超声辅助酶法提取中华鳖裙边胶原蛋白及其热稳定性能

胶原溶解方法
胶原，作为生物高分子，广泛存在于动物结缔组织中，对动物细胞起到支撑和保护的作用。

由于其优良的生物相容性和生物活性，胶原在医学、美容、生物工程等领域有着广泛的应用。

然而，有时我们需要将胶原进行溶解，以满足某些研究和应用的需求。

胶原的溶解方法有多种，下面介绍其中几种常用的方法：
1.酸解法：胶原在酸性条件下会逐渐溶解。

通常使用稀酸溶液（如稀盐酸或稀硫酸）将胶
原样品浸泡在溶液中，逐渐搅拌，使胶原逐渐溶解。

酸解法的优点是操作简单，溶解速度快。

但需要注意控制好酸的浓度和溶解时间，避免胶原发生水解而失去活性。

2.酶解法：利用特定的酶（如胶原酶）在温和的条件下将胶原分解成小分子肽或氨基酸。

酶解法的优点是条件温和，对胶原的活性影响较小。

但酶解法的溶解速度较慢，需要较长时间才能完全溶解胶原。

3.热解法：通过加热使胶原变性并逐渐溶解。

通常将胶原样品加热至接近沸水的温度，并
持续搅拌，使胶原逐渐溶解。

热解法的优点是溶解速度快，但需要注意控制好温度和时间，避免胶原发生热解而失去活性。

4.超声波法：利用超声波的振动作用将胶原逐渐破碎并溶解。

超声波法的优点是能够快速
有效地破碎胶原，且对胶原的活性影响较小。

但需要注意的是，超声波法的设备成本较高，且需要专业的操作人员。

在选择溶解方法时，需要根据具体的应用需求和实验条件进行综合考虑。

同时，还需要注意溶解过程中的安全问题，如避免使用过量的酸或高温等条件，以防止对人体和环境造成危害。

94 为0工科■技2019年•第7期◊海南热带海洋学院理学院林丽薛为长麦笃萍唐兰英李明珍鱼皮胶原蛋色的提取与检测研究综述通过查阅了相关的文献，了解到胶原蛋白在食品、医疗、化妆品等领域有着非 常重要的作用，并且有非常好的发展前景，现今对于鱼类产品的胶原蛋白这种新 兴天然胶原蛋白的研究较多。

目前，胶原蛋白的提取方法有酸提取法、酶提取法、碱提取法和热水提取法等，本文主要研究鱼皮胶原蛋白的酸法和酶法相结合提取胶 原蛋白以及胶原蛋白性质检测，对后续胶 原蛋白研究有着重要的作用。

胶原蛋白又称胶原，而鱼类胶原蛋白是属于新的天然胶原蛋白资源，其在医疗 上，可用于烧伤、创伤等方面的治疗；食 品加工上，胶原蛋白具有乳化效果、胶质 功能和分散作用；还可以运用到化妆品当 中巴根据胶原蛋白的组成及特性，可用做 化妆品原料，鱼皮中含有大量的蛋白质， 其中80%以上是胶原蛋白，目前为止已被发现的胶原蛋白约为27种寫鱼皮胶原蛋白有安全性好呦等特点，使其应用的范围较为广 泛且需求量大，因此胶原蛋白的提取以及 ft®研究具有軽作用。

1鱼皮胶原蛋白研究现状国外对鱼皮胶原蛋白的研究较为深入，其中日本人有深入的研究，主要集中 在胶原中活性肽提取，这是目前研究的热点；我国对鱼类胶原研究也较多，傅燕凤曲等用酸法对不同种鱼皮进行了胶原蛋白提 取，柠檬酸等可用来提取胶原；贾媛君呀IJ 用乙酸浸泡溶胀，提取出青鱼皮的胶原蛋 白较高；吴丹问等在鱼皮胶原蛋白研究进展中，提出中科院上海有机所发明利用碱溶液处理深海鱼皮的方法，然后用限制性酶 解法对鱼皮进行操作，净化酶解，从碱性 溶液和酶中提取胶原蛋白。

刘凝巾用3%的 氢氧化钙溶液浸泡并搅拌，胶原提取率约为1.39%,且有淡臭味；许庆陵问等利用热 水浸提法，通过采用（L933）正交实验设 计，结果说明，时间、料液比、温度等对 胶原蛋白提取为影响因素，当温度为80t 、水解12小时、料水比为（1:15）时，可得到胶原蛋白提取率最高；秦玉青问等采用 胃蛋白酶、胰蛋白酶等试剂，通过不同时 间、不同温度对觥鱼皮进行水解，确定胃 蛋白酶在温度为4 t 进行酶解两天左右，提取率最高。

