酶的特性实验

注：保温时间可根据各人唾液淀粉酶活力调整
1 1.5 0.5 0.5 － － － 2－3 －
2 1.5 0.5 － 0.5 － － 2－3 －
3 1.5 0.5 － － 0.5 － 2－3 －
4 1.5 0.5 － － － 0.5 2－3 －
37 ℃恒温水浴、保温 恒温水浴、保温10min
解释说明，说明本实验第3管的意义
四、操作方法： 操作方法： 取四个标有号码的50ml锥形瓶。用吸管按下表添 锥形瓶。 取四个标有号码的 锥形瓶 磷酸氢二钠溶液和0.1柠檬酸溶液以制备 加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和 柠檬酸溶液以制备 磷酸氢二钠溶液和 pH5.0－8.0的四种缓冲液。 的四种缓冲液。 － 的四种缓冲液 从四个锥形瓶中各取缓冲液3ml，分别注入 支 从四个锥形瓶中各取缓冲液 ，分别注入4支 带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5％ 带有号码的试管中，随后于每个试管中添加 ％淀 粉溶液2ml和稀释 和稀释200倍的唾液 倍的唾液2ml。向各试管中加入 粉溶液 和稀释 倍的唾液 。 稀释唾液的时间间隔各为1min。 稀释唾液的时间间隔各为1min。将各试管内容物混 并依次置于37 恒温水浴中保温。 匀，并依次置于37 ℃恒温水浴中保温。 第四管加入唾液2min后，每隔 由第3管取出一 第四管加入唾液 后 每隔1min由第 管取出一 由第 滴混和液，置于白瓷板上， 小滴KI－碘溶液， 滴混和液，置于白瓷板上，加1小滴 －碘溶液，检 小滴 验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时， 验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时，向所 有试管依次添加1－ 滴 －碘溶液。添加KI－ 有试管依次添加 －2滴KI－碘溶液。添加 －碘溶 液的时间间隔从第一管起，亦均为1min。 液的时间间隔从第一管起，亦均为 。 观察各试管内容物呈现的颜色，分析pH对唾液 观察各试管内容物呈现的颜色，分析 对唾液 淀粉酶活性的影响。 淀粉酶活性的影响。
1％淀粉溶液（滴） ％淀粉溶液（ 2％蔗糖溶液（滴） ％蔗糖溶液（ 稀释唾液（ ） 稀释唾液（ml） 煮沸过的稀释唾液 （ml） ） 蒸馏水（ ） 蒸馏水（ml） Benedict试剂（ml） 试剂（ ） 试剂
37 ℃恒温水浴 恒温水浴15min 1 1 1 1
2.
蔗糖酶的专一性： 蔗糖酶的专一性： 1 4 － － － 1 1 2 － 4 － － 1 1 沸水浴2－ 沸水浴 －3min 现象 解释实验结果 3 4 － 1 － － 4 － 4 1 － － 5 4 － － 1 － 6 － 4 － 1 －
二、器材
1) 2) 3) 4) 5)
试管及试管架 吸管 滴管 50ml锥形瓶 锥形瓶 恒温水浴
三、试剂和材料
1) 2) 3) 4) 5) 6)
新配制的溶于0.3％ 250ml 新配制的溶于 ％NaCl的0.5％淀粉溶液 的 ％ 稀释200倍的新鲜唾液 100ml 稀释 倍的新鲜唾液 0.2mol/L磷酸氢二钠溶液 600ml 磷酸氢二钠溶液 0.1mol/L柠檬酸溶液 400ml 柠檬酸溶液 KI－碘溶液 － 50ml pH试纸： pH=5、 pH=5.8、 pH=6.8、 pH=8四种 试纸： 试纸 、 、 、 四种
取三支试管，编号后按下表加入试剂： 取三支试管，编号后按下表加入试剂：
管号 淀粉溶液（ ） 淀粉溶液（ml） 稀释唾液（ ） 稀释唾液（ml） 煮沸过的稀释 唾液（ ） 唾液（ml）
1 1.5 1 －
2 1.5 1 －
3 1.5 － －ຫໍສະໝຸດ 摇匀后， 号两试管放入37 摇匀后，将1号、3号两试管放入 ℃ 恒 号 号两试管放入 温水浴中， 号试管放入冰中，10min后去 温水浴中，2号试管放入冰中，10min后去 ，（将 号管内液体分为两半） KI－ 处，（将2号管内液体分为两半）用KI－碘 溶液来检验1 溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶 水解的程度。记录并解释结果， 水解的程度。记录并解释结果，将2号管剩 下的一半溶液放入37℃ 37℃水浴中继续保温 下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温 10min后 再用碘液实验，结果如何？ 10min后，再用碘液实验，结果如何？
管号 1％淀粉溶液（滴） ％淀粉溶液（ 2％蔗糖溶液（滴） ％蔗糖溶液（ 蔗糖酶溶液（ ） 蔗糖酶溶液（ml） 煮沸过的蔗糖酶溶液 （ml） ） 蒸馏水（ ） 蒸馏水（ml） Benedict试剂（ml） 试剂（ ） 试剂
37 ℃恒温水浴 恒温水浴15min 1 1 1 1
pH对酶活性的影响 对酶活性的影响
一、原理
酶的活力受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适 值不同 值不同。 酶的活力受环境 的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同。本实验观 的影响极为显著 对唾液淀粉酶活性的影响， 约为6.8。 察pH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适 约为 。 对唾液淀粉酶活性的影响 唾液淀粉酶的最适pH约为
四、操作方法： 操作方法：
淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小， 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小， 遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。 遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘 不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下， 不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下，淀粉被 唾液淀粉酶水解的程度， 唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色 来判断。 来判断。
