下载文档原格式
抗菌性实验报告引言：抗菌性是指一种物质对抑制或杀灭细菌的能力。
抗菌性实验是一项重要的生物学实验，旨在评估不同物质的抗菌能力和效果。
本次实验通过对不同物质在抗菌培养基上的生长情况观察，探究不同物质对细菌生长的影响。
实验方法：1. 准备实验材料：抗菌培养基、细菌培养物、试验物质（例如抗生素、植物提取物等）。
2. 实验前的准备工作：消毒实验器材、制备抗菌培养基。
3. 制备培养皿：将抗菌培养基倒入培养皿中，待其凝固成平坦的琼脂状后，开始实验。
实验步骤：1. 在培养皿上均匀地涂布细菌培养物，用灭菌的铂铁棒将其划成4个等份，建立4个对照组。
2. 在各自对照组中滴加不同浓度的试验物质，确保每个对照组的试验物质浓度一致。
3. 将试验培养皿放置在恒温培养箱中，以37℃恒温培养24小时。
4. 24小时后，观察每个培养皿上的菌落形成情况，并记录结果。
结果与分析：根据实验结果，我们可以针对不同试验物质的抗菌活性进行评估并对其进行分类。
一般来说，物质的抗菌活性可以分为以下三类：1. 高度抗菌活性：这类物质在培养皿上呈现出清晰的抑菌区，菌落无法在该区域生长。
高度抗菌活性物质具有强大的抑制或杀灭细菌的能力，可以作为潜在的抗菌剂。
例子包括某些抗生素。
2. 中度抗菌活性：这类物质在培养皿上呈现出部分抑菌区，菌落生长受到一定程度的抑制。
中度抗菌活性物质的抗菌效果较弱，可能需要更高的浓度才能达到有效抑菌效果。
例子包括一些植物提取物。
3. 低度或无抗菌活性：这类物质在培养皿上没有明显的抑菌区，菌落可以自由地生长。
这可能是由于该物质无抗菌效应，或浓度过低无法发挥抗菌作用。
例子包括一些普通溶液。
实验结果的分析有助于我们评估不同物质对细菌的抑制效果，并进一步探究其中的机制。
结论：通过本次实验的结果分析，我们可以得出以下结论：1. 不同物质对细菌的抗菌效果存在差异，有的具有较强的抑菌作用，有的抑菌效果较弱甚至无抑菌作用。
2. 抗菌物质的抑菌效果可能与其浓度、种类以及作用机制有关。
金银花中绿原酸提取方法的筛选及其抑菌作用近年来，金银花在中草药领域中具有重要作用，得到越来越多的关注。
然而，在金银花中，绿原酸却鲜有开发利用。
本文旨在深入研究金银花中绿原酸的提取方法及其抑菌作用，为后续研究提供参考。
绿原酸的提取方法有多种，其中水提法是最常用的，因为它很容易操作，而且提取效果很好。
水提法的步骤如下：首先，将金银花切碎，放入搅拌机中混合，然后加入大量温水，缓慢搅拌，使混合物充分溶解；接着，将混合物过滤，将固体颗粒滤出；最后，将滤液冷却干燥，提取绿原酸溶液并灌装。
金银花中绿原酸的抑菌作用已被研究表明，尤其是对嗜热性菌的抑制效果更加明显。
最近的研究表明，金银花中绿原酸具有良好的抑菌作用，尤其是对金黄色葡萄球菌、克雷伯氏菌和大肠杆菌等细菌有显著的抑制效果。
另外，研究也表明金银花中绿原酸还能抑制耐药菌，如多重耐药金黄色葡萄球菌和多重耐药链球菌等。
此外，绿原酸的药效还受到其提取方法的影响。
目前已有研究表明，不同提取方法对绿原酸的抗菌活性有很大的差异，水提法的绿原酸抗菌活性最强。
因此，在采用绿原酸作为抗菌剂时，应当采用水提法提取，以保证绿原酸的抗菌活性。
另外，金银花中绿原酸还能治疗炎症，尤其是对慢性炎症有良好的疗效。
临床实验表明，使用金银花中绿原酸治疗慢性炎症可有效改善病情，并具有良好的抗炎作用。
因此，绿原酸在金银花中具有重要的药理作用，具有抗菌和抗炎作用，可用于治疗多种疾病。
但是由于提取方法的不同，绿原酸的抗菌活性也会受到影响，因此，在采用金银花中绿原酸进行抗菌筛选时，应当采用水提法提取。
综上所述，原文的研究表明，金银花中绿原酸含量丰富，可作为一种抗菌剂使用，具有良好的抗菌活性和抗炎作用。
