母种培养基制作
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食用菌玉米粒菌种的制作方法用玉米粒代替化学药品制作食用菌母种培养基,是一种既经济又实用的制作方法。
一、用玉米粒制作食用菌母种培养基,有以下几方面的特点:1、原料来源广,营养丰富,成本低,且设备简单,制作简便,易掌握,既省工,又省时。
2、菌丝生长迅速且整齐健壮,适用于各种菇类制种用。
3、玉米粒菌种比斜面菌种接原种瓶(袋)数量多。
一支斜面菌种能扩母种60—80支,扩原种3—5瓶(袋)。
而玉米粒种能扩80—100支母种,扩原种5—7瓶(袋)。
因为斜面种只用表层长菌丝部分,而培养基留下;玉米料种可以全部用上。
另外还要注意两点:(1)玉米粒培养基刚制好后较松散,接上种要垂直放,等菌丝封面后再平放。
(2)此菌种制好后不能放时间太久,否则易老化,降低质量。
二、原料选择要选完整无损、无霉变、无虫蛀,未发芽的玉米粒。
三、玉米粒母种制作方法。
先将选好的玉米粒放在较结实的布上包好,用铁锤或较硬的工具轻轻砸开,但不要太碎,使一粒玉米碎成四五块为宜。
然后把砸碎的玉米浸泡在凉水中,12小时后可用手掰开看一看,如有白芯,说明未吸足水分,还应延长浸泡时间。
充分吸水膨胀后捞出,稍晾片刻,拌入20%的石膏粉,分装试管。
每支试管可装3—4克,为管长的1/2或1/3。
500克玉米大约可装100—120支试管。
装好后,用干净的布(纱布、棉布均可)擦一下试管外及试管口处沾上的玉米渣,以防杂菌污染。
然后,按常规法塞上棉塞,用牛皮纸或报纸包好后在1.2kg/cm2压力下灭菌30分钟,取出后冷却。
在接种箱内接种,放到合适的温度下培养6—10天菌丝满试管即可备用。
真菌母种制备流程真菌母种制备呀,这可是个挺有趣的事儿呢。
一、准备工作。
二、培养基的制作。
培养基制作可是个关键步骤。
先把土豆去皮切成小块,就像切小方块一样,然后煮一煮。
煮的时候可别偷懒,得煮得软软的,这样才能把营养都煮出来。
煮好之后呢,用纱布过滤一下,把那些渣渣都去掉,只留下土豆汁。
接着把葡萄糖、琼脂还有其他需要的营养物质按照一定的比例加进去,然后再加热搅拌,就像做美食的时候搅拌面糊一样,要搅拌得均匀些。
等琼脂完全融化了,这培养基就差不多做好啦。
然后趁热把培养基分装到试管或者三角瓶里,装的时候也要小心,别装得太满,就像给杯子倒水,不能太满,不然会溢出来的。
最后呢,给这些装了培养基的容器塞上棉塞,这棉塞就像小卫士,既能让空气进去一点,又能防止外界的杂菌跑进去捣乱。
三、灭菌。
灭菌这个步骤就像是给真菌的小房子和食物来个大扫除,把那些坏细菌都消灭掉。
一般咱们用高压蒸汽灭菌锅来灭菌。
把装了培养基的容器放进去,然后按照规定的时间和压力来灭菌。
在这个过程中,就想象是在给真菌创造一个超级干净的世界,只有这样,真菌才能在里面自由自在地生长,不用担心被坏家伙欺负。
灭菌的时候可不能着急,得等灭菌完成后,让锅里的压力慢慢降下来,就像让一个刚跑完步的人慢慢平静下来一样。
四、接种。
接种可是个技术活。
得在无菌的环境下进行,就像做手术一样,得特别小心。
把灭过菌的培养基拿出来,然后用接种针或者接种环挑取一点已经纯化好的真菌菌丝或者孢子。
这个挑取的动作要轻,就像从花丛里轻轻摘下一朵花一样。
然后把挑取的真菌放到培养基上,这个过程就像是把小种子种到土里一样。
接种完之后呢,要尽快把容器的口封好,防止杂菌进去。
五、培养。
接种好的真菌母种就可以放到培养箱里去培养啦。
要给它们设置合适的温度、湿度和光照条件。
