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黄曲霉毒素的生物学特性及其分析方法黄曲霉毒素（HMT）是一种常见的真菌毒素，它是由黄曲霉菌属中的一种真菌产生的。
这种菌属中有几十种黄曲霉，其中最为常见的是黄曲霉（Aspergillus flavus）和双孢黄曲霉（Aspergillus parasiticus）。
HMT对人和动物的健康有害，它会引起急性和长期疾病、免疫抑制和癌症等问题。
因此，对黄曲霉毒素进行监测和控制是非常重要的。
本文将介绍黄曲霉毒素的生物学特性以及分析方法。
黄曲霉毒素的生物学特性黄曲霉毒素是一种多环芳香族化合物，它的分子式为C24H20O6。
主要作用对象为哺乳动物，因为它们对该毒素的毒性更高。
一旦摄入HMT，它会被肠道吸收并进入血液循环系统，然后分布到丰富脂肪的组织中（如大脑、肝、脾、肾和心脏）。
HMT有很强的生物持久性，这意味着它有可能在组织中长期存留。
在生物体内，HMT会形成不稳定的代谢产物，这些产物可以被通过尿液或粪便排出体外。
但是，在一些情况下，这些代谢产物会在体内积累，并对健康产生负面影响。
黄曲霉毒素的分析方法检测HMT的方法有许多，但基本上可以分为以下几种类型：1.光谱法HMT可以通过高效液相色谱仪-电喷雾-质谱法（HPLC-ESI-MS/MS）或紫外线分光光度计等仪器来检测。
这些方法使用的检测样本包括食品、饲料、动物组织和尿液等。
2.细胞毒性法HMT的致细胞毒性测试（MTT法或NTC法）可以用于检测该毒素的存在。
这些方法通常使用小鼠或大鼠肝细胞进行测试，并通过测定细胞存活率来评估样本中毒素的含量。
3.免疫学检测法酶联免疫吸附检测法（ELISA）可以用于检测食品、饲料和血清样品中的HMT含量。
这种方法通过检测特定的抗原-抗体相互作用来精确地测量HMT。
总结通过对黄曲霉毒素的生物学特性以及分析方法的介绍，我们可以看出，监测HMT是不可或缺的。
如今，越来越多的环境和饮食污染问题已成为一种新的挑战。
因此，我们需要更多的科学研究，以了解这些污染物对生物系统的影响，并采取控制和预防措施以减少对健康的威胁。
黄曲霉毒素的检测技术研究摘要：黄曲霉毒素是危害较大的毒素之一，给食品、饲料和畜牧等行业造成了极大的损失。
由于它的强致病性及强致癌性，很早就受到了广大科学家及国际粮农组织的广泛关注。
本文对黄曲霉毒素的检测技术进行了综述，为更加快速有效的检测黄曲霉毒素，减少黄曲霉毒素对食品的污染以及对人体健康的危害提供了理论依据。
关键词：黄曲霉毒素；检测；预防措施1前言黄曲霉毒素主要是由黄曲霉和寄生曲霉产生的次级代谢产物，具有致癌、致畸、致细胞突变的“三致”作用，一直都受到各国的关注；其中寄生曲霉的所有菌株都能产生黄曲霉毒素而黄曲霉只有部分菌株能产生黄曲霉毒素；据FAO报道，全球每年约有2596的农作物遭受霉菌及其毒素的污染，约有2%的农作物因污染严重而失去营养和经济价值。
2黄曲霉毒素的理化性质及危害2.1黄曲霉毒素的理化性质黄曲霉毒素属于二呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，其分子结构中含有1个二呋喃环和1个氧杂萘邻酮（香豆素）环。
黄曲霉毒素难溶于水、己烷、石油醚，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、二甲基甲酰胺等有机溶剂。
在中性溶液中较稳定，在强酸性溶液中稍有分解，易被碱或强氧化剂破坏，在 pH 值 9～10的强碱溶液中会迅速分解成无毒的盐。
纯品为无色结晶，耐高温，分解温度为268 ℃，紫外线对低浓度黄曲霉毒素有很强稳定作用。
2.2黄曲霉毒素的危害黄曲霉毒素的产毒菌广泛存在于花生、玉米、麦类、稻谷等粮食作物的籽粒及核桃、杏仁等干果、禽蛋、肉、甘薯、大豆粕、奶及奶制品中。
对动物有剧烈急性毒性和明显慢性毒性，具有很强致突变、致畸和致癌作用。
3黄曲霉毒素的检测方法黄曲霉毒素的检测方法从最初以薄层色谱法为主，发展到高效液相色谱法、微柱法、酶联免疫吸附法等多种方法的普遍应用。
黄曲霉毒素定量分析法主要有：薄层层析法(TLC)、酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫层析(IC)、高效液相色谱法(HPLC)、放射免疫测定法(RIA)等检测方法。
3.1薄层层析法薄层层析法（TLC）是传统检测黄曲霉毒素最常用的方法，该方法针对不同的样品，用适宜的提取剂把黄曲霉毒素从样品中提取出来，经纯化再在薄层板上展开层析、分离，利用黄曲霉毒素的荧光性，在波长365 nm的紫外光照射下产生荧光，根据其在薄层板上显示的荧光最低检出量来定量。
玉米中的黄曲霉毒素及检测方法研究1. 引言1.1 研究背景玉米是世界上最重要的粮食作物之一，而黄曲霉毒素是玉米中常见的一种真菌毒素，对人类健康造成了潜在的威胁。
对玉米中的黄曲霉毒素进行检测具有重要的意义。