二、器材： 器材：
1) 2) 3)
恒温水浴 沸水浴 试管及试管架
三、试剂和材料： 试剂和材料：
1) 2) 3) 4)
5)
2％蔗糖溶液 ％ 150ml 溶于0.3％NaCl的1％淀粉溶液（需新鲜配制） 溶于 ％ 的 ％淀粉溶液（需新鲜配制） 150ml 稀释200倍的新鲜唾液 100ml 稀释 倍的新鲜唾液 100ml 蔗糖酶溶液 将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤2－ 次 离心）， ），然后放在滤纸上自然 将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤 －3次（离心），然后放在滤纸上自然 干燥。取干酵母100g，置于乳钵内，添加适量蒸馏水及少量细沙， 干燥。取干酵母 ，置于乳钵内，添加适量蒸馏水及少量细沙， 用力研磨，提取约1h，再加蒸馏水使总体积约为原体积的10倍 用力研磨，提取约 ，再加蒸馏水使总体积约为原体积的 倍。离 心，将上清液保存于冰箱中备用。 将上清液保存于冰箱中备用。 Benedict氏试剂 200ml 氏试剂 无水硫酸铜1.74g溶于 溶于100ml热水中，冷却后稀释至 热水中， 无水硫酸铜 溶于 热水中 冷却后稀释至150ml。取柠檬 。 酸钠173g，无水碳酸钠 水共热， 酸钠 ，无水碳酸钠100g和600ml水共热，溶解后冷却并加水至 和 水共热 850ml。再将冷却的150ml硫酸铜溶液倾入。本试剂可长久保存。 。再将冷却的 硫酸铜溶液倾入。本试剂可长久保存。 硫酸铜溶液倾入
酶的专一性
一、原理 酶具有高度的专一性。 酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀 粉酶和蔗糖酶的作用为例， 粉酶和蔗糖酶的作用为例，来说明酶的专 一性。 一性。 淀粉和蔗糖无还原性， 淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水 解淀粉生成由还原性的麦芽糖， 解淀粉生成由还原性的麦芽糖，但不能催 化蔗糖的水解。 化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产 生还原性葡萄糖和果糖， 生还原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉 的水解。 试剂检查糖的还原性。 的水解。用Benedict试剂检查糖的还原性。 试剂检查糖的还原性
1) 2) 3) 4)
二、器材： 器材： 试管及试管架 恒温水浴 冰浴 沸水浴
三、试剂和材料： 试剂和材料： 1) 含0.2﹪淀粉的0.3％NaCl溶液150ml，需新鲜 配制 2) 稀释200倍的唾液50ml：用蒸馏水漱口，以清 除事物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使 其流入量筒并稀释200倍，混匀备用。 3) KI－碘溶液50ml：将KI20g及碘10g溶于100ml 水中。使用前稀释10倍。
锥形瓶 0.2mol/L磷酸氢二 磷酸氢二 钠（ml） ） 号码 1 2 3 4 5.15 6.05 7.72 9.72
0.1 mol/L柠 柠 檬酸（ ） 檬酸（ml） 4.85 3.95 2.28 0.28
pH
5.0 5.8 6.8 8.0
唾液淀粉酶的活化和抑制
一、原理 酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。 酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶 的活化剂，铜离子为其抑制剂。 的活化剂，铜离子为其抑制剂。 器材： 二、器材： 恒温水浴 试管及试管架 试剂和材料： 三、试剂和材料： 0.1％的淀粉溶液 150ml ％ 稀释200倍的新鲜唾液 150ml 稀释 倍的新鲜唾液 1％NaCl溶液 50ml ％ 溶液 1％硫酸铜溶液 50ml ％ 1％硫酸钠溶液 50ml ％ KI－碘溶液 100ml －
四、操作方法： 操作方法：
1.
淀粉酶的专一性：
管号 1 4 － － － 1 1 2 － 4 － － 1 1 沸水浴2－ 沸水浴 －3min 现象 解释实验结果（提示：唾液除含淀粉酶外还含有少量麦芽糖酶） 解释实验结果（提示：唾液除含淀粉酶外还含有少量麦芽糖酶） 3 4 － 1 － － 4 － 4 1 － － 5 4 － － 1 － 6 － 4 － 1 －
1) 2) 1) 2) 3) 4) 5) 6)
四、操作方法： 操作方法：
管号 0.1％的淀粉溶液（ml） ％的淀粉溶液（ ） 稀释唾液（ ） 稀释唾液（ml） 1％硫酸铜溶液（ml） ％硫酸铜溶液（ ） 1％NaCl溶液（ml） ％ 溶液（ ） 溶液 1％硫酸钠溶液（ml） ％硫酸钠溶液（ ） 蒸馏水（ ） 蒸馏水（ml） KI－碘溶液（滴） －碘溶液（ 现象
实验十： 实验十：酶的特性
实验目的： 实验目的：加深对酶的性质的认识。 实验内容： 实验内容：
1. 2. 3. 4.
温度对酶活力的影响 pH对酶活力的影响 酶的激活及抑制剂 酶的专一性
温度对酶活力的影响
一、原理： 原理：
酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶 的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37－ 40℃，植物酶的最适温度为50－60℃ 。 酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的 干燥制剂，虽加热到100℃，其活性并无明显改变， 但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。 低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。