细胞周期与细胞同步化

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动物细胞胞质分裂
◆胞质分裂(cytokinesis)开始于细胞分裂后期，在赤道 板周围细胞表面下陷，形成环形缢缩，称为分裂沟 (furrow)。分裂沟的位置与纺锤体和钙离子浓度的变化 有关 ◆胞质分裂开始时，大量肌动蛋白和肌球蛋白在中体 处组装成微丝并相互组成微丝束，环绕细胞，称为收缩环 （contractile ring)。收缩环收缩、收缩环处细胞膜融合 并形成两个子细胞
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酵母细胞的细胞周期
·酵母细胞的细胞周期与标准的细胞周期在时相 和调控方面相似 ·酵母细胞周期明显特点:首先，酵母细胞周期持 续时间较短；细胞分裂过程属于封闭式，即 在细胞分裂时核膜不解聚；纺锤体位于细胞 核内；在一定环境下，也进行有性繁殖
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植物细胞的细胞周期
·植物细胞的细胞周期与动物细胞的标准细胞周 期非常相似，含有G1期、S期、G2期和M期四 个时期。 ·植物细胞不含中心体，但在细胞分裂时可以正 常组装纺锤体。 ·植物细胞以形成中间板的形式进行胞质分裂
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M期
· M期即细胞分裂期，真核细胞的细胞分裂主要包 括两种方式，即有丝分裂(mitosis)和减数分裂 (meiosis)。遗传物质和细胞内其他物质分配给子 细胞。
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S期
·DNA复制与组蛋白合成同 步，组成核小体串珠结构 ·S期DNA合成不同步
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细胞周期长短测定
◆脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观 察测定法 ◆流式细胞仪测定法(Flow Cytometry) ◆缩时摄像技术，可以得到准确的细 胞周期时间及分裂间期和分裂期的准 确时间。
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细胞周期各时 相的合成活动
◆G1期 (Gap1 phase) ◆S 期 (synthesis phase) ◆G2 期(Gap 2 phase) ◆ M期

1、什么是细胞周期？细胞周期各时相的主要变化是什么？答：(1)细胞周期是指分裂细胞从一次分裂结束到下一次分裂结果所经历的时期和顺序变化。

(2)G1期:主要特征是合成一定数量的RNA和某些专一性的蛋白质（触发蛋白）。

S期:DNA复制时S期的主要特征，此外，也合成组蛋白和非组蛋白。

G2期:1个细胞核的DNA含量从2C变为4C，细胞在此其中也合成某些蛋白质。

M期:核分裂和胞质分裂。

2.细胞周期时间是如何测定的？答：单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现多采用其他方法测群体周期。

测定细胞周期的方法很多，有同位素标记法、细胞计数法等，这里介绍一种利用BrdU渗入测定细胞周期的方法。

BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷）加入培养基后，可做为细胞DNA复制的原料，经过两个细胞周期后，细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2，反映在染色体上应表现为一条单体浅染。

如经历了三个周期，则染色体中约一半为两条单体均浅染，另一半为一深一浅。

细胞如果仅经历了一个周期，则两条单体均深染。

计分裂相中各期比例，就可算出细胞周期的值。

3、细胞周期同步化有哪些方法，比较其优缺点。

答：方法有三种：自然同步化，人工选择同步化，人工诱导同步化。

●自然同步化：常见于某些无脊椎动物的早期胚胎细胞。

优点是简单，不使用任何试剂。

●人工选择同步化:可分为有丝分裂选择法和密度梯度离心法。

优点是简单省时，效率高，成本低；缺点是只适用于少数种类的细胞。

●人工诱导同步化:可分为DNA合成阻断法和分裂中期阻断法。

前者优点是效率高，适用性高；缺点是可能造成细胞的非均衡生长：后者的优点是操作简单，效率高；缺点是药物的毒性较大。

一、选择题1-5 BABBB 6-10 BDABB 11-15 ABCAC 16-18 CCC二、填空题1、根据线粒体和叶绿体起源内共生学说，认为线粒体起源于细菌，叶绿体起源于蓝藻。

