第２５卷第１期 ２０１１年２月 高校化学工程学报 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆＣｈｉｎｅｓｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓ Ｎｏ．１、，０１．２５ Ｆｅｂ． ２０ｌ１
文章编号：１００３－９０１５（２０１１）０１－００９６—０７
化学渗透法破碎基因重组Ｅ．ｃｏｌｉ提取重组人ＳＯＤ包含体和复性
刘建荣 ｒ，王慧 ，赵晓瑜１，２，静天玉１，２
（１．河北大学生物技术研究中心，河北保定０７１００２；２．河北省生物工程技术研究中心，河北保定０７１００２；
３．北京师范大学生命科学学院，北京１００８７５）
摘要：以化学渗透法破碎重组大肠杆菌细胞释放重组人超氧化物歧化酶（ｒｈＳＯＤ）包含体并对其复性。选择四种化学试
剂（Ｔｒｉｔｏｎ ｘ一１００、ＥＤＴＡ、ＮａＯＨ和ＳＤＳ）对ｒｈＳＯＤ重组大肠杆菌细胞进行破碎实验，以ＳＤＳ．ＰＡＧＥ检测破菌效果，结 果Ｏ．５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００和１０ ｍｍｏ１．Ｌ ＥＤＴＡ可以较好地破碎重组大肠杆菌细胞，所提取的包含体溶解液纯度与超声法相 近，可达６５％￣Ｅ右。采用透析法复性包含体，尿素终浓度Ｏ．１ ｍｏ１．Ｌ－ 时ｒｈＳＯＤ包含体复性效果优于１．０ ｔｏｏ１．Ｌ－。，比活 分别为：Ｔｒｉｔｏｎ法２８００ Ｕ・ｍｇ－ ，ＥＤＴＡ法３２００ Ｕ・ｍｇ－ ，超声法２８００ Ｕ．ｍｇ－ ，复性ｒｈＳＯＤ纯度达８５％左右。本研究建立 的用于破碎重组大肠杆菌释放ｒｈＳＯＤ包含体的Ｔｒｉｔｏｎ法和ＥＤＴＡ法，包含体复性后比活等于或高于超声法，与机械破 菌法相比，简便有效，成本低廉，无需特殊破菌设备，为放大规模破菌提取重组大肠杆菌包含体和复性奠定了实验基础。 关键词：重组人超氧化物歧化酶；化学渗透；细胞破碎；包含体；复性 中图分类号：Ｑ５５ 文献标识码：Ａ
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ａｇｅｎｔｓ Ｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｅ．ｃｏｌｉ Ｃｅｌｌ ｔｏ
1.在制备基因工程药物过程中，如何将包含体复性：1.稀释、透析复性法，为了获得正确折叠的活性蛋白质，复性前可用稀释、透析及凝胶过滤层析出去变性剂、还原剂，促进蛋白质复性。2.含二硫键的蛋白质的复性。可以利用空气中的氧气或加入还原剂。3.封闭蛋白的疏水簇促进复性：减少分子间结合引起的聚集。4.凝胶过滤层析复制5.小分子添加剂促进复制。6.分子伴侣或折叠酶促进的复制。7.人工分子伴侣促进的复制。
2常见的基因工程抗体有那些？如何制备？1.人-鼠嵌合抗体2改形抗体3Fab4FV抗体5单链抗体6单域抗体7分子识别单位。上述7项的制备是在异源宿主中直接变大相应鼠源性抗体的CDR，其余项的制备是在鼠源性单克隆抗体的制备基础上由不变区基因序列和鼠抗体可变区基因序列并接后，在异源宿主中表达的融合蛋白。
3假悬浮培养动物细胞的方法有哪几类，各自的优点是什么：1.假悬浮培养动物细胞的方法分三类：微载体培养、包埋和微囊培养及结团培养。2.优点：微载体培养：可创造相当大的贴附面积和供细胞贴附生长增殖，载体的体积小，比重较轻，在轻度搅拌下即可携带细胞自由地悬浮在培养基内，充分发挥了悬浮培养的一切优点。工艺成熟，适应面广，微载体容易商品化。3.包埋或微囊培养法：a细胞可获得保护，避免了剪切力的损害。B可以获得较高的细胞密度。C产品浓缩在微囊内，有利于下游产物的纯化D可进行大规模培养包含体二硫键复制。4.结团培养：操作简单，节省了用于微载体的成本。
4获得目的基因的方法有那些：1人工基因文库中获得目的基因2通过反转录获得3通过PCR获得4人工化学合成5改造旧基因。
抗体治疗药物有哪些，各有什么组分？