不同的真菌可能要求不太一样,就像不同的人喜欢不同的居住环境一样。
在培养的过程中,要时不时去看看它们,就像照顾小宠物一样。
看看它们有没有开始生长,有没有什么异常情况。
金针菇母种的简易制作方法
1、母种用PDA综合培养基。
制作同常规。
2、用原种培养子实体。
原种培养基制法常规。
3、子实体的取得:装原种时,先装到瓶的1/2,然后放3-5根线,这些线要帖在瓶壁上,后装满料、封口。
灭菌、接种、培养同常规。
因为壁上有些孔隙,所以很容易长出子实体。
在发菌、培养期间,不要打开瓶子的封口用的料物,所以其子实体是无菌的。
组织分离时,在接种箱里,用消毒的镊子取出子实体,去掉头与根部,切取一小段,放入试管即可培养。
如子实体不好取,可打破瓶子。
其它菇可仿照,成功率100%。
菇体不用任何消毒。
共同行试做,不妥请指教。
- 1 -。
秀珍菇母种优质培养基配方筛选作者:高为民卢玉文来源:《现代农业科技》2020年第01期摘要; ; 为了筛选出秀珍菇母种优质培养基配方,以马铃薯、胡萝卜、大豆、芋头、麸皮、红薯等为主料,制作母种培养基,接入秀p-1号菌种,并存放入6 ℃恒温箱培养,进行母种培养基配方筛选试验。
结果表明,效果最好的配方是马铃薯和麸皮为主料的混合配方,菌丝洁白,浓密,粗壮,萌发快,生长速度也快,生长旺盛,爬壁力强。
关键词; ; 秀珍菇;母种培养基;配方筛选中图分类号; ; S646.14; ; ; ; 文献标识码; ; A秀珍菇学名为环柄侧耳、白环柄侧耳。
秀珍菇营养丰富,质地细嫩,味道鲜美,含纤维量少,被人们称为保健食品、安全食品。
秀珍菇在市场上畅销不衰。
目前,国内有相当的省(市、地区)已形成利用科技大棚栽培秀珍菇的生产规模,需要大量优质菌种,而优质菌种需要优质培养基配方,特别是优质母种培养基配方,以促进菌丝浓白、健壮和快速生长,提高菌种质量,缩短制种时间,对提高产量、质量起到重要作用[1-3]。
因此,笔者开展了秀珍菇母种优质培养基配方筛选試验,为生产实践提供参考。
1; ; 材料与方法1.1; ; 供试材料1.1.1; ; 供试菌株。
秀p-1号,从广西农业科学院微生物研究所引进,经广西玉林市微生物研究所进行转管保存。
1.1.2; ; 供试培养基。
主料为马铃薯、大豆、红薯、芋头、胡萝卜、麸皮;辅料为葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁。
1.2; ; 试验设计本试验共设计了7个母种培养基配方:①(常规配方,CK)马铃薯200 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;②胡萝卜200 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;③大豆100 g,胡萝卜100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;④芋头100 g,胡萝卜100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;⑤马铃薯100 g,麸皮100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;⑥大豆100 g,红薯100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;⑦红薯100 g,芋头100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g。
