种子制备

人工种子（artificial seeds）的研制。

1、人工种子：即人为制造的种子，它是一种含有植物胚状体或芽、营养成分、激素以及其他成分的人工胶囊。

人工种子又称合成种子或体细胞种子，任何一种繁殖体，无论是在涂膜胶囊中包裹的，裸露的或经过干燥的，只要能够发育成完整的植株，均可称之为人工种子。

根据包被的需要程度可分为三类：第一类是裸露的或休眠的繁殖体，如可以适当干燥的体细胞胚(如鸭毛草的体细胞胚)，休眠的微鳞茎和微块茎等，它们在不加包被的情况下也具有较高的成株率；第二类为人工种皮包被的繁殖体，一些体细胞胚，原球茎等虽不能过度干燥，但只需人工种皮包被即可维持良好的发芽状态，如胡萝卜体细胞胚；第三类是水凝胶包埋再包被人工种皮的繁殖体，大多数体细胞胚，不定芽，茎尖等均需要先包埋在半液态凝胶中，再经人工种皮包裹才能避免失水，从而维持良好的发芽能力。

与试管苗技术和自然有性繁殖种子相比,人工种子具有以下突出的，甚至是不可取代的优点：其一，在无性繁殖植物中，有可能建立一种高效快速的繁殖方法，它既能保持原有品种的种性，又可以使之具有实生苗的复壮效应；其二，可以对优异杂种种子不通过有性制种而快速获得大量种子，特别是对于那些制种困难的植物更具有重要的实用意义；其三，对于一些不能正常产生种子的特殊植物材料如三倍体，非整倍体，基因工程植物等，有可能通过人工种子在短期内加大繁殖应；其四，与田间制种相比，可以节省制种用地，且不受季节限制，可以实现工厂化生产，同时还避免了种子携带病原菌的危险；其五，与利用试管苗相比，可以避免移栽困难，且可以实现机械化操作，同时还便于储藏和运输。

2、人工种子的构成及特点：（1）人工种皮：包裹在人工种子最外层的胶质化合物薄膜，具有进行气体交换、防止营养物的渗漏、抗机械压力。

（2）人工胚乳：人工配制的保证胚状体营养物质。

（3）胚状体：胚状体是由组织培养产生的具有胚芽、胚根和类似天然种子胚的结构，具有萌发长成植株的能力。

胚状体人工种子
根据繁殖体的类型人工种子
物 种 主 要 结 果 有菌土壤中发芽成苗 有菌条件下发芽成苗 胡萝卜(Daucus carota) 苜蓿(Medicago sativas)
芹菜(Apium graveolens)
柑橘(C. sinensis×C. reticulata) 挪威云杉(Picea abies) 松树(Pinus lambertiana, P. aeda) 玉米(Zea mays) 杂交水稻(O. sativa×O. lalifolia) 橡胶树(Hevea brasiliensis) 西洋参(Panax quinquefolium) 刺五加(Acanthopanax senticosus) 黄连(Coptis chinensis)
裹。因此，任何一种经人工种皮包被或裸露的，具有形成完整植株
能力的繁殖体均可称之为人工种子。 繁殖体：具有成株能力的离体培养物。
人工种子的结构
人工种皮
繁殖体：离体培养产生的胚状 体、球茎、茎段、芽、块茎等。
繁殖体
在实验中，有时将人工种子的 种皮与胚乳合二为一。 微鳞茎、微块茎等甚至不需要 包被。
标准结构
发生（Somatic Embryogenesis）的研究中发现，利用植物组织培养中体细胞所 形成的胚状体可以获得人工种子。接着，Kitto和Janick也于1982年制成了胡萝
卜胚状体的人工种子。
因此，早期的人工种子（Plant artificial seeds）是指将植物离体培养 物中产生的胚状体，包裹在含有养分和保护功能的外皮中，在适宜的条件下能够 发芽出苗的颗粒体。它应符合以下条件: （1）具有发育良好的胚状体，能发育成正常完整的植株。 （2）具有能提供种胚发育所需要的营养，即人工胚乳。 （3）具有能起保护作用种皮，即人工种皮。

2. 通过寄主体进行复壮 3. 淘汰已衰退的个体
（三） 菌种的保藏
不同菌种保藏方法比较
方法名称
主要措施
适宜菌种 保藏期 评 价
冰箱保藏法（斜面）
低温
各大类
3~6月 简便
冰箱保藏法（半固体）
低温
细菌、酵母菌 6~12月 简便
石蜡油封藏法*
低温、缺氧
各大类**
1~2年 简便
沙土保藏法
干燥、无营养 产孢子微生物 1~10年 简便 有效
恢复和建立具有原来生产性状的群体。
菌种的复壮： 狭义：在菌种已发生衰退的情况下，通过纯种分离等技术，从已衰
退的群体中帅选出少数尚未退化的个体，以达到恢复原菌株固有性状的 相应措施。
广义：在菌种尚未衰退前就有意识地采取纯种分离和生产性状的测 定工作，以期从中选择到自发的正突变个体。
菌种复壮的措施：
1. 菌种的提纯（稀释涂平板法等、单细胞分离 法）
第四节 菌种的扩大培养及保藏
菌种的扩大培养：将保藏的菌种，即砂土管，冷冻干燥管中处于休眠 状态的生产菌种接入试管斜面活化，再经过扁瓶或药瓶和种子罐，逐 级扩大培养后达到一定的数量和质量的纯种培养过程。这些纯种的培 养物称为种子。
一、 菌种的扩大培养
广义：从斜面菌种开始到发酵罐接种之前的所有生产过程。 狭义：仅指生产车间种子罐的培养过程。
菌种衰退的后果： 1. 菌种的发酵能力降低 2. 繁殖能力降低 3. 发酵产品的得率降低
菌种衰退的原因：
1. 基因突变（基因负突变） 2. 变异菌株性状分离 （多次划线分离纯化） 3. 连续传代 （减少传代次数） 4. 其他因素 （温度、湿度、培养基成分）
（二） 菌种的提纯与复壮
菌种的提纯： 从已衰退的菌种中，通过分离纯化，将尚未退化的个体分离出来，以

菊科（莴苣、茼蒿及其他小粒种子）四唑（TTC）法进行种子生活力测定的种子制备方法
1.制备种子：
种子软化后放在装入培养皿的滤纸上，各粒种子之间要有一定距离，在实际操作时可选用较大的培养皿，种子上再盖一张滤纸，用手向下紧压，将两层滤纸中间的种子尽力压碎，使外种皮内种皮都因受压而破裂（应注意茼蒿种子的外种皮较厚，可将外种皮一一剥掉），准备染色。

2.染色方法：
用1%四唑溶液放入染色杯内，使压碎的种子能充分接触溶液。

在35℃需60-80min染色。

3.生活力测定图谱
注：以上作物生活力图谱标“+”为有生活力种子“—”为无生活力种子。