现场样品采集
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现场样品的采集、保存和运输保存在现场调查中,很重要的一项工作是现场样品的采集、和运输。
正确采集、妥善保存、和尽快送检样品,以及随后对样品检测结果进行正确的判读和分析。
一、样品采集的目的、作用和原则一是查明突发公共卫生现场调查的目的主要可分为两大类:尽二是进行卫生质量监测和评价。
事件或疾病暴发流行的原因,采样具有其特殊性,检测对象和样品种类不同,管根据调查目的、但应该遵循如下总原则:标本和环境的注意生物安全:采样中避免造成人员感染、1.污染。
采用防护装备,注意安全操作和安全包装样品。
需要采取的具体措施包括如下两方面:①个人防护:采样时要戴手套,接并注意手触不同患者时不能重复使用一副手套,以免交叉感染,根据所估计的疫情采样中尽可能穿防护服,套是否有小的破损;采样后消毒要穿戴防护服和厚橡胶手选择不同的防护服;级别,如怀疑有高度传染力的病对污染区表面和溢出物进行消毒;套,原,需使用护目镜、呼吸面罩等;为了防止意外,确保安全,采②恰当处理污染废弃样应备有急救包,供意外泄露时应急使用。
用过的针头妥善污染的可废弃设备和材料应先消毒后废弃;物:收集消毒,并按规定销毁或损毁;在暴发疫点使用过的防护服、特殊情况也可在现材料等使用化学消毒剂消毒后再清洗,设备、场建简易焚烧炉焚烧。
1 / 14以卫生质量评价为目的的样注意采样的代表性或针对性:2.品采集,影响采样代表性的因素包括采样量、采样部位、采样时间、采样的随机性和均匀性,以及按批号抽样。
同时还应考虑原料情况(来源、种类、地区、季节等)、加工方法、运输、保藏条件、销售中的各个环节(例如有无防蝇、防污染、防蟑螂及防及销售人员的责任心和卫生认识水平等对样品可能的鼠等设备)以查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因为目的的影响。
样品采集,不要求样品的代表性,强调针对性,尽可能采集病原根据疾病表现和流微生物含量最多的部位和足够检测用的样本;行病学调查资料,指导采集正确的样品。
一般原则是根据不同疾病的特点和3.注意采样时间和种类:临床表现,确定采样时间和标本种类。
以分离培养细菌为目的,如果已使用则应尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本,(中和样品中残采样和分离培养最好加入相应的中和剂抗生素,避免抗菌药物对细菌培养的干或进行其他处理,存的抑菌物质)应在发病初期和急性期作病毒分离和病毒抗原检测的标本,扰。
天内采取,此时病毒在体内大量繁殖,~2采样,最好在发病1 检出率高。
所4.注意避免采样引入新的污染或者对微生物的杀灭因子:有采样用具、容器需严格灭菌,并以无菌操作采样。
对容器基本能承受空中或要求是选耐用材料制成,容器包装好后可防渗漏,2 / 14应地面运送过程中可能发生的温度和压力变化。
对微生物样品,如容器是避免采样时对微生物的杀灭作用和引入新的抑菌物质,并注意保否有消毒剂的残留,或使用刚烧灼未冷却的采样工具。
护目的微生物,注意使用正确的采样液和加入中和剂。
应标注意对样品的详细标记:用于卫生质量评价的样品, 5.明样品名称、编号、采样时间、采样量、采样者、检测项目等。
二、样品采集的方法和注意事项主要用于用于微生物分离培养或抗原检测的生物性样品:1. 查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因。