但是，其有效性受提取方法的影响，因此，在采用金银花中绿原酸进行抗菌筛选时，应当采用水提法提取。
未来的研究应着重于绿原酸的抗菌作用，以及采用水提法提取的绿原酸的抗菌活性。
本文通过深入研究金银花中绿原酸的提取方法及其抑菌作用，为进一步研究金银花中绿原酸的有效性与作用提供参考依据。
GUANGXI PLANT PROTECTION2021,Vol.34.No.1香附子根茎提取物对植物病原真菌的抑菌活性王灿灿，林海鸥，刘书宇，唐文伟，曾东强*（广西大学农学院植保系南宁市530005）摘要：本研究采用菌丝生长速率法，测定了香附子根茎甲醇粗提物及其萃取物对9种植物病原真菌的抑制活性。
结果表明，在10mg/mL的浓度下，甲醇粗提物对姜白绢病菌的抑制效果最好，抑制率达到100%，其EC50值为0.93mg/mL；在5mg/mL的浓度下，石油醚萃取物对姜白绢病菌的抑制效果最好，抑制率为99.72%，其EC50值为0.37mg/mL；乙酸乙酯萃取物对苦瓜枯萎病菌、姜白绢病菌、甘蔗凤梨病菌和甘蓝黑斑病菌的抑制率均在99%左右；正丁醇萃取物的抑菌作用一般，抑制率为49.36%~52.54%；水相对9种病原真菌均没有抑制作用。
因此，石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物为主要活性成分的集中段，具有进一步研究的价值和意义。
关键词：香附子；根茎；提取物；植物病原真菌；抑菌活性中图分类号：S476+.9文章标识码：B文章编号：1003-8779（2021）01-0003-05香附子Cyperus rotundus L.，为莎草科Cypera⁃ceae莎草属Cyperus植物，又名三菱草、莎草、回头青等，原产于印度，国内分布于陕西、甘肃、山西、河南、河北、山东、江苏、浙江、江西、安徽、云南、贵州、四川、福建、广东、广西和台湾等省区[1]。
香附子是玉米、甘蔗、蔬菜等农作物田的恶性杂草，严重危害农作物的生长，但其根茎是一种常见的中草药，在民间常用于治疗各种炎症性疾病，有“妇科圣药”、“气中之血药”之称。
香附子挥发油现已在我国实现商品化生产，主要采用β-环糊精对其进行包合，并制成相应的制剂，如胶囊剂等，用于治疗各种临床疾病[2]。
前人对香附子化学成分已进行了系统的研究，基本明确其主要的化学成分类型有倍半萜、单萜、三萜、黄酮、糖苷、甾醇、生物碱及其他类化合物。
植物类研究课题案例（高中组）1.标题：地木耳和泥炭藓对入侵植物加拿大一枝黄花种子萌发的影响摘要：加拿大一枝黄花是原产北美，1935年作为观赏花卉引种到我国上海，但2O世纪8O年代迅速扩散蔓延成杂草，最近几年特别在上海一些新的抛荒地疯长，对其所处的生态环境具有很大的影响。
随着全球气候变化，空气污染以及都市化的发展，蓝藻和苔藓植物这些先锋植物也快速远离上海，特别在上海大多数新的抛荒地极其贫乏。
为了探讨加拿大一枝黄花在新的抛荒地泛滥是否与缺乏蓝藻、苔藓这些先锋植物有关，作者选取苔藓植物的泥炭藓与蓝藻的地木耳等为研究材料，通过不同浓度提取液测试对一枝黄花种子萌发的影响。
研究结果表明地木耳对一枝黄花种子萌发具有促进作用，泥炭藓对一枝黄花种子萌发则具有明显的抑制作用。
通过形态学观察和野外调查作者也发现加拿大一枝黄花的种子质量轻且有细丝状冠毛，极易随风飘扬，容易在疏松的新抛荒地表面（因为缺乏苔藓层）着落，并通过雨水植入土中。
除了特殊的土壤条件和加拿大一枝黄花种子特点外，作者认为新抛荒地苔藓植物的贫乏也是导致加拿大一枝黄花在上海新抛荒地疯长的原因之一。
因此，改善生态环境，增加都市苔藓植物多样性是控制加拿大一枝黄花泛滥的有效途径之一。