目前，随着人们对食品安全需求的不断提高，黄曲霉毒素检测方法也得到了广泛关注和研究。
目前仍存在着一些挑战，如检测方法的准确性、灵敏性和快速性等方面有待进一步提升。
在这样的背景下，我们有必要深入研究玉米中的黄曲霉毒素及其检测方法，以更好地保障食品安全和人类健康。
通过对黄曲霉毒素的形成和危害、玉米中黄曲霉毒素的来源、检测方法的研究进展等方面进行系统的研究和总结，可以为今后的检测工作提供参考和指导。
本文旨在探讨玉米中的黄曲霉毒素及其检测方法，为食品安全和农业生产提供一定的借鉴和启示。
1.2 研究意义黄曲霉毒素是一种常见的食品毒素，存在于许多食物中，尤其是玉米中。
长期摄入含有黄曲霉毒素的食物会对人体健康造成严重危害，甚至引发癌症等疾病。
研究玉米中的黄曲霉毒素及其检测方法具有重要的意义。
了解黄曲霉毒素的形成和危害有助于我们更好地认识食品安全和卫生问题，从而采取有效的措施保障公众健康。
研究玉米中黄曲霉毒素的来源可以帮助我们找出产生环境中的潜在风险，减少黄曲霉毒素对农产品的污染。
检测方法的研究进展可以提高检测的准确性和灵敏度，为食品安全监测提供更有效的手段。
对玉米中的黄曲霉毒素及其检测方法进行深入研究具有重要的理论和实践意义，可以为食品安全领域的发展和进步提供有力支持。
2. 正文2.1 黄曲霉毒素的形成和危害黄曲霉毒素（aflatoxin）是由青霉菌（Aspergillus）属真菌产生的一类高毒性化合物，主要包括黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2等四种。
青霉菌在玉米等作物上生长繁殖，产生的黄曲霉毒素会在作物收获、贮存和加工等环节中积累，对人体和动物产生严重危害。
黄曲霉毒素具有强烈的致癌性和致突变性，长期摄入会导致肝癌、肝硬化、胃癌等严重疾病，并对免疫系统、神经系统等造成损害。
黄曲霉毒素B1在食品检测中的研究新进展黄曲霉毒素B1（AFB1）是一种常见的真菌毒素，存在于一些农产品中，如玉米、花生、大米等。
AFB1是一种强烈的致癌物质，被国际癌症研究机构（IARC）列为第一类致癌物质，因此对AFB1的检测非常重要。
本文将介绍近期对AFB1检测的新进展。
传统的AFB1分析方法主要基于色谱分析技术。
通过高效液相色谱（HPLC）或气相色谱（GC）对样品进行分离和检测。
虽然色谱分析技术被广泛应用于AFB1的检测，但也存在一些缺点，如要求昂贵专业的仪器和技术操作。
另外，此类方法也不适用于快速检测。
为了克服这些缺点，研究人员近年来开发了一些新的AFB1检测方法。
其中，基于免疫检测技术的方法逐渐成为主流。
免疫检测技术可以在不需要昂贵的仪器和技术操作条件下，快速准确地检测样品中的AFB1。
基于免疫检测技术开发的AFB1检测方法主要有以下几个方向：酶联免疫吸附测定法（ELISA）、荧光免疫分析法、光学谱学分析法、纳米材料检测法等。
ELISA是最常用的免疫检测技术之一。
该方法可以快速准确地定量检测样品中的AFB1含量。
ELISA方法利用特异性的抗AFB1抗体，将样品中的AFB1与抗体结合，然后采用酶标记检测，获得高灵敏度和高特异性的检测结果。
近年来，研究人员结合修饰的纳米材料，如金磁纳米颗粒、碳纳米管等，将其用于ELISA检测，既增强了ELISA的灵敏性，又提高了检测速度。
荧光免疫分析法是另一种免疫检测技术，该方法利用与AFB1结合的荧光标记物，通过检测荧光信号来定量检测样品中的AFB1含量。
该方法具有高灵敏度、高准确性和高特异性等优点，因此被广泛应用于食品检测领域。
光学谱学分析法是一种基于样品产生衍射或吸收性改变的检测技术。
研究人员开发了基于表面等离子体共振（SPR）或色谱显微镜（SCM）的光学谱学分析法来检测AFB1。
这些方法具有低成本、便携、易操作等优点，可以用于食品加工厂、市场等场所的实时检测需求。
玉米中的黄曲霉毒素及检测方法研究
黄曲霉毒素是玉米等粮食中常见的毒素之一，对人体健康造成严重危害。
目前常用的
检测方法有生物法、物理法和化学法等，但存在着时间、精度等方面的限制。
因此，本文
将探讨玉米中黄曲霉毒素及检测方法的研究。
一、黄曲霉毒素的形成与危害
黄曲霉是一种属于真菌门、革霉目、曲霉科的真菌，广泛分布于自然环境中的植物、
土壤和粮食中，尤其是在高温、高湿的环境下容易生长。
当玉米等粮食被黄曲霉感染后，
黄曲霉会生成一系列的黄曲霉毒素，其中包括黄曲霉素、花生四环素等，这些毒素在人体
内会残留并危害健康。
黄曲霉素被认为是一种致癌物质，具有诱导肝癌等多种癌症的危害；花生四环素则可以通过抑制DNA复制等方式干扰细胞分裂和增殖。
1.生物法
生物法检测黄曲霉毒素主要是通过对试样进行培养，并观察生长情况来确定样品是否
受到感染。
其优点在于可以检测玉米中的各种毒素，但其缺点在于操作时间较长、精度不
高等。
2.物理法
3.化学法
化学法检测黄曲霉毒素主要是通过表面增强拉曼光谱、高效液相色谱、气相色谱等方法，利用化学分离和分析的原理确定样品中的毒素含量。
