第四届海峡两岸寄生虫病学术研讨会通知
- 格式：pdf
- 大小：85.68 KB
- 文档页数：1
中国寄生虫学与寄生虫病杂志２０１５年２月第３３卷第１期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ Ｐａｒａｓｉｔ Ｄｉｓ Ｆｅｂ．２０１５，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．１ ・１３・ 上千个克隆中尽可能地排除阴性和有交叉反应的克 隆，减少后期工作量；第二步为特异性筛选，用粗筛 步骤中使用的方法再加上２～３种不同抗原或方法的 ＥＬＩＳＡ共同筛选，目的是淘汰有非特异性反应的粗筛 阳性克隆。通过这样的两步筛选，一次成功的融合实 验一般可以获得１％左右的特异性阳性克隆。由于筛 选和培养同步进行，所获得的细胞克隆的遗传稳定性 也在几次传代中得到了筛选。 本文以ｒｅＰｆ－ＨＲＰ重组抗原单克隆抗体的制备为 例，分析了从动物免疫到细胞的融合、培养、筛选、 单克隆抗体鉴定及其应用的完整流程和数据资料。一 次融合获得了８株特异性单抗细胞株。其中有２株为可 用于检测恶性疟原虫感染患者血液样本中特异性循环 抗原的配对抗体。这是一次高效的单抗制备结果。在 此．将这一结果总结和分享，希望对有兴趣开展单克 隆抗体制备工作的读者和同行有所参考。 参 考文献 『１］Ｋｏｈｌｅｒ Ｇ，Ｍｉｌｓｔｅｉｎ Ｃ．Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｏｆ ｆｕｓｅｄ ｃｅｌｌｓ ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｏｆ ｐｒｅｄｅｆｉｎｅｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１９７５，２５６（５５１７）： ４９５—４９７． ［２］Ｂｒｉｓｓｌｅｒｔ Ｍ，Ｒｅｈｎｂｅｒｇ Ｍ，Ｂｏｋａｒｅｗａ ＭＩ．Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｔｒａｎｓｆｏｒｍｓ ＣＤ２５ Ｂ ｃｅｌｌｓ ｉｎｔｏ ａｎｔｉｂｏｄｙ—ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｒｈｅｕｍａ－ ｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０１３，１４０（４）：４２１—４２９． ［３］Ｆｒｅｎｚｅｌ Ａ，Ｋｉｌｇｌｅｒ Ｊ，Ｗｉｌｋｅ Ｓ，ｅｔ ｏ１．Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｇｅｎｅ ｌｉｂｒａｒｉｅｓ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｂｙ ｐｈａｇｅ ｄｉｓｐｌａｙ［Ｊ］． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｊ ｏ】，２０１４，１０６０：２１５—２４３． ［４］Ｌｅｅ ＴＰ，Ｈｕａｎｇ ｊｃ，Ｌｉｕ ｃＪ，ｅｔ ｏ１．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｓｕｒｆａｃｅ－ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ＴＬＲ－４ ａｎｄ ｅｎｄｏｓｏｍａｌ ＴＬＲ－９ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅ ｌｕｐｕｓ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ａｎｔｉ— ｄｓＤＮＡ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｅｘｐ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ（Ｍａｙｗｏｏｄ）， ２０１４，２３９（６）：７１５＿７２３． ［５］Ｍｏｒｒｉｓ Ｌ，Ｃｈｅｎ Ｘ，Ａｌａｍ Ｍ，ｅｔ ｏ１．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｈｕｍａｎ ａｎｔｉ— ＨＩＶ ｓｔ，４１ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｘｉｍａｌ ｒｅｇｉｏｎ ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｂｙ ａｎｔｉｇｅｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｓｉｎｇｌｅ Ｂ ｃｅｌｌ ｓｏｒｔｉｎｇ［Ｊ］．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２０１ １，６ （９）：ｅ２３５３２． ［６］Ｙａｇａｍｉ Ｈ，Ｋａｔｏ Ｈ，Ｔｓｕｍｏｔｏ Ｋ，ｅｔ ０１．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｈｙｂｒｉｄｏｍａ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍ Ｐａｔ Ａｎａｌ，２０１３，２ （２）：２４９－２６３． ［７］Ｓｔｒａｃｈａｎ ＬＲ１，Ｇｈａｄｉａｌｌｙ Ｒ．