关键词：地木耳，泥炭藓，加拿大一枝黄花，种子萌发，治理2.标题：能吸收和监测室内甲醛的转基因植物构建摘要：甲醛是室内空气污染的主要成份之一，可与蛋白质及核酸相互作用，引发疾病。
利用观赏植物净化室内甲醛已开展了很多研究，但绝大多数是比较自然状态下不同类型植物净化能力的差异。
在本项研究中，我们尝试运用DNA重组技术构建携带外源甲醛脱氢酶基因（FALDH）的转基因植物，在有较高浓度甲醛存在的情况下，通过该基因的过量表达提高植物对甲醛的吸收和分解能力；与此同时，我们把控制叶片“卷叶”性状的IAMT1基因与甲醛诱导型启动子连接在一起，并用于构建转基因植株，目的是在提高植物对甲醛吸收和分解能力的同时，使植物表现一定的异常形态特征（卷叶），引起人们的警觉，从而起到吸收和监测的双重作用，为开发既具有观赏价值又具有较强的监测和净化甲醛能力的园艺植物提供依据。
几种中药提取液对常见的致病菌体外抑菌及抗氧化活性的初步研究历雪;夏青;李艳;赵凤胜;何秀霞【摘要】测试了四种中草药对4种常见的病原菌的单独、联合抑菌效果,旨在找到能够作为防腐剂、抗菌药膏有效的中草药成分,采用滤纸片法进行体外抑菌试验,利用二倍稀释法测定4种中草药提取液的最低抑菌浓度(MIC);同时通过DPPH法测定其抗氧化活性.结果表明,独角莲对全部的病原菌无抑菌作用,而黄连、迷迭香、大蒜对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌均有抑制作用,只有黄连对粘质沙雷氏菌有抑菌作用.以金黄色葡萄球菌为指示菌,迷迭香、黄连、大蒜的MIC值依次为1.95mg/mL,3.9mg/mL、50mg/mL,同时DPPH自由基清除能力依次为:迷迭香＞黄连＞独角莲＞大蒜.说明这3种中草药具有良好的抑菌及抗氧化作用,药物两两混合后,独角莲对迷迭香和黄连的抑菌能力有一定的促进作用,可以联合.【期刊名称】《长春理工大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2019(042)001【总页数】4页(P139-142)【关键词】中药提取液;病原菌;抑菌作用;抗氧化活性【作者】历雪;夏青;李艳;赵凤胜;何秀霞【作者单位】长春理工大学生命科学技术学院,长春130022;长春理工大学生命科学技术学院,长春130022;长春理工大学校医院,长春130022;长春理工大学生命科学技术学院,长春130022;长春理工大学生命科学技术学院,长春130022【正文语种】中文【中图分类】Q939.92食源性疾病[1-2]已经对人类的健康带来了严重的危害[3]，而全世界所有食源性疾病暴发案例中，有60%以上为细菌性致病菌污染食物所致的，食品的细菌污染是指暴露于环境中的食品通过不同途径被细菌污染，在细菌作用下腐败变质，失去其应有的营养成分，从而影响其食用性和安全性的现象。
人们在食用了被有害细菌污染的食品后，会发生各种中毒现象，同时细菌污染是最常见的食品污染之一。
天然植物体外抑菌实验中国中学：陆思怡尹意添陈玺梁栋指导老师：摘要：我国是一个农业大国，随着化学农药和化肥的大量不科学使用．很多弊端突出，在这种情况下，植物源农药悄然兴起。
因此，本课题开始研究天然植物提取物的抑菌效果。
课题采用，苹果，姜，大蒜进行汁液提取，抗生素溶解，使用大肠杆菌作为样品进行实验。
经数据研究分析，抗生素具有明显抑菌作用，且这四种提取物所表现的抑制作用随浓度的增大而提高。
但由于实验中出现的误差及实验材料的不完备，致使实验结果与预测有偏差。
苹果，清水，蒜，姜均对大肠杆菌有一定抑制作用。
其中蒜溶液的抑菌作用大于其他溶液，但相对于抗生素效果较弱。