其优点在于操作简便、精度高，
但其缺点在于对操作人员技术要求较高。
三、结论
玉米中的黄曲霉毒素是人们生活中不可忽视的问题，对其检测方法的研究也面临着更
高的要求。
因此，在今后的研究中，应通过生物法、物理法和化学法等多种方法相结合，
提高检测效率、提高检测精度，从而更好地保障人们的健康。
黄曲霉毒素的检测方法研究进展(综述)刘作新，高军侠(1．中国科学院沈阳应用生态研究所，沈阳110016；2．中国科学院研究生院，北京100039)摘要：黄曲霉毒素(aflatoxin，AFT)是一类有毒致癌化合物，污染粮食及其制品，给人类健康造成严重威胁。
本文对目前用于黄曲霉毒素的检测方法进行了综述。
在对薄层层析法、高效液相色谱法、微柱法及酶联免疫吸附法等检测方法综合分析的基础上，评述了上述方法的优劣和适用条件。
关键词：黄曲霉毒素；检测方法；进展黄曲霉毒素(aflatoxin，AFT )主要是由黄曲霉和寄生曲霉等真菌产生的一类有毒次生代谢物。
在世界不同地区都发现了这些真菌大量存在于供人类食用的食品中，黄曲霉毒素污染已导致严重的食品安全问题[1,2] 。
自20世纪60年代以来，有关黄曲霉毒素的危害被大量报道，以致黄曲霉毒素已成为最受人们关注的一种真菌毒素[3]。
因此，寻求准确、快速、简便的检测方法，对黄曲霉毒素进行高效的定性定量分析，是黄曲霉毒素研究的一个重要方面。
1.黄曲霉毒素研究概况迄今为止，已经发现的黄曲霉毒素至少包含黄曲霉毒素B1、B 2、G1、G2 、M1、M2 等l7种结构相似且特征已知的化合物，其结构特征为都含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮。
黄曲霉毒素的理化性质比较稳定，如B1 在高温200℃、紫外线照射下，都不能使之破坏，加热到B1的熔点(268～269~C)才开始分解；在酸性溶液中，B1也很稳定，在pH 1～3的强酸性溶液中则稍有分解【2】。
黄曲霉毒素的毒性为氰化钾的l0倍，砒霜的68倍，能引起人急性中毒死亡，与人的肝癌有密切关系，能使家畜、家禽及多种实验动物诱发癌症，其中B1、B2 、G1、G2 是最主要的毒素物质，而B1是自然发生潜力最大的一种毒素【4,5】。
2 黄曲霉毒素的检测方法黄曲霉毒素的检测方法从最初以薄层层析法为主，发展到高效液相色谱法、微柱法、酶联免疫吸附法等多种方法普遍应用，其进展与新的化学检测手段和新仪器的出现密不可分。
玉米中的黄曲霉毒素及检测方法研究玉米是世界上最重要的粮食之一，但在其生产和储藏过程中，常常受到黄曲霉菌（Aspergillus flavus）和黄曲霉毒素的污染。
黄曲霉毒素是一种非常有害的真菌毒素，对人类和动物的健康都具有严重的危害。
对玉米中的黄曲霉毒素进行检测和研究十分重要。
一、黄曲霉毒素的种类及危害黄曲霉毒素主要包括黄曲霉毒素B1（AFB1）、黄曲霉毒素B2（AFB2）、黄曲霉毒素G1（AFG1）、黄曲霉毒素G2（AFG2）和黄曲霉毒素M1（AFM1）等。
这些毒素对人和动物的健康都有潜在的危害。
高浓度的黄曲霉毒素会导致急性或慢性中毒，严重时可能危及生命。
而长期摄入低浓度的黄曲霉毒素也会引发慢性病变，如肝癌、肝硬化等。
黄曲霉毒素对畜禽也有一定的危害，容易导致动物生长发育不良、产蛋量下降等问题。
二、玉米中黄曲霉毒素的污染原因1. 环境条件黄曲霉菌在适宜的温湿度条件下容易生长繁殖，而玉米的生长和储存环境往往非常适合黄曲霉菌的生长。
特别是在高温高湿的气候条件下，黄曲霉菌容易大量滋生，从而导致玉米的污染。
2. 贮存条件如果玉米在贮藏过程中受潮、受损，或者贮存条件不当，容易导致黄曲霉菌的污染。
玉米的贮存时间过长也容易导致黄曲霉菌的感染。
3. 生长过程玉米在生长的过程中，如果受到虫害或者病害的侵袭，会导致玉米的表层受损，从而为黄曲霉菌提供了生长的温床。
为了确保玉米产品的质量和安全，必须采取科学有效的方法对其中的黄曲霉毒素进行检测。
目前常用的检测方法主要包括生物学法、化学法和免疫学法。
1. 生物学法（1）小鼠生物法：小鼠生物法是黄曲霉毒素检测的一种常用方法，通过给小鼠灌胃或皮下注射黄曲霉毒素，然后观察小鼠的中毒反应来判断样品中的毒素含量。
这种方法的优点是灵敏度高，可以检测多种黄曲霉毒素，但操作过程繁琐、时间长，而且对动物造成伤害。
2. 化学法（1）色谱法：色谱法是一种常用的化学检测方法，包括气相色谱法和液相色谱法。
生物技术进展 2023 年 第 13 卷 第 6 期 853 ~ 862Current Biotechnology ISSN 2095‑2341进展评述Reviews黄曲霉毒素降解技术研究及应用进展李雨薇 ， 吕家硕 ， 于一凡 ， 刘晓晖 ， 刘成珍 *青岛大学生命科学学院，山东 青岛 266071摘 要：黄曲霉毒素是由多种曲霉属真菌产生的强致癌物，在多种恶劣环境中有极高的稳定性，该毒素分布广泛，与人类和动物接触可能性较大，因此也被认为是人类和动物最重要的饮食风险因素之一。