)咽拭子、洗漱液或痰液标本:①咽拭子的采集:让患1(者仰头张口,用压舌板压舌,用无菌棉拭子在咽部涂抹数次后,棉拭子接触手的部分应及时折断或液的试管中,放入含2mlHank剪断去掉,然后盖紧试管。
②洗漱液的采集:用生理盐水或自配作为洗漱液,让患者咳嗽后,倒入灭菌生理盐水淡盐水约15ml分钟,直接将洗漱液吐1,反复洗漱咽部或自配淡盐水约15ml入灭菌容器内。
③痰液标本:肺部感染应采取痰标本,以清晨第最迟采取标本的时间一般在发病的第一日采集,一口痰为最佳。
38℃以上时采集。
3不得超过日,最好选择体温在)粪便标本:对黏液脓血便应挑取黏液或脓血部分,液2 (;成形粪便至~状粪便采集水样便或含絮状物的液状粪便25ml3 / 14)放于灭菌容器内,最好加有保5g少取蚕豆大小粪便1块(约可用保存液或增菌液湿润过若无法获得粪便时,存液或增菌液。
)轻轻转动一圈,3cm深处(小儿2~的棉拭子插入肛门4~5cm 为盛入运送培养基或保存液中送检,取直肠表面的黏液后取出,采样支肛拭。
同一患者应至少采集2保证多个检验项目的开展,采样后尽快塞紧或旋紧时注意勿将尿液或水混入粪便或容器内,小时,2所采取的粪便标本应尽快送检,运送时间不得超过容器,℃条件下送检;集体腹泻或食源性疾病暴发~8否则应保存在4尽量在急患者粪便采集,应根据患者人数决定采取标本的数量;性腹泻期及用药前采集。
)血液标本:作血液病原培养时,严格无菌采静脉血,(3,放入无2ml0.5~5ml~15ml,儿童2~,婴儿一般成人采血10暗视野作血片、菌的加入抗凝剂的有螺口容器或培养瓶中送检。
检查可采耳垂血或指尖血。
)尿液标本:主要采用中段尿采集法,先用肥皂水清洗(420ml~外阴部,再以无菌水洗净,一般取首次晨尿的中段尿102于无菌容器内。
结核分枝杆菌集菌检查时,以一清洁容器留取送检。
注意无菌操作并在用药前采~15ml104小时尿,取沉渣℃条件8~小时内送到实验室检测,否则应在~集,最好在234 下保存运送样品。
4 / 14,放于~5ml3 (5)脑脊液:在无菌条件下由腰椎穿刺抽取无菌试管或厌氧瓶内(需厌氧培养时)。
用于细菌培养时标本采小时,℃最多可维持48用于病毒培养时在4~8集后应立即送检;℃保存;本操作最好在医院内由有经验的医生按腰否则需在-70 椎穿刺术进行。
)皮肤标本:有时需要采集皮疹或皮肤病变标本帮助诊6 ((焦痂和腹股如怀疑皮肤炭疽或淋巴腺鼠疫时可从病变皮肤断。
出现囊疱疹或脓疱疹时可直接从取样做细菌学培养。
沟淋巴结)采集疱疹标本时要注意无囊疱或脓疱采集液体用于镜检或培养。
菌操作,刺破疱囊后用无菌拭子尽量拭抹足够量的疱疹内液体。
)尸体标本:进行解剖和取样。
解剖前观察并记录外观(7状态,如新鲜程度、皮肤粘膜、淋巴结、尸僵程度和自然孔有无淋巴结、胶样水肿,剖开后应观察皮下有无出血,血性渗出物等。
肝、脾是否大和有无其他病变,肺部有无充血,肝样实变、化脓采脑组织样本如需要采血则需进行心脏穿刺。
和结节性病灶等。
时,如不开颅,可用穿刺长针由鼻孔插入,一直刺到脑干和间脑可采取丘脑和小脑部位吸出脑组织少许。
剖检森林脑炎尸体时,如取脏器组织,部分,其他型别脑炎可采海马回部位的脑组织块。
清除瞬时烙焦表面,先用灼热的金属压舌板接触一下采样部位,小5用剪刀剪取深部组织块。
杂菌,供分离病毒的组织要在死后时内取样。
尸体如已腐烂,可锯一段带骨髓的股骨送检。
至少取5 / 14感染部位标本,放入单独的装有相应液体或培养基的无菌~2g1容器中(注意贴牢标签和拧紧螺口),这些液体如:用于组织病用于制备免疫荧光显微技术所需的冷冻切片理学切片的固定液,装用于分离细菌或病毒所需的各种转运培养基。
的无菌盐溶液,为了避免尸体表面用碘酒涂擦消毒后送检。