关键词大肠杆菌抑菌试验天然植物提取液前言微生物是包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物等在内的一大类生物群体，它个体微小，却与人类生活密切相关。
我国是一个农业大国。
毋容置疑，农药、化肥对于从根本上解决我国人口温饱问题和促进农业经济的腾飞功不可没。
但是，随着化学农药和化肥的大量不科学使用．很多弊端突出，如有害生物的抗药性、对环境的污染和生态系统的破坏等已成为当前应用农药的主要问题。
在这种情况下，植物源农药悄然兴起，因其与环境兼容性好、高效、低毒、低残留，并且对有害生物的选择压力小．目前已成为农药研究开发领域的热门之一。
因此，本课题探究的是天然植物源对于微生物的抑菌效果。
为此，我们选用了清水，苹果，姜蒜和抗生素进行对大肠杆菌的抑菌试验。
研究方法和过程：实验法：1.实验材料苹果、姜、蒜、大肠杆菌群落、清水、头孢药片2.实验器材培养皿、量筒、研钵、玻璃棒、烧杯、胶头滴管、滤纸、漏斗、移液管、酒精灯、涂布棒、镊子、接种环实验步骤：1.制作液体培养基（酵母菌提取物：0.50g 蛋白胨：1.06g 氯化钠：1.00g 水：100ml）制作固体培养基（酵母菌提取物：0.55g 蛋白胨：1.00g 氯化钠：1.00g 琼脂：2.00g 水：100ml ）并调节PH值（弱碱性）2.将固体、液体培养基进行高温蒸汽灭菌（121.3摄氏度 1.05kg/cm^2 20分钟）3.将固体培养基倒入培养皿，制作培养基平板，静置16个小时4.将接种环加热杀菌，待冷却后，用其刮取挂肠杆菌菌落，加入液体培养基内，放入恒温摇床中，4小时5.将苹果，蒜，姜放入研钵中进行研磨，获取苹果、姜、蒜汁液，并过滤。
紫茎泽兰对植物病原菌的抑制作用研究进展紫茎泽兰，学名苋菜（ Alternanthera philoxeroides (Mart.) Griseb），是一种常见的入侵植物。
它具有广泛的适应性和强大的繁殖能力，对水稻田、农田和湿地等生态环境造成了严重的威胁。
近年来，研究人员发现紫茎泽兰可以抑制一些植物病原菌的生长，具有潜在的抑菌活性。
以下是紫茎泽兰对植物病原菌的抑制作用研究进展。
研究表明，紫茎泽兰提取物对多种植物病原菌具有抑制作用。
紫茎泽兰对水稻生长过程中常见的致病菌纹枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）具有较强的抑菌活性。
研究人员发现，紫茎泽兰提取物中含有多种具有抗菌活性的化合物，包括酚类化合物、黄酮类化合物和糖类化合物等。
这些化合物可以抑制纹枯病菌的生长和生理活性，减轻其对水稻的侵染。
紫茎泽兰还对一些其他重要作物常见的病原菌具有抑菌作用。
研究人员通过体外实验发现，紫茎泽兰提取物对小麦赤霉病菌（Fusarium graminearum）和玉米赤霉病菌（Fusarium verticillioides）的生长有明显的抑制作用。
这些病原菌是引起小麦赤霉病和玉米赤霉病的主要致病菌，对粮食作物的产量和质量造成了严重的损失。
研究人员认为，紫茎泽兰提取物中的抗菌活性化合物可以干扰这些病原菌的生物代谢过程，抑制它们的生长和侵染作用。
一些研究还发现，紫茎泽兰能够促进植物的自身免疫反应，增强植物对病原菌的抵抗能力。
研究人员发现，紫茎泽兰提取物处理后的植物叶片对纹枯病菌的侵染程度较低，病情发展较慢。
植物体内抗氧化系统和防御酶活性也得到增强，有助于抵抗病原菌的侵染。
这表明紫茎泽兰提取物可以调节植物的免疫反应，提高植物对病原菌的抵抗力。
紫茎泽兰具有潜在的抗病原菌活性。
研究人员通过对紫茎泽兰提取物的化学分析和生物学实验，揭示了其抑制作用的机制和途径。
紫茎泽兰提取物中的多种化合物可以抑制病原菌的生长和侵染作用，并且可以增强植物的免疫反应，提高植物对病原菌的抵抗能力。