此外，在降解黄曲霉毒素的过程中仍有可能会产生其他有毒物质，加之某些降解技术可能会破坏营养物质的结构，从而降低产品质量。
黄曲霉毒素污染问题给全球卫生体系和食品工业造成了巨大负担。
尽管降解黄曲霉毒素的方法多种多样，但仍未能找出一种比较完美的方法解决黄曲霉毒素的污染问题，因此寻求一种高效安全的黄曲霉毒素降解技术成为当代科研工作者研究的热点。
综述了黄曲霉毒素的致毒机理、常用的降解方法及其优缺点，系统总结了生物法和新型纳米材料在黄曲霉毒素降解中的研究进展。
目前使用生物技术手段和新型纳米材料降解黄曲霉毒素有着较高的生物安全性和高效性，因而未来可将黄曲霉毒素新型降解方法的研究聚焦于此，期望为科研工作者进一步开发黄曲霉毒素的降解方法提供助力。
关键词：黄曲霉毒素；致毒机理；降解方法；生物安全DOI ：10.19586/j.20952341.2023.0096中图分类号：Q949.32,TS205 文献标志码：AResearch and Application Progress in Degradation of AflatoxinLI Yuwei ， LYU Jiashuo ， YU Yifan ， LIU Xiaohui ， LIU Chengzhen *School of Life Sciences ， Qingdao University ， Shandong Qingdao 266071， ChinaAbstract ：Aflatoxins （AFTs ） are potent carcinogens produced by multiple strains of the Aspergillus genus ， which show extremely high stability in different harsh environments ， so it is also considered to be one of the most important dietary risk factor for humans and animals. Furthermore ， other toxic materials may also be generated in the degradation process of AFTs ， and the degradation methods might destroy the structure of nutrients ， and then decrease the quality of products ultimately. The contaminationof aflatoxins places a huge burden on global health systems and the food industry. Although there are many ways to degrade aflatoxins ， there is still no way to solve the problem of aflatoxins pollution perfectly ， so searching for a technology which can eradicate aflatoxins effectively and safely has become a research hotspot for contemporary researchers. In this article ， we summarized the mechanism of aflatoxin toxicity and reviewed several methods of AFTs degradation. We also summarized the advantages and disadvantages of these techniques ， in which the research progress of using biological methods and nanomaterials to remove AFTs was recaptitulated systematically. At present ， the use of biotechnological means and nanomaterials to degrade aflatoxins has commendable biosafety and efficiency ， so the generation of new degradation techniques in the future might revolve around this. Therefore ， this paper attempted to support researchers to develop new degradation methods of AFTs.Key words ：aflatoxin ； toxicity mechanism ； degradation method ； biosecurity黄曲霉毒素（aflatoxins ，AFTs ，相对分子质量312~346 kD ）是由黄曲霉、寄生曲霉、集蜂曲霉以及某些曲霉亚种等多种真菌所产生的一类无色无味的次生代谢产物，具有极强的毒性，可诱导发生致癌、致毒和致畸形作用［1］。