样本的容器封口后,不能火化解剖后尸体最好火化;和解剖时的污染物成为传染源,以上土坑,坑内和尸2m则应离村庄和交通要道1Km以外,深挖体周围撒生石灰,先填入可能被污染的土,后用净土填平;所用分钟,橡胶和塑料制品40器材和隔离衣,凡耐热者均煮沸消毒小时以上。
%含氯消毒剂浸泡6用1%~5采用于病原体抗体检测的标本:通常包括血液和脑脊液。
2.静脉血移入无抗凝剂的无菌螺口管,室温集血清样本可将1Oml小时(在此温2~8℃至少1静置30分钟使之凝集,然后置4~小时),离心收集血清。
如能立即检测,采72度下可存放48~可用三如用于微量法试验,集的血液应在室温下尽快分离血清。
用0.3ml.棱针刺手指或耳垂部,再用毛细管采集,一般不少于的血液用于检测IgG的血清一般采于发病于检测IgM1个月内;周)各4天)和恢复期(第一次采血后3~~应于发病初期(13一般于出现神经症状时采次。
脑脊液采集方法同前所述,1采集次,采集时2则需收集份脑脊液,而查、需采集,查IgM1IgG 间如前所述。
6 / 14并对其进行卫可用于检测环境被污染的状况,3.环境样品:突发公共卫生事件的原因样本。
也可作为食源性疾病、生学评价,这里主要介绍空气、水、土壤样品的采集方法。
)空气样品:一般需要用空气采样器采集,用于检测微(1空气中细菌和真菌还可使用平板沉生物或化学因子,包括毒物。
降法。
空气采样器有不同的分类方法,种类繁多,如按流量的不49min为大流量,同,采样器可分为大、中、小三类:≥500L/根据采样器所用为小流量;为中流量,≤10L/min9~11L/min 根据采样器的工作原介质性质可分为固体采样器和液体采样器;理可分为撞击式、沉降式、过滤式、静电吸附式、旋风式和离心撞击式六种。
平板沉降法由于方法简单,不需要特殊设备,虽然采样方法是将琼脂平板置但仍被广泛应用,准确性低于仪器法,于各采样点,打开平皿盖,扣放于平皿旁,暴皿于规定时间后立3即盖好盖送检;注意根据房间面积确定采样布点,室内面积<;1.5ml1m3点,距墙壁,距地面高0m2时,设内、中、外对角线,采样高度距地面高点,距墙壁1m角及中央>30m2者,设45 处。
1.5m)水样:水样来源主要是河水、湖水、地下水和自来水,(2在疫区还包括稻田、塘水、井水和邻近畜舍、厕所的积水点。
采手工采样是将水样器具有用于手工采样的采样瓶和自动采样器。
样瓶用铁架固定,塞住瓶口,待瓶沉入到一定深度时拉开瓶塞,7 / 14自动采样是用自动采样器在一定间隔时间中或连续让水样进入。
采集样品,分别放入样品瓶或合并于一个样品瓶中成为混合样。
采集时最好采非日光直射处的疫区传染病病原污染的上述水体,表层水。
采集自来水样品时,先用酒精灯将水龙头烧灼消毒,然分钟,再采集水样。
采样量因工作条~10后将龙头打开,放水5~250件和样品处理方法不同而不同,如直接用于增菌可采~1001000ml;先作絮凝或离心浓缩处理时,以每个采样点取为宜。
生活饮用水样微生物检验的采集和盛装容器均须无200ml在容器灭菌前应向内加入硫代硫酸钠以还原如水中有余氯,菌,但应彻底用于化学因子检测的水样盛装容器可以不灭菌,余氯。
清洗干净。
)土壤样本:根据检测目的选择有代表性的土壤,确定(3采样地点。
按对角交叉(五点法)取样;用灭菌工具先除去地表以避免地面微生物与土样混左右表层土,枯枝落叶,再铲除1cm,装于灭菌容器内,300g200~杂;用烧灼过的勺或铲取土样约并注意保留适当空间,混合后,标明采样地点、深度、日期后送检。
综上可见,样品类型很多,而不同微生物,需要采集的样品为主要法定报告传染病检验标2-6、表和采样要求各异,表2-5 本采集的相关要求,供参考。