核农学报2024，38（5）：0889~0898Journal of Nuclear Agricultural Sciences板栗花抑制植物病原真菌成分提取及活性研究靳长迎1谢巧玲1彭飞1， 2， 4王秀平3杨越冬1， 2， 4， *（1河北省天然产物活性成分与功能重点实验室，河北秦皇岛066004；2板栗产业技术教育部工程研究中心，河北秦皇岛066004；3河北科技师范学院分析测试中心，河北秦皇岛066004；4河北省板栗产业协同创新中心，河北秦皇岛066004）摘要：为促进板栗花资源的充分利用，本研究优化了板栗花中有效成分的提取条件，并评价了其对植物病原真菌的抑制活性。
采用菌丝生长速率法比较板栗花提取物对3种不同植物病原体的作用，包括小麦赤霉病菌（FG）、油菜菌核病菌（SS）和黄瓜枯萎病菌（FO），结合单因素试验和响应面曲线法优化板栗花抑菌活性成分的提取工艺，并通过萃取分相探究不同相的抑菌活性成分含量及抑菌活性。
结果表明，板栗花抑菌活性成分对3种植物病原真菌均有明显的抑制作用，其中对FG的抑制作用最为明显。
经过严格的试验和优化，确定最佳提取条件为乙醇体积分数55.00%（V/V）、提取时间50.00 min、提取温度65.00 ℃、液料比15.00∶1 mL·g-1，该优化条件下提取物中的活性成分抑菌率达到了45.27%。
乙酸乙酯相总酚、总黄酮含量最高，其抑制中浓度值（EC50）为2.51 mg·mL-1。
本研究结果可为开发新型植物源抗菌剂提供理论依据。
关键词：板栗花；植物病原真菌；响应面优化；总黄酮DOI：10.11869/j.issn.1000⁃8551.2024.05.0889在板栗（Castanea mollissima）工业生产过程中，通常会产生大量副产品，如花、栗蓬、叶子和壳［1］。
对这些废弃物进行开发，将其转化为有价值的生物资源，既能获得经济效益、生态效益和社会效益，又能促进板栗产业的良性发展［2］。
动物营养学报2016，28（8）：2344-2452C hi ne s e J our nal of A ni m al N ut r i t i ond o i ：10.3969/j .i ssn .1006-267x.2016.08.004植物提取物抑菌活性及作用机理刘旺景 敖长金*萨茹丽 陈圣阳 丁 赫（内蒙古农业大学动物科学学院，呼和浩特010018）摘 要：天然植物中含有多种抑菌活性成分，可大致归纳为如下几大类，即生物碱类、挥发油类、黄酮类、有机酸类、多糖类、单宁类和植物色素等。
本文借鉴国内外学者近年来的研究成果，对植物提取物抑菌活性成分及抑菌机理方面的研究进行了概括和总结，展望了植物源性添加剂在动物饲养方面的开发及应用前景，以期为抑菌性植物源饲料添加剂的开发及应用提供参考依据。
关键词：植物提取物；抑菌活性成分；作用机理中图分类号：S816.7 文献标识码：A 文章编号：1006-267X （2016）08-2344-09收稿日期：2016-02-26基金项目：国家自然科学基金（31260558）；国家科技支撑计划课题（2013B A D 10B 04）作者简介：刘旺景（1991—），男，山西孝义人，硕士研究生，研究方向为动物营养与饲料科学。
E -m a i l ：1051327358@qq.c om *通信作者：敖长金，教授，博士生导师，E-m a i l ：c ha ngj i na o@s ohu.c om植物提取物顾名思义是指存在于植物体中人们通过物理或者化学的方法提取出具有生物活性的物质，其有效成分如生物碱、挥发油、黄酮、多糖、有机酸、单宁、油脂和大蒜素等均具有不同程度的抗菌作用，作为饲料添加剂，其耐药性极小，不易出现残留和毒副作用，具有极高的安全可靠性。