黄曲霉毒素生物降解的研究进展
孙玲玉;柴同杰
【期刊名称】《山东农业大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2012(043)004
【摘要】黄曲霉毒素B1具有强毒性、强致畸性和强致突变性,是危害最大的真菌毒素之一.黄曲霉毒素污染食品、饲料等严重危害消费者和动物的健康,给相关行业和畜牧业生产带来巨大的经济损失.由于物理和化学方法去除食物中的黄曲霉毒素存在种种应用缺陷,目前生物降解黄曲霉毒素成为安全、高效且环保的方法而备受关注.本文就国内外黄曲霉毒素生物降解的研究作一综述,同时对生物降解应用前景予以展望.
【总页数】3页(P645-647)
【作者】孙玲玉;柴同杰
【作者单位】山东农业大学动物科技与动物医学院,山东泰安271038;山东农业大学动物科技与动物医学院,山东泰安271038
【正文语种】中文
【中图分类】S828.5
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3000字生物工程专业导论小论文篇一：生物工程导论论文黄曲霉毒素的降解与去除（化学方法）微生物方法黄曲霉毒素（FAT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。
黄曲霉毒素是主要由黄曲霉寄生曲霉产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。
它是所有真菌毒素和化学毒物中毒性最强的一种，被世界卫生组织列在重点研究的毒物首位。
它们在紫外线照射下能产生荧光，根据荧光颜色不同，将其分为B族和G族两大类及其衍生物。
在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1最为多见，其毒性和致癌性也最强，B1是最危险的致癌物，经常在玉米、花生、棉花种子和一些干果中常能检测到。
因此自1960年发现黄曲霉毒素以来，科学工作者便对黄曲霉毒素的解毒进行了大量的研究。
由于黄曲霉毒素对热稳定，因此很难通过加热去除，多年来国内外科学家一直在寻找黄曲霉毒素的有效去毒方法。
大约100种化合物如甲醇、过氧化氢等可以抑制黄曲霉毒素产生，其中两种黄曲霉毒素抑制剂DDV和咖啡研究较多。
传统的去毒方法有：（1）碱处理：包括氨化法和氢氧化钠法，氨化法适合含水量较高的青绿或青贮饲料，去毒有效率高达98%，但不适合子实、饼粕等低水分原料，而且处理后原料残留有大量氨。
氢氧化钠法适用于植物油解毒，但是设备投资大、成本高，已逐渐被淘汰。
（2）氧化处理法：常用氧化试剂有次氯酸钠、臭氧、过氧化氢及氯气等。
此外紫外光法也是利用紫外线的强氧化作用。
该方法主要问题在于处理效果不稳定，饲料中维生素等营养成分损失严重，处理成本较高。
（3）高温法：破坏黄曲霉毒素需268℃以上的温度，能耗高，对饲料中的营养成分破坏大，实际应用很少。
（4）吸附剂脱毒：常用吸附剂包括酵母细胞壁、硅铝酸盐等。
这种方法不能解除黄曲霉毒素的毒性，且可能通过吸附作用而降低营养物质的利用率。
饲料行业目前采用这种方法较多，也有许多新型的吸附剂问世，但其解毒效果还有待考察。
（5）抗氧化剂的使用：常用2，6-二叔丁基对甲酚。
食品中黄曲酶毒素的检测方法研究进展∗钱天元;单海峰;饶桂维【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2016(044)022【摘要】Aflatoxins are the carcinogens of typeⅠ. They are dangerous to human and animal’s health and safety through food or feed chains. The most effective method to control its negative impact is to fully understand their characteristics for conducting accurate and rapid detection. With the development of science and technology, great progress has been made in the detection