食用菌栽培技术一、菌种制备菌种制备包括母种、原种、栽培种三级菌种。
1、母种培养基的制作。
常用的主要有以下几种:(1)马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基(PDA培养基)。
马铃薯(去皮)200克,葡萄糖20克,琼脂18~20克,水1000毫升。
(2)猴头菌培养基。
黄豆芽250克加水1000毫升,煮沸15~20分钟,过滤取汁,补足失水至1000毫升。
加入葡萄糖30克、蛋白胨5克、酵母膏1克、琼脂20克,加热溶化,然后分装。
适用于猴头母种培养。
(3)玉米粉培养基。
玉米粉30克左右,葡萄糖20克,琼脂20克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁0.5克、蛋白胨0.5克。
玉米粉煮至70℃左右保持1小时,然后加上其余的成分。
2、原种培养基的制作。
常用配方:(1)棉耔壳培养基。
棉耔壳100斤,麦麸15斤,石膏粉1.5斤,料水比1:1.1~1.2。
该培养基适合于大多数食用菌品种。
(2)木屑培养基。
干木屑100斤,麦麸20斤,蔗糖1斤,石膏粉1.5斤,硫酸镁0.5斤,料水比按1:1.1~1.2。
该培养基适合于银耳、黑木耳、猴头、金针菇、平菇等原种培养。
(3)粪草培养基。
稻草63斤,玉米粉4斤,大豆粉3斤,干牛粪25斤,过磷酸钙3斤,硫酸镁2斤,料水比1:1.1~1.3。
适合于双孢菇原种培养。
其中牛粪也可以鸡粪等等畜粪来代替,只是所加的量根据其所含氮量而定。
(4)谷粒培养基。
选新鲜、无虫、无霉变的小麦、(大麦、谷子、高粱、玉米粒均可),淘洗干净,按1:2.0比例加水,煮沸30分钟,闷4~6个小时,沥去水分,标准是“煮透晾干”,再加入干料1%的石膏粉,0.5%的石灰拌匀、装瓶。
适用于平菇、双孢菇原种培养。
该种培养基发菌快,在时间紧迫的情况下采用此培养基可以大大的节省时间。
3、培养基灭菌。
(1)高压蒸汽灭菌法。
主要用于母种,灭菌的条件是0.11~0.12千帕。
原种灭菌一般是0.12千帕,1.5小时。
(2)常压蒸汽灭菌。
主要用于原种和栽培种。
灭菌的条件一般是灭菌器内达到100℃后保持8~10个小时。
母种制作的主要方法和一般流程母种制作是一种用于生产发酵食品的过程,它是通过培养并保持一种有益的菌种(母种),以便在发酵过程中使用。
下面是母种制作的主要方法和一般流程。
主要方法:1.选取菌种:选择一种适应所需发酵条件的菌株,比如酵母菌或乳酸菌。
这些菌种应具有较强的发酵能力和食品安全性。
2.培养基的准备:准备含有适当营养物质的培养基,以满足菌种的生长需求。
培养基可以是简单的含有碳源、氮源、矿物质和水的液体或固体培养基。
3.菌种的接种:将选取的菌种接种到培养基中,可以通过混合培养基和菌种,或者通过无菌技术将菌种转移到培养基中。
4.培养条件的控制:根据菌种的生长需求,控制培养的温度、pH值和氧气供应等条件,以促进菌种的繁殖和生长。
5.培养时间的控制:将培养基加到适当的容器中,并根据菌种的生长速度和酸碱度,控制培养的时间。
6.包装和储存:将培养好的菌种分装到适当的容器中,并储存于适宜的温度和湿度下,以保持菌种的活力和稳定性。
一般流程:1.选取菌种:根据所需发酵食品的特点,选择适合的菌种。
2.培养基的准备:根据菌种的营养需求,准备适当的培养基。
3.菌种的接种:将选取的菌种接种到培养基中,可以使用接种针或无菌技术实现。