因此以植物为原料进行饲料添加剂的研制与开发已经成为各国研发的热点。
我国的植物资源非常丰富，尤其是有些植物已被证明具有良好的药用价值，所以，研究开发植物提取物为饲料添加剂对我国畜牧业的健康发展和畜产品品质的改善和提高具有重要的意义。
11种植物提取物对4种病原细菌的抑菌活性筛选植物源杀菌剂具有选择性高、环境友好、对非靶标生物安全、低毒、低残留等优点，从植物中寻找抑菌活性物质，是研发新型杀菌剂的热点之一。
目前，中国开发与应用的植物源杀菌剂主要有苦参碱、黄岑苷、小檗碱、丁子香酚、香芹酚、儿茶素、大蒜素、乙蒜素、大黄素甲醚等。
但前述产品多集中于对植物真菌病害的防治，对植物源杀细菌剂的研究大多侧重于食品污染菌的控制，且大多数还处于室内筛选阶段。
魏希颖等研究发现泡桐花提取液对金黄色葡萄球菌有很强的抑制作用。
叶舟测定了木麻黄（Casuarina equisetifolia Forst）小枝提取液的抑菌活性，发现对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌表现出较强的抑制活性。
崔彦等的研究证明五倍子、丁香、地榆对黄瓜细菌角斑病菌表现出显著的抑制作用，其中五倍子提取物的活體防效可达60%，具有一定的开发潜力。
李玉玲发现竹焦油对甘蓝黑腐病菌、番茄细菌性斑点病菌、茄青枯病菌等多种供试细菌都有不同程度的抑制活性。
为了获得对植物细菌病害有广泛抑菌谱的植物源物质，本研究选取已报道过的具有广泛抑菌活性的11种植物提取物，对魔芋软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌、核桃黑斑病菌、白菜软腐病菌4种常见的病原细菌进行室内抑菌活性筛选，旨在为新型植物源杀细菌剂的开发研究提供线索。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 供试菌种魔芋软腐病菌（Erwinia carotovora pv. carotovora）、猕猴桃溃疡病菌（Pseudomonas syringae pv. actinidiae）、白菜软腐病菌（Erwinia carotorora）均由西北农林科技大学无公害农药研究服务中心提供；核桃细菌性黑斑病菌（Xanthomonas campestris pv. juglandis）由西北农林科技大学林学院提供。
1.1.2 供试植物源物质及试剂大黄提取物（其中大黄素含量为0.30%）、博落回提取物（其中血根碱含量为0.57%）、狼毒提取物（其中狼毒素含量为1.90%）、皂荚提取物（其中皂荚素含量为6.90%）、苦参提取物（其中苦参碱含量为2.15%）均由山西德威生化有限公司提供。
90%的小檗碱、蛇床提取物（其中蛇床子素的含量为10%）、藜芦生物碱（其中藜芦胺含量为2.30%）、98%的肉桂酸、98%的丁香酚、98%的柠檬酸铜均由西北农林科技大学无公害农药研究服务中心提供。
72%的农用链霉素购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司。
丙酮、葡萄糖、琼脂粉、氯化纳、胰蛋白胨、酒精、牛肉膏、酵母粉均购于陕西天成化玻有限公司。
1.2 方法1.2.1 培养基配制方法室内生测用于细菌性病原菌的培养与保存的固体培养基（NA）：称取琼脂粉15 g、蛋白胨5 g、牛肉膏3 g，加水至1 L，灭菌锅灭菌待用；用于活化细菌性病原菌菌株的液体培养液（LB）：称取胰蛋白胨10 g、酵母粉5 g、氯化钠3 g，加水至1 L，灭菌锅灭菌待用。
1.2.2 药剂配制采用对供试病菌没有抑菌作用的丙酮作为溶剂，将供试植物源物质溶解。
