3显微镜计数 、死活细胞的鉴图文.ppt14-文档资料

RBC/L＝600 / 5×25 ×10 ×200 ×106 ＝6.0×1012
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一、原理
将待测标本制成涂片，经适当染色 后，显微镜下计数待测细胞的相对比 值，结果以分数或百分率表示，或换 算成单位体积标本中的细胞数。
二、应用
常用于白细胞分类计数、网织红细胞 计数和点彩红细胞计数等。
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红细胞 中性粒细胞 嗜酸性粒细胞
六. 报告方式 RBC ：
×1012／L
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结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End
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谢谢大家
荣幸这一路，与你同行
1.细胞计数方法 (1)显微镜细胞直接计数法：原理 (2)显微镜细胞间接计数法：原理 2.血液组成和红细胞发育过程 3.手工显微镜法红细胞计数
掌握原理、试剂、方法、、 注意事项、参考值
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直接计数法 显微镜细胞计数பைடு நூலகம் 间接计数法
（比值计数法） 血细胞计数仪计数法
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一、原理
将标本作适当稀释(或浓缩)后直接在显 微镜下计数一定容积内的细胞，经换算 可知单位体积标本中的细胞数。
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骨髓造血干细胞 Epo 红系祖细胞 原红 早幼红 中幼红 晚幼红 网织红 红细胞
erythrocyte red blood cell
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（ blood routine ）
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( red blood cell count, RBC )
一. 原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充 入计数池中，于显微镜下计数一定体积 内的红细胞数，经过换算求得每升血液 中的红细胞数量。

微生物学实验
实验三 酵母菌形态的观察和显微镜直接计数法
执教 单位
刘森林
生命科学学院
实验目的
观察酵母菌的形态，学习区分酵母菌死活细 胞的实验方法。
掌握酵母菌的一般形态特征。 明确血球计数板计数的原理。
掌握使用血球计数板进行微生物计数的方法。
实验原理
美兰染色检时为无色。活的 酵母细胞具有还原能力，能使美兰保持为还原态， 因此染色后死的为蓝色、活的为无色。

三.实验步骤: 作业 画图说明你所观察到的酵母菌的形态特 征，并说明死细胞和活细胞分别为什么颜 色。
三.实验步骤:
二．显微镜直接计数法


1. 菌悬液的制备：以无菌水将酿酒酵母制成浓度适 中的菌悬液 2. 镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进 行镜检，若有污物，则需清洗，吹干后才能计数。 3. 加样品：将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片， 再用无菌滴管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘滴一小 滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室， 一般计数室均能充满菌液。 注意：取样时先要摇匀菌液；加样时计数室不可有 气泡产生。
酵母菌细胞计数的原理:
将菌液放在已知体积计数室(1mm2×0.1mm)，计数 室薄，因此每个细胞都可以被看到。体积确定，因 此数完所有细胞后就知道单位体积的细胞个数。
三.实验步骤: 一、酵母菌形态的观察 （美蓝浸片的观察）
1. 在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色 液，然后按无菌操作接种环挑取少量酵母菌苔放 染色液中，混合均匀。 2. 用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触， 然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。 注意：盖玻片不宜平放，以免产生气泡影响观察 3. 将玻片放置约3分钟后镜检，先用低倍镜观察 后用高倍镜观察酵母菌的形态，并根据颜色区别 死活细胞。

微生物生长量的测定 -显微镜直接测定法
酵母菌细胞的镜检计数
原理：主要采用显微镜直接计数法，该方法是将小量待测 样品的悬浮液置于一种特别的具有特定面积和容积的载玻 片上(又称计菌器），于显微镜下直接计数的一种简便、快 速、直观的方法。目前国内常用的计菌器：血细胞计数板
血球计数板的构造
四条槽构成三个平台， 中间较宽的平台被一短
0.1毫米，所以计数室的容积为0.1mm3（万分之一毫升）
计数方法
数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值， 再乘上25或16，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换 算成毫升菌液中的总菌数。设五个中方格中总菌数A，菌液 稀释倍数B，如果是25个中方格的计数板，则
1ml菌液中的总菌数=A/5×25×104×B=50000AB 同理，如果是16个中方格的计数板，则
1ml菌液中的总菌数=A/4×16×104×B=50000AB
操作步骤见视频
①、菌悬液的制备 ②、镜检计数室
பைடு நூலகம்
③、加样品：
④、显微镜计数(记录结果） ⑤、清洗血细胞计数板
横槽隔成两半。
计数室的刻度一般有两种规格 大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格
一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25 个小方格
无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方
格400个，每一个大方格边长为1毫米，则每一个大方格的 面积为1mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为

血球计数法结果
通过血球计数板对酵母菌进行计数，我们得到了每毫升菌 液中酵母菌的数量。结果显示，菌液中酵母菌的数量在合 理范围内，计数结果准确可靠。
对实验过程的反思与总结
实验操作方面
在实验过程中，我们需要注意无菌操作 ，避免杂菌污染。同时，需要准确配制 试剂，保证实验结果的准确性。
VS
实验设计方面
在实验设计时，需要考虑实验的可行性和 可重复性。本实验中，血球计数法的操作 较为简便，且结果准确可靠，是一种有效 的计数方法。
死活细胞鉴定结果分析
死活细胞鉴定结果
通过染色法和荧光染色法，我们成功地对酵母菌的死活细胞进行了鉴定。活细胞能够吸 收染料并发出荧光，而死细胞则不能。在显微镜下观察，活细胞呈现明显的荧光，而死
细胞则无荧光。
分析
死活细胞鉴定结果表明，大部分酵母菌为活细胞，仅有少量酵母菌为死细胞。这说明在 实验过程中，酵母菌的生长条件较为适宜，且培养基的营养成分能够满足酵母菌生长的
实验七酵母菌的形 态观察、死活细胞 鉴定及血球计数法
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 结论
01
CATALOGUE
实验目的
掌握酵母菌的形态观察方法
了解酵母菌的形态特征
通过显微镜观察，了解酵母菌的单细 胞形态，包括其形状、大小、细胞壁 、细胞膜等结构特点。
学习染色法
THANKS
感谢观看
酵母菌是单细胞真菌，通常呈卵圆形或圆柱形，具有细胞壁、细胞膜、细胞质和 细胞核等基本结构。通过显微镜观察酵母菌的形态，可以了解其生长状态和繁殖 方式。
酵母菌在生长过程中，会经历由单倍体到二倍体的过程，通过观察其形态变化， 可以了解其生长周期和繁殖特点。