4.培养条件的控制:根据菌种的生长需求,调整培养的温度、pH值、氧气供应等条件,以促进菌种的繁殖和生长。
5.培养的时间和方法:根据菌种的生长速度和培养基的类型,控制培养的时间和方式。
有些菌种需要连续培养,而有些可以一次性培养。
6.培养结束的判定:通过观察培养物的外观和特性,如颜色、气味、PH值的变化等,来判断培养是否结束。
7.包装和储存:将培养好的菌种分装到适当的容器中,如试管、培养皿或冻干等。
然后,将菌种储存在适宜的温度和湿度下,以保持其活力和稳定性。
8.检测和验证:对储存的菌种进行检测和验证,确保其符合食品安全要求和发酵的需要。
需要注意的是,在母种制作的过程中,严格要求无菌操作,以防止其他有害菌的污染。
●食用菌栽培●黑木耳菌种母种的生产技术1母种培养基配方母种培养基用试管作培养容器,装入培养液并经过高压灭菌后摆成斜面,所以又称试管斜面培养基,常用于母种扩大培养及菌种保存。
1.1生产母种配方1.1.1马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA ):马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂18~20克,水1000毫升。
1.1.2马铃薯葡萄糖蛋白胨琼脂培养基:马铃薯200克,蛋白胨10克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升。
1.1.3洋葱酱油琼脂培养基:洋葱煎汁100毫升,酱油50毫升,琼脂20克,水1000毫升。
1.1.4木汁麸皮琼脂培养基:阔叶树木片500克,硫酸铵1克,麸皮或米糠100克,蔗糖20克,琼脂20克,水1000毫升。
1.1.5木屑煮汁培养基:阔叶硬杂木屑40克,马铃薯200克,蔗糖20克,琼脂18~20克,水1000毫升。
1.2保藏菌种配方1.2.1玉米粉琼脂培养基:玉米粉30克,琼脂20克,水1000毫升。
1.2.2玉米粉酵母膏葡萄糖琼脂培养基:玉米粉50克,酵母膏10克,葡萄糖10克,琼脂15~18克,蒸馏水1000毫升。
1.2.3完全培养基:葡萄糖20克,蛋白胨2克,硫酸镁0.5克,磷酸氢二钾1克,磷酸二氢钾0.5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
2培养基制作2.1称量和配制先按配方准确称取易溶物质,置于烧杯或搪瓷杯等容器内(不用铜、铁器皿,以免铜、铁锈混入培养基),加入总量1/4~1/3的清水搅成糊状。
难溶物质按配方称取后加适量清水,加热并不断搅拌使其溶解;微量元素和生长素因需要量少难以准确称取,可称取一定量先溶解调成高浓度母液,再按比例换算后从中取出需要的用量。
去皮挖芽眼切块的马铃薯、阔叶树木片、阔叶硬杂木屑及洋葱等物质,按配方称后放入容器内,加清水1000毫升,文火煮沸20~30分钟,然后用4~6层湿纱布过滤取汁。
玉米粉称后加1000毫升清水搅拌均匀,并加热至70℃保持60分钟,再用湿纱布过滤取汁,最后补足水量至1000毫升。
实验二 武陵山野生食用菌母种的制作与培养
一.目的
1.了解食用菌菌种的来源,菌种的分离方法。
2.掌握PDA培养基的配制、分装、灭菌的方法和食用菌菌种的
培养方法。
3.熟悉和掌握无菌操作的原理和操作方法。
二.原理
首先是制作菌种,即通过孢子或组织分离出菌丝体,菌丝体扩大
繁殖成为生产菌种;其次是将菌种接种于基质中,生产出食用菌的子
实体。食用菌菌种是食用菌菌种生产和科研工作的基本材料。食用菌
生产的菌种来源于野生食用菌资源,我国丰富的食用菌资源为我国食