用20%丙酮-水溶液将各植物源提取物或化合物按其有效成分含量溶解稀释成2 000 μg/mL药液（作为母液备用）。
用无菌水将各母液分别依次2倍稀释最终确定为1 000、500、250 、125、62.5 μg/mL 5个浓度梯度处理，均以浓度为200 μg/mL的72%农用链霉素作药剂对照，采用对供试细菌没有抑菌作用的20%丙酮-水溶液作为空白对照，每个处理重复3次，以减少误差。
1.2.3 供试菌种的准备将供试菌种在试验前1 d转接到LB培养液中，置于28 ℃恒温摇床箱中活化12 h。
用无菌水调配成菌液浓度为1×106 CFU/mL，以供室内抑菌活性筛选使用。
1.2.4 琼脂扩散法室内抑菌活性筛选方法采用琼脂扩散法进行室内抑菌活性筛选，将溶化的营养琼脂培养基冷却至45～50 ℃，加入活化好的细菌数量大于106 CFU/mL的供试菌悬液摇匀（成带菌培养基）。
每次取15 mL的带菌培养基，分别倒入直径为9 cm的玻璃培养皿中，制成带菌平板。
待冷却后用直径为9 mm的打孔器在平板上均匀打3个孔，并用接种针挑出孔中培养基，在每孔内加入75 μL配好的供试植物源物质，以200 μg/mL的农用链霉素作为药剂对照，并以丙酮作为溶剂对照，每组处理重复3次。
置于28 ℃恒温培养箱中培养24 h后观察结果，用直尺按十字交叉法测量抑菌圈直径（减去孔径9 mm）求取平均值，进行比较。
1.2.5 最低有效抑制浓度（MIC）的测定方法采用二倍稀释法测定待测植物源物质的MIC值，取编号为1～11的试管以及适量的蒸馏水，放入灭菌锅里灭菌待用。
灭菌完成后，取无菌试管，分别往试管内加入2 mL无菌水。
将2 mL 浓度为2 000 μg/mL待测药液加入1号试管中，摇匀后，将混合后的药液2 mL 加入2号试管中，依次操作到10號管为止，弃掉10号管中的2 mL药液，使各个试管中的药液体积一样，将11号管设为空白对照，加入同等含量丙酮的水溶液。
每种病菌设3组重复处理。
最后将稀释好的细菌数量达104 CFU/mL的病原菌菌悬液2 mL分别加入1～11号试管中，置于适宜的温度培养箱中培养，待空白对照试管菌液出现浑浊，观察结果，进行比较。
结果判断：由于菌液与药液等量混合，相当于将药液二倍稀释，最终待测药液为10个浓度梯度，分别为500、250、125、62.5、31.3、15.6 、7.8、3.9、1.8、0.9 μg/mL。
结果观察：通过肉眼比对发现试管内液体澄清透明经震荡后仍无沉淀产生，则此试管对应的药液浓度即为此药剂对待测病菌的MIC值。
1.3 数据分析利用SPSS 20.0软件对数据进行统计分析。
2 结果与分析2.1 11种植物提取物对4种病原细菌的室内抑菌活性筛选2.1.1 魔芋软腐病菌的室内抑菌活性筛选采用琼脂扩散法测定了11种植物提取物对魔芋软腐病菌的抑制活性，结果表明，供试11种植物提取物对魔芋软腐病菌的抑制效果有明显的差异。
大黄、狼毒、博落回提取物、小檗碱、肉桂酸和藜芦生物碱6种植物提取物对魔芋软腐病菌均有不同程度的抑制作用（表1），皂荚、苦参、蛇床提取物及丁香酚、柠檬酸铜对魔芋软腐病菌则无明显抑制效果。
由表1可看出，博落回提取物对魔芋软腐病菌的抑制作用最强，浓度在1 000 μg/mL时，抑菌圈直径最高达（19.3±0.30）mm；其次是大黄、狼毒提取物，抑菌圈直径分别为（17.3±0.48）、（11.9±0.26）mm，均高于或相当于对照药剂农用链霉素200 μg/mL的抑菌圈直径（12.6±0.26）mm；同时，小檗碱、藜芦生物碱的抑菌圈直径也达到了（10.0±0.26）、（10.1±0.34）mm，对魔芋软腐病抑制作用较好；肉桂酸仅有微弱抑菌活性，其1 000 ?g/mL处理抑菌直径仅（0.3±0.10）mm。
