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病原微生物检验标本采集、运送操作规程
1、目的：正确的标本采集，运送，保存和处理对于微生物检验工作质量至关重要，为了准确检出病原菌，避免漏检与误诊，临床医护人员和实验室工作人员应掌握微生物标本的选择，采集，运送，保存及处理的一般原则。
2、标本采集的一般原则
2.1早期采集
采集时间最好在病程早期，急性期，且必须在使用抗菌药物之前采集，确保病原菌的检出。
2.2无菌操作
采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近或皮肤黏膜正常菌群的污染，使病原菌与正常菌群混淆，造成临床误诊。采集的标本应存放在无菌容器内，容器不能使用消毒剂处理，标本中也不能添加防腐剂，以免降低病原菌的检出。
2.3适量的标本
标本量过少可能导致假阴性结果。
2.4适当的采集方法
对于厌氧菌，需氧菌或兼性厌氧菌的采集方法是不同的，用于厌氧菌培养的标本应尽量用注射器采集抽取物，室温保存，不能冷藏和冷冻。
2.5盛放标本的容器
采集标本应存放在无菌，防漏，应带有螺旋盖的容器内。
3、标本的运送
3.1标本采集后立即送检，若有延迟也应在2小时内送到实验室，否则会影响病原菌的检出，一般性的细菌培养标本若需延迟送检时，应置于4度冰箱保存，且不能超过24小时。
3.2.临床标本最佳运送时间取决于标本的量，少量液体（小于1ml）或组织（小于1cm3）应在15~30分钟内送到实验室，较多量的标本置于运送培养基中可放
12~24小时，厌氧培养标本原则上是床边接种，如延迟送检，需保存在厌氧运送培养基中，室温保存，不得超过24小时。
4、不同标本的采集，运送
4.1血液标本采集，运送
4.1.1血培养指针征
当患者出现：发热（大于38度）或低温（小于36度），寒战，白细胞增多,皮肤黏膜出血，休克，多器官衰竭，血压降低，c反应蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等，具备上述一种或几种体征时，临床怀疑菌血症应采集血液标本进行血培养，对入院危重感染患者应在未使用抗菌药物治疗前，及时做血培养。
4.1.2对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用抗菌药物之前，应立即采集血培养标本。必须同时或间隔短时间内采集２套以上血培养标本。成年患者：推荐同时采集２－３套（不同部位）血培养标本（即双瓶双臂同时采集血培养标本），采血量每瓶不少于5ml;婴幼儿患者：推荐同时采集２次（不同部位）血培养标本,采血量每瓶不少于2ml。（少于病人总血容量的1%）.在采取血培养后的2—5
天内，无需重复采取血培养。两个例外：细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症。
4.1.3血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。
检出率与采血量成比例增长，每增加1ml的血液，病原菌的检出率就会相应增加。儿童患者血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人。采用一对（需氧瓶+厌氧瓶）组合，比采用二个需氧瓶的组合可检出更多的葡萄球菌、肠杆菌科细菌和厌氧菌。采血量不能满足推荐的量时，应首先满足需氧瓶的需要。
推荐从外周静脉采集血液标本,不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读。
4.1.4血标本采集的注意事项
在采血之前，血培养瓶的橡皮塞需使用75%酒精消毒并干燥。然后再进行穿刺部
位的皮肤消毒。严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”的消毒步骤操作，并等待足够的消毒时间。严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手接触静脉，除非带有无菌手套.不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头;采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室,血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。
4.2痰培养标本采集，运送
4.2.1痰培养指征
上呼吸道感染包括咽炎，喉炎，会咽炎等都可采集鼻，鼻咽，口咽拭子标本培养。下呼吸道感染：凡是咳嗽，咳痰，痰呈脓性，粘稠或血性等都可采集痰标本。4..2.2标本的采集
采集前嘱咐病人先用清水漱口，摘去牙托，因唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml，去除表面的菌群。教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液。在抗生素应用前采集痰标本;标本采集后1～2h内送往实验室进行处理，采集标本过程中要有专业的医务人员指导;无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰；也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等方法取痰。
4.2.3正常的痰标本
低倍视野下鳞状上皮细胞小于25个，白细胞大于10个。如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个，白细胞小于10个应不做或仅在特殊要求时做培养，如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显”。
4.2.4痰培养方法的局限性
多数引起肺炎的病原菌不能培养出，如病毒，军团菌，衣原体等。影响因素很多：如黏液包裹、定植菌污染。建议痰培养同时做血培养和痰涂片镜检。
4.2.5注意事项
常规的痰培养需在2小时内送检，若怀疑嗜血杆菌，肺炎链球菌感染时必需随留随送;标本中不能混入唾液与鼻咽分泌物等。
4.3尿培养标本采集，运送
4.3.1尿培养指征
尿路感染，肾结核，泌尿系结石，膀胱排空功能受损或前列腺增生等患者，出现
尿频，尿急，尿痛等膀胱刺激症状，肉眼脓尿或血尿，尿常规检查有白细胞或亚硝酸盐阳性，，不明原因的发热，尿道口有脓性分泌物等症状，需采集尿培养标本送检。
4.3.2标本的采集
清洁中段尿液，嘱咐患者用肥皂水清洗，弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿；导尿管尿液，留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液，采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过30分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中。膀胱穿刺尿，无菌操作，用无菌注射器刺入膀胱抽取5—10ml尿液送检，主要用于厌氧菌的培养或留取标本困难的婴幼儿标本的采集，此法可避免尿液标本的污染。
4.3.3标本的采集量
一般成人采集10-15ml,婴幼儿不得少于1ml。诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够，治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人，需采集2-3份标本。怀疑肾结核时，应连续3天采集晨尿。
4.3.4.室温都有利于病原菌和污染菌生长繁殖，标本采集后立即送检和接种，室温下存放不能超过2小时，（夏季保存时间应适当缩短或冷藏），4-8度冷藏保存时间也不能超过24小时，冷藏的尿液不能用于淋球菌的培养。
4.3.5注意事项
必须无菌操作，采用带盖防渗漏的无菌杯收集，多次收集或24小时尿不能用作培养。集尿袋内的尿液不能用作培养。导尿管末端的尿液也不能用于培养，很难避免没有尿道菌群污染。在使用抗菌药物前留取标本，尿液中不能加任何防腐剂或消毒剂，抑制细菌的生长。
4.4粪便标本采集，运送
4.4.1送检指征
当患者出现腹泻，大便每天大于或等于3次，粪便的性状异常，可为稀便，水样便，粘液便，脓血便或血便，伴有恶心，呕吐，食欲不振，发热，腹痛及全身不