用菌产业的发展奠定了坚实的基础。食用菌菌种的最初来源是来自于
野生食用菌资源,采用孢子或组织分离法分离得到食用菌菌种,然后
把该菌种进行人工驯化、菌种选育,得到具有生产价值的食用菌菌种。
母种是食用菌生产的经菌丝体,菌丝体扩大繁殖成为生产菌种;而该
过程必须在无菌环境中以无菌操作进行,以防杂菌污染。一般在接种
箱,无菌室或超净工作台上进行接种。
接种前要对环境进行消毒,一般是用37%~40%甲醛溶液于接种
前按5ml/m3 的量熏蒸半小时。也可用紫外灯照射半小时,以杀死空
气中的微生物。
适合食用菌生长繁殖的混合培养料称培养基,由于不同的食用菌
生长繁殖需要相应的营养条件及适宜的酸碱度。因此,在配制培养基
时,还要根据所使用的配方,按次序配制培养基,并调节pH等。在
液体培养基中加入琼脂等凝固剂后,就可制成试管斜面或在培养皿内
倒成平板,成为用途广泛的食用菌母种培养基。
三.实验材料
1.野生食用菌标本。
2.量筒、试管、玻棒、铝锅、电炉、天平、高压灭菌锅、超净工
作台、接种钩、酒精灯、火柴、蒸发皿、甲醛、高锰酸钾、70%酒精、
无菌平皿
3.培养基配方
(1)PDA培养基 马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18~25g 和水
1000ml
(2)完全培养基 蛋白胨2.0g、酵母膏2.0g、葡萄糖20g 、
MgSO4H2O 0.5g、K2HPO4 1.0g、KH2PO4 1.0g、琼脂20g、水1000ml
四.方法与步骤
(一)培养基的配制
1.把马铃薯洗干净,去皮,挖掉芽眼,切成大约1cm3 的小方块,
在天平上称取200g。
2.把切好的马铃薯小块倒入铝锅中,加水1000ml,煮沸15~30min。
3.用纱布(2~3层)过滤。
4.滤液加水至1000ml,加入蔗糖及琼脂。
5.加热使琼脂完全熔化。
6.趁热加入分装筒。分装于试管中(装量为1/5),塞棉花塞。
7.高压灭菌(121℃,30分钟)后,排成斜面。
(二)菌种分离
1.洗净手并用75%酒精消毒。
2.用75%酒精棉球对采集的野生食用菌子实体表面擦洗(消毒)。
3.用手术刀将食用菌子实体菌盖延菌柄方向切去多余部分,同时切
去菌柄极处1cm左右,然后将经上述处理后的菌柄置于无菌培养皿
处,用75%酒精浸泡1~2min。
4.用无菌镊子夹住子实体用无菌水冲洗4~5次,重复3.4操作一次。
5.将手术刀, 镊子(夹住菌柄)在火焰上灼烧,灭菌冷却。
6.用镊子夹住菌柄,将菌柄切下1cm小段,然后将小段切成长方体,
灼烧冷却,进一步切成绿豆大小的方块。
7.灭菌接种针接种。
(三)菌种培养
食用菌母种培养一般放在培养箱中,温度控制视所用菌种而定。
一般平菇以22~25℃为宜。
五.高压锅的使用方法
高压锅的使用方法
(1)将待灭菌的物品(如:试管)放在灭菌筒内,包与包之间
应留有适当的空隙,以利蒸汽流畅,达到彻底灭菌。
(2)盖上软管插入灭菌桶的槽内,上下对齐,对角拧紧螺栓,
切勿漏气。
(3)加热。水沸腾之后,排尽锅内空气(当压力表的指针指到
0.51kg/cm2)时,打开放气阀放气,进行两次放气阀,升压。
(4)待压力达到要求时,保持稳定,并开始计算时间。
(5)达到规定的灭菌时间后,关闭电源,让其自然降压冷却。
(6)待压力完全降到“0”后,松动对角螺栓,取下盖子,从
灭菌桶内取出材料。
(7)若灭菌物为试管,则应立即放入特制的木箱内排成斜面。
(8)若灭菌锅用毕后,应把锅内的水倒掉,以免日久腐蚀。
六.作业
P396 1,2,3