海洋覆盖了地球表面的70%以上，其物种约占全球生物多样性总量的一半，因此海洋生物是可开发利用的巨大资源。

鱼类、虾类、海藻、水母等生物提供了丰富的胶原，是制备胶原蛋白的理想来源[1]。

水产生物胶原因其自身广泛的原料来源基础和特有的生物结构、理化性质成为胶原研究新的前沿热点，具有广泛而深厚的科学研究前景。

1 水产生物胶原的提取方式胶原的常规提取方式主要有热提取、酸提取、碱提取、酶法以及结合法提取等，在实际操作过程中要根据具体情况进行提取方式的合理选择。

作者简介：赵海婷（1987—），女，硕士，工程师，研究方向为生物医用高分子材料。

通信作者：郭刚（1983—），男，本科，工程师，研究方向为纳米材料。

E -mail：****************。

doi:10.16736/41-1434/ts.2023.10.055水产生物胶原的研究现状及开发前景Research Status and Development Prospect of Aquatic Biological Collagen◎ 赵海婷，朱晓强，黄乃进，张 晓，郭 刚（诺一迈尔（山东）医学科技有限公司，山东 潍坊 261061）ZHAO Haiting, ZHU Xiaoqiang, HUANG Naijin, ZHANG Xiao, GUO Gang （Neo Modulus (Shandong) Medical Sci-Tech Co., Ltd., Weifang 261061，China）摘 要：胶原蛋白作为动物组织的主要成分，是体内含量最为丰富的高分子蛋白。

因其本身具有优良的生物相容性、降解性和低免疫原性等特点，已广泛应用于生物制药、食品化工、医学保健、美容以及医疗与护理等诸多领域。

高营养、高品质胶原蛋白主要来源于水产生物，多项研究表明，水产胶原蛋白已经显示出多种有益于机体健康的特殊生物活性，在生物医药行业的研究中有着更广阔深入的应用前景。

多种作用。目前, 胶原已广泛应用于医学医药工业、食品工业 、日用化学品工业、生物合成及胶原修 饰等领域, 本文现将胶原的提取、改性、交联及其应用加以综 述。 关键词: 胶原蛋白 交联 提取 改性
( 接上期) 前最常见的碳化二亚胺是 1- 乙基3( 3- 二甲丙氨基) 碳化二亚胺。结构式如下图
二醛处理过的胶原相比较有以下几点不同〔41〕: ( 1) 皱缩温度不同。戊二醛可以使胶原皱缩
架具有很好的生物相容性、机械稳定性和抗降 物具有很低的免疫原性, 因此它的生物兼容性
解能力。
很好。但碳化二亚胺的交联产物的降解速度要
快于用戊二醛交联的产物; 体外实验表明用 N DGA 交联的产物为成纤维母细胞提供了一 个优越的附着, 移动和增值的环境。
DP PA 结构式
4. 1. 9 使用 1, 4-二( 3, 4-羟基苯) -2, 3 二甲基 丁 烷 ( NDAG ) 作 为 交 联 剂 T ho mas J. K oob 等 〔13〕 利用 N DG A 交联胶原取得了成功,
一个有效方法, 而且具有没有任何毒性成分存 在的优点。紫外线照射可以引起芳香的氨基酸
第一步: 用碳化二酰胺来激活硫酸软骨素 中易于反应的羧基团形成反应中介物。
残基如铬胺酸和 苯丙氨酸内不成对电子的形 第二步: 反应中介物慢慢凝结于胶原或二
成。经其照射后在相邻的胶原蛋白分子上产生 胺的氨基酸基团上来产生相应的氨基化合物。
用 EDC 或 NHS 处理过的羊皮胶原与用戊
象可以用由于交联的作用使酶无法和胶原分子 充分接触来解释。使酶的分解作用只能在胶原 分子表面进行, 因此减缓了胶原的分解和机械 强度的下降的速度。 Olde Dam ink 还报道: 是否用环氧乙烷进 行消毒还可以影响胶原的酶降解速度。这是由 于环氧乙烷在进行消毒时环氧乙烷分子和羊皮 胶原中的自由氨基酸进行反应。它虽然不能明 显改变胶原在降解时的机械特性, 却能明显改 变胶原在降解的张力特性, 提高胶原对降解的 抵抗特性。