5],于是,开发和探索天然的神经元保护剂引起了大家的广泛关注。
大豆是中国重要的传统食物,同时大豆蛋白是一种重要的潜在的生物活性肽资源库,酶解蛋白可以释8放出多种具有特殊活性的肽段。
天然蛋白源的酶解产物,因其具有低分子量、高活性、易吸收和低副作用等特点,受到越来越多人的研究和开发[6]。
大豆蛋白酶解物(Soybean protein isolate hydrolysates,SPIHs)已经被研究证明其具有降血压、抗血栓、抗淀粉样蛋白和抗氧化等多种生物活性[7],正因其具有较高的抗氧化和抗淀粉样蛋白的特点,预示其可能具有较强的神经元保护作用,但还没有被具体研究。
本研究以H2O2诱导PC12细胞建立神经元氧化损伤模型,通过检测各种生物学指标评价SPIHs的神经元保护作用并初步分析其作用机制,为深入研究其在神经退行性疾病中的作用奠定基础。
1 材料与方法1.1 材料与试剂大豆分离蛋白,哈高科大豆食品有限责任公司;2.4L Alcalase蛋白酶,丹麦Novozymes公司;大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12细胞),购自中国科学院细胞库;乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CA T)、超氧化物歧化酶(SOD)和BCA试剂盒,购自中国海门碧云天公司;DMEM培养基、胎牛血清,购自美国Gibco公司;EDTA,Fluorescein,AAPH,Trolox和DCFH-DA,购自美国Sigma公司;MTS,购自美国Promega公司;其他化学试剂均购自中国北京化工厂。
1.2 主要仪器与设备CR20B2型高速冷冻离心机,日本日立公司;ZD-2型电位滴定仪,上海精密科学仪器公司;AG-204型电子天平,瑞士Mettler Toledo公司;多功能酶标仪,美国Bio-Tek公司;超净工作台,上海精密实验仪器设备有限公司;CO2细胞培养箱,上海力申科学仪器有限公司;-80 ℃超低温冰箱,青岛Haier医用低温科技有限公司;倒置生物显微镜,重庆奥特光学仪器有限公司。
1.3 试验方法1.3.1 SPIHs的制备大豆分离蛋白配制为质量分数10%的溶液,90 ℃预处理10 min;在60 ℃、pH 8.0、加酶量5.18×10-2 AU/g的条件下,用Acalcase碱性蛋白酶酶解4 h,水解过程中持续加入0.5 mol/L NaOH,控制pH 8.0;酶解液90 ℃水浴处理10 min灭酶,1 mol/L HCl调pH 至4.4,10000 r/min离心15 min除去沉淀;将上清液进行透析脱盐,透析袋截留分子量100 u。
将上述得到的大豆蛋白酶解液在恒流蠕动泵的压力作用下进入膜分离系统,依次经过30 ku、10 ku和3 ku三块超滤膜,得到四种分子量不同的大豆蛋白水解组分SPIHs1(> 30 ku)、SPIHs2(10 ku~30 ku)、SPIHs3(3 ku~10 ku)和SPIHs4(0~3 ku)冷冻干燥后保存备用。
1.3.2 SPIHs的抗氧化活力测定1.3.2.1 Fe2+螯合法采用Fe2+螯合法检测SPIHs的螯合能力,参考Dinis[8]等人的方法,SPIHs的螯合能力以EDTA当量(mg EDTA equivalents per gram dried weigh,mg EDTA/g)来表达。
1.3.2.2 ORAC法用ORAC法检测SPIHs的抗氧化能力,参考D. Huang[9]等人的方法进行,SPIHs的ORAC值以Trolox (μmol Trolox equivalent per gram dried weigh,μmol TE/g)来表达。
1.3.2.3 抑制亚油酸自氧化法SPIHs抑制亚油酸自氧化能力的测定参考Osawa & Namiki[10]的方法,并做适当修改。
0.5 mg的样品溶解于5 mL的50 mM磷酸盐缓冲液(pH 7.0),在棕色玻璃瓶中依次加入5 mL的样品溶液,5 mL的无水乙醇,65 μL的亚油酸,再加蒸馏水调整到12.5 mL,在混合器上混合均匀,用硅胶塞密封,放在60 ℃恒温培养箱中保温,每隔24 h测定吸光度。