2、协助扩散和主动运输的主要相同之处在于都需要载体，速度都很快,主要差别在于协助扩散只能顺浓度梯度进行，不消耗能量；主动运输可以逆浓度梯度进行，消耗能量。

3、核纤层结构的组成成分, 属于中间纤维蛋白家族4，核小体的核心由四种组蛋白（H2A、H2B、H3、H4）各两分子共8分子组成的八聚体，核心的外面缠绕了1.75圈的DNA双螺旋，其进出端结合有H1组蛋白分子。

5、YAC（酵母人工染色体）的构建成功说明：一个有功能的染色体至少有自主复制DNA序列,着丝粒DNA序列, 端粒DNA序列三个不可缺少的功能元件。

6、真核细胞和原核细胞中都存在的rRNA是5SrRNA。

7、细胞周期调控中的两个主要因子细胞周期蛋白依赖的蛋白激酶（CDK 激酶）和。

细胞周期蛋白其中前者是催化亚基，后者相当于调节亚基。

三、名词解释1.常染色质(euchromatin):间期核中处于伸展状态，压缩程度相对较低、着色较浅的染色质。

2.双信号系统：以PIP2代谢为基础的信号通路中，胞外刺激使转化为IP3和DAG，引发IP3/Ca2+和DAG/PKC 两条信号转导途径，在细胞内沿两个方向传递，实现细胞对外界的应答，这样的信号系统称之为双信号系统。

3.细胞周期同步化：将一个细胞群体内处于不同时期的细胞处于细胞周期的同一时相的方法。

4.多聚核糖体：具有特殊功能与形态结构的核糖体与mRNA的聚合体。

5.细胞凋亡：为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。

6.Hayflick界限：正常的体外培养的细胞寿命不是无限的，只能进行有限次数的增殖。

7踏车行为：在一定条件下,微丝的正极由于肌动蛋白亚基不断添加而延长,负极由于肌动蛋白亚基去组装缩短,这种现象称为踏车行为。

羟基脲对体外Hela细胞周期同步化作用的研究王昱;卢仲毅;许峰;朱宇迪;朱宇熹【摘要】目的探讨利用羟基脲(HU)对Hela细胞进行细胞周期同步化.方法培养Hela细胞,采用Hu处理Hela细胞24 h,然后除去HU,让Hela细胞进入细胞周期G1、S、G2/M期,通过流式细胞术确认.结果流式细胞仪检测证实Hela细胞在HU祛除后3.5 h处于S期,8.5 h处于G2/M期,18 h处于G1期.结论 HU处理可以有效地将Hela细胞同步化于特定的细胞周期,而且方法简单,易于操作.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2010(039)024【总页数】3页(P3331-3332,3335)【关键词】羟基脲;Hela细胞;细胞周期;同步化【作者】王昱;卢仲毅;许峰;朱宇迪;朱宇熹【作者单位】第三军医大学西南医院儿科,重庆400038;重庆医科大学儿童医院急诊科,400014;重庆医科大学儿童医院急诊科,400014;重庆医科大学儿童医院急诊科,400014;重庆医科大学儿童医院药剂科,400014;重庆医科大学附属第一医院肿瘤科 400016;Department of Radiat ion Oncology & Ⅰ mage-applied,Therapy Kyoto University Graduate School of Medicine,Japan【正文语种】中文【中图分类】R329.28;R979.1细胞增殖分裂是细胞基本的生理活动,细胞周期的紊乱导致许多疾病[1],各种调控因子通过作用于细胞周期而产生作用[2]。

肿瘤是严重危害人类健康的疾病之一,从细胞周期的角度出发,探讨不同细胞周期肿瘤细胞在侵袭和转移过程中的细胞生物学特性的变化,可为肿瘤的治疗提供定量的参考依据[1]。

在体外细胞水平的研究中,将细胞同步化于特定的细胞周期,可以为各种细胞因子、药物、放射的实验提供理想的实验对象[3]。