of aflatoxin. The detection methods, such as thin layer chromatography ( TLC) , enzyme-linked immunoassay( ELISA) , HPLC, micro column screening( MS) , immunosensor, laser induced fluorescence method( LIF) , quick measure car and hyperspectral optimum wavelengths method, were reviewed. The prospect of the detection methods was also discussed.%黄曲霉毒素是Ⅰ类致癌物，通过食品或者饲料危害人类及动物的健康安全。
黄曲霉毒素的危害及检测方法的研究进展熊 丽1,陆 琳2,罗 超1,程天印1(1.湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;2.云南农业大学动物科技学院)摘 要:黄曲霉毒素(A F)是由某些真菌产毒菌株产生的次生代谢产物,具有极强的毒性、致癌性,在自然界中普遍存在。
A F不仅直接危害动物机体的健康,还可以通过食物链对人类健康造成极大的危害。
随着技术的发展和各国的重视,其检测方法也不断发展。
目前已有H PL C法、TL C法、EL ISA法、SFB等检测方法。
本文主要就A F的危害及其检测方法作一综述。
关键词:黄曲霉毒素;危害;检测中图分类号:S856.9 文献标识码:A 文章编号:100426704(2008)0320039203 R esearch Progress in H azard and Detect Methods of AflatoxinsXION G Li1,L U Lin2,L UO Chao1,C H EN G Tian2yin(1.College of V eterinary Medicine,H unan A g ricult ure Universit y,Changsha H unan410128,China;2.College of V eteri nary Technology,Yunnan A g ricult ure Uni versit y,Kunming Yunnan650201,China) Abstract:Aflatoxins,a group of toxins structurally related to secondary metabolites are produced by some f ungal strains and to have extremely toxic,potent carcinogenic and ubiquitous in the environment.Aflatoxin is not only directly against the body of the animal health,but also on human health through the food chain causing tremendous harm.Along with technological devel2 opment and national attention,its detection method has also developed continuously.Diferent analytical methods are currently used:TL C,HPL C,EL ISA,SFB,etc.This paper mainly on aflatoxin harm and detection methods are reviewed.K ey w ords:A F;Hazard;Detection 黄曲霉毒素(A F)是一类结构和理化性质相似的真菌次级代谢物,是自然界中已经发现的理化性质最稳定的一类霉菌毒素。
黄曲霉毒素的研究进展 孙丽 08食检（1）班 20080405210 摘 要：黄曲霉毒素(AFT)是一类有毒致癌化合物，污染粮食及其制品，给人类健康造成
严重威胁。黄曲霉毒素(AFT)是迄今发现的毒性最强的一类生物毒素，有AFB1、AFB2、AFG1、AFG2等多种形式。本文介绍了黄曲霉毒素的基本结构，致病机理，危害，和预防措施，并且对目前用于黄曲霉毒素的检测方法进行了综述。在对薄层层析法、高效液相色谱法、微柱法及酶联免疫吸附法等检测方法综合分析的基础上，评述了上述方法的优劣和适用条件。
关键词：黄曲霉毒素；致病机理 ；危害 ； 检测方法 ；预防措施；进展