5.抗体治疗药物有哪些，各有什么组分抗体治疗药物是以抗体为载体，通过基因工程技术手段，将特异抗体与毒素基因重组而合成的融合蛋白以达到导向治疗的目的。抗体治疗药物有①放射性同位素标记的抗体治疗药物：131I、212Bi②抗癌药物偶联的抗体药物：MTX、ADM、MMC、CTX等③毒素偶联的抗体药物：抗体+毒素A链、免疫毒素-重组免疫毒素
复合材料概论全套课件312P
一、教学内容
本节课我们将学习《复合材料概论》一书的第1章“复合材料概述”和第2章“复合材料的组成与结构”。详细内容包括复合材料的基本概念、分类、性能特点，以及复合材料的基体、增强体、界面等基本组成部分和作用。
二、教学目标
1. 了解复合材料的基本概念、分类及性能特点。
2. 掌握复合材料的组成、结构和制备方法。
3. 能够运用所学知识分析复合材料的性能与应用。
三、教学难点与重点
教学难点：复合材料的组成、结构和性能关系。
教学重点：复合材料的基本概念、分类、性能特点及其应用。
四、教具与学具准备
1. 教具：多媒体课件、黑板、粉笔。
五、教学过程
1. 导入：通过展示复合材料在日常生活中的应用实例，激发学生的学习兴趣，引入本节课的主题。
2. 知识讲解：
（1）复合材料的基本概念、分类及性能特点；
（2）复合材料的组成、结构和制备方法。
3. 例题讲解：分析一个具体复合材料的性能，引导学生运用所学知识解决问题。 4. 随堂练习：设计若干有关复合材料的选择题、填空题和简答题，巩固所学知识。
5. 小组讨论：分组讨论复合材料在实际应用中的优势与局限性，培养学生的团队协作能力。
六、板书设计
1. 复合材料基本概念
2. 复合材料分类
3. 复合材料性能特点
4. 复合材料组成与结构
5. 复合材料制备方法
七、作业设计
1. 作业题目：
（1）简述复合材料的基本概念及其分类。
（2）解释复合材料的性能特点及其应用。
（3）分析复合材料组成、结构与性能之间的关系。
2. 答案：
（2）复合材料具有轻质、高强度、耐腐蚀、耐磨损、导电性等特点，广泛应用于航空航天、汽车、建筑、电子等领域。
（3）复合材料的性能取决于基体、增强体和界面的性质。基体负责传递应力，增强体负责提供强度和刚度，界面则是连接基体和增强体的桥梁。
八、课后反思及拓展延伸
打印版
打印版
1．与x轴同方向的单位向量e1，与y轴同方向的单位向量e2，它们对应的复数分别是( )
A．e1对应实数1，e2对应虚数i
B．e1对应虚数i，e2对应虚数i
C．e1对应实数1，e2对应虚数－i
D．e1对应实数1或－1，e2对应虚数i或－i
解析：选A.e1＝(1,0)，e2＝(0,1)．
2．若x，y∈R，i为虚数单位，且x＋y＋(x－y)i＝3－i，则复数x＋yi在复平面内所对应的点在( )
A．第一象限 B．第二象限
C．第三象限 D．第四象限
解析：选A.∵x＋y＋(x－y)i＝3－i，
∴ x＋y＝3，x－y＝－1.解得 x＝1，y＝2.
∴复数1＋2i所对应的点在第一象限．
3．若23
解析：∵23
∴3m－2>0，m－1<0，
∴复数对应点位于第四象限．
答案：四
4．已知m∈R且满足|log2m＋4i|≤5，求m的取值范围．
解：∵|log2m＋4i|＝log22m＋42＝log22m＋16≤5，
∴log22m≤9，
∴－3≤log2m≤3，
∴18≤m≤8.
一、选择题
1．复数z＝3＋i对应的点在复平面( )
A．第一象限内 B．实轴上
C．虚轴上 D．第四象限内
答案：A
2．复数z1＝a＋2i，z2＝－2＋i，如果|z1|<|z2|，则实数a的取值范围是( )
A．－11
C．a>0 D．a<－1或a>0
解析：选A.依题意有a2＋22<－22＋1，解得－1
3．复数2－3i对应的点在直线( )
A．y＝x上 B．y＝－x上 打印版
打印版 C．3x＋2y＝0上 D．2x＋3y＝0上
解析：选C.将点(2，－3)代入检验．
4．复数z＝(a2－2a)＋(a2－a－2)i对应的点在虚轴上，则( )
A．a≠2或a≠1 B．a≠2且a≠1
C．a＝0 D．a＝2或a＝0