Ｌｉｍｉｔｉｎｇ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍｕｒｉｎｅ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｕｓｉｎｇ ａｎ ｉｎ ｖｉｖｏ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ［Ｊ￣．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２０１０，５８５：４２１４３２． ［８］Ｄａｖｉｓ ＪＭ，Ｐｅｎｎｉｎｇｔｏｎ ＪＥ，Ｋｕｂｌｅｒ ＡＭ，ｅｔ ａ１．Ａ ｓｉｍｐｌｅ，ｓｉｎｇｌｅ－ ｓｔｅｐ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｆｏｒ ｓｅｌｅｃｔｉｎｇ ａｎｄ ｃｌｏｎｉｎｇ ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ， １９８２，５０（２）：１６１—１７１． ［９］Ｐａｒｋｓ ＤＲ，Ｂｒｙａｎ ＶＭ，Ｏｉ ＶＴ，ｅｔ ０１．Ａｎｔｉｇｅｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆ ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ｗｉｔｈ ａ ｆｉｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ—ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｓｏｒｔｅｒ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１９７９，７６（４）：１９６２—１９６６． ［１０］Ｗｅｒｎｅｒ Ｍ，Ｍｅｒｅｎｄａ Ｆ，Ｐｉｇｕｅｔ Ｊ，ｅｔ以Ｍｉｃｍｆｉｕｉｄｉｃ ａｒｒａｙ ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ ｏｐｔｉｃａｌ ｔｗｅｅｚｅｒｓ ｆｏｒ ｐａｒａｌｌｅｌ ｔｒａｐｐｉｎｇ，ｉｍａｇｉｎｇ ａｎｄ ｓｏｒｔｉｎｇ ｏｆ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｌａｂ Ｃｈｉｐ，２０１Ｉ，ｉｌ（１４）： ２４３２．２４３９． ［１１］谭峰，潘长旺，梁韶晖，等．抗广州管圆线虫成虫单克隆抗体的 研制及初步应用［Ｊ］．中国寄生虫学与寄生虫病杂志，２００５，２３ （４）：２０９—２１２． ［１２］李妍，宁云山，李莉，等．抗恶性疟原虫重组谷氨酸脱氢酶单克 隆抗体的制备及其鉴定［Ｊ］．中国寄生虫学与寄生虫病杂志， ２００４，１７（３）：１５５—１５７． ［１３］王保君，陈实平，陈克铨，等．在甲基纤维素半固体培养基上制 备抗人黄体生成素ＭｃＡｂ［Ｊ］．中国医学科学院学报，１９９２，１４ （５）：３８２－３８５． ［１４］刘帆，王萍，魏威，等．半固体培养基法制备单抗的可行性研究 ［Ｊ］．热带医学杂志，２０１０，１０（４）：３８３－３８６． ［１５］江莉，李雄，李浩，等．Ｅｍｌ８重组抗原特异性抗体的制备及对 循环抗原检测的初探［Ｊ］．中国寄生虫学与寄生虫病杂志，２００６， ２４（５）：３２９－３３２ ［１６］江莉，李雄，柴君杰．包虫病人血清和家兔免疫血清识别抗原表 位差异的研究［Ｊ］．地方病通报，１９９７，１２（２）：１８—２０． ［１７］Ｂｅａｔｔｙ ＪＤ，Ｂｅａｔｔｙ ＢＧ，Ｖ１ａｈＯＳ ＷＧ．Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ ａｆｆｉｎｉｔｙ ｂｙ ｎｏｎ—ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ ｅｎｚｙｍｅ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ［Ｊ］．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９８７，１００（１－２）：１７３—１７９． ［１８］张玉梅，袁俊勇，朱国琴，等．全血快速检测甲胎蛋白胶体金免 疫层析方法的研制和应用［Ｊ］．中国病理生理杂志，２０ｏ４，３９ （６）：１０３７—１０３９． （收稿日期：２０１４．０８—２７ 编辑：瞿麟平） 文章编号：１０００．７４２３（２０１５）一Ｏ１．００１３．０１ 第四届海峡两岸寄生虫病学术研讨会通知 由台湾寄生虫学会、中华预防医学会医学寄生虫分会、长 庚大学医学院、中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所共 同主办的“第四届海峡两岸寄生虫病学术研讨会”拟于２０１５ 年１１月在中国台湾桃园长庚大学会议中心举办。届时海峡两 岸寄生虫学领域的专家学者将参会，通过两岸寄生虫病防治与 研究的交流，分享防治经验，促进两岸寄生虫病科研与防治工 作的合作，共同推动寄生虫学的发展。诚挚邀请海峡两岸寄生 虫学及相关专业人员积极参与。本届论坛的主题为“后千年目 标时期寄生虫病研究与防治”。欢迎大家踊跃报名！有关本届 论坛报名、注册等事宜请与组委会联系。 【消息】 联系人：古芙熳（中国台湾）、姚嘉文（大陆） 联系电话：＋８８６－３．２１１８８００＃５６９０，＋８６—２１．５４５９３２７１ Ｅ—ｍａｉｌ：ｃｓｃｐ２０１５＠１６３．ＣＯＢ，ｗｅｎｄｙ＿ｙａｏ＠１６３．ｃｏｒｎ 台湾寄生虫学会 长庚大学医学院寄生虫学科 中华预防医学会医学寄生虫分会 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
２０１５年１月