黄曲霉毒素(AFT )主要是由黄曲霉和寄生曲霉等真菌产生的一类有毒次生代谢物。在世界不同地区都发现了这些真菌大量存在于供人类食用的食品中，黄曲霉毒素污染已导致严重的食品安全问题[1,2]。自20世纪60年代以来，有关黄曲霉毒素的危害被大量报道,以致黄曲霉毒素已成为最受人们关注的一种真菌毒素[3]。阐明黄曲霉毒素的治病机理，快速，准确地检测食品中黄曲霉度的含量，并制定相应的标准，采取适当的预防措施来降低其危害已成为我们研究的重点。
一． 黄曲霉毒素的概述 （1）黄曲霉毒素的发现 上世纪60年代，在英国发生的十万只火鸡突发性死亡事件被确认与从巴西进口的花生粕有关，进一步的调研证明，这些花生粕被一种来自真菌的有毒物质污染，这些研究工作最终使人们发现了黄曲霉产生的有毒代谢物质：黄曲霉毒素。黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物，特曲霉也能产生黄曲霉毒素，但产量较少[4]。产生的黄曲霉毒素主要有B1，B2，G1，G2 以及另外两种代谢产物M1 ，M2.其中M1 和M2是从牛奶中分离出来的，B1，B2 ，G1 ，G2 ，M1 ，M2在分子结构上十分接近。 （2）黄曲霉毒素化学结构和理化性质 黄曲霉毒素是一组化学结构类似的化合物，目前已分离鉴定出12种，包括B1，B2，G1，G2，M1，M2，P1，Q，H1，GM，B2a和毒醇[5]。黄曲霉毒素的的基本结构为二呋喃环和香豆素，B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素)，前者为基本毒性结构，后者与其致癌性有关[6]。M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物。黄曲霉毒素的主要分子形式含 B1，B2，G1，G2，M1，M2等，其中M1和M2主要存在于牛奶中，B1为毒性及致癌性最强的物质。 黄曲霉毒素难溶于水、己烷、乙醚和石油醚，易溶于甲醇、乙醇、氯仿和二甲基甲酰胺等有机溶剂，分子量为312-346，熔点为200-300℃。黄曲霉毒素耐高温，通常加热处理对其破坏很小，只有在熔点温度下才发生分解。黄曲霉毒素遇碱能迅速分解，但此反应可逆，即在酸性条件下又复原。一般来说，温度30℃、相对湿度80%、谷物水份在14%以上（花生的水份在9%以上）最适合黄曲霉繁殖和生长。在24-34℃之间，黄曲霉菌产毒量最高[7]。几乎所有谷物、饲草和各种食品（包括畜产品）都可作为黄曲霉基质[8]。 （3）黄曲霉毒素的分布 黄曲霉毒素存在于土壤、动植物、各种坚果，特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般在热带和亚热带地区食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。在我国，产生黄曲霉毒素的产毒菌种主要为黄曲霉，1980年测定了从17个省粮食中分离的黄曲霉1660株，广西地区的产毒黄曲霉最多，检出率为58%。总的分布情况为：华中、华南、华北产毒株多，产毒量也大，东北、西北地区较少。
二． 黄曲霉毒素的致病机理及其危害 （1）黄曲霉毒素的致病机理 AFB1进入体内后首先聚积在肝细胞内，在细胞色素P450系统作用下转变为8，9-环氧化物，这一代谢的关键酶为细胞色素P450，P450主要存在于肝细胞内，可能也是AFB1具有亲肝性的重要原因[9]。细胞色素P450氧化酶系可将其代谢活化为AFB1-8，9-环氧化物，进而攻击DNA的N鸟嘌呤位置的G：C碱基对，形成AFB1-N7 -鸟嘌呤加合物，与其他AFB1代谢产物如AFM 、AFQ1、AFPl等一起从尿中排除。AFB1-8，9-环氧化物也可攻击蛋白质，形成AFB1 白蛋白加合物，AFB，ALB而残留于血液中，其形式主要为AFB 赖氨酸加合物。尿中的AFB1-N7-GUA可反映新近暴露水平，而血清中AFB，ALB可作为一种暴露生物标记物，反映累积及多重暴露水平。因为AFB1，ALB在体内的半衰期较尿中代谢产物长，可反映较长时间的暴露情况，且与尿中AFB1-N7-GUA的排出呈高度相关，而后者是肝癌危险性的重要指标，所以血清中AFB1，ALB的检测可用于高危人群的筛选[10]。 AFB1-N7-GUA有很强的生物学效应，它带正电荷的咪唑环能促进自身脱嘌呤，产生无嘌呤嘧啶位点；或打开咪唑环形成在化学、生物学上更为稳定的AFB1甲酰胺加合物。在暴露于AFB1之后几周内AFBl-FAPY可以达到最高浓度，且在体内持续时间较长。AFB1-N7-GUA、带有AP位点的加合物、AFB1-FAPY可能是AFB1在体内发挥毒性作用的3种主要形式，其他AFB1代谢产物水平要低于这3种物质。 目前AFB1及其代谢产物致癌的分子机制主要集中在癌基因的激活与抑癌基因的失活上。有研究提示AFB1及其代谢产物在肝癌发生和演进过程中引起了癌基因及抑癌基因表达的改变，可能是通过诱导相应基因的碱基对的相关位点发生突变，具体的分子机理有待进一步研究。 （2）黄曲霉毒素与动物疾病 黄曲霉毒素中毒主要对动物肝脏的伤害，受伤害的个体因动物种类年龄、性别和营养状态而异。