2.1.2 猕猴桃溃疡病菌的室内抑菌活性筛选通过对猕猴桃溃疡病菌的室内活性筛选结果表明（表2），在浓度为1 000 μg/mL时，大黄和狼毒提取物抑菌圈直径分别为（13.3±0.47）、（12.2±0.32）mm，均大于对照药剂农用链霉素浓度在200 μg/mL时的抑菌圈直径（12.0±0.18）mm；博落回、皂荚、苦参、蛇床提取物对病原菌抑制作用次之，最大抑菌圈直径在6.7～9.8 mm之间；柠檬酸铜的最大抑菌圈直径为（0.2±0.00）mm，抑菌作用较弱；小檗碱、丁香酚、肉桂酸以及藜芦生物碱则无明显抑制效果，故在表2中未列出。
2.1.3 核桃黑斑病菌的室内抑菌活性筛选从表3结果可看出，蛇床子提取物对核桃黑斑病菌的抑菌作用最好，在浓度为1 000 g/mL时，抑菌直径达到（12.7±0.13）mm，其次是苦参提取物，抑菌圈直径为（10.0±0.23）mm。
皂荚提取物、丁香酚、肉桂酸对核桃黑斑病菌也有一定的抑制作用。
大黄、博落回、狼毒提取物、小檗碱、柠檬酸铜以及藜芦生物碱对核桃黑斑病菌无抑制作用，在表3中未列出。
而药剂对照链霉素在200 ?g/mL时抑菌圈直径达（17.0±0.58）mm。
由此表明，这11种植物提取物对核桃黑斑病菌抑制作用不显著。
2.1.4 白菜软腐病菌的室内抑菌活性筛选试验结果（表4）表明，在11种供试植物提取物中，仅苦参提取物、丁香酚和肉桂酸对白菜软腐病菌有抑菌作用，而大黄、博落回、狼毒、蛇床子提取物、小檗碱、柠檬酸铜、藜芦生物碱及皂荚提取物对白菜软腐病菌无明显抑制作用，在表4的抑菌活性筛选的结果中未列出；苦参提取物、丁香酚和肉桂酸对白菜软腐菌均有一定的抑制作用但不显著，其最大的抑菌圈直径均比对照药剂农用链霉素在200 ?g/mL时的抑菌圈直径小。
2.2 抑菌活性较好的植物源物质的MIC测定结果2.2.1 5种植物提取物对魔芋软腐病菌的MIC测定结果由表5可知，大黄和博落回提取物对魔芋软腐病菌的MIC值分别为7.8、15.6 ?g/mL，均显著低于对照农用链霉素的MIC值31.3 ?g/mL。
狼毒提取物、小檗碱和藜芦生物碱的MIC值分别为125、62.5、250 ?g/mL，表现出一定的抑菌活性，与表1的抑菌圈试验结果基本一致。
综合表1和表5可知，大黄和博落回提取物对魔芋软腐病菌的抑菌作用最为显著，有进一步研究的潜力。
同等含量丙酮的水溶液对魔芋软腐病菌的MIC值无影响。
2.2.2 6种植物提取物对猕猴桃溃疡病菌的MIC测定结果从表6可知，大黄提取物对猕猴桃溃疡病菌的MIC值与对照农用链霉素均为3.9 ?g/mL，表明猕猴桃溃疡病菌对大黄提取物比较敏感。
其次苦参和狼毒提取物的MIC值均达到15.6 ?g/mL，皂荚和博落回提取物分别为31.3、250 ?g/mL，与表3的抑菌活性筛选结果基本相同。
结合表5～6可看出，大黄、博落回和狼毒提取物对魔芋软腐病菌和猕猴桃溃疡病菌均有显著的抑制作用，表现出广谱的抑菌活性。
同等含量丙酮的水溶液对猕猴桃溃疡病菌的MIC值无影响。
2.2.3 3种植物提取物对核桃黑斑病菌的MIC测定结果由表7可见，核桃黑斑病菌对农用链霉素最敏感，其MIC值为7.8 ?g/mL。
皂荚、苦参和蛇床子、提取物的MIC值分别为15.6、31.3、15.6 ?g/mL，也表现出较好的抑菌活性。
同等含量丙酮的水溶液对核桃黑斑病菌的MIC值无影响。
3 讨论本研究采用琼脂扩散法、二倍稀释法对11种植物提取物对魔芋软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌、白菜软腐病菌、核桃细菌性黑斑病菌4种病原细菌的抑菌活性进行了研究。