研究结果表明，黄曲霉毒素可导致肝功能下降，降低牛奶产量和产蛋率，并使动物的免疫力降低，易受有害微生物的感染。此外，长期食用含低浓度黄曲霉毒素的饲料也可导致胚胎内中毒，通常年幼的动物对黄曲霉毒素更敏感。黄曲霉毒素的临床表现为消化系统功能紊乱，降低生育能力，降低饲料利用率，贫血等。黄曲霉毒素不仅能够使奶牛的产奶量下降，而且还使牛奶中含有转型的黄曲霉毒素M1和M2。据美国农业经济学家统计，由于食用黄曲霉毒素污染的饲料，每年至少要使美国畜牧业遭受10%的经济损失。在我国由此而带来的畜牧业损失可能会更大。 （3）黄曲霉毒素与人类的健康 人类健康受黄曲霉毒素的危害主要是由于人们食用被黄曲霉毒素污染的食物。对于这一污染的预防是非常困难的，其原因是由于真菌在食物或食品原料中的存在是很普遍的。国家卫生部门禁止企业使用被严重污染的粮食进行食品加工生产，并制定相关的标准监督企业执行，但对于含黄曲霉毒素浓度较低的粮食和食品无法进行控制。在发展中国家，食用被黄曲霉毒素污染的食物与癌症的发病率呈正相关性。亚洲和非洲的疾病研究机构的研究工作表明，食物中黄曲霉毒素与肝细胞癌变呈正相关性，长时间食用含低浓度黄曲霉毒素的食物被认为是导致肝癌、胃癌、肠癌等疾病的主要原因[11]。1988年国际肿瘤研究机构将黄曲霉毒素B1列为人类致癌物。除此以外，黄曲霉毒素与其它致病因素(如肝炎病毒)等对人类疾病的诱发具有叠加效应。 黄曲霉毒素Bl的半数致死量为0.36毫克/公斤体重，属特剧毒的毒物范围(它的毒性比氰化钾大10倍,比砒霜大68倍[12]。它引起人的中毒主要是损害肝脏,发生肝炎，肝硬化，肝坏死等，临床表现有胃部不适、食欲减退、恶心、呕吐、腹胀及肝区触痛等，严重者出现水肿、昏迷、以至抽搐而死。黄曲霉毒素是目前发现的最强的致癌物质，其致癌力是奶油黄的900倍，比二甲基亚硝胺诱发肝癌的能力大75倍，比3，4苯并芘大4000倍。它主要诱使动物发生肝癌，也能诱发胃癌、肾癌、直肠癌及乳腺、卵巢、小肠等部位的癌症[13]。
三．黄曲霉毒素的检测方法 黄曲霉毒素的检测方法从最初以薄层层析法为主，发展到高效液相色谱法、微柱法、酶联免疫吸附法等多种方法普遍应用，其进展与新的化学检测手段和新仪器的出现密不可分。这些新方法、新手段的快速应用，为黄曲霉毒素的检测提供了更广泛的选择余地，适应了不同的检测目的和要求。 （1） 薄层层析法(TLC) 薄层层析法是测定黄曲霉毒素的经典方法，其原理是将样品经过提取、柱层析、洗脱、浓缩、薄层分离后，在波长365 nm紫外光下产生蓝紫色或黄绿色荧光，并根据其在薄层上显示的最低检出量来确定其含量。 聂孝同等[14]应用薄层层析法采用以下步骤对饲料中的黄曲霉毒素进行了检测。首先是黄曲霉毒素的提取：把粉碎过20目筛的样品放人具塞三角瓶中，加入甲醇(55：45)溶液，再加入石油醚盖严，静置片刻后，用慢速定量滤纸过滤于分液漏斗中，通人三氯甲烷，再过滤并将滤液在65℃水浴上通风挥干，冷却后加入苯一乙腈(98：2)充分混合，然后吸取上清液待用。对杂质少的样品，采取直板定性。依次点板、展开、观察；其中预展展开剂为无水乙醚，正展展开剂为丙酮一三氯甲烷(1：9)，且展开剂要事先加入到展开槽内；通过观察，无荧光出现为阴性．出现荧光则为阳性，需作直板确证，若继续有荧光出现，则进一步作定量确证；样品的某一点荧光强度与标样点的荧光强度相一致，则取此点为样本的黄曲霉毒素含量值，否则作稀释定量检测；但是对于杂质多的样品，须采取横板定性；同样经过点板、展开、观察，有荧光者为阳性检出，进一步作横向确证，经再次检测观察呈阳性，则需要定量确证黄曲霉毒素含量。 为了提高薄层层析法的精度，建立薄层扫描法来测定黄曲霉毒素，它是薄层层析法的仪器化，样品的处理和层析条件与薄层层析法相同，只是在标准品的设定和结果判定上有所不同。杨焱等[15]把粉碎过筛的样品加水湿润后通人氯仿过滤，取滤液在65℃水浴上挥干，再用苯一乙脯溶液转移；通过点板，用乙醚预展后，再用氯仿一丙酮(92：8)展开，在365 nm紫外光下观察，根据AFB1、AFB2 、AFG1和AFG2分别显示的蓝紫色、蓝紫色、绿色和绿色荧光，在扫描仪上绘制AFrr扫描图谱，并由此分辨出黄曲霉毒素种类；最后作定量分析：以斑点面积积分值为纵坐标，标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线，建立回归方程，得到样品的黄曲霉毒素浓度。 （2）高效液相色谱法(HPLC) 用高效液相色谱法测定黄曲霉毒素，一般分提取、净化、衍生和测定几个步骤。 提取通常是黄曲霉毒素分析的第一步，所用的仪器和溶剂有很多种[2，16]韩红岩等[17]对于受黄曲霉毒素污染不同程度的玉米用60％甲醇、80％丙酮、90％ 乙腈提取，均得到较高的回收率，其中，80％丙酮的毒性与乙腈、甲醇相比较小，操作较为安全，是提取黄曲霉毒素的最佳选择；王光建等[18]给样品中加入甲醇(6：4)溶液，高速捣碎，将